骨立对去卵巢大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究

运用骨立冲剂对切除卵巢大鼠复制的类似“肾虚”骨质疏松症模型进行干预,并与西药对照组结果进行比较,通过对血清中反映骨代谢的生化指标及骨小梁形态检测结果进行综合分析,证实骨立防治原发性骨质疏松症的疗效并探讨其防治机理。方法:将60只大鼠按随机原则分成假手术组(Sham组)、造模组(Model组)、骨立高剂量组(H-GSL组)、骨立中剂量组(M-GL组)、骨立低剂量组(L-GL组)和己烯雌酚阳性对照组(DES组),共6个组,每组10只。去卵巢造模后按不同要求进行干预,12周后观察各组结果并做比较分析。结果:骨立能明显提高去卵巢大鼠的雌激素水平,纠正去卵巢后骨的高转换率,以保持适度的骨转换,减少骨质丢失,并阻止大鼠骨小梁结构的破坏;骨立高剂量组与己烯雌酚组E2水平相当(P>0.05)。结论:骨立能有效阻止骨质疏松症的发生与发展,其机制可能主要是通过抑制骨高转换率而实现其作用的。     

骨益补对去卵巢大鼠骨质疏松作用的研究

目的：研究骨益补对去卵巢大鼠骨质疏松的作用。方法：去卵巢诱导大鼠骨质疏松症，骨益补以100，200，400mg/kg/d的剂量灌胃给药3月后，以比色法测定其血清钙(s-Ca)、骨碱性磷酸酶(b-AKP)和血清抗酒石酸酸性磷酸酶(s-TRAP)的活性，竞争放射免疫法测定血清中骨钙素(s-BGP)的含量；双能X线骨密度仪(DEXA)测定股骨及腰椎的骨密度；三点弯曲试验法测定骨生物力学；扫描电镜进行骨小梁形态计量学分析。结果：骨益补能增加去卵巢大鼠子宫重量，降低s-TRAP水平，增加股骨骨密度，改善股骨抗弯抗拉能力，改善骨小梁形态，显著增加骨小梁平均宽度(MTT)与骨小梁面积百分比(TS％)。结论：骨益补对去卵巢大鼠骨质疏松症具有防治作用，其机制可能与抑制骨高转换有关。     

续断对大鼠去卵巢骨质疏松的骨形态计量学研究

观察续断提取液对去卵巢大鼠骨质疏松的骨形态计量学影响.随机将40只4月龄大鼠分为假手术组(Sham)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除续断治疗组(Herb组)和卵巢切除倍美力治疗组(Premarin组).采用双侧去卵巢6周的方法造成骨质疏松模型,分别予生理盐水、续断提取液及倍美力灌胃10周后取材.处死动物前进行骨组织的双荧光标记,处死后取近心段右侧胫骨行骨形态计量学研究.结果显示去卵巢造模后,OVX组的骨量明显减少,骨组织退化,出现骨小梁数目减少和骨小梁分离度显著增大,续断提取液和Premarin治疗组骨量明显增加,骨结构明显改善,且其疗效是由于两者都能抑制骨吸收与骨形成,降低骨高转换率,总体上抑制骨吸收大于骨形成.表明续断对骨质疏松症具有部分治疗作用.     

骨松强骨方对去卵巢大鼠股骨骨密度、骨强度和骨结构的影响

目的:研究骨松强骨方对去卵巢大鼠股骨骨密度、骨强度和骨结构的影响。方法:采用去势雌性大鼠作为骨质疏松动物模型,将其分为假手术组,对照组,雌激素组,骨松强骨方低、中、高治疗组。治疗3个月后,检测大鼠骨密度、股骨松质骨显微结构以及股骨的生物力学性能。结果:对照组与假手术组相比骨密度、骨应力、结构强度、弹性模量、骨小梁数目显著降低,骨小梁间隙、骨小梁模型因子显著增高,表明摘去卵巢后成功建立骨质疏松症的病理模型。各治疗组与对照组进行比较,发现雌二醇和骨松强骨方的中剂量、高剂量组均能显著抑制大鼠骨密度降低;雌激素及骨松强骨方可不同程度地提高大鼠骨应力、弹性模量,改善大鼠股骨干骺端骨小梁的显微结构。结论:骨松强骨方对骨质疏松症的治疗具有较好的防治作用,且呈剂量依赖性。通过抑制骨量流失,改善骨小梁微结构,提高股骨强度,从而预防脆性骨折。     

