线粒体DNA突变及其与衰老的关系

大量研究证实衰老与线粒体 DNA缺失突变有密切关系。在衰老过程中 ,线粒体 DNA的缺失突变随增龄而积累 ,使线粒体的生物学发生变化 ,从而影响线粒体的正常功能 ,促进衰老的进程 ,本文主要就以上内容作一综述。真核细胞基因组由核 DNA和线粒体 DNA(m t DNA)两部分组成。人和哺乳动物的 mt DNA是一种大小约为 16 .5 kb的双链环状分子 ,其中一条为轻链 ,另一条为重链 ,均具有编码功能 ,共含有 37个基因 :13个编码氧化磷酸化的 13条多肽链 ,2个编码 r RNA (12 sr RNA和 16 sr RNA) ,2 2个编码线粒体 t RNA,同时线粒体 DNA中还具有…     

益肾强身丸和防衰益寿丸干预衰老小鼠作用研究

目的研究益肾强身丸和防衰益寿丸对自然衰老模型小鼠抗衰老作用的影响。方法将48只6～8月龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为模型组、益肾强肾丸+防衰益寿丸低剂量组(0.25 g·kg~(-1))、益肾强肾丸+防衰益寿丸高剂量组(0.5 g·kg~(-1))、人参总皂苷组(0.1 g·kg~(-1));12只8周龄雌性C57BL/6J小鼠为正常对照组。按照每10 g体质量0.2 mL容积灌胃给药,各给药组给予相应药物溶液(早服益肾强身丸溶液,晚服防衰益寿丸溶液),正常对照组给予相应体积的生理盐水,每日给药1次,连续干预8周,药物干预结束后,进行Morris水迷宫训练及测试并测定小鼠血清、肝、心脏、脑、肾中SOD,LPO,MDA及GXHPx含量。结果 Morris水迷宫定向航行试验的第4天,益肾强肾丸低剂量+防衰益寿丸低剂量组显著降低老龄小鼠逃避潜伏期(P<0.01),第6日进行的空间探索试验益肾强肾丸+防衰益寿丸对老龄小鼠空间探索能力没有明显影响,第7日工作记忆能力检测中,益肾强肾丸高剂量+防衰益寿丸高剂量组可明显降低老龄小鼠的逃避潜伏期(P<0.05)。与模型组相比,益肾强身丸+防衰益寿丸低剂量组(0.25 g·kg~(-1))血清、肝、脑SOD活力及肾LPO含量显著提高(P<0.05),血清及脑GSH-Px浓度显著升高但MDA浓度显著降低(P<0.05);与模型组相比,益肾强身丸+防衰益寿丸高剂量组(0.5 g·kg~(-1))血清、脑SOD活力及脑内GSH-Px浓度显著升高(P<0.05),血清、肾MDA浓度及肝LPO含量显著降低(P<0.05);人参皂苷组(0.1 g·kg~(-1))血清MDA浓度显著降低、GSH-Px浓度显著升高(P<0.05),血清、肝、肾及心脏LPO含量显著升高(P<0.05)。结论益肾强身丸和防衰益寿丸对D-半乳糖所致衰老模型小鼠具有一定的抗氧化抗衰老作用。     

氧化胁迫及线粒体DNA突变与衰老的研究进展

目的介绍氧化胁迫对线粒体的影响 ,人体线粒体DNA的结构 ,线粒体DNA点突变及缺失与衰老的关系。方法根据国内外有关文献加以综述。结果与结论线粒体是生物的能量工厂 ,是氧消耗的主要细胞器。线粒体内呼吸链产生的活性氧和自由基不断积累 ,造成对细胞及其结构功能生物大分子产生氧化胁迫 ,进而产生氧化损伤 ,促进衰老。线粒体DNA是独立于染色体之外的具有自主复制的DNA ,大量实验表明线粒体DNA(mtDNA)突变与衰老及衰老有关的衰退性疾病有关     

线粒体DNA与线粒体DNA突变

线粒体是真核生物细咆内的能量转换体系和供能中心。它含有自己的 DNA。就人体来说,线粒体 DNA(mtDNA)是细胞内唯一的核外遗传物质。1988年,Holt 和 Wallace 分别在线粒体脑肌病和 Leber 氏遗传性视神经病患者中发现了 mtDNA 的突变,从而开辟了研究 mtDNA 突变与人类疾病的新领域。     

