蛇六谷葡苷露聚糖对小鼠巨噬RAW264.7细胞免疫调节作用及机制研究

目的探讨蛇六谷葡苷露聚糖(KGM)对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用及机制。方法采用MTT法检测KGM对小鼠巨噬RAW264.7细胞存活率的影响,观察巨噬细胞形态的变化;采用吞噬中性红和流式细胞仪测FITC-dextran的方法检测KGM处理后小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬活性;采用Griess法测定NO,ELISA法检测细胞培养液中IL-6,IL-1β和TNF-α等细胞因子的含量;采用qRT-PCR法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7相关基因iNOS,IL-6,TNF-α,IL-1β,TLR4,My D88,TRAF-6,TRAM和NF-κB等的表达。结果 KGM在50～400 mg·L~(-1)对小鼠巨噬细胞RAW264.7没有细胞毒性。KGM处理24 h后,RAW264.7细胞体积增大,胞内颗粒小泡增多,呈不规则多边形,部分细胞伸出伪足,表现为典型的激活态;中性红吞噬实验和流式测定FITC-dextran实验结果表明,KGM 50～200 mg·L~(-1)能显著提升小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬活性,与对照组相比,KGM 100 mg·L~(-1)分别使细胞吞噬活性提高101.4%和404.3%。Griess法检测表明,KGM能显著增加小鼠巨噬细胞RAW264.7合成和释放NO,其中KGM100 mg·L~(-1)处理组细胞NO含量与LPS 5 mg·L~(-1)作用相当,与对照组相比,NO含量提高318.1%。ELISA检测表明,KGM 50～200 mg·L~(-1)能诱导RAW264.7细胞分泌IL-6,TNF-α和IL-1β等细胞因子,与对照组相比,KGM 100 mg·L~(-1)明显使细胞因子分泌量分别增加415.5%,158.6%和458.0%(P<0.01)。qRT-PCR的结果显示,与对照组相比,KGM组IL-6,i NOS,TNF-α,IL-1β,TLR4,My D88,TRAF-6和NF-κB的mRNA表达水平升高(P<0.05),表明KGM可以激活小鼠巨噬细胞RAW264.7中的核转录因子NF-κB和TLR4。结论 KGM对小鼠巨噬RAW264.7细胞具有免疫调节活性,能够显著提升小鼠细胞RAW264.7的吞噬能力,促进分泌与释放NO和TNF-α等相关细胞因子,推测可能是通过激活TLR4/My D88/NF-κB信号通路发挥免疫调节作用。     

豆蔻明对TLR4/MyD88/NF-κB/iNOS信号通路的调节作用

目的探讨豆蔻明(cardamonin,CDN)对RAW264.7小鼠巨噬细胞Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/My D88/NF-κB/i NOS信号通路的调节作用。方法利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理RAW264.7细胞建立炎性细胞模型并分组:正常对照组(Vehicle组)、模型组(LPS组)和药物处理组(LPS+CDN组);CCK-8方法检测细胞活力,Griess法检测细胞培养上清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,RT-PCR检测诱导型NO合成酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-ɑ、白介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的mRNA表达,Western blot检测i NOS、TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)phosphorylated(p)-p65、inhibitorκBα(IκBα)和p-IκBα的蛋白表达。结果1~50μmol·L~(-1)豆蔻明对RAW264.7细胞没有毒性,但可以剂量依赖性抑制LPS诱导的NO分泌和i NOS、COX-2、MCP-1、TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达,25μmol·L-1豆蔻明可下调LPS诱导的i NOS、TLR4、My D88、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达及抑制IκBα降解。结论豆蔻明通过抑制TLR4/My D88/NF-κB/i NOS信号通路从而抑制NO的产生。     

