人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立

目的:为子宫内膜异位症的各项研究提供实验动物模型.方法:选择6-8周龄的雌性裸鼠,收集人在位子宫内膜种植于裸鼠腹腔.分别于种植后第5 d、第15 d、第30 d断颈处死裸鼠,观察子宫内膜种植生长情况和组织形态学变化.对照组:同法置人人大网膜.结果:种植成功率可达100%.种植后第5 d见移植内膜与裸鼠盆、腹腔组织牢固粘附.光镜下见种植物与鼠间皮之间已出现新生的血管网,可见腺体,周围围绕着间质细胞.种植后第15 d见病灶与裸鼠组织呈融合状态,周围有血管生长,病灶呈实质性或囊肿样.光镜下见明显的子宫内膜腺体和间质,血液供应丰富.种植后第30天病灶萎缩变小,局部粘连较重.光镜下见纤维化严重,腺细胞不完整.对照组植人的大网膜组织部分粘连于腹壁切口,其余游离存在,并逐渐萎缩、吸收.光镜下除炎性反应外.大网膜组织结构无改变.结论:采用人在位子宫内膜构建裸鼠内异症在体模型,移植后的内膜组织仍保持原有的组织形态和生化特征,便于对子宫内膜细胞增殖、新血管形成、激素和免疫应答等机理进行充分的分析和研究.此模型性状显著且稳定,费用低、操作简单,观察周期短,是一种较理想的内异症在体模型.     

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立

目的：建立人子宫内膜异位症裸鼠模型。方法：4只参加实验的裸鼠分戍2组，每组2只，分别用注射人子宫内膜碎屑液入裸鼠腹腔和手术将人子宫内膜组织块贴于裸鼠卵巢的方法建立模型，观察移植内膜的组织学、超微结构情况。结果：手术组人子宫内膜异位症裸鼠模型成功建立，光镜下见内膜细胞及间质生长，电镜下见丰富粗面内质网，线粒体丰富，纤维增生，提示内膜细胞生长活跃；注射组未能成功建立模型。结论：外科手术移植法是建立人子宫内膜异位症裸鼠模型有效的方法。     

裸鼠人子宫内膜异位症模型建立与病灶血管形成相关检测

[目的]探讨裸鼠人子宫内膜异位症模型的建立方法,研究血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管生成与异位人内膜病灶病理组织发生的关系.[方法]分别采用皮下接种、腹腔放置与腹腔注射的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,连续切片观察病灶的血管生成,再使用S-P免疫组化染色法检测10例成模裸鼠的14处病灶中VEGF的表达及微血管密度(MVD).[结果]实验裸鼠共18只,皮下接种组10只,8例成模;腹腔放置组4例,1例死亡,2例成模;腹腔注射组4只,均无成模.连续切片结果发现于种植第4天组织内出现血管生长,异位人子宫内膜病灶的VEGF表达阳性率腺上皮动情前期10.1±3.2,动情后期12.5±5.4;间质动情前期4.9±2.5,动情后期5.2±3.7;MVD动情前期(80±15)/mm2,动情后期(84±23)/mm2,腺上皮表达VEGF有增多趋势.[结论]成功建立裸鼠皮下与腹腔人异体移植模型,同时发现异位人内膜于种植第4天出现血管生长.模型病灶种植后15d检测到血管增生与腺上皮VEGF的表达增高,可适宜进行抗血管生成治疗评估.     

