兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变中血小板源性生长因子和增殖细胞核抗原表达的变化

目的 探讨血小板源性生长因子（platelet—derived growth factor．PDGF）和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen．PCNA）在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR）中表达的动态变化及其相关性．方法 采用原位杂交法和免疫组化法分别检测免外伤性PVR模型PDGF和PCNA表达．染色结果行图像分析。结果 伤后PDGF和PCNA表达呈现先升高后降低的动态变化，14d组阳性表达最高。与7d、21d、28d组比较差异有显著性：PDGF和PCNA表达之间有显著相关性（P≤0．01）。结论 PDGF参与外伤性PVR增殖细胞的生长调控．并与细胞增殖的动态变化呈高度相关性．     

大鼠外伤性PVR视网膜前膜形成中TERT、PCNA和Bcl-2的变化

目的：探讨与细胞增殖相关的端粒酶逆转录酶TERT、增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡抑制蛋白Bcl-2在外伤性PVR视网膜前膜形成中的动态变化及其相关性。方法：S-P法对外伤性PVR大鼠模型视网膜前膜做TERT、PCNA、Bcl-2免疫组织化学染色和HE染色,染色结果行图像分析。结果：伤后PCNA蛋白表达阳性细胞率和平均光密度值出现先升高后降低的动态变化,14d组阳性率最高,与7d组和28d组比较有显性差异。伤后TERT蛋白和Bcl-2表达阳性细胞率和平均光密度值出现先升高后稍降低的动态变化,14d组和21d组阳性率最高,与7d组比较有显性差异,TERT、PCNA和Bcl-2蛋白表达之间有显相关性(P≤0．01)。结论：TERT、Bcl-2参与外伤性PVR视网膜前膜增殖细胞的生长调控,与细胞增殖的动态变化呈高度相关性。     

p21WAF1/CIP1在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的抑制作用

背景 p21是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,能阻止细胞从G1期进入S期,抑制细胞增生,研究认为内源性p21表达的动态变化可能与细胞增生性病变有关.外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼部增生性反应相关性疾病,了解PVR过程中p21表达的动态变化可能为PVR的靶向治疗提供依据.目的 检测p21WAFl/CIP1在兔外伤性PVR中的动态变化,探讨其在外伤性PVR发病机制中的作用.方法 选取青紫蓝兔54只,采用随机数字表法将实验兔随机分为正常对照组(6只)和造模后7、14、21和28 d组(每组12只),每只兔任意选取一眼作为实验眼.各模型组兔眼玻璃体腔注射人富含血小板血浆(PRP)0.4 ml,同时于鼻上方角巩膜缘后5 mm处行巩膜外冷冻约5 s,以建立外伤性PVR模型.各组兔眼行眼部B型超声检查以评估建模情况.分别于造模后7、14、21和28 d以过量麻醉法处死实验兔并制备实验眼视网膜组织切片,采用苏木精-伊红染色法检测兔眼视网膜的形态表现,分别采用免疫组织化学染色、Western blot及逆转录PCR(RT-PCR)法检测兔视网膜中p21WAFl/CIP1蛋白及其mRNA的相对表达. 结果 正常对照组兔眼眼前后节均正常,模型组兔造模后1～7 d兔眼玻璃体中增生条索逐渐变粗,可见视网膜皱褶,造模后14d兔眼出现牵引性视网膜脱离,造模后28 d兔眼漏斗状视网膜脱离.视网膜病理组织学检查显示,造模后7d兔眼视网膜表面有增生膜和炎性细胞聚集,造模后28 d可见视网膜呈花瓣形固定皱褶,视网膜结构紊乱.免疫组织化学染色显示,p21WAF1/CIP1蛋白在正常对照组兔眼视网膜神经节细胞层及内核层的细胞核内呈强阳性表达,造模后7、14、21和28 d表达强度减弱,以造模后14d表达量最低.Western blot结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为0.74±0.08、0.60±0.05、0.56±0.03、0.74±0.02和0.65±0.04,组间总体比较差异有统计学意义(F=20.55,P=0.00),造模后7d和14d的表达量均明显低于正常对照组和造模后21 d和28 d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).RT-PCR结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF/CIP1 mRNA的相对表达量分别为0.65±0.09、0.57±0.05、0.45±0.04、0.46±0.02和0.47±0.04,总体比较差异有统计学意义(F=18.06,P=0.00),造模后14、21和28 d P21WAF1/C1P1 mRNA的相对表达量均明显低于正常对照组和造模后7d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 p21WAF1/CIP1在外伤性PVR兔眼视网膜中的动态表达变化与PVR的病程发展过程相吻合,p21可能参与外伤性PVR发生和发展的病理过程,p21WAF1/C1P1表达量的下降与细胞增生的动态变化过程一致,可能促进了PVR的进展.     