PV-杀白细胞素和PDTC对THP-1巨噬细胞IL-1β表达的影响

目的探讨NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌PV-杀白细胞毒素相关性肺损伤中的作用。方法实验前用100 nmol·L-1佛波酯孵育THP-1细胞48 h,充分诱导使其分化为巨噬细胞,分为三组,正常对照组、PDTC阻断组和rPVL刺激组,PDTC阻断组实验前1 h加入PDTC孵育,1 h后分别加入PBS和rPVL刺激其诱导分化好的巨噬细胞,采用ELISA检测细胞上清IL-1β的蛋白含量,RT-PCR检测IL-1βmRNA水平的表达,Western-blot检测NF-кB的表达。结果 PV-杀白细胞毒素能促进THP-1巨噬细胞分泌IL-1β,同时rPVL能活化NF-κB蛋白,NF-κB信号通路的特异性阻断剂能够抑制NF-κB蛋白的活化。结论 NF-κB信号通路蛋白激活及细胞因子大量释放可能是PVL相关肺损伤重要的发病机制。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的干预作用

目的:基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路研究黄连素对小鼠巨噬细胞极化的影响。方法:以小鼠巨噬细胞RAW264.7为对象,以阿托伐他汀钙为阳性对照,经脂多糖(LPS)诱导以复制炎症细胞模型,采用酶联免疫吸附测定法检测低、中、高剂量黄连素(5、10、20μmol/L)作用24 h后细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、NF-κB含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中TLR4、MyD88 mRNA的表达水平,采用Western blotting法检测细胞中TLR4、MyD88、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD206蛋白的表达水平。结果:与空白对照组比较,LPS诱导组细胞培养液中TNF-α、IL-6、NF-κB含量,细胞中TLR4、MyD88 mRNA的相对表达量以及TLR4、MyD88、iNOS蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。与LPS诱导组比较,阿托伐他汀钙组和黄连素中、高剂量组TNF-α、IL-6含量,TRL4、MyD88 mRNA及其蛋白的相对表达量以及各给药组NF-κB含量和i NOS蛋白的相对表达量均显著降低,且黄连素高剂量组NF-κB含量显著低于阿托伐他汀钙组(P<0.05);阿托伐他汀钙组和黄连素高剂量组CD206蛋白的相对表达量均显著升高,且黄连素高剂量组CD206蛋白的相对表达量显著高于阿托伐他汀钙组(P<0.05)。结论:不同剂量的黄连素均可不同程度地干预小鼠巨噬细胞极化,其机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。     

芍药苷对AGEs刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响。方法 AGEs在不同时间点刺激RAW264.7巨噬细胞,使用不同浓度的PF预先孵育细胞干预刺激,以优化实验条件;后将巨噬细胞随机分为对照组(DMEM培养基)、牛血清白蛋白(BSA)组(200 mg·L~(-1)BSA)、AGEs组(200 mg·L~(-1)AGEs)、PF组(200 mg·L~(-1)AGEs+10~(-5)mol·L-1PF)及TLR2/4抑制剂组(200 mg·L~(-1)AGEs+30 mg·L~(-1)人氧化磷脂)。Western blot检测各组TLR2、TLR4、髓样分化因子(My D88)、p-IRAK1、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、干扰素调节因子3(IRF3)、p-IRF3、NF-κB p-p65、NF-κB p65、iNOS、TNF-α、IL-1β和MCP-1蛋白表达,RT-PCR检测各组TLR2和TLR4mRNA表达,ELISA法测定各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β及MCP-1水平。结果与对照组相比,AGEs能明显上调TLR2、TLR4、My D88、p-IRAK1、TRIF、IRF3、p-IRF3、NF-κB pp65、NF-κB p65、i NOS、TNF-α、IL-1β、MCP-1蛋白表达(P<0.01)及TLR2、TLR4 mRNA表达(P<0.01),增加细胞上清液中TNF-α、IL-1β、MCP-1水平(P<0.01);PF和TLR2/4抑制剂能明显下调AGEs诱导产生的效应(P<0.01)。结论 PF可通过抑制巨噬细胞TLR2/4信号通路而发挥抗炎作用,这可能为糖尿病肾病的治疗提供新的理论基础。     

