尿液蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立及优化

目的 建立稳定的尿液蛋白质组学双向凝胶电泳技术体系.方法 对尿液蛋白质组双向电泳样品的收集保存、样品制备、上样量、水化方式、水化上样液成分、IPG胶条选择及电泳程序参数等进行了比较研究和条件优化.结果 双向电泳图谱清晰.检测到蛋白斑点数目为(849+18)个,匹配率达到81.26%.结论 建立了较稳定的尿液蛋白质双向凝胶电泳方法 ,可用于开展疾病的尿液蛋白质组学研究.     

蛋白质组研究技术平台的建立——双向电泳条件的建立及优化

目的　建立和优化蛋白质组研究的双向电泳及相关技术。方法　以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS PAGE为第二向 ,对样品制备、上样量、IPG胶条、等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳程序及参数、染色方法等相关技术进行了比较研究和条件优化。结果及结论　成功地得到了人胚肺成纤维细胞和蚕卵蛋白质组双向电泳图谱 ,建立了蛋白质组研究的双向电泳技术平台。     

终末期肾病患者血清蛋白质组二维电泳图像与正常血清蛋白图谱比较研究

目的建立和优化终末期肾病患者血清蛋白质组研究的双向电泳及相关技术,并与正常血清蛋白图谱比较。方法以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向,对终末期肾病患者血清蛋白质样品制备、上样量、IPG胶条、等电聚焦等进行条件优化。质谱鉴定有差异表达的其中4个蛋白点。结果成功获得终末期肾病患者血清蛋白质组电泳图谱,与正常者相比存在表达有明显差异的蛋白点。结论成功建立了终末期肾病患者血清蛋白质组研究的双向电泳技术平台。     

海马组织蛋白质双向电泳条件实验研究

目的优化大鼠海马组织蛋白质双向凝胶电泳分离(2-DE)的实验条件。方法分离并比较不同大鼠海马组织总蛋白的制备方法,pH 3～10非线性胶条(NL)、pH 4～7的2种不同pH梯度预制胶条,300、700μg不同质量蛋白上样量,保存2个月及保存1年的标本对2-DE效果的影响。结果本研究采用裂解液及样本制备方法所得蛋白适于2-DE,海马组织总蛋白等电点(PI)主要在4～8;与300μg相比,700μg蛋白上样量对于信噪比控制效果更理想;新鲜标本中影响聚焦的物质较少,凝胶横纹少。结论新鲜海马组织匀浆经多次低温重复离心制备的蛋白,采用pH 4～7预制胶条(24 cm)及700μg上样量获得的2-DE图谱更理想。     

双向电泳分离大鼠子宫组织提取物的最佳条件摸索

目的:建立并优化大鼠子宫组织提取物的双向电泳分离条件。方法:机械匀浆法制备子宫组织总蛋白提取物,采用不同方法处理样品及不同pH范围的固相梯度胶条进行双向电泳分析。结果:经丙酮沉淀处理的提取物在pH 5～8范围的固相梯度胶条进行双向电泳分离,可获得分辨率清晰和重复性较好的二维图谱。特别是在高分子量蛋白区域得到独立清晰的蛋白质斑点。结论:通过建立并优化双向电泳分离条件,为进一步分析生理与病理状态的子宫蛋白成分提供了技术支持。     

膀胱移行上皮癌细胞系双向电泳技术的建立

目的建立高分辨率的移行上皮癌细胞PUMC双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌细胞PUMC细胞总蛋白,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800 Calibrated Densitometer凝胶成像系统获取图像,用 PDQuest2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性进行系统分析。结果获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱。结论建立膀胱癌移行上皮癌细胞PUMC的双向电泳参考图谱,为进一步构建其蛋白质表达数据库提供了基础。     

人绒癌耐药细胞株JAR/MTX蛋白质组双向凝胶电泳图谱的建立

目的:建立人绒癌耐药细胞株JAR/MTX蛋白质组双向凝胶电泳图谱。方法:用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养JAR/MTX细胞,胰酶消化后收集细胞,加入细胞裂解液使细胞充分裂解,离心后取上清液进行双向凝胶电泳和考马斯亮蓝染色,应用PDQuest图像分析系统进行凝胶图谱分析,从凝胶图中选取1个分离较好的蛋白质点,应用四极杆-飞行时间质谱(Q-TOF-MS)和数据库搜索鉴定蛋白质。结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱;在17cmpH3～10IPG胶条上可分离到(810±45)个重复性及分辨率均较好的蛋白位点,蛋白斑点的匹配率为80.2%;1个蛋白点通过质谱分析和数据库检索得到了初步的鉴定。结论:建立了人绒癌耐药细胞株JAR/MTX双向凝胶电泳参考图谱,为其蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。     