PVR玻璃体切割物的免疫组化研究

目的观察外伤性PVR玻璃体切割物的特点，探讨外伤性PVR的发生机制。方法观察玻切物标本的细胞构成并检测bFGF和巨噬细胞。结果PVR标本中以RPE为主要增殖细胞，神经胶质细胞在外伤性PVR玻璃体切割物中更多见。PVR组与外伤PVR组的bFGF和CD68阳性率不同。结论外伤性PVR也是一种细胞增殖性疾病，玻璃体内细胞增殖与生长因子水平密切相关，是外伤性PVR形成与发展的重要机制之一。     

端粒酶催化亚单位TERT在实验性外伤性PVR视网膜前膜的动态表达

目的:探讨端粒酶催化亚单位(TERT)是否参与了实验性外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜的细胞增殖调控及其随病程的动态变化。方法:对外伤性PVR大鼠模型视网膜前膜做S-P法TERT免疫组织化学染色和HE染色,染色结果行计算机图像分析。结果:术后7,14,21,28d视网膜前膜阳性细胞率出现先升高后略降,分别为(4.5±2.7)%,(14.2±4.6)%,(13.0±4.8)%,(9.2±2.3)%,平均A分别为0.0690±0.0213,0.0912±0.0125,0.0825±0.0278,0.0744±0.0159,7d组与14d组和21d组比较有显著性差异,28d组较前2组阳性率下降,差别有显著性意义。结论:端粒酶的激活可能是启动PVR视网膜前膜细胞增殖的机制之一,TERT的表达随病程而出现波动。     

活血利水法对外伤性PVR兔眼玻璃体FNmRNA表达的影响

目的:探讨活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)纤维连接蛋白信使核糖核酸(FNmRNA)的影响。方法:用兔眼后节穿通伤加注入血浆法制备PVR模型,利用免疫组化法对正常组、模型组、活血利水组、活血化瘀组、利水明目组PVR中的玻璃体腔增殖膜FNmRNA进行检测。结果:活血利水组增殖膜中FNmRNA的阳性表达低于模型组、活血化瘀组和利水明目组(P<0.05)。结论:活血利水法能够降低PVR增殖膜中FNmRNA的阳性表达,抑制PVR的发生发展。     

散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼血小板源性生长因子表达的影响

目的探讨散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy．PVR）增殖膜上血小板源性生长因子（platelet derived growth factor,PDGF）表达的影响以及防治PVR的作用机制。方法将40只成年青紫蓝兔兔眼造成外伤性PVR模型,随机分为空白组（A组）、模型组（B组）、利水明日组（C组）、活血化瘀组（D纽）、活血利水组（E组）,每组8眼。并利用改良免疫组织化学方法对PVR实验兔眼中增殖膜上PDGF的表达进行检测。结果给药后第7天．B、C、D、E组的PVR分级比较差异无统计学意义（P〉0．05）：给药后第28天．E组与其他各组比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。各用药组玻璃体腔增生膜PDGF阳性细胞数明显少于B组,差异有统计学意义fP〈0．05）或非常显著的统计学意义（p〈0．01）;E组与C组、D组之间比较,差异有统计学意义fP〈0．051。结论散血明目片能通过抑制玻璃体腔中PDGF对视网膜色素上皮细胞的刺激作用．从而抑制增殖细胞的过度增生．防止PVR形成和发展。     