Sorting nexin 10缺失对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的内涵体/溶酶体转运对巨噬细胞处理病原体和炎症应答等功能至关重要。该研究探讨了内涵体/溶酶体转运调节蛋白SNX10对巨噬细胞功能的影响,为治疗多种巨噬细胞相关免疫疾病提供新的潜在靶点。方法 PCR反应鉴定小鼠基因型;激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护实验检测巨噬细胞的杀菌功能;RT-q-PCR法检测TNF-α、IL-12/23 p40、IL-6的表达水平;ELISA检测细胞培养上清中TNF-α、IL-12/23 p40、IL-6的表达;Western blot和免疫荧光染色检测NF-κB通路;脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激巨噬细胞炎症化。结果 SNX10敲除后对其吞噬功能没有影响,但能够增强巨噬细胞的杀菌能力;同时SNX10缺失还可以抑制巨噬细胞分泌促炎因子TNF-α、IL-12/23 p40和IL-6,抑制NF-κB信号通路。结论 SNX10敲除增强了巨噬细胞的杀菌能力,同时可以抑制巨噬细胞的炎症应答,其作用机制可能是通过NF-κB信号途径而实现的。     

巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制.方法:用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预.RTPCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88 (MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平.结果:MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移.LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响.结论:MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移.     

隐丹参酮对骨髓来源巨噬细胞功能的影响

目的研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平;Western blot检测NF-κB通路;LPS(lipopolysaccharides)及IL-4刺激检测巨噬细胞分型。结果隐丹参酮能够增强巨噬细胞吞噬功能及杀菌能力;促进抗炎因子IL-10并抑制促炎因子TNF-α及IL-6的表达;阻断NF-κB信号通路;诱导巨噬细胞向M2型分化。结论隐丹参酮能促进巨噬细胞向M2型分化,并上调骨髓巨噬细胞的免疫功能。     

金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的调节机制研究

目的：研究金茵清热口服液（JYQR）对人外周血单个核细胞（PBMC）中Toll样2受体（TLR2）信号通路免疫调节作用机制。方法：体外分离、培养人PBMC,设空白对照组和JYQR组,JYQR组加入JYQR刺激PBMC,与空白组经37℃,5% CO₂培养24 h后,分别提取各组PBMC中总RNA、总蛋白、细胞上清液,RT-PCR和Western Blot法检测空白对照组和JYQR组PBMC中相关信号分子TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6、IRF3 mRNA和蛋白的表达情况,ELISA法检测细胞因子IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-α的分泌水平;分别设空白对照组：不作处理;JYQR组：JYQR 2.015 mg·mL^-1;TLR2激动剂组：Pam3CSK4 300 ng·mL^-1;TLR2抑制剂组：OxPAPC 30 μg·mL^-1+JYQR 2.015 mg·mL^-14组,提取核蛋白和浆蛋白,Western Blot法检测IRF3和NF-κB p65的核转位情况。结果：与空白对照组相比,JYQR组中TLR2、IRAK4、TRAF6、IRF3 mRNA表达水平分别上调5.93倍、1.77倍、2.95倍、1.43倍（^*P<0.05,^**P<0.01）;MyD88、TRAF6蛋白的表达分别上调1.26倍、1.24倍（^*P<0.05）,IRAK4和IRF3的相对表达水平差异无统计学意义;细胞因子IL-1α、IL-6的表达下调55%、61%,TNF-α、IFN-α的分泌水平上调4.3倍、2.9倍（^*P<0.05,^**P<0.01）。JYQR预处理PBMC后,IRF3及NF-κB核转位增加,但是经过TLR2抑制剂预处理后,IRF3和NF-κB的核转位减弱;相反,TLR2激动剂预处理可以进一步上调IRF3和NF-κB的核转位。结论：金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的作用机制可能是通过MyD88依赖型信号通路激活中、下游的IRAK4、TRAF6、IRF3以及NF-κB调控终端效应因子发挥免疫调节作用。     