转绿色荧光蛋白基因小鼠子宫内膜异位症模型的建立和评价

目的建立小鼠子宫内膜异位症种植模型,探讨荧光检测异位子宫内膜的方法。方法将转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠的子宫内膜剪碎后,注射入C57BL/6小鼠的腹腔,喂养含17-β-雌二醇的无菌水,3周后剖检小鼠,在活体荧光成像系统下观察腹腔的绿色荧光,并做免疫组化染色。结果在移植转GFP基因小鼠子宫内膜的C57/BLC57BL/6小鼠的腹腔内存在绿色荧光,且免疫组化证实该异位内膜组织中表达GFP,而对照组均阴性。结论转GFP基因小鼠子宫内膜模型可清晰地显示异位内膜病灶,具有良好的应用前景。     

内皮抑素在人子宫内膜异位症裸鼠模型中的治疗作用

目的建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用。方法采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结果实验裸鼠共25只,20只成模,以内皮抑素按2mg/(kg.d)分别自尾静脉注射(静脉注射组8只)及局部注射(局部注射组7只),对照组注射5只(局部注射)同体积PBS,比较3组异位病灶VEGF的表达。注射内皮抑素的两组异位病灶的VEGF表达均明显降低,差异均有显著性(P<0.05),而两组之间比较,局部注射组VEGF的表达较静脉注射组低,差异有显著性(P<0.05)。结论成功建立人子宫内膜异位症裸鼠皮下种植模型,通过不同给药途径内皮抑素对内异症裸鼠异位内膜VEGF分泌的抑制、局部给药效果好于全身用药,给今后内皮抑素应用于临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据。     

内皮抑素在人子宫内膜异位症裸鼠模型中的治疗作用术

目的 建立人子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,探讨内皮抑素治疗内异症的作用.方法 采用皮下种植方法,建立内异症裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,采用免疫组化法检测内皮抑素的不同给药方法裸鼠异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共25只,加只成模,以内皮抑素按2 mg/(kg·d)分别自尾静脉注射(静脉注射组8只)及局部注射(局部注射组7只),对照组注射5只(局部注射)同体积PBS,比较3组异位病灶VEGF的表达.注射内皮抑素的两组异位病灶的VEGF表达均明显降低,差异均有显著性(P＜0.05),而两组之间比较,局部注射组VEGF的表达较静脉注射组低,差异有显著性(P＜0.05).结论 成功建立人子宫内膜异位症裸鼠皮下种植模型,通过不同给药途径内皮抑素对内异症裸鼠异位内膜VEGF分泌的抑制、局部给药效果好于全身用药,给今后内皮抑素应用于临床治疗子宫内膜异位症提供了实验依据.     

VEGF在人子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

目的 建立人子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型,检测血管内皮生长因子(VEGF)在正常在位内膜及裸鼠异位内膜的表达,探讨其在EMs发生发展中的作用.方法 分别采用皮下种植和腹腔注射的方法,建立EMs裸鼠模型,光镜下观察异位病灶的形态学特点,并采用免疫组化法检测正常在位内膜及裸鼠异位内膜中VEGF蛋白表达水平.结果 实验裸鼠共20只,皮下种植组10只,8只成模,腹腔注射组10只,7只成模,异位病灶在光镜下呈现增生期特点;正常在位内膜10例,VEGF蛋白在异位内膜中的表达有增多趋势(t=2.632,P<0.05).结论 成功建立人EMs裸鼠皮下种植及腹腔注射模型,检测到VEGF表达较正常在位内膜增多,该模型可用于进行人EMs血管生成及抗血管生成治疗的研究模型.     

子宫内膜异位症裸鼠模型的建立与血管生成研究进展

子宫内膜异位症(EMs)的发病机制和治疗一直是困扰妇科医师的难题。由于伦理学问题,不能直接在人体上进行实验研究,更不能反复地进行有创性检查监测疾病的进展,限制了EMs的研究。裸鼠模型是EMs理想的动物模型,能够准确地再现疾病的特点,并能反映疾病的发展变化,尤其在研究血管形成等因素在EMs中的作用和抗血管生成治疗的应用方面更具有价值。     

