罗格列酮联用维甲酸抗胃癌裸鼠移植瘤血管生成的研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的激动剂罗格列酮(ROS)联用全反式维甲酸(ATRA)对人胃低分化黏液癌MGC-803细胞的裸鼠移植瘤血管生成的影响,并初步探讨其抗血管生成的可能机制。方法建立胃癌裸鼠移植瘤模型,荷瘤裸鼠随机分为荷瘤未用药组、ROS组(ROS 25 mg·kg~(-1)·2d~(-1))、ATRA联用ROS低剂量组(ROS 18 mg+ATRA 11 mg·kg~(-1)·2d~(-1))、中剂量组(ROS 30 mg+ATRA 11mg·kg~(-1)·2d~(-1))、高剂量组(ROS 50 mg+ATRA 11mg·kg~(-1)·2d~(-1))。用药40d后,观察各组裸鼠移植瘤体积变化及抑瘤率；利用免疫组化观察移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,对移植瘤中的微血管密度(MVD)进行计数,同时用RT-PCR技术观察VEGF及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。结果①ROS组能缩小瘤体体积,其与荷瘤未用药组比较差异有统计学意义(P＜0．01),ATRA联用ROS低剂量,与ROS组抑瘤率相当(P＞0．05),随着ROS剂量增加,抑瘤率增加,呈剂量依赖关系；②ROS组能抑制肿瘤新生血管生成,降低VEGF、HIF-1αmRNA的表达；ROS与ATRA联用,随着ROS剂量增加,抑制肿瘤新生血管生成、降低VEGF、HIF-1αmRNA的表达更明显(P＜0．05)。结论25mg·kg~(-1)·2d~(-1)ROS有一定抑瘤效果,ATRA与ROS联用可发挥协同抗肿瘤作用,其机制可能是通过蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)途径抑制肿瘤血管生成,从而抑制肿瘤的生长。     

衰老大鼠心肌对缺血再灌注损伤的敏感性研究

目的观察衰老大鼠心肌对缺血再灌注损伤的敏感性,并探讨其可能的机制。方法成年和老年雄性Wistar大鼠各12只,分为4组：成年假手术组、成年缺血再灌注组、老年假手术组和老年缺血再灌注组,每组6只,进行缺血30 min再灌注3 h。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,比色法检测心肌组织半胱胺酸蛋白酶蛋白-3 (caspase-3)活性,化学发光法测定心肌组织总一氧化氮(NOx)含量,ELISA法检测心肌过氧亚硝基(ONOO~-)含量。结果老年组缺血再灌注引起心肌细胞凋亡的程度明显高于成年组,凋亡指数分别为(14．6±1.7)%、(19．0±2．1)%,差异有统计学意义(P＜0．05)；caspase-3活性：成年组为(340±32)μmol/mg,老年组为(436±35)μmol/mg,差异有统计学意义(P＜0．05)；心肌组织中NOx含量：成年缺血再灌注组、老年缺血再灌注组分别为成年假手术组的(2．1±0．2)、(4．4±0．5)倍,差异有统计学意义(P＜0．05)；ONOO~-含量：成年缺血再灌注组和老年缺血再灌注组分别为(4．68±0．15)nmol/g、(7．25±0．18)nmol/g,差异有统计学意义(P＜0．05)。结论老年大鼠对心肌缺血再灌注损伤的敏感性增加,可能的原因是老年鼠心脏中NO的毒性衍生物ONOO~-含量增加,从而导致功能蛋白的硝基化。     