线粒体DNA与衰老和长寿

线粒体DNA（mtDNA）是细胞中独立存在于核DNA（nDNA）之外的呈闭合环状的DNA分子．研究表明mtDNA有半自主复制．高突变性、母系遗传、异质性等特点。它包含37个基因．其中的2个编码rRNA、22个编码tRNA．另外13个基因编码与线粒体氧化磷酸化有关的蛋白质。这些蛋白质与其他nDNA编码的蛋白质一起．组成了完整的电子传递链，完成细胞呼吸功能，为细胞提供能量。当线粒体功能出现异常的时候．细胞往往因能量供应不足而丧失活力，进而出现衰老。另外因为mtDNA特殊的结构积累了大量的突变，最终加速衰老的发生发展。众多研究表明线粒体与衰老和长寿有着密切联系．使得线粒体成为衰老和长寿机制研究的重要热点．本文就此作一综述.     

松果菊苷对衰老小鼠免疫功能和线粒体DNA相对含量的影响

目的观察肉苁蓉提取物松果菊苷(ECH)对实验性小鼠免疫功能和肝细胞线粒体DNA相对含量的影响。方法小鼠皮下注射10%D-半乳糖10ml.kg-1,每天1次,连续8wk,建立亚急性衰老模型。阳性组和松果菊苷各组同时灌胃给于维生素E40mg·kg-1和ECH20、40、60mg·kg-1,每天1次。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中IL-2、IL-6含量;中性红实验测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;MTT法检测ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;SDS碱变性法测定肝细胞线粒体DNA相对含量。结果与正常组比较,模型组小鼠血清IL-2含量,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖反应均下降,IL-6和肝脏线粒体DNA相对含量升高。ECH各剂量组和维生素E阴性对照组均能提高衰老小鼠血清IL-2含量、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖反应,降低IL-6和肝细胞线粒体DNA相对含量。结论松果菊苷能够提高机体的免疫功能,降低衰老小鼠肝细胞线粒体DNA相对含量,可能是其延缓衰老的作用机制之一。     

健脑益寿胶囊对衰老模型小鼠血清SOD及GSH—Px的影响

目的：探讨健脑益寿胶囊的抗衰老作用机制。方法：以D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠为模型，分别灌胃给予健脑益寿胶囊高剂量组2．08g／kg，中剂量组1．04g／kg，低剂量组0．52g／kg；阳性对照药维生素E0．0078g／kg；空白对照生理盐水10ml／kg。6周后，测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性。结果：与模型组比较，健脑益寿胶囊可明显提高衰老模型小鼠血清中SOD及GSH—Px的活性。结论：健脑益寿胶囊具有明显的抗衰老作用，其作用机理可能与提高抗氧化酶的活性，对抗自由基的生成有关。     

线粒体与衰老

衰老是一种复杂的病理生理现象 ,主要表现为机体各种功能的下降。大量研究结果表明 ,衰老的发展过程与线粒体功能异常有密切关系。在衰老过程中 ,线粒体生物学发生变化 ,线粒体产生自由基和自由基对线粒体的损伤对衰老的发展起到促进作用 ;线粒体DNA突变和线粒体对细胞死亡进程的调控与衰老的进程有密切关系。本文主要对以上内容作一综述。     

神经肌肉性疾病患者线粒体DNA突变的研究分析

目的 为了探讨神经肌肉怀疾病的发病与线粒体ＤＮＡ突变的关系。方法 采用ＰＣＲ技术检测１８例患有不同神经肌肉性疾病患者的外周血和骨骼肌细胞中的线粒体ＤＮＡ。结果 其中５例患者有ｍｔＤＮＡ５２６ｂｐ段缺失，此缺失区于线粒体呼吸链复合物的编码区。结论 表明该突变对神经肌肉性疾病的发生有一定作用。     

益寿永真合剂对大鼠性激素水平和小鼠超氧化物歧化酶活力的影响

目的：探讨益寿永真合剂对大鼠性激素水平和小鼠超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。方法：以大鼠性激素水平和小鼠SOD活力变化为评价指标。结果：益寿永真合剂能够显著提高年老大鼠的性激素水平和小鼠SOD活力,结论：提示该制剂具有一定抗衰老作用。     