散血明目片对兔tPVR玻璃体中生长因子和细胞间粘附分子浓度的影响

目的探讨活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变（traumatic proliferative vitmoretinopathy，tPVR）玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblasts growth factors，bFGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）和细胞间粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM—1）浓度的影响及防治PVR的作用机理。方法50只家免随机抽取40只，造成外伤性PVR模型．随机分成散血明目片组、桃红四物汤组、猪苓散组、模型组，另10只为空白组。连续灌胃1月后，检测玻璃体中bFGF、EGF和ICAM-1的含量，检眼镜眼底检查并取眼球壁标本作组织病理学观察。结果散血明目片组玻璃体中bFGF、EGF、ICAM—1含量低于模型组，2者有显著性差异（P〈0．01）．散血明目片组EGF含量与空白组比较差异无显著性（P〉0．05），bFGF含量高于空白组（P〈0．05），桃红四物汤组与猪苓散组bFGF、EGF、ICAM-1浓度均低于模型组，且均高于空白组，有显著性差异（P〈0．01），桃红四物汤组与猪苓散组bFGF、EGF、ICAM-1浓度高于散血明目片组，有显著差异（P〈0．01）。各治疗组ICAM-1含量高于空白组，有显著性差异（P〈0、01）。结论活血利水之散血明日片有可能通过降低玻璃体中bFGF、EGF和ICAM-1的浓度，抑制增殖细胞的过度增生从而防治PVR形成和发展。     

PTEN mRNA在兔晶状体上皮细胞增殖中的表达

目的：探讨PTEN mRNA在兔晶状体上皮细胞增殖中的作用。方法：将健康白色家兔42只随机分为实验组（36只）和对照组（6只）。实验组兔行双眼透明晶状体皮质吸除术,对照组未做处理。在术后ld,3d,1wk,2wk,1mo和2mo各处死6只。应用免疫组化法检测赤道部晶状体上皮细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）;应用原位杂交和RT-PCR方法检测PTEN mRNA的表达。结果：①正常赤道部晶状体上皮细胞核可见PCNA弱阳性表达,术后1～7d PCNA的表达维持在高水平状态。2wk后,随着时间的延长,PCNA表达逐渐减弱,1～2mo时大致恢复术前状态。②正常兔晶状体上皮细胞中PTEN mRNA的表达呈阳性,术后1d时PTEN mRNA表达明显下降;术后3d时,PTEN mRNA表达仍处于低水平状态。随着时间的延长,术后1wk时略有恢复,2wk时趋于明显好转,1-2mo时恢复正常。PTEN mRNA与PCNA的表达呈负相关。结论：PTEN mRNA在正常兔晶状体上皮细胞胞质中有表达;PTEN参与晶状体上皮细胞的增殖代谢过程,对细胞的增殖起抑制作用。     

人工角膜植入术后EGF和bFGF局部应用的实验研究

目的 在兔眼局部应用上皮生长因子(EGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，观察对人工角膜植入术后植床角膜的影响。方法 于PMMA襻状支架人工角膜植入兔眼后，结膜下注射EGF或bFGF，术后1月取植床角膜制作石蜡切片，应用免疫组织化学技术ABC法，检测植床角膜组织增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况及细胞凋亡情况；并检测c—myc基因的表达情况。结果 bFGF组植床角膜基质细胞可见PCNA阳性表达；EGF组植床角膜上皮细胞及基质细胞均可见PCNA阳性表达；对照组未见PCNA表达；各组植床角膜基质及上皮细胞均可见c—myc基因表达，角膜内皮细胞未见表达；各组均未见阳性凋亡细胞。结论 EGF和bFGF对人工角膜植入兔眼后植床角膜组织细胞的增生过程有促进作用，对减少人工角膜植入术后并发症，提高成功率有积极意义。     

增生性玻璃体视网膜病变的药物治疗

增生性玻璃体视网膜病变（PVR）常由于裂孔源性视网膜脱离、眼穿孔伤或眼内手术造成血-视网膜屏障受损,视网膜色素上皮（RPE）细胞进入玻璃体,继而引起RPE细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等在玻璃体内增生,形成以细胞为主的纤维膜。临床上治疗和预防PVR以手术为主,但效果不佳。近来有许多药物治疗PVR的研究报道,就PVR药物治疗研究进展进行综述。     