乌鸡白凤丸对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态计量学参数的影响

目的:通过比较去卵巢骨质疏松大鼠骨形态计量学参数的变化,以评价乌鸡白凤丸对骨微观结构的影响.方法:实验选择6月龄SD大鼠,采用卵巢切除致大鼠骨质疏松模型,术后将大鼠随机分为假手术组、去卵巢模型组、乌鸡白凤丸低剂量组(1.0 g/(kg·d))、乌鸡白凤丸中剂量组(2.0g/(kg·d))、乌鸡白凤丸高剂量组(4.0 g/(kg·d))及阳性药仙灵骨葆胶囊组(0.6 g/(kg·d)),连续灌胃给药12周.各组动物于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素进行荧光标记,处死后取左侧胫骨,制作不脱钙骨切片和甲苯胺蓝染色切片,采用Leica Qwin图象分析系统进行骨组织形态参数计量.结果:去卵巢模型组大鼠骨小梁体积百分比(TBV)明显较假手术组大鼠降低(P＜0.01),骨小梁吸收表面百分比(TRS)、骨小梁形成表面百分比(TFS)、活性生成表面百分比(AFS)、骨小梁矿化率(MAR)、骨小梁骨生成率(BFR)、类骨质平均宽度(OSW)、骨皮质矿化率(mAR)均较假手术组大鼠升高(P＜0.01);乌鸡白凤丸(1.0g/kg、2.0 g/kg、4.0g/kg)组大鼠TBV%较去卵巢模型组大鼠升高,TRS、TFS、AFS、MAR、BFR、OSW、mAR较去卵巢模型组大鼠降低.结论:乌鸡白凤丸能纠正骨质疏松骨形态计量学参数的异常,对骨质疏松症具有一定的治疗作用.     

骨康片治疗原发性骨质疏松症的实验研究

目的:探讨骨康片治疗原发性骨质疏松症的机理,为临床应用提供依据。方法:将6月龄健康雌性SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组、去势模型组、骨康片组、仙灵骨葆片组,每组10只。除假手术组外,其他各组建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型。从模型建立第4天开始,假手术组和去势模型组给予等容量氯化钠注射液10 m L/(kg·d)灌胃,骨康片组按2.5 g/(kg·d)灌胃骨康片,仙灵骨葆片组按2.5 g/(kg·d)灌胃仙灵骨葆片。给药3月后,检测尿脱氧吡啶酚(DPD)和肌酐(Cr)的变化,检测骨组织形态计量学指标,RT-PCR法检测骨钙素(BGP)mRNA表达变化。结果:与假手术组比较,去势模型组大鼠DPD显著升高,DPD/Cr的比值也显著升高,骨小梁平均宽度和成骨细胞数显著降低,骨小梁平均间距显著增大,破骨细胞数显著增多,BGP mRNA表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与去势模型组比较,骨康片组和仙灵骨葆片组大鼠DPD显著降低,DPD/Cr的比值也显著降低,骨小梁平均宽度和成骨细胞数显著升高,骨小梁平均间距显著降低,破骨细胞数显著减少,BGP mRNA表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:骨康片能够明显改善去势大鼠的骨结构及骨代谢指标,它能够抑制骨吸收,促进骨形成,对骨质疏松症有明显的防治作用。     

不同频率电针对切卵大鼠松质骨空间结构的影响s

目的：观察电针不同脉冲频率对切卵大鼠松质骨结构的影响,探讨电针治疗原发性骨质疏松模型大鼠的最佳刺激参数。方法：采用电针2Hz、100Hz、2/100Hz不同频率对去卵巢骨质疏松大鼠进行治疗,以倍美力灌胃作为对照组,观察Micro-CT下大鼠松质骨空间结构参数以及血清E2、PICP、ICTP的变化。结果：电针组能不同程度提高模型大鼠骨小梁数目、厚度、骨体积分数和血清E2、PICP含量,减小骨小梁间隙、骨表面积体积比,降低血清ICTP水平;其中以100Hz频率电针组疗效更为明显。结论：电针对骨质疏松大鼠骨小梁空间结构具有一定的保护作用,并且这种保护作用以100Hz频率电针刺激更为明显。     