冠舒滴丸对衰老模型大鼠脑组织的保护作用

目的：研究冠舒滴丸对衰老模型大鼠脑组织氧化损伤的保护作用。方法：大鼠腹腔注射D一半乳糖以复制衰老模型。60只Wistar大鼠分为正常对照（等容生理盐水）组、模型（等容生理盐水）组、维生素E（27mg／kg）组与冠舒滴丸高、中、低剂量（800、400、200mg／kg）组,灌胃给药,每天1次,连续8周。测定大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性与丙二醛（MDA）含量,大鼠脑组织匀浆SOD活性与MDA、脂褐素（LPF）含量,并对大鼠脑组织进行病理学观察。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠血清SOD活性显著减弱,MDA含量显著减少,大鼠脑组织匀浆SOD活性显著减弱,MDA、LPF含量显著减少（P〈0．01）;模型组大鼠神经元与胶质细胞排列紊乱,部分神经元萎缩变性,局灶性神经元核固缩,小胶质细胞增生;与模型组比较,冠舒滴丸高、中剂量组大鼠血清SOD活性显著增强,MDA含量显著增加,大鼠脑组织匀浆sOD活性显著增强,MDA、LPF含量显著减少（P〈0．01或P〈0．05）,大鼠神经元及胶质细胞排列较为规则,细胞大小及形态较为正常,脑膜无充血水肿,未见炎细胞浸润。结论：冠舒滴丸对衰老模型大鼠脑组织氧化损伤有一定的保护作用。     

复方丹参滴丸对急性心肌梗死大鼠基因表达谱的影响

目的：利用基因芯片技术对复方丹参滴丸对心肌梗死大鼠基因表达的影响进行评价和研究。方法：使用冠脉结扎法造成大鼠心肌缺血模型,并提取给药组和模型组大鼠心肌缺血区组织的总RNA,用大鼠全基因组芯片分析其基因组表达谱变化。结果：基因芯片结果显示,与模型组相比,给药组表达量发生变化的基因（Ratio〉2或〈0．5）有49条,其中表达下调的有39条,主要有Ppp3r1、Rhoa和Nppa,表达上调的有10条,包括H2,T24、RT1-CE15、Ptprb和Hcst等。结论：复方丹参滴丸可通过调节Wnt信号通路等多个基因和信号途径来减小心肌梗死模型大鼠心脏缺血区的心肌损伤。     

Mitochondrial DNA sequences from dried snake venom: a DNA barcoding approach to the identification of venom samples.

Outdated nomenclature and incorrect taxonomic characterisation of snake venoms in the current toxinological literature have serious implications for the replicability of results from snake venom toxin research. The situation has not improved, despite attempts to supply toxinologists with regular updates on snake systematics. Here, we demonstrate the successful extraction of DNA, and subsequent sequencing of the mitochondrial 12S gene, from dried snake venoms. This approach offers a new and potentially straightforward method for accurate species identification. Mitochondrial DNA (mtDNA) sequences isolated from snake venom can be used to clarify or validate snake species identification through comparison against existing sequences in the GenBank database, and through phylogenetic analyses with other sequences. Pooled venoms can also be screened a priori for the presence of multiple species, and the species names on the labels of commercial venoms verified. Moreover, if the species from which the venom sample has been taken is known, and the specimen is available as a voucher, the mtDNA sequence of the haplotype isolated from that species venom sample could serve as a sequence standard (or 'DNA barcode') for that species. Our new method of DNA barcoding venoms ensures the identification of venoms even after future taxonomic changes.     

黄芪与红芪提取物对衰老模型小鼠脑组织抗氧化能力和海马结构功能的影响

目的 研究黄芪、红芪提取物的抗衰老作用。方法 采用D-半乳糖建立小鼠衰老模型,分别灌服同剂量黄芪与红芪提取物进行抗衰老实验。UV检测脑组织T-AOC、SOD活力和MDA含量,单细胞凝胶电泳检测脑细胞DNA损伤。光镜和电镜观察其脑组织学和海马超微结构的改变。结果 黄芪高剂量组,红芪中、高剂量组能显著提高衰老模型小鼠脑组织T-AOC、SOD活性,显著降低MDA含量,明显减轻DNA损伤,明显减轻海马神经元形态结构衰老。结论 黄芪、红芪提取物具有明显的延缓衰老作用,其作用机制可能与提高机体抗氧化能力,减轻自由基对脑细胞DNA的损伤,维护海马区神经细胞的结构完整性,改善或延迟脑组织和神经元退行性变有关。     

