依沙吖啶-β-环状糊精包合物溶液剂稳定性的探讨

探讨应用β－环糊精提高依沙吖啶溶液剂稳定性的方法。采用紫外分光光度法,在３６２ｎｍ处测定依沙吖啶－β－环糊精包合物溶液中依沙吖啶的含量,并对外观,贮存条件、ｐＨ值,附加剂进行观察比较。结果表明：含量测定平均回收率为９９．０７％,ＲＳＤ＝０．２９（ｎ＝５）。溶液剂在避光贮存下稳定,室温自然散射光下贮存易变化。ｐＨ值在５．５￣６．５之间。     

正交试验法探讨心乐片中挥发性成分β-环状糊精包裹工艺

目的 正交试验法探讨心乐片中挥发性成分β－环状糊精的包裹工艺。方法 包裹物挥发油含量作为本实验考察指标，考察了β－ＣＤ的用量、混合方式、包裹时间、β－ＣＤ与水配比量４个因素。结果 最佳包裹工艺条件为Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ１，即挥发油：β－ＣＤ；水按１：６：２００的比全钐胶体磨混合３０ｍｉｎ的包工艺为最佳。结论 经差热分析，包物为一新物相。     

TGF-β1质粒DNA前房注射在角膜内皮细胞表达的实验研究

目的 探索转化生长因子β1(transforming growth factorβ1，TGF—β1)真核表达质粒pMAM TGF—β1前房注射后在角膜内皮细胞的表达及其对局部抗角膜移植排斥反应基因治疗的可能性。方法 利用脂质体介导方法，将其直接注射至家兔前房内，2d后分别行角膜组织石蜡切片和角膜内皮撕片，通过SABC免疫组化方法检测角膜内皮细胞质粒DNA表达产物。TGF—β1的表达情况。结果 石蜡切片和内皮撕片均可见角膜内皮细胞内质粒DNA表达产物TGF—β1的表达为阳性。结论 通过前房注射法，外源基因可以转染至角膜内皮，并在角膜内皮细胞得到有效表达，为进一步研究。TGF—β1参与角膜局部免疫耐受的诱导和维持奠定了基础。     

质粒P^JSB15DNA的提取及鉴定研究

质粒Ｐ＾ＪＳＢ１５ＤＮＡ含有ＩＬ－２ＲαｃＤＮＡ６７３ｂｐ片段，本研究从３０００ｍｌ菌液中提取出７．９２ｍｇｇ质粒Ｐ＾ＪＳＢ１５，收获率为２．６４ｍｇ／Ｌ。同时对其纯度，浓度，分子量及酶切图谱进行了鉴定和分析。     

重组质粒PGL3-DF3-DTA对乳腺癌荷瘤裸鼠的治疗研究

目的 探讨重组质粒PGL3-DF3-DTA对乳腺癌移植模型的治疗作用.方法 裸鼠皮下接种MCF-7人乳腺癌细胞,建立人乳腺癌移植模型.用质粒PGL3-DF3-DTA,质粒PGL3-DF3和生理盐水分别给裸鼠移植瘤瘤内多点注射.观察肿瘤大小和组织形态学变化,并用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡改变.结果 重组质粒PGL3-DF3-DTA组裸鼠乳腺癌生长受到明显抑制,抑制率为50.08%,肿瘤细胞的凋亡率增加.结论 重组质粒PGL3-DF3-DTA对裸鼠人乳腺癌移植瘤的生长具有明显抑制作用,为乳腺癌基因治疗提供了新的方法.     