长期高脂饲养大鼠胰岛形态功能改变与外周胰岛素抵抗的关系

目的观察高脂高热量饲料长期饲养对大鼠胰岛形态功能的影响,探讨其与外周胰岛素抵抗的关系。方法8周龄雄性Wistar大鼠30只,分为正常对照组(NC,n=15)和高脂饲养组(HF,n=15),分别给予普通饲料和高脂高热量饲料饲养,采用高胰岛素-正常血糖钳夹技术测定外周胰岛素抵抗程度；以静脉胰岛素释放试验观察胰岛分泌功能；作胰岛素和胰高血糖素双重免疫组化染色,进行胰岛形态学及量化分析；RT-PCR观察胰岛素原mRNA水平的变化。结果HF组的葡萄糖输注率(GIR)显著低于NC组[(5．83±0．79)mg·kg~(-1)·min~(-1)vs(7．60±1．29)mg·kg~(-1)·min~(-1),P＜0．05]。胰岛的免疫组化结果显示HF组单个胰岛的体积增大[(15168±1327)μm~2 vs(6264±1840)μm~2,P＜0．01],β细胞相对于α细胞比率下降[(4．68±1．01)vs(11．84±3．82),P＜0．05],β细胞的胰岛素相对浓度降低[(-5．15±0．03) vs(-4．81±0．17),P＜0．01]。HF组胰岛素分泌高峰明显延迟至10min,NC组达峰时间为5min,HF组胰岛素曲线下面积在10～60min则显著增高[(152．51±34．53)mIU·L~(-1)·min~(-1)vs(86．40±21．21)mIU·L~(-1)·min~(-1),P＜0．01],60 min胰岛素仍在基础水平之上,胰岛素原mRNA差异无统计学意义。结论长期高脂高热量饮食不仅诱导出显著的胰岛素抵抗,胰岛的形态和功能已经出现了早期的损害,提示在2型糖尿病发生发展的前期阶段胰岛的代偿能力已经受损。     

姜黄素对三硝基苯磺酸诱导的结肠炎模型细胞因子的影响

目的探讨姜黄素对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的实验性结肠炎的疗效,并研究肠黏膜、脾细胞和血清中细胞因子的变化。方法45只Sprague-Dawley大鼠经直肠注入TNBS(100 mg/kg)诱导肠炎模型。实验动物分为阴性对照组、模型组(TNBS)和姜黄素治疗组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1),腹腔注射)。RT-PCR测定肠黏膜细胞因子表达水平,流式细胞术测定脾细胞内干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4,ELISA法测定血清中IFN-γ和IL-4。结果姜黄素治疗前后肠黏膜大体评分(3．9±1．0比2．2±0．7),髓过氧化物酶(MPO)活性[每毫克蛋白(15．0±2．6)U比(7．3±1．4)U],肠黏膜中Th1类细胞因子IFN-0γ(1．02±0．07比0．06±0．02)、IL-12 mRNA相对表达水平(0．29±0．05比0．11±0．01)和IFN-γ/IL-4比值(11．44±0．97比0．38±0．10),脾细胞中IFN-γCD4~+细胞百分比(31．7±7．5比21．1±3．7)和IFN-γ/IL-4 CD4~+比值(19．9±5．1比6．1±1．8),血清中IFN-γ质量浓度[(1528±159)pg/ml比(513±14)pg/ml]和IFN-γ/IL-4比值(19．5±4．1比4．2±0．6)均降低(P＜0．05或P＜0．01)。且姜黄素治疗前后肠黏膜中Th2类细胞因子IL-4 mRNA(0．09±0．01比0．15±0．04)和IL-10 mRNA相对表达水平(0．28±0．08比0．63±0．12),脾细胞中IL-4 CD4~+细胞百分比(1．6±0．5比3．4±1．1)和血清IL-4质量浓度[(81±1 5)pg/ml比(124±20)pg/ml]升高(P＜0．05或P＜0．01)。结论姜黄素能治疗TNBS诱导的肠炎,其机制可能与调节肠道局部和机体Th1/Th2平衡有关。     