副溶血性弧菌蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

目的:建立副溶血性弧菌蛋白质分离的双向电泳技术。方法:分析比较两种不同的副溶血性弧菌蛋白制备方法,样品纯化后,选择不同pH范围IPG胶条,双向电泳,蓝银染色,比较图片。结果:超声裂解法效果较好且操作简便快速,提取出来的蛋白质经过纯化处理后再进行双向电泳效果较好,该细菌蛋白质点主要集中在pH4.5～5.5之间,还有部分分布在pH6～7之间。结论:建立了副溶血性弧菌蛋白质双向凝胶电泳技术,为后续研究奠定了基础。     

肺组织蛋白质组双向电泳技术的建立

目的 对肺组织蛋白质组分析中的双向电泳(2-DE)技术进行质量控制。方法 通过多种条件的组合与优化,建立以物理和化学两种方法充分裂解组织细胞,并采用低温操作、加入蛋白酶抑制剂等防止蛋白降解,最后离心去除不溶性杂质的肺组织蛋白质组2-DE样品制备方法。第1向电泳为固相pH梯度等电聚焦、第2向电泳为垂直平板SDS-PAGE(T=13)。结果 通过对蛋白定量、样品制备、第1向和第2向电泳中的各个实验环节进行控制和优化,正常大鼠肺组织在18cm pH3-10L的胶上可分离720个点左右,蛋白点平均匹配率为72.2％。结论 建立了肺组织蛋白质组双向电泳技术,为后续工作奠定了基础。     

结核分枝杆菌强毒株和弱毒株的胞外蛋白比较分析

目的 通过结核分枝杆菌(M．TB)强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra胞外蛋白表达的比较，寻找差异蛋白并为下一步研究M．TB的毒力因子提供思路。方法 M．TBH 37Rv和H37Ra菌株分别在苏通液体培养基培养3周后提取胞外蛋白并定量，第一向电泳是用pH3～10线性IPG预制胶条进行等电聚焦，第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白。银染PAGE凝胶、干燥，用Image Scanner扫描凝胶，ImageMaster 2D Elite3．10(图像分析软件)分析2D图像。结果 H37Rv和H37Ra胞外蛋白的斑点大部分在酸性区域(pI小于7．0)。在极碱性区域(pI大于9．0)，两者胞外蛋白的斑点数极少。在小分子区域可明显发现H37Rv有3个蛋白斑点在H37Rv中缺失。结论 二维凝胶电泳技术是目前有效分离蛋白质的重要途径之一。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

Choice of measures of vaccination and estimates of risk of pediatric pertussis

BackgroundVaccination uptake at the individual level can be assessed in a variety of ways, including traditional measures of being up-to-date (UTD), measures of UTD that consider dose timing, like age-appropriate vaccination, and risk reduction from individual doses. This analysis compared methods of operationalizing vaccination uptake and corresponding risk of pertussis infection.MethodsCity-wide case-control study of children in Philadelphia aged 3 months through 6 years, between 2001 and 2013. Multiple logistic regression was used to isolate the independent effects of each measure of vaccination uptake and the corresponding relative odds of pertussis.ResultsBeing UTD on vaccinations was associated with a 52% reduction in risk of pertussis (OR 0.48, 95% CI: 0.34, 0.69). Evaluation of delayed receipt of vaccine versus on-time UTD yielded similar results. There was a decrease in risk of pertussis for each additional dose received with the greatest reduction in pertussis infection observed from the first (OR 0.48, 95% CI: 0.28, 0.83) and second dose (OR 0.17, 95% CI: 0.08, 0.34). Additional doses conferred minimal additional protection in this age group.ConclusionExamining vaccination status by individual doses may offer improved predictive capacity for identifying children at risk for pertussis infection compared to the traditional UTD measure.     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