人大肠癌线粒体DNA重组质粒的构建及对NIH3T3细胞的转染

目的: 构建pcDNA3. 1( )-mtDNA真核表达重组体,并导入NIH3T3细胞.方法: 提取大肠癌细胞株(SW480,Lovo,HT29)mtDNA,扩增D-loop区,产物用DNA自动测序法进行序列分析.利用DNA重组技术将其定向插人真核表达质粒pcDNA3. 1( ),并用脂质体法导入NIH3T3细胞.结果: 大肠癌细胞株SW480,Lovo,HT29细胞mtDNA D-loop分别有10,9,8个突变位点.成功克隆1119 kb的mtDNA D-loop区至表达质粒pcDNA3. 1( ),并导入NIH3T3细胞中.结论: 成功构建了pcDNA3. 1( )-mtDNA真核表达重组体,并成功导入NIH3T3细胞中.     

β-胡萝卜素对吸烟所致大鼠支气管炎的保护作用

吸烟是慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)的重要致病因素之一[1] 。但其引起ＣＯＰＤ的机理尚不完全清楚。临床上对ＣＯＰＤ也没有比较特效的早期防治方法。β 胡萝卜素是体内必需的抗氧化维生素 ,它具有增强细胞间的信息传递、刺激机体免疫功能增强等作用[2 ] 。近年来研究发现 ,β 胡萝卜素可以抑制氧自由基诱发的急性炎症反应 ,但其对慢性炎症有无作用和对体内 (ＮＯ)、白细胞介素 (ＩＬ)ＩＬ 6、ＩＬ 8含量的影响尚少见报道。一、材料和方法1 大鼠慢性支气管炎模型的复制与分组 :选用Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 ,体重 2 30～ 30 0ｇ(购于首都医科…     

血清中β-葡萄糖苷酸酶及γ-谷氨酰转肽酶对鼻咽癌及喉癌的诊断意义

目的：探讨β－葡萄糖苷酸酶（β－ＧＤ）及γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）对鼻咽癌及喉癌的诊断意义。方法：分别采用微量比色法和对硝基苯胺法测定了正常人和鼻咽癌及喉癌患者血清中β－ＧＤ和γ－ＧＴ的活性，对数据作统计分析和ｔ检验。结果：鼻咽癌及喉癌患者血清中β－ＧＤ和γ－ＧＴ活性均较正常人明显升高（Ｐ＜０００１），其阳性率在鼻咽癌中分别为６２５％及５６２５％，在喉癌中均为５７１４％，若将β－ＧＤ和γ－ＧＴ联合检测，可提高鼻咽癌及喉癌的阳性率，鼻咽癌可达８７５％，喉癌可达８５７１％。结论：血清中β－ＧＤ和γ－ＧＴ的联合检测对鼻咽癌及喉癌有一定的临床诊断意义。     

西红花酸对自由基发生系统诱导DNA损伤的保护作用

目的研究西红花酸对不同自由基发生系统诱导的DNA损伤的保护作用.方法通过葡聚糖凝胶、TBA反应、紫外碱基吸收来检测西红花酸对DNA的保护作用.结果 DNA被OH*进攻损伤后,碱基在260 nm处紫外吸收下降,DNA脱氧核糖氧化破坏,其氧化产物与TBA反应在532 nm处出现特征吸收,DNA的链结构破坏,痕量的金属离子可以加速DNA的损伤.西红花酸可以显著抑制DNA的上述损伤.结论西红花酸具有很强的抗自由基作用,对DNA具有保护作用.     

3-氧-乙酰-11-脱氧甘草次酸铝毒理学研究

目的测定３－氧－乙酰－１１－脱氧甘草次酸铝（Ａｌｕｍｉｎｕｍ３－ｏ－ａｃｅｔｙｌ－１１－ｄｅｏｘｏｇｌｙｃｙｒｈ－ａｔｅ，ＡＤＡ）的半数致死量（ＬＤ５０）及对大鼠血清钠、钾浓度的影响。方法昆明小鼠６０只，体重２０±１ｇ，随机分６组，每组１０只，各组按不同剂量的ＡＤＡ０．２ｍｌ·１０ｇ－１灌胃，给药后按急性毒性实验法连续观察７ｄ。Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，体重２００±１０ｇ，随机分４组，每组１０只。各组分别给０．５％羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）、生胃酮（Ｃａｒｂｅｎｏｘｏｌｏｎｅ，ＣＮ）和两个剂量的ＡＤＡ，早晚灌胃一次，连续１２ｄ后，处死大鼠取血，测血清钠、钾浓度。结果灌胃ＡＤＡ的ＬＤ５０为４４４４±８３１．５ｍｇ·ｋｇ－１。长期用药，ＡＤＡ未引起大鼠血清钠、钾浓度的明显变化，相反ＣＮ却显著降低血清钾浓度。结论ＡＤＡ引起急性致死性中毒的危险性甚小，长期用药未引起大鼠血清钠、钾浓度的变化     

TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：观察外源性TGF－β3对增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）生长增殖的影响，为临床治疗提供理论依据。方法：用MTT比色法检测TGF－β3对HSFB增殖活性的影响，^3H-脯氨酸掺入法检测细胞内胶原合成，免疫组化检测I，Ⅲ型胶原及TGF－β3蛋白表达情况。结果：TGF－β3可抑制HSFB细胞增殖，下调TGF－β1蛋白及I型胶原蛋白表达。结论：TGF－β3具有抗瘢痕形成作用，有望在临床中应用。     

β—胡萝卜素对氧化镍致人肺成纤维细胞DNA损伤作用的影响

目的 探讨β—胡萝卜素对氧化镍致人肺成纤维细胞DNA损伤作用的影响。方法 应用单细胞凝肢电泳技术(single cell gel electrophoresis,SCGE)或称彗星电泳技术(comet assay)比较研究。结果 氧化镍(Ni2O3)可引起人肺成纤维细胞DNA双链断裂损伤，Ni203与β—胡萝卜素共同处理的人肺成纤维细胞的DNA双链损伤较之Ni2O3单独处理组降低(P＜0．01)。结论 氧化镍可引起人肺成纤维细胞DNA双链损伤。β—胡萝卜素可明显降低Ni2O3对人肺成纤维细胞DNA链的损伤作用。SGGE是一种简便、快速、敏感及经济的细胞基因毒性检测方法，可应用于各级水平的环境与人类疾病(镍污染)检测与研究。     

β-胡萝卜素和维生素 E对大鼠抗辐射作用的实验研究

目的：本实验通过对大鼠进行辐,然后供食不同剂量的β－胡萝卜素（Beta-Carotene,BC)与维生素E（VE），检测照射前后及给药后机体DNA的损伤情况以及超氧化物歧化酶（SOD）活性和脂质过氧化物（LPO）含量的变化。方法：将120只大鼠随机分为A、B、C3组，再将每组分为5小组，然后半A1、B1、C1，A2、B2、C2，A3、B3、C3，A4、B4、C4定为实验组，用不同剂量VE＋BC灌胃，Ao、Co、Co定为对照组。用药4小时后进行^60Co照射。结果：大鼠经照射后DNA损伤率和LPO含量明显增加，SOD活性也显著下降，但随着照射剂量的增加呈相应变化；给药后，DNA损伤率和LPO含量明显降低，SOD活性有所恢复。结论：生物机体照射后补充一定量的BC和VE能抑制自由基的产生和扩展，缓解机体损伤、提高免疫力，从而为放疗的临床研究提供一定的参考资料。     

硫辛酸对细胞DNA损伤保护作用的初步研究

目的:用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究不同浓度过氧化氢(H2O2)分别作用于HepG2细胞2 h后DNA损伤的剂量效应关系,同时观察硫辛酸对H2O2损伤细胞DNA的保护作用. 方法: 将细胞分为对照组、损伤组和保护组,依次加入不同浓度的H2O2及硫辛酸,应用SCGE检测H2O2引起细胞DNA损伤. 结果: 随着H2O2浓度的增加,细胞DNA的损伤程度加重,能使尾长、尾部DNA百分含量和尾距显著增加(P《0.05). 硫辛酸能使H2O2损伤细胞的尾长、尾部DNA百分含量和尾距均较对照组减少(P《0.05). 结论: H2O2对细胞DNA损伤具有剂量效应关系,硫辛酸可以有效地减少H2O2引起的细胞DNA的断裂损伤.     