罗格列酮对大鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的探讨罗格列酮对大鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的作用及可能机制。方法12周龄雄性Wistar大鼠55只,随机分为对照组20只、模型组20只、治疗组15只。对照组大鼠喂食基础饲料;模型组和治疗组在喂食开始时一次性腹腔注射维生素D_3 40万IU/kg,喂食高脂饲料。6周后,处死对照组和模型组大鼠各5只,提取全长主动脉,油红O染色进行病变分级评分;HE染色观察斑块的病理形态改变;免疫组化法测定过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白表达;并测空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。剩余大鼠继续喂养至12周,模型组和治疗组同时分别给予生理盐水(10 m1·kg~(-1)·d~(-1))和罗格列酮(3 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃治疗。6周后,各组大鼠处死后按前述方法再次检测各指标。结果造模6周后,模型组大鼠空腹血糖、FINS、HOMA-IR升高(P＜0．05);主动脉病变评分明显增高(P＜0．01);光镜下可见典型的AS斑块;免疫组化染色显示PPARγ蛋白平均吸光度值明显增强(P＜0．01)。治疗6周后,治疗组与模型组比较,空腹血糖[(5．28±1．44)mmol/L和(8．90±2．60)mmol/L]、FISN[(31．04±24．20)mU/L和(48．38±27．62)mU/L]及HOMA-IR[(7．78±2．61)mmol/L和(12．42±4．13)mmol/L]水平降低(P＜0．05或P＜0．01),但与对照组[(6．01±0．89)mmol/L、(32．15±25．28)mU/L、7．79±2．58]比较,差异无统计学意义;治疗组主动脉斑块评分明显低于模型组(P＜0．01),但略高于对照组(P＜0．05)。光镜下可见治疗组AS病变较模型组明显减轻,且PPARγ蛋白平均吸光度值降低(P＜0．01)。结论罗格列酮治疗6周后,大鼠AS斑块明显消退,激活PPARγ和改善胰岛素抵抗可能是其作用机制之一。     

阿司匹林干预野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的研究

目的探讨阿司匹林对野百合碱(MCT)诱导的大鼠肺动脉高压的作用。方法雄性Sprague Dawley(SD)大鼠120只,随机分为6组,每组20只,分别为:正常对照组(Ctrl组)、肺动脉高压组(PAH组)和阿司匹林不同剂量治疗组(ASA 0.5组,ASA 1组,ASA 2组,ASA 4组)。PAH组、阿司匹林各剂量治疗组于第0天一次性腹腔注射MCT 50 mg/kg。从第l天开始,阿司匹林各剂量治疗组分别给予阿司匹林0.5、1.0、2.0 mg·kg~(-1)和4.0mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,共30d。第31天,对各组大鼠进行以下检测:(1)统计大鼠的体质量和生存率;(2)右心导管法测定肺动脉收缩压(sPAP);(3)心脏大体标本测定右心室肥厚指数(RVHI);(4)肺组织染色切片,运用IPP 6.0图像分析软件测定肺小动脉增厚指数(PATI)。结果与PAH组比较,ASA 2组和ASA 4组体质最增加[(464.6±62.6)g和(473.2±77.2)g比(424.9±68.5)g,均为P<0.05];ASA各治疗组合计生存率较PAH组明显提高(83.75%比60.00%,P<0.05);与PAH组比较,ASA各治疗组sPAP明显下降(均为P<0.05),RVHI显著降低(均为P<0.05);除ASA 0.5组以外,其他阿同匹林治疗组的PATI较.PAH组明显降低(均为P<0.05)。结论阿司匹林1、2 mg·kg~(-1)·d~(-1)和4 mg·kg~(-1)·d~(-1)能有效降低野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠的肺动脉压力,减轻右心室肥厚和肺小动脉增生。     

周岁以下婴儿的肝移植

过去15年内,肝移植已成为挽救终末期肝病患者的治疗方法,但有关儿童患者的初步经验不多。Johns Hopkins医院在过去4.5年内曾为13例1岁以下婴儿施行了17次肝移植。术中给甲基去氢泼尼松一次剂量10mg/kg,随后10天内渐减至1mg·kg~(-1)·d~(-1),其后1个月内,逐步减量至0.3mg·kg~(-1)·d~(-1),后隔天用药3个月,     