恩度对子宫内膜异位症裸鼠模型治疗效果的研究

目的:探讨重组人血管内皮抑制素恩度抑制异位内膜生长的作用机制,进而为子宫内膜异位症(EMS)的临床治疗提供理论依据.方法:将35只裸鼠随机分为正常组(n=10)和实验组(n=25).实验组25只小鼠采用皮下种植方法建立子宫内膜异位裸鼠模型,造模成功的再随机分为对照组(n=11)和恩度组(n=11).恩度组腹腔注射恩度2 mg·(kg·d)-1,对照组每日给予同等剂量的PBS液.用药2周后,观察小鼠血清细胞因子(VEGF、TNF-α)的水平及进行免疫组化检测异位内膜VEGF的表达.结果:对照组的细胞因子水平高于正常组和恩度组(P<0.05),且VEGF的表达高于恩度组.结论:恩度明显抑制VEGF等细胞因子水平,降低其在异位内膜组织中的表达,从而抑制异位内膜血管生长,达到抑制异位病灶的生长.     

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立及雌、孕激素受体的表达

目的　为子宫内膜异位症 (EM)的临床研究提供实验动物模型。方法　实验组 :取EM和正常育龄妇女分泌晚期子宫内膜 ,剪碎 ,随机置入裸鼠盆腹腔 ,实验Ⅰ组切除卵巢 ,实验Ⅱ组不切除卵巢 ;对照组 :同法置入人大网膜。术后给雌激素支持。各组裸鼠分别于 5、10、15、2 0、2 5、3 0d脱颈椎处死 ,观察异位病灶生长情况。免疫组化SP法检测异位病灶雌、孕激素受体表达。结果　子宫内膜种植 5d即见异位病灶牢固粘附 ,主要发生在腹壁(56% )、膀胱旁脂肪 (2 1% )等部位 ,可见腺体细胞及散在间质细胞 ,时间越长 ,病灶与裸鼠组织融合越明显 ,盆腹腔粘连越重。用EM患者和正常育龄妇女内膜移植的异位病灶无差别 ,实验Ⅰ组和实验Ⅱ组的裸鼠所形成的异位病灶亦无差别 ,它们的雌、孕激素受体表达未显示差别 ,多数呈弱表达。结论　裸鼠做为EM早期动物模型科学、简便、可行。     

人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及两种方法比较

目的：建立人胃癌裸小鼠原位移植和转移模型，并比较两种不同方法的结果。方法：将肿瘤组织块和肿瘤细胞悬液种植于裸小鼠胃壁形成原位移植瘤，观察和比较了两种方法所建立模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。结果：胃癌组织块种植的原位成瘤率达100％，淋巴结广泛转移率90％，肝转移发生率75％。细胞悬液种植的原位成瘤时间较组织块法延迟2周，成瘤率为67％，淋巴结广泛转移率为50％，肝转移发生率仅为30％。结论：两种原位移植和转移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，以肿瘤组织块原位模型为优，该模型的建立可为人胃癌转移机制和抗转移实验治疗的研究提供一种有价值的工具。     

应用CSC-GE-80基因芯片筛查人子宫内膜早期异位种植的血管生长相关基因

【目的】探讨子宫内膜异位早期种植的相关基因,特别是与早期种植相关的血管生长基因。【方法】采用裸鼠人子宫内膜皮下种植的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,在种植后14d,取出成模病灶与未种植内膜进行CSC-GE-80基因芯片筛查比较。【结果】在基因表达谱中最有显著性上调基因50个,最有显著性下调基因47个,包括生长因子和细胞因子及其受体的变化,其中生长因子受体结合蛋白10（growth factor receptor-bound protein10,Grb10）与丁酸盐反应因子1（butyrate response factor 1）中表皮生长因子（EGF-response factor 1）上调明显,下调明显胰岛素样生长因子结合蛋白7（insulin-like growth factor binding protein 7）。【结论】通过基因筛查我们初步考虑生长因子结合蛋白10（growth factor receptor-bound protein 10）有可能参与早期异位内膜的血管生长。     