桑黄多糖对人TLR4信号通路的激活作用研究

目的 观察桑黄多糖（polysaccharide from Phellinus igniarius,PPI）对人Toll-样受体4（Toll like receptor 4,TLR4）通路的激活作用及作用特点。方法 采用转染了人TLR4基因、分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-Blue^TM hTLR4细胞模型,快速评价PPI对TLR4通路的激活作用,并用PMA诱导的THP-1细胞模型观察药物对TLR4通路作用的特点;MTT法检测细胞活性;ELISA法检测细胞因子分泌量;Real time PCR检测细胞mRNA表达水平。结果 PPI作用24 h不影响细胞活性,但能剂量依赖性地增加HEK-Blue^TM hTLR4细胞分泌型胚胎碱性磷酸酶的表达,并使THP-1细胞TLR4通路相关细胞因子TNF-α,IP-10分泌量增加。TLR4受体阻断剂TAK-242能显著降低PPI诱导的细胞因子分泌量（P<0.01）。Real-time PCR结果显示PPI既可以增加MyD88通路TNF-α、IL-6、IL-12、IL-1β、COX-2等细胞因子的mRNA表达,又可以增加TRIF通路IP-10、IFN-β等细胞因子的mRNA表达。结论 PPI对人TLR4受体具有直接激活作用,能同时激活TLR4下游MyD88和TRIF 2条分支,对TLR4分支通路的激活没有选择性。     

红霉素对佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1、IL-4及IL-8水平表达的影响

类风湿性关节炎是一种主要累及关节的全身慢性自身免疫性疾病.其发病机制未明,在炎性滑膜组织中,巨噬细胞、成纤维细胞和淋巴细胞在抗原的不断刺激下增生并分泌多种细胞因子,如白细胞介素(interleukin,IL,以下简称白介素)-1,IL-4,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12等.其在介导炎症反应、促进免疫应答的过程中起着非常重要的作用.而红霉素是临床常用的大环内酯类抗生素,其抗菌活性也已经是公认的,而近年来越来越多的研究表明,红霉素具有潜在的免疫调节机制.     

慢性肾炎治疗前后血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-18和T淋巴细胞亚群检测意义

目的探讨慢性肾炎患者治疗前后血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-18和T淋巴细胞亚群的变化。方法分别应用放免法、ELISA法和单克隆抗体法对30例慢性肾炎患者治疗前后进行了血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-18和T淋巴细胞亚群水平的检测,并与35名正常健康人作比较。结果慢性肾炎患者在治疗前血清IL-2和CD4/CD8比值明显低于正常人组（P〈0.05）,而IL-6、IL-10和IL-18水平高于正常人组（P〈0.01）;经半年治疗后血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-18和CD4/CD8与治疗前组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论检测慢性肾炎患者血清IL-2、IL-6、IL-10、IL-18和T淋巴细胞亚群水平对判断病情及其预后均具有一定的临床实用价值。     

子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中白细胞介素-8、10、15、16的检测分析

目的探讨腹腔液白细胞介素-8、10、15、16与子宫内膜异位症发病机制的相关性。方法收集近一年子宫内膜异位症和子宫肌瘤、卵巢良性肿瘤患者腹腔液，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定IL-8、10、15、16浓度。结果子宫内膜异位症患者腹腔液中IL-10、16的浓度明显低于对照组，IL-8、15的浓度明显高于对照组。两组间比较P〈0．01，具有显著性差异。结论子宫内膜异位症腹腔液中IL-10、16的浓度降低，IL-8、15的浓度升高．可能与内异症免疫发病机制有关。     