褪黑素对脑组织氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用研究

目的:研究褪黑素(MT)对谷氨酸所致脑组织氧化损伤模型小鼠的对抗作用。方法:将小鼠随机分为空白组、模型组、MT(高、低剂量)组,MT组预先经腹腔注射给药7d ;经侧脑室注射谷氨酸造模,测定各组小鼠脑组织中的丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -PX)活性。结果:模型组小鼠脑组织MDA含量显著升高(P<0 .01) ,GSH含量显著降低(P<0 .01) ;与模型组比较,MT组MDA含量降低,GSH含量升高,GSH -PX活性增强。结论:MT可通过抗氧化及增强抗氧化酶活性抑制谷氨酸的神经毒性,发挥抗衰老作用。     

螺旋藻多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的作用

雌性NIH小鼠每天颈背scD-半乳糖80mg／kg，连续42d，造成亚急性衰老模型。同时每天分别ig螺旋藻多糖（PSP）200、100mg／kg，能显著拮抗D-半乳精的作用，使小鼠肝、脑MAO－B活性显著降低，心、脑Na－K－ATP酶活性回升；能明显促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖转化，并使小鼠皮肤羟脯氨酸含量明显增加。提示PSP对D-半乳糖所致衰老小鼠有明显的改善作用。     

醋酸氯己定泡腾滴丸的老化及其对策研究

目的:对醋酸氯己定泡腾滴丸的老化现象进行研究,并提出预防老化的措施。方法:考察置于透明敞口三角瓶、透明具塞三角瓶及不透明具塞瓷瓶中储存的醋酸氯己定泡腾滴丸的性状变化,并对发生变化的滴丸在200⁴00 nm波长范围内进行紫外扫描、高效液相色谱分析,考察老化情况;在密封、避光、温度(30±2)℃、湿度(65±5)%、放置6个月的条件下,对置于不透明具塞瓷瓶中的滴丸进行加速试验,考察其性状、溶散时限及含量变化,同时进行电镜扫描。结果:置于透明敞口三角瓶中3 d、透明具塞三角瓶中22 d的滴丸性状发生了变化,而置于不透明具塞瓷瓶中的滴丸至考察结束性状都未发生变化。产生变化的滴丸均在259 nm波长处有最大吸收,吸收行为完全一致,均没有新的有紫外吸收的物质生成;各滴丸中醋酸氯己定主峰均未分解,并没有其他物质产生。加速试验结果表明性状、溶散时限在6个月内均变化不大,且符合要求;电镜扫描性状没有明显变化。结论:湿度、光线是引起泡腾滴丸老化的主要因素,但老化对主药醋酸氯己定影响不大。建议严格控制生产时环境湿度在(60±10)%,并尽量减少贮存时与水分接触,采用密封避光的贮藏方式可有效预防滴丸老化。     

氯诺昔康滴丸的研制

目的:通过发挥滴丸剂快速溶解、迅速释放药物的优点,将氟诺昔康片改为滴丸剂。方法:通过对滴制条件、处方、加料方式等因素的考察,确定氯诺昔康的最佳工艺及最佳处方。结果:以滴丸圆整度为考察指标时确定PEG4000:PEG6000=1:1为滴丸基质。结论:该制剂制备工艺简单,丸重差异小,质量稳定,而且适合于大规模工业生产。     

润肠通乐丸提取工艺研究

目的研究润肠通乐丸的提取工艺。方法以干膏得率、粗多糖、松果菊苷和毛蕊花糖苷的总含量为指标,先用预实验考察提取因素加水量和提取时间,再采用正交实验设计,考察提取次数、加水量和提取时间,优选出最佳工艺条件。结果最佳提取工艺条件为:处方药味加水提取2次,第1次加15倍量水提取1.0h,第2次加14倍量水提取0.5h。结论该工艺简单、稳定、可行,可作为润肠通乐丸的提取工艺。     

肝复康丸质量标准研究

目的建立肝复康丸的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）法对五味子和白花蛇舌草进行定性鉴别,用高效液相色谱（HPLC）法测定五味子醇甲含量。结果定性鉴别分离度好、专属性强;五味子醇甲质量浓度在6．68～33．40μg／mL范围内与峰面积线性关系良好．r=0．99997（n=5）,平均回收率为99．97％,RSD为0．98％（n=6）。结论该法操作简便、结果准确、重现性好,适用于肝复康丸的质量控制。