ELISA法检测HBsAg灰区设置的探讨

目前国内对献血者血液HBsAg的检测多采用酶联免疫吸附试验即ELISA法。该试验以临界值(cut off值,简称CO值)作为判断阴阳性的界定标准。理想的实验结果是只有阳性或阴性两种情况。但实际检测工作中常会遇到一些献血者血液标本的OD值接近临界值,其结果难以判断,即灰区标本。在HBsAg感染人群中,部分血清(浆)HBsAg呈     

ELISA定性检测HBsAg的室内质控探讨

目前国内检测HBsAg的ELISA大多参照生化的质控方法,即选弱阳性标本为质控物,以X图法控制日常工作的精密度,判断实验的有效性。我们改用临界值法进行室内质控,简便易行,现特予介绍。一、室内质控物　高值质控物为10μg/ml,低值质控物为1ng/ml,阴性质控物则取A值在0.04～0.08间的样本20份以上混匀后分装。二、室内质控方法　实验除用试剂盒内的质控品外,同时也检测高值、低值和阴性三种质控物,并将质控结果算出S/CO值点入质控图中(S/CO值:S为样本A值,CO为临界(CutOff)值,即阴性对照A值×2.1。如阴性对照小于0.05时,以0.05计)。参…     

ELISA检测HBsAg复检结果的分析

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)测定过程中影响因素较多，为了提高乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测质量，我院已经对HBsAg初检临界状态的标本建立了复检制度，现就积累的实验结果作分析。     

ELISA法检测HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认结果分析

目的 探讨ELISA法检测HBsAg结果判定灰区设置的必要性,以及中和试验对HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认情况.方法 采用两个不同厂家生产的ELISA HBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,对检测结果在0.7≤S/CO＜1或单试剂为反应性的标本,再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1孔结果仍在灰区内或仍为反应性,留取标本做HBsAg中和试验确证.结果 136例灰区标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本10例,阳性率为7.35％,结果异常标本14例;159例单试剂反应性标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本19例,阳性率为11.95％,结果异常标本16例.灰区与单试剂反应性样本阳性率的差异没有统计学意义;S/CO值在0.70～0.79区间、0.80～0.89区间、0.90～0.99区间的阳性率有逐渐升高的趋势,但差异无显著性;双试剂灰区的阳性率高于单试剂灰区的阳性率,但差异无统计学意义.结论 对HBsAg灰区和单试剂反应性标本,ELISA检测漏检率较高,应结合自己实验室实际设置合适的灰区,最大限度地检出这些可疑标本,并进行确认实验,进一步减少HBsAg漏检和误检率,以提高输血安全,同时避免血源的浪费.     

唾液和血液中HBsAg检测结果的比较

为了解乙型肝炎患者唾液中乙肝表面抗原(HBsAg)的携带情况，笔者用ELISA法检测了198例患者血清和唾液中的HBsAg。现报告如下。     

ELISA一步法和二步法检测HBsAg结果的对比分析

目的 验证酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)二步法诊断试剂灵敏度及评价HBsAg二步法诊断试剂的质量.方法 分别采用ELISA一步法及二步法两种方法检测体检人群2 154例和不同浓度质控血清,结果 不一致样本进行化学发光法定量检测.结果 一步法检测HBsAg阴性1 978例,阳性176例,阳性率为8.17%;二步法检测HBsAg阴性1 953例,阳性201例,阳性率为9.33%.ELISA一步法检测的1 978例HBsAg阴性样本中,有25例二步法检测为阳性.一步法检出率较低,仅为二步法的87.56%,而漏检率为1.16%.一步法最低检测浓度为1 IU/mL,二步法为(0.1～0.2) IU/mL.结论 一步法与二步法HBsAg试剂灵敏度差异有统计学意义(P<0.01),二者检出率具有统计学意义(P<0.05).     

ELISA检测献血者HBsAg设定灰区的必要性

目的探讨ELISA检测献血者HBsAg设置灰区以及灰区设置的合适范围。方法用ELISA检测献血者血浆标本后,选取吸光度值在临界值(cut off,CO)值以下30%范围内的血浆标本442份,用聚合酶链反应(PCR)检测其是否含有HBV DNA。结果吸光度值在CO值以下10%范围内的标本检出HBV DNA阳性2份,吸光度值在CO值以下20%～10%范围内的标本检出HBV DNA阳性1份,吸光度值在CO值以下30%～21%范围内未检出HBV DNA阳性标本。结论为了尽可能减少HBV漏检,保障用血安全,用ELISA检测献血者HB-sAg时应该设置灰区并建议灰区下限设置在CO值以下20%。     

应重视ELISA检测HBsAg灰区范围内样品的复检

ＥＬＩＳＡ测定ＨＢｓＡｇ常以Ｃｕｔ Ｏｆｆ(简称ＣＯ)值作为阴阳性的界定标准。我们对初次检测Ａ值位于灰区 (本室定为ＣＯ± 30 % )的 398份样品进行了复检。现报道如下。一、材料和方法1.材料　本院临床标本 ,ＥＬＩＳＡ初次测定ＨＢｓＡｇ的Ａ值介于ＣＯ值± 30 %的血清样品共 398份 ,其中溶血标本17份 ,脂血 2 4份 ,其他标本 35 7份。复检时对溶血及脂血样品嘱患者重新采血分离血清后复检。试剂为上海科华公司ＨＢｓＡｇ一步法酶免试剂盒。Ｂｉｏ 12 8Ｃ酶标比色计 ,Ｂｉｏ ＲａｄⅡ型洗板机。2 .方法　复检血清每人测三孔 ,第一孔为…     