尘肺病患者145例死因调查

目的分析汉中市尘肺病的发生、发展和死亡原因，以提高尘肺病患者的生存质量。方法对145例尘肺病患者的死因进行回顾性分析，计算其平均发病年龄、死亡年龄及患尘肺病后的存活年限。结果矽肺的平均发病年龄和死亡年龄均早于煤工尘肺和石棉肺，尘肺病的主要死因为患肺部疾患，患尘肺病后的平均存活年限为12a。结论加强职业健康体检工作，对尘肺病人做到早发现早治疗和预防并发症的发生。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

西林瓶装注射用水的装量检查分析

为了检查西林瓶装注射用水的实际分装量是否符合2005年版《药典》三部要求,按照2005年版《药典》三部中“生物制品分装和冻干规程”,分装规格为0．8ml的西林瓶装注射用水10000瓶,随机在分装过程的前、中、后阶段共抽取100瓶,轧盖、目检。分别用1ml标定注射器及1ml普通无菌注射器抽取每瓶注射用水的实际体积,以t检验法对实际抽取量与标示量的差值进行统计学分析,结果显示其与2005年版《药典》三部要求分装附加量为0．1ml相比有显著性差异（P〈0．001）。     

对《医疗事故处理条例》的几点认识--学习《医疗事故处理条例》的一点体会

国务院颁布的《医疗事故处理条例》（以下简称《条例》）在吸收、总结原《医疗事故处理办法》（以下简称《办法》）实施十几年以来正反两方面经验教训的基础上，对《办法》作了许多重大的修改：《条例》扩大了医疗事故的主体与范围，提出了防范医疗事故的一些重要措施，授权医学会独立担纲医疗事故技术鉴定工作，赋予了患者更多的权利，规定医疗事故民事责任争议可以“私了”，制定了更为规范的医疗事故的赔偿制度等。《条例》作出的这些新规定必将使医疗事故得以更加科学、客观、公正、公平、合理的解决。认真学习、把握《条例》的这些新规定，很好地透视《条例》的立法宗旨与原则，必将极大地提高学习、宣传《条例》的主动性与积极性，更好地推进《条例》的贯彻执行工作。     

The analysis of case-control studies of the efficacy of screening for recurrence of cancer

Occasionally, the efficacy of screening for cancer recurrence has been evaluated by means of case-control studies. However, these studies generally have not been designed and analyzed in a manner that will yield an unbiased result. The commentary shows that by adhering to the principles developed for the analysis of studies of the efficacy of screening for the presence of a given cancer in persons with no history of this disease, a case-control study of screening for recurrence will improve its chances of obtaining valid findings.     

137例地中海贫血出生相关因素分析

目的:揭示地中海贫血患儿出生相关因素,提出干预措施,为进一步制定地贫预防控制总体规划提供决策参考。方法:对近3年137例地贫儿(45例重型β-地贫、29例中间型β-地贫、32例中间型α-地贫和31例巴氏胎儿水肿综合征)出生相关因素进行调查研究。结果:地贫儿出生相关社会心理因素顺位依次为:基因携带者不知情(70.07%)、经济困难(21.17%)、心理因素(5.11%)、其它(3.65%)。基因携带者对自身情况不知情是本组地贫儿主要出生相关因素,与其它出生相关因素有显著差异(P<0.05)。结论:基因携带者自身的认识与重视是预防控制工作的一个重要组成部分,地贫高发区人群携带者(轻型β-地贫、α-地贫特征和静止型携带者)的检出及系统管理是预防控制工作的关键环节,应进一步应用生物、社会及心理的医学模式搞好地贫预防控制工作。     

可乐对小鼠精子质量影响

目的 探讨可乐对雄性小鼠精子质量及数量的影响.方法 31只昆明种雄性小鼠按体重随机分为阴性对照组、低剂量组、高剂量组(分别以0.6ml生理盐水、0.3,0.6ml可乐灌胃),腹腔注射组(0.6ml可乐注射)和阳性对照组(0.6ml环磷酰胺腹腔注射)5组.灌胃及腹腔注射1次/d,连续7d,测定小鼠精子的运动参数,并观察其畸形发生率.结果 高剂量组肾脏系数与阴性对照、低剂量组比较差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔注射组与阴性对照组比较小鼠附睾系数明显升高(P<0.05).腹腔注射组的精子平均移动角度与阴性对照组比较明显升高(P<0.05),低剂量组精子密度与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).高剂量组、阳性对照组与阴性对照组比较精子畸形率明显升高(P<0.05);低、高剂量组及腹腔注射组与阳性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);低、高剂量组与腹腔注射组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 可乐对小鼠精子活性和形态有一定的影响.