保护性单肺通气在老年患者开胸手术中的应用

目的观察保护性单肺通气对行开胸手术老年患者的呼吸血流动力学,炎性介质的影响,探讨保护性单肺通气在老年开胸手术患者中的应用价值。方法60例择期行肺叶切除术的肺癌患者,年龄均大于60岁。随机分为对照组（C组）;保护性肺通气组1（P1组）,保护性肺通气组2（P2组）。3组患者在行常规静脉诱导后均插入双腔气管插管,并以听诊法定位。C组患者行传统方法单肺通气（潮气量10ml/kg,PEEP0cmH2O）;P1组患者行保护性单肺通气（潮气量6ml/kg,将PEEP维持在5cmH2O左右）;P2组患者（潮气量6ml/kg,并在循环功能稳定的基础上逐步增加PEEP,直至将PEEP维持在10cmH2O左右,并控制气道平台压低于30cmH2O）。记录单肺通气前（T1）、单肺通气开始后1h（T2）、2h（T3）及术后2h（T4）的：动脉血气分析指标并计算出氧合指数OI;血流动力学数值;检测外周血中炎症介质（IL-6、IL-8、IL-10）。结果在单肺通气期间OI均有明显降低,但C组显著低于P1、P2组（P〈0.05）;3组血清中IL-6、IL-8的浓度于T2时明显上升（P〈0.05）,IL-10于T3时明显上升（P〈0.05）。P1、P2组T3、T4时血清IL-6和IL-8浓度均明显低于C组（P〈0．05）,而IL-10浓度高于C组（P〈0．05）。结论低潮气量结合呼气木正压的保护性肺通气可减轻老年患者开胸手术肺的炎性反应,有利于减少围手术期呼吸系统并发症及多器官功能障碍。     

IL-10抑制脂多糖诱导的Hela细胞IL-15和IL-6转录

目的研究IL-10对脂多糖(LPS)诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6 mRNA表达的影响,分析其激活的信号转导通路。方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Westernblot分析信号转导通路蛋白变化。结果RT-PCR分析得知①1ng～10μgLPS刺激Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P<0.01),且存在剂量依赖关系,100ng/mL时达峰值;100ng/mLLPS刺激Hela细胞0～24h,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平亦明显上调(与对照组比较:P<0.01),24h内存在时间依赖关系,12h时达峰值。②单独IL-10(10ng/mL)作用于Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA没有明显变化(与对照组比较:P>0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100ng/mL)均下调100ng/mLLPS诱导的Hela细胞IL-15 mRNA和IL-6 mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。Western blot分析显示LPS主要通过磷酸化信号蛋白PI3K/AKT和ERK1/2上调IL-15和IL-6转录,IL-10能阻断AKT的磷酸化而对ERK1/2的磷酸化没有影响。结论IL-10可抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,这可能与其阻断AKT的磷酸化有关,因而,IL-10可能应用于某些临床感染性疾病的预防和治疗。     

动态监测重症肺炎患者血液和支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-10的含量及其意义

目的动态监测重症肺炎患者血液和支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、IL-10的浓度变化，探讨其临床意义。方法收住本院ICU的重症肺炎患者，人选患者在病程的第1天，CPIS评分〉6分为CPIS高分组，CPIS评分≤6分为CPIS低分组。在病程的第1、4、7天抽取外周静脉血做细胞因子测定以及支气管肺泡灌洗液检查。结果无论在血液中还是在BALF中，CPIS高分组的IL-6、IL-8水平比CPIS低分组明显增高，差异有统计学意义（P〈0．01），CPIS高分组IL．10水平比CPIS低分组组稍高，但尚未达显著差异；血液和BALF中IL石、IL-8水平与CPIS评分呈正相关（P〈0．05），血液和BALF中IL-10水平与CPIS评分无明显相关性。结论重症肺炎患者血液和支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-8的水平可以反映肺感染程度，IL-8、IL-10的水平及变化趋势可以反映患者预后情况。     