纳洛酮早期干预预防新生儿缺氧缺血性脑病的临床观察

目的观察纳洛酮预防新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的疗效。方法将有 HIE 病因的106例足月新生儿随机分为两组,对照组52例,治疗组54例。入院后均进行常规治疗,治疗组同时给予纳洛酮0．1 mg·kg~(-1)·d~(-1),加入葡萄糖内静脉滴注3～5 d。对入院时有明显神经症状者,首剂0．03～0．05 mg/kg 静脉注射,然后按上述方法静脉滴注。比较两组 HIE 发生率。结果治疗组 HIE 发生率48．1%,中重度 HIE 发生率24．1%,较对照组的86．5%及44．2%明显降低(P 分别小于0．01,0．05),治疗组中出生后6 h 以内用药者 HIE 发生率34．4%,明显低于6 h 后用药的68．2%(P＜0．05),未见有不良反应。结论对有 HIE 病因的新生儿,早期应用纳洛酮预防 HIE 疗效显著,尤以6 h 内应用为佳,值得推广应用。     

麻醉和镇痛对老年人食管癌术后T细胞亚群变化的影响

目的比较不同麻醉和镇痛方法对非老年及老年食管癌患者术后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD+／CD8)的影响。方法回顾性分析80例食管癌患者,其中40例65- 75岁患者为老年组,40例47-59岁患者为非老年组,根据麻醉和术后镇痛方法的不同,每组分为静脉复合全麻、术后静脉自控镇痛20例(静脉自控组)和静脉全麻联合硬膜外阻滞、术后硬膜外自控镇痛20例(硬膜外腔自控组)。分别于麻醉前、术毕、术后1 d、2 d、5 d,共5个时点测定T细胞亚群。结果术后5 d,非老年组及老年组硬膜外腔自控组CD4／CD8为(1．5±0．4)和(1．3±0．4),分别高于非老年组的(1．3±0．4)和老年组静脉自控组的(1．1±0．4),差异有统计学意义(均为P<0．05)。结论全麻复合硬膜外麻醉较有利于促进患者T细胞亚群恢复正常。     

人TIMP-1转基因小鼠随增龄肾组织炎症反应变化的意义

目的利用人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)转基因小鼠,研究了IMP-1在肾脏器官衰老过程中的作用。方法对3、12、24月龄人TIMP-1转基因小鼠和野生型小鼠肾组织石蜡切片行PAS染色；免疫荧光法检测肾组织内F4/80阳性细胞数；Western印迹方法检测肾组织内TIMP-1、TIMP-2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9、MMP-2、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Ⅲ型和Ⅳ型胶原蛋白质表达；明胶酶谱法检测明胶酶活性。反向酶谱法检测TIMP-1的活性。结果两种基因型小鼠随增龄肾组织内出现局灶性纤维化改变。24月龄,与野生型小鼠比较,转基因小鼠肾组织内TIMP-1表达及活性上调[(1．10±0．18)对(0．62±0．09)；(50．75±7．25)对(20．64±3．50),P＜0．05]；明胶酶的表达及活性降低[(MMP-2：(2．08±0．20)对(3．39±0．43)；MMP-9：(4．02±0．82)对(6．72±1．40),P＜0．05]；Ⅲ型和Ⅳ型胶原[(0．72±0．11)对(0．57±0．09)；(0．84±0．13)对(0．6±0．11),P＜0．05]、ICAM-1和TGF-β1的表达上调[(0．72±0．12)对(0．53±0．07)；(0．69±0．12)对(0．45±0．09),P＜0．05],F4/ 80阳性细胞增多[(18．8±4．4)对(12．7±3．6),P＜0．05]。结论TIMP-1通过上调ICAM-1、增强炎症,促进衰老相关肾脏纤维化。