稳定表达野生型和突变型DNA聚合酶β的NIH3 T3细胞系的建立及其生长特性

目的：建立稳定表达野生型及突变型DNA聚合酶β（polβ）的NIH3T3细胞系。方法：用脂质体转染法分别将野生型和突变型polβ真核表达载体pcDNA3．1-PW和pcDNA3．1-PM3转染入NIH3T3细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系。用RT—PCR、免疫印迹法检测转染细胞polβmRNA和POLB蛋白的表达水平．MTT法测转染细胞生长曲线,免疫组化法测增殖细胞核抗原（PCNA）,并用流式细胞仪测细胞周期。结果与结论：成功建立了稳定表达野生型及突变型polβ的NIH3T3细胞系。野生型polβ对NIH3T3细胞生长无明显影响,突变型polβ则使NIH3T3细胞生长速度加快,细胞周期发生改变,细胞多被阻滞在S期。     

1，2-二氯乙烷对淋巴细胞DNA的损伤及胆红素的保护作用研究

目的 探讨１，２－二氯乙烷（１，２－ＤＣＥ）对人外周血淋巴细胞ＤＮＡ的损伤作用及胆红素的保护作用。方法 用不同浓度的１，２－ＤＣＥ对人外周血淋巴细胞进行染毒，然后用单细胞凝胶电泳法观察ＤＮＡ链断裂、ＤＮＡ－ＤＮＡ链间交联和ＤＮＡ损伤后的修复能力，同时观察胆红素对１，２－ＤＣＥ所致ＤＮＡ损伤的保护作用。结果 ５０￣２５０μｍｏｌ／Ｌ的１，２－ＤＣＥ均可明显引起淋巴细胞ＤＮＡ的链断裂；５０，１００，２     

小鼠Ehrlich实体瘤局部DNA直接转染TGF—β1基因的研究

研究Ｅｈｒｌｉｃｈ实体瘤局部ＤＮＡ直接转染ＴＧＦ－β１基因的治疗效果,将真核表达载体ｐＳＶＴＧＦ－β１直接瘤周转染Ｅｈｒｌｉｃｈ实体瘤,用原位杂交方法检测靶基因的表达,ＭＴＴ法检测脾脏细胞免疫功能,并观察小鼠生存期及肿瘤生长速度。治疗组肿瘤细胞及瘤周组织有靶基因ｍＲＮＡ表达,脾脏细胞免疫功能高于对照组,肝瘤生长受到抑制,治疗组小鼠生存期较对照组明显延长,ＴＧＦ－β１基因ＤＮＡ直接转染法可以明显抑制     

转染人转化生长因子-β3基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的 观察转染人转化生长因子-β3(hTGF-β3)基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法 通过脂质体介导的方法，将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒(pBK-CMV)-TGF-β3质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞，采用RT—PCR法检测TGF-β3mRNA的表达，放射免疫(RIA)法测定细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原的浓度。结果 构建的TGF-β3质粒可成功转染成纤维细胞，并增强Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达，下调Ⅰ／Ⅲ型胶原比值。结论 转染hTGF-β3基因可调节瘢痕成纤维细胞的生物学活性。     

DNA聚合酶β靶向siRNA对PC3细胞生物学行为的影响

目的:观察DNA聚合酶(pol)B靶向siRNA表达载体转染人前列腺癌PC3细胞对细胞生物学行为的影响.方法:采用已构建的DNA polβ靶向siRNA真核表达载体(pSUPERneoGFP-PS1、pSUPERneoGFP-PS2和pSU-PERneoGFP-CS),利用脂质体包裹转染PC3细胞,并设未转染组和转染空...