戒毒中药玄夏对吗啡依赖大鼠戒断过程中Th1/Th2平衡的影响

目的:通过对大鼠在吗啡依赖、自然戒断和使用戒毒药玄夏治疗时Th1/Th2相关细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6进行测定,以了解戒毒药玄夏对大鼠体内Th1/Th2平衡的影响。方法:成年♂SD大鼠24只,随机分配到正常对照组、吗啡依赖组、自然戒断组和玄夏治疗组,每组6只。正常对照组每日两次sc生理盐水。余3组每日sc吗啡,共8d,建立吗啡依赖模型。玄夏治疗组于给吗啡的d4起每日ig玄夏,正常对照组和吗啡依赖组于最后一次sc吗啡后取脾脏,自然戒断组和玄夏治疗组于停吗啡72h后取脾脏,制备脾细胞悬液,加入Con A后置CO2细胞培养箱中培养48h后,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-64种细胞因子的水平。结果:脾细胞培养液中,IFN-γ、IL-2和IL-6 3种细胞因子的组间差异有统计学意义(P<0.05),IL-4组间差异无统计学意义。吗啡依赖组大鼠Th1型因子IFN-γ水平显著高于正常对照组(P<0.05),IL-2的水平有升高的趋势,但差异无统计学意义;Th2型因子IL-6水平则显著低于正常对照组(P<0.05)。自然戒断组,IFN-γ的水平较吗啡依赖组有所下降,但仍显著高于正常对照组(P<0.05);IL-2的水平进一步升高,与吗啡依赖组的差异无统计学意义,但显著高于正常对照组;IL-6的水平较吗啡依赖组稍有增加。玄夏治疗组,IFN-γ水平较吗啡依赖组低,而且明显低于自然戒断组,与正常对照组的水平相似;IL-2水平较自然戒断组和吗啡依赖组低,接近正常对照组;IL-6的水平则显著低于自然戒断组(P<0.05)。结论:大鼠使用玄夏后,Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2能恢复到正常水平,提示玄夏能抑制大鼠吗啡依赖时增强的Th1型免疫应答,对Th1/Th2平衡有调节作用。     

肾病综合征患儿免疫功能测定的临床意义

目的研究肾病综合征（NS）患儿T细胞亚群、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-8（IL-8）在肾病综合征（NS）患儿中的水平变化及其临床意义。方法分别采用流式细胞仪直接免疫荧光法和特异性酶联免疫吸附实验检测30例体检健康者,30例NS发作组和32例NS缓解组患者血清中T细胞亚群和IL-2、IL-6和IL-8水平及其动态变化。结果NS发作组T细胞亚群均明显高于正常对照组（P〈0.05）及NS缓解组（P〈0.05）,NS发作组IL-2、IL-6和IL-8水平亦明显高于正常对照组（P〈0.01）及NS缓解组（P〈0.01）,而NS缓解组IL-2、IL-6和IL-8水平与正常对照组无显著性差异。结论研究提示肾病综合征（NS）患儿存在明显的免疫功能紊乱。     

清肺止咳糖浆与阿奇霉素联合应用对幼儿支原体肺炎疗效及机制

目的观察清肺止咳糖浆对幼儿支原体肺炎（Mycoplasma pneumoniae,MPP）的治疗作用,以及对患儿血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6的影响。方法选择支原体肺炎患儿46例,随机分为阿奇霉素组20例,清肺止咳糖浆联合阿奇霉素组26例。观察各组的治愈情况,并以酶联免疫法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6含量的变化。结果与阿奇霉素组比较,联合治疗组治愈率显著提高（P〈0.05）。与正常组比较,MPP患儿血清IFN-γ、IL-2含量明显于正常组（P〈0.05）;经清肺止咳糖浆干预后,IFN-γ、IL-2含量明显于正常组（P〈0.05）;与正常组比较,MPP患儿血清IL-4、IL-6含量显著升高（P〈0.05）;经清肺止咳糖浆干预后,IL-4、IL-6含量显著降低（P〈0.05）。结论清肺止咳糖浆与阿奇霉素联合应用对MPP患儿疗效可靠,其机制可能与调节患儿免疫功能有关。     

新生儿缺氧缺血性脑病与T辅助细胞亚群功能的相关性探讨

目的探讨患有缺氧缺血性脑病新生儿T辅助细胞亚群的水平与疾病的相关性。方法收集2007年3月至2009年1月缺氧缺血性脑病患儿80例,轻度HIE28例,中度HIE36例,重度HIE16例。选取正常儿40例作为对照组。两组新生儿一般状况等方面,差异无统计学意义,具有可比性。采集患儿股静脉血,对照组脐带血。用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测γ-干扰素、白细胞介素2、IL-4及IL-6的水平。结果患儿IFN–γ、IL-2水平明显低于正常新生儿组,且病情越重,IFN-γ、IL-2水平越低。IL-4、IL-6高于正常新生儿组,病情越严重,IL-4、IL-6的水平越高。结论对新生儿的T辅助细胞亚群功能的检测,能够早期诊断疾病、评估病情的轻重程度,判断患儿的预后。