五味子对去卵巢致骨质疏松大鼠胫骨护骨素、核因子-кB受体活化因子配体蛋白表达的影响

目的 探讨五味子对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理.方法 将59只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组及五味子组,其中五味子组11只,其余每组12只.摘除大鼠双侧卵巢1个月后,五味子组灌服五味子水煎剂(lg/ml),阳性对照组予己烯雌酚(0.008mg/ml)灌胃3个月(5.6m1/kg).对不脱钙骨切片进行形态计量并检测胫骨成骨细胞(OB)和骨髓基质细胞(MSC)中护骨素(OPG)、核因子-кB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达.结果 五味子组大鼠胫骨骨小梁体积百分比较模型组显著增高,除骨皮质类骨质平均宽度外,骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、骨小梁矿化率术较模型组均显著降低,OB及MSC中OPG蛋白表达明显增高(P＜0.05或P＜0.01),OB中RANKL蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 五味子对卵巢切除大鼠骨质疏松症治疗作用机理之一是通过促进OB和MSC中OPG的分泌,使之与RANKL的结合增多,进而抑制破骨细胞的活性.     

补肾方剂防治去卵巢大鼠骨丢失作用机制的探讨

目的:探讨补肾方剂对去卵巢大鼠骨丢失的疗效作用及其作用机理。方法:选用6月龄雌性SD大鼠,切除卵巢并诱发的骨质疏松模型,分别设为假手术组、模型组、雌二醇组和中药治疗组,治疗3个月后,观察大鼠骨密度、骨组织形态学及骨代谢相关生化指标。结果:补肾方剂组大鼠与模型组大鼠比较:补肾方剂可提高大鼠的平均骨密度,病理切片可见骨小梁明显致密,骨髓腔缩小。其生化指标显示雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、皮质醇(COR)、雌激素水平升高,而睾酮(T)水平明显降低,各指标之间统计分析均有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾方剂有类似雌激素样作用,可有效防治卵巢切除大鼠的骨量丢失,可作为绝经后骨质疏松症的预防用药。     

骨疏宁颗粒治疗去卵巢后骨质疏松大鼠的实验研究

目的:观察骨疏宁颗粒对去卵巢所致大鼠骨质疏松的影响,为临床用于治疗骨质疏松症提供现代药理学依据。方法:建立去卵巢致大鼠骨质疏松模型,观察骨疏宁颗粒对大鼠体重、股骨重量、长度以及骨密度、骨硬度的影响,以及对大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶含量和股骨组织形态学的影响。并设抗骨质疏松药仙灵骨葆胶囊及尼尔雌醇片为对照。结果:与模型组比较,骨疏宁高、低剂量组均可明显增加去卵巢大鼠的体重和股骨干重(P<0.01);高剂量组还可明显提升去卵巢大鼠股骨的湿重、骨密度以及血清磷水平(P<0.01)。结论:骨疏宁颗粒具有一定的对抗去卵巢致大鼠骨质疏松症的作用,可用于临床治疗骨质疏松症。     

补肾密骨液作用于卵巢切除大鼠的骨组织计量学研究

为探讨补肾密骨液预防绝经后骨质疏松症的作用及机理，选用４０只８月龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为：假手术组、卵巢切除组、卵巢切除后用雌二醇组、卵巢切除后用补肾中药组和卵巢切除后用盐水组。用药均在卵巢切除后第二天进行。１０周后，取大鼠胫骨近端制成不脱钙骨切片行骨组织形态计量学测定。结果显示，卵巢切除后大鼠小梁骨体积、矿化小梁骨体积降低，表明绝经后骨质疏松症动物模型成立。补肾密骨液组其小梁骨体积与矿化小梁骨体积明显高于盐水组，而其反映骨形成，矿化和骨吸收的指标均下降，表明补肾密骨液可抑制升高的骨转换，且抑制吸收强于抑制形成，进而使骨转换降低而防止骨量丢失。     