应用CSC-GE-80基因芯片筛查人子宫内膜早期异位种植的血管生长相关基因

 【目的】探讨子宫内膜异位早期种植的相关基因,特别是与早期种植相关的血管生长基因。【方法】采用裸鼠人子宫内膜皮下种植的方法,建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,在种植后14d,取出成模病灶与未种植内膜进行CSC-GE-80基因芯片筛查比较。【结果】在基因表达谱中最有显著性上调基因50个,最有显著性下调基因47个,包括生长因子和细胞因子及其受体的变化,其中生长因子受体结合蛋白10（growth factor receptor-bound protein10,Grb10）与丁酸盐反应因子1（butyrate response factor 1）中表皮生长因子（EGF-response factor 1）上调明显,下调明显胰岛素样生长因子结合蛋白7（insulin-like growth factor binding protein 7）。【结论】通过基因筛查我们初步考虑生长因子结合蛋白10（growth factor receptor-bound protein 10）有可能参与早期异位内膜的血管生长。     

人胰腺癌裸小鼠模型的建立及其生物学特性的研究

目的 建立荷人胰腺癌裸小鼠模型，研究其生物学特性，观察8988胰腺癌细胞株在移植前后的形态学变化。方法 将人胰腺癌细胞株8988接种于裸鼠腋窝处皮下，每周测量肿瘤大小，第42d处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查，放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养，HE染色。结果 肿瘤生长较快，成功率高，病理及电镜检查符合人胰腺癌细胞特征。肿瘤组织细胞及培养细胞形态学未见显著差异。结论 荷人胰腺癌细胞株8988裸小鼠模型建立方法较简便，细胞形态无明显差异，且保持了人胰腺癌的生物学特性。     

人乳腺癌裸鼠移植模型的建立

目的 :建立人乳腺癌裸鼠移植模型 ,并探讨其部分生物学特性。方法 :采用雌激素受体阳性的 MCF- 7人乳腺癌细胞株 ,接种于 2 0只裸小鼠右侧胸壁乳垫下 ,移植细胞总数为 1× 10 6 /只。观察肿块生长情况 ,至 90天处死荷瘤鼠 ,切除肿块作病理切片 ,角蛋白19( KT19) m RNA、雌激素受体 ( ER)检测。结果 :接种后第 10天在接种部位可见结节 ,肿瘤移植成功率 (成瘤率 )为 95 %( 19/2 0 )。切除肿块平均直径为 ( 14± 3 ) mm,平均重量为 1.4 g,病理学检查为浸润性导管癌 ,RT- PCR检测表达人角蛋白 19( KT19)、ER阳性。结论 :该方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型 ,成功率高 ,肿瘤可部分保持人乳腺癌生物学特性 ,为研究人乳腺癌提供了重要工具     

人甲状旁腺裸鼠过渡模型的建立

将源于尸体、20～28周胎儿及甲状旁腺腺瘤的人甲状旁腺组织移植于88只Balb/C裸鼠的双肾被膜下,30、60、90、120、150d后取出,分析其组织结构和内分泌功能改变。结果表明:三种人甲状旁腺组织均可在裸鼠体内存活100d以上,并保持一定的分泌功能。同时对三种供体人甲状旁腺组织裸鼠过渡后的结构和功能改变进行了对比分析。     

手术时机与移植部位的选择对子宫内膜异位大鼠模型建模效果的影响

目的采用自体移植法建立子宫内膜异位大鼠模型,比较选取不同的手术时机及内膜自体移植在不同部位的建模效果,以期寻求便捷、有效的手术建模方法。方法将SD大鼠随机分为动情期手术组与间情期手术组,分别在动情期与间情期将大鼠自体子宫内膜移植在腹壁、肠系膜袢部、肠系膜根部3个部位,以典型度为主要模型评价指标,建立有序多分类Logistic回归模型对数据进行统计分析。结果动情期造模与非动情期造模的模型效果无显著差异(P0.05),不同移植部位的模型效果有差异(P0.05),成模效果优度分别为肠系膜袢部腹壁肠系膜根部。结论手术时机对自体移植建立EMT大鼠模型的建模效果无影响;移植部位的血供情况可能对建模效果有影响。