RPE细胞发生上皮间充质转化机制及PVR的治疗研究进展

增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是眼外伤、糖尿病性视网膜病变、血管性视网膜病变和炎症性视网膜病变等眼部疾病的严重并发症,也是孔源性视网膜脱离手术失败的最重要原因,对视功能的危害较大。大量研究已证明PVR发生的主要危险因素是视网膜损伤后血视网膜屏障受损,视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞受到玻璃体腔内细胞因子的刺激,RPE细胞发生上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),转分化为成纤维样细胞,细胞的形态发生了变化,细胞间的紧密连接消失,细胞极性丧失,增殖、迁移、侵袭能力增强。在视网膜前表面或视网膜下形成具有收缩性的纤维增殖膜,形成的纤维增殖膜会使视网膜形成皱褶,牵拉视网膜导致视网膜脱离,最终会导致患者视力下降甚至失明。国内外对预防和治疗PVR进行了大量的研究,本文对RPE细胞发生上皮间充质转化相关信号通路及PVR的治疗进行简要综述。     

Patomechanisms in proliferative vitreoretinopathy

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) remains the most common cause of recurrent retinal detachment following retinal detachment surgery. The development of PVR is a complex process involving humoral and cellular factors. Surgical treatment of PVR, which consists of removal of the fibrous membranes and restoration of physiological anatomic ocular conditions is often unsuccessful. Therefore the surgery should by backed up by local medication to inhibit new formation of proliferative lesions. Unfortunately, there is no satisfactory antiproliferative treatment available so far. Proliferative vitreoretinopathy remains a therapeutic challenge.     

裂孔源性视网膜脱离显微外路手术临床观察

目的 观察手术显微镜直视下经外路手术治疗裂孔源性视网膜脱离的疗效.方法 在手术显微镜直视下,8眼PVR分级A级和9眼B级实行了裂孔定位、冷凝和外加压术,9眼C1级行裂孔冷凝、外加压和环扎术,共36例36眼.术后随访6个月,观察手术疗效.结果 一次手术视网膜复位34眼(94.4％),二次手术视网膜复位35眼(97.2％),1眼失败改行玻璃体视网膜手术.无明显手术并发症发生.结论 手术显微镜直视下治疗简单性裂孔源性视网膜脱离立体感好、疗效可靠.     

增生性玻璃体视网膜病变炎性细胞增殖过程的实验研究

目的观察实验性增生性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）形成过程中炎性细胞的增殖过程。方法通过眼球穿孔伤和玻璃体内注入自家血诱发大鼠ＰＶＲ模型,分别在处理后第１,３,７,１４,２１和２８天取模型眼行细胞学和免疫组化方法检测玻璃体和视网膜的增殖细胞。结果炎症反应在处理后第五天就开始,细胞增殖在第７天达高峰,１４天后以单核细胞,淋巴细胞和成纤维细胞增殖为主。后期玻璃体纤维化,视网膜脱离,结构不清。结论实验性ＰＶＲ形成过程中,炎性细胞的增殖规律与创伤后伤口愈合过程相一致。     

Proliferative vitreoretinopathy and chemotherapeutic agents

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is a disease process that occurs in eyes with rhegmatogenous retinal detachments and accounts for the majority of failures following retinal detachment surgery. PVR involves the uncontrolled proliferation of non-neoplastic cells capable of forming membranes, which may occur on either surface of the retina or along the detached surface of the vitreous gel. Contraction of these membranes creates tractional forces that can distort or detach the retina. Various surgical procedures have been used to repair retinal detachments associated with PVR. The results have not been encouraging in many instances. Recent efforts have been directed toward the chemical inhibition of cellular proliferation in PVR. The majority of drugs used in these studies have been antineoplastic agents that affect various phases in the cycle of cell growth.     