益妇宁软胶囊对去卵巢大鼠骨形态和生物力学性能的影响

目的:观察益妇宁软胶囊(YFN)对去卵巢大鼠骨形态和生物力学性能的影响。方法:采用未孕产SD雌性大鼠60只,50只行双侧卵巢切除术,随机分为YFN大、中、小剂量组和阳性药对照组、模型对照组,每组10只;另10只为假手术组。术后4周开始给药,给药12周后收集标本。采用病理计量学观察骨组织形态并测量骨小梁密度,采用万能生物材料测试机测定骨生物力学指标。结果:YFN能明显增加骨小梁密度,增加股骨、椎骨最大载荷。结论:YFN能显著改善骨质疏松程度,提高骨生物力学性能。     

乌鸡白凤丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响

目的:观察乌鸡白凤丸去卵巢大鼠骨质疏松症的影响.方法:采用去卵巢的方法建立大鼠骨质疏松症模型以骨钙素,碱性磷酸酶,骨密度,血磷和血总钙等指标评价.结果:乌鸡白凤丸(1.0g·kg-1,2.0g·kg-1,4.0g·kg-1)能有效预防去势大鼠骨质丢失,增加骨密度;减缓大鼠去势所致的增重效应;能有效预防去势大鼠子宫及肾上腺萎缩;对血钙含量、碱性磷酸酶无明显影响,但可回升血磷含量;可明显升高大鼠血清雌二醇、降钙素含量,降低血清骨钙素含量,有较好的防治骨质疏松效果.结论:乌鸡白凤丸对去卵巢大鼠骨质疏松症具有一定的保护作用.     

益妇宁软胶囊对去势大鼠骨组织雌激素受体表达的影响

目的:研究不同剂量的益妇宁软胶囊(YFN)对去势大鼠骨组织中雌激素受体(ER)表达的影响,探讨该方对绝经后骨质疏松症(PMO)的治疗机制.方法:采用3月龄SD雌性大鼠60只,50只行双侧卵巢切除术,随机分为YFN大剂量组(相当于原生药0.8 g/kg)、YFN中剂量组(相当于原生药0.4 g/kg)、YFN小剂量组(相当于原生药0.2 g/kg)和阳性药对照组(己烯雌酚0.1 mg/kg)、模型对照组,每组10只;另10只为假手术组.术后4周开始给药,给药12周后收集标本.采用放免法测定血清雌二醇水平,Western blotting免疫印迹法检测胫骨组织中ER表达情况.结论:YFN能明显提高去势大鼠体内雌激素水平及骨组织雌激素受体的表达量,通过这两条途径起到治疗绝经后骨质疏松症的作用.     

仙灵强骨口服液对去势老龄大鼠骨质疏松症的影响

目的：观察仙灵强骨口服液对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法：采用12月龄SD雌性大鼠,行双侧卵巢切除术,随机分为强骨口服液高、中、低剂量组(6,3,1.5 g·kg^-1))和阳性药(尼尔雌醇)组、模型组、假手术组。术后45 d开始给药,给药90 d后取出大鼠股骨及第四腰椎骨进行股骨骨形态计量学测定、股骨骨密度测量、股骨三点弯曲实验及椎骨压缩实验,同时测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)水平。结果：仙灵强骨口服液可显著增加骨密度、降低血清StrACP水平,明显提高骨最大应力、弹性模量、刚度水平,同时对股骨形态计量学有改善作用。结论：仙灵强骨口服液对去卵巢大鼠的骨质疏松症有治疗作用。     