滦平县22638名服务行业人员HBsAg检测结果分析

近年来，服务行业人员逐年增加。为了更好的贯彻食品卫生法，把住病从口入关，保护消费者的利益，现将1997—2003年22638名从业人员的乙肝表面抗原(HBsAg)检查情况汇报如下。     

CLIA和ELISA检测血清HBsAg及HBsAb的结果比较

目的比较化学发光免疫分析(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg及HBsAb的结果。方法采用CLIA法和ELISA法测定定值血清中的HBsAg和HBsAb,并对两种结果进行比较和分析。结果测定HBsAg时,ELISA法的批内CV:1IU/ml为9.6%,2IU/ml为7.3%,批间CV:1IU/ml为17.8%,2IU/ml为15.1%,灵敏度为0.25IU/ml,CLIA法的批内CV:1IU/ml为2.33%,2IU/ml为1.07%,批间CV:1IU/ml为6.57%,2IU/ml为3.78%,灵敏度为0.063IU/ml。HBsAb测定时,ELISA法的批内CV:10mIU/ml为11.8%,20mIU/ml为8.7%,批间CV:10mIU/ml为18.6%,20mIU/ml为15.9%,灵敏度为10mIU/ml,CLIA法的批内CV:10mIU/ml为4.79%,20mIU/ml为3.52%,批间CV:10mIU/ml为7.58%,20mIU/ml为6.13%,灵敏度为2.5mIU/ml。结论 ELISA法敏感度相对低,精密度差;CLIA法灵敏度高,精密度好,且自动化程度高,检测更快速,更适合于临床。     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

应重视ELISA检测HBsAg灰区范围内样品的复检

ELISA测定HBsAg常以Cut-Off(简称CO)值作为阴阳性的界定标准.我们对初次检测A值位于灰区(本室定为CO±30%)的398份样品进行了复检.现报道如下.     

血液HBsAg,抗HCV复检中应采用不同试剂和设置低限灰区

临床用血前复检舸用不同试剂和设置低限灰区，可有效地防止ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ的漏检，减少输血的肝炎的发生。     

化学发光法对ELISA检测HBsAg“灰区”标本的再分析探讨

目的探讨用化学发光法对乙型病毒性肝炎患者,乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测灰区标本的再分析及其临床意义。方法用低浓度质控血清对两种ELISA试剂盒进行测试,同时对用ELISA法检测的80例患者HBsAg弱阳性标本用化学发光法定量复检。结果目前国内两种较好的ELISA试剂盒的A值都低于其cutoff值区域("灰区");化学发光法的阳性率与HBsAg阴性组差异有统计学意义。结论不顾及ELISA"灰区"的标本,就有一定的阳性标本漏检,对HBsAg弱阳性的研究和报道应引起临床医生的重视,对HBsAg弱阳性患者应定期随访。     

输血HBsAg检测结果设置灰区的意义

输血是临床治疗和抢救危重病人常用的医疗措施,近年来输血安全越来越得到人们重视,经血液可传播的疾病有病毒性肝炎、梅毒、艾滋病等。为了保证患者输血安全,避免医疗纠纷,按卫生部颁发的《临床输血技术规范》要求,受血者在输注血液制品前必须做输血前感染指标检测,即HBsAg,抗-HCV,梅毒、抗-HIV、ALT等的检测。     

献血者ELISA检测为灰区标本的确证试验与核酸检测情况分析

目的对献血者血样"灰区"标本进行确证试验及核酸检测,探讨如何设置"灰区"。方法对本中心2011-2013年无偿献血者血液标本进行HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体常规酶免检测,对Cut off值为0.5≤S/CO<1的标本进行统计分析,核酸检测和确证试验。结果对随机选取的部分"灰区"标本,进行NAT和确证试验的结果表明,HBs Ag、抗-HCV、梅毒抗体的"灰区"标本均有一定比例的确证试验及核酸检测阳性。所有抗-HIV"灰区"标本的确认试验及NAT均为阴性。结论 HBs Ag、抗-HCV、梅毒抗体进行"灰区"设置,可以提高血液安全;抗-HIV设置"灰区",则会造成血液浪费。     

ELISA检测HBsAg结果判定方法的建立

HBsAg是乙肝病毒感染的最主要病原标记和直接证据之一。目前临床常规检测HBsAg主要采用ELISA法，但是由于酶活力的变化及操作误差，利用传统的结果判断标准(cut off值法)，对于低滴度和极高滴度的HBsAg标本极易漏检，给临床诊断，特别是输血安全造成很大的隐患。笔者根据HBsAg含量与吸光度的相关关系曲线建立一种HBsAg检测结果判定方法，现报道如下。     

ELISA法检测抗-HCV灰区设置探讨

目的探讨ELISA法检测抗-HCV灰区的设置。方法对本中心33份ELISA法检测"灰区"标本进行重组免疫印迹试验(RIBA)。结果本中心为最大程度的保障血液安全,将灰区范围设置在Cut off值以下50%范围。在33份样本中,位于Cut off值以下10%～20%范围内,通过RIBA确认方法检测出"不确定性"1例。结论证实"灰区"范围内的标本很有可能还存在病毒复制,有一定的传染性。