Mögliche Rolle von Alkylphosphocholinen bei der Ablatio-Chirurgie

BACKGROUND: Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is a major complication after retinal detachment surgery, but there is no established pharmacotherapy available to control the cell biology of the disease. The aim of this study was to investigate the role of alkylphosphocholines [APCs; erucylphosphocholine (ErPC) was used in this study], novel pharmacologic substances with antiproliferative properties, on intraretinal proliferation initiated by experimental retinal detachment in a well-established in vivo model. METHODS: Retinal detachments were created in adult pigmented rabbits. ErPC was injected intravitreally on either day 1 or day 2 after detachment. Bromodeoxyuridine (5-bromo-2-deoxyuridine, BrdU) was injected on day 3. Following fixation, retinas were triple-labelled with anti-BrdU (proliferation marker), Isolectin B4 (retinal microglia marker), and anti-vimentin (retinal Mueller glia cell marker). The number of anti-BrdU-labelled cells per millimeter of retina was determined from sections imaged by laser scanning confocal microscopy. Toxicity was assessed by light and electron microscopy. RESULTS: A single intravitreal injection of ErPC had a significant effect on reducing the number of proliferating non-neural retinal cells on day 3 after experimental retinal detachment in the rabbit. Injection of ErPC on day 1 was more effective than when given on day 2. No evidence of toxicity was observed in the retina on day 3 for any of the conditions. CONCLUSIONS: APCs are novel pharmacologic substances that significantly inhibited intraretinal proliferation after experimental retinal detachment in this in vivo model. They could be considered as an adjunct therapy at the time of retinal reattachment surgery to potentially prevent proliferative vitreoretinal diseases such as PVR. However, long-term toxicity studies must be performed before APCs can be considered for clinical application.     

血管内皮生长因子及上皮-间充质转化在增生性玻璃体视网膜病变发病中的作用

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是一种发生在孔源性视网膜脱离(RRD)自然病程中或复位手术后的严重并发症,常常导致患者视力丧失。目前,临床缺乏有效的治疗方法。PVR病理特征是多种细胞在细胞因子的作用下发生的过度炎症反应和异常增生,最终在视网膜表面形成增殖膜及进一步的牵拉性视网膜脱离(TRD)。对PVR发病机制的深入研究将有助于为其治疗寻找有前景的分子靶标。近年研究发现,血管内皮生长因子(VEGF)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的上皮-间充质转化(EMT)在PVR发病中发挥着重要作用。本文就VEGF及RPE细胞EMT在PVR发病中的作用,以及二者的相互联动机制进行了总结,以期为PVR的治疗和临床研究提供新的思路。     

生长因子与增生性玻璃体视网膜病变相关性的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼球穿通伤及孔源性视网膜脱离手术后的常见并发症。该病的发病机制仍未明确,但研究表明,视网膜色素上皮(RPE)细胞具有自分泌细胞因子的能力,许多生长因子在PVR患者的玻璃体或者视网膜下积液中过度表达,这些生长因子及其受体在PVR的发生发展中扮演了重要角色,血-视网膜屏障被破坏后,生长因子的生理平衡即被打破,RPE细胞受到生长因子的刺激发生上皮-间质转化(EMT)、迁移及增殖,进而与其他细胞及细胞外基质形成视网膜前膜,牵拉视网膜造成视网膜脱离。近年来学者们对生长因子在PVR的形成中所涉及的信号通路、促EMT进程及细胞增殖做了大量研究,本文将对近年来促PVR发展的生长因子及拮抗生长因子治疗PVR的研究结果作一综述。     

增生性玻璃体视网膜病变的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是裂孔源性视网膜脱离手术失败最常见的原因。研究结果表明，PVR是视网膜脱离手术后的创伤愈合反应。随着视网膜的创伤，活化的视网膜色素上皮细胞，胶质细胞，纤维母细胞等增殖、迁移，与细胞外间质共同形成了PVR膜而导致牵引性视网膜脱离。就PVR的治疗而言，早期在于控制炎症，中期主要是抑制细胞增殖，晚期着重于防止纤维化的形成。着重就PVR的危险因素、临床分类、病理、手术处理以及最新的药物治疗进展做综合归纳。