仙灵强骨口服液对去势老龄大鼠骨质疏松症的预防作用

目的以去卵巢老龄大鼠为实验对象,观察仙灵强骨口服液对绝经后骨质疏松症的影响。方法50只7月龄SD大鼠去除卵巢后,随机分为5组:模型组、尼尔雌醇组、仙灵强骨口服液高剂量组、仙灵强骨口服液中剂量组、仙灵强骨口服液低剂量组,同时设假手术组。手术结束后第3天开始给药,连续90d。所有大鼠给药80、87d时两次ip四环素20mg/kg进行骨荧光标记;给药末日股动脉放血,收集血液,分离出血清,测定ALP及StrACP;取出大鼠股骨及第四腰椎骨进行骨密度、骨形态计量学、骨生物力学测定。结果仙灵强骨口服液能显著降低血清StrACP水平,提高椎骨刚性,增加股骨,破坏载荷及刚度,增高骨小梁体积,降低单标表面、双标表面、类骨表面、类骨质宽、成骨表面、吸收表面、矿化率及矿化时间。结论仙灵强骨口服液对绝经后骨质疏松症模型大鼠有预防作用。     

中药治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析

目的:用蛋白质组学的方法对绝经后骨质疏松症和中药作用机理进行研究,有利于临床防治该疾病。方法:建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型,设立中药治疗组及假手术对照组,6周后骨质疏松症模型成功,行骨形态学检查,提取骨组织蛋白质样品,双向电泳分离,得到各组骨组织总蛋白质分子解剖图谱,用图像分析软件,分析各组间差异蛋白质点,MADITOF/MS质谱分析,结合蛋白质生物信息库(Matrix science Ltd database),对各蛋白质初步鉴定。结论:鉴定了3个差异蛋白,分别为P1硫氧还蛋白过氧化酶1(Thioredoxin peroxidase 1),P2为阻凝蛋白轻链肽2(Myosin light polypeptide 2),P3为泛素化酶E2-17KD(ubiquitin-conjugating enzyme E2-17kD)。初步认为这三种蛋白质在绝经后骨质疏松症的发病及中药治疗过程中发挥着重要调控作用。     

Antiosteoporotic Activity of Saururus chinensis Extract in Ovariectomized Rats

Recent studies suggest that phytoestrogens may exert a protective effect against osteoporosis. This study examined whether treatment with phytoestrogen extracts from Saururus chinensis (SC) exerted a preventive effect on estrogen‐deficiency‐induced osteoporosis. Six‐ to seven‐month‐old female Sprague–Dawley rats were randomly assigned into either a sham‐operated group or one of three ovariectomy (OVX) subgroups: OVX treated with vehicle, OVX with alendronate, and OVX with SC extract (SC). Rats began receiving treatment 4 weeks before the OVX treatment and continued receiving treatment for an additional 10 weeks after OVX (for a combined total of 14 weeks). The results showed that the SC treatment prevented loss of femur bone mineral density after OVX, as determined by a significant decrease in the levels of serum bone turnover markers osteocalcin and alkaline phosphatase as well as urinary deoxypyridinoline. Micro‐computed tomography analysis showed that the SC treatment significantly prevented decreases in bone volume/tissue volume, trabecular number and trabecular thickness, while also preventing an increase in trabecular separation. It was concluded that SC treatment could prevent OVX‐induced loss of bone mass and deterioration in trabecular microarchitecture by suppressing bone turnover, thereby maintaining bone structural integrity. Further, no stimulation of proliferation of uterine tissue was noted. Therefore, it is suggested that treatment with S. chinensis extracts might be a potential alternative therapy for treating postmenopausal osteoporosis. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

女贞子水提液对去卵巢大鼠骨结构和骨代谢的影响研究

目的探讨女贞子水提液对骨质疏松大鼠骨保护作用和骨代谢调节作用。方法用去卵巢方法复制大鼠骨质疏松模型,其中假手术组大鼠仅切除卵巢周围与卵巢体积大小相同的脂肪。实验分为4组:假手术组、模型组、阿伦膦酸钠(0.12 g/kg)组、女贞子水提液(3.5 g/kg)组,每组9只。各组均ig给药,连续12周。实验结束时,用生化法测定血清钙(S-Ca)、血清磷(S-P)、尿钙(U-Ca/Cr)、尿磷(U-P/Cr)及血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的量;用ELISA法测血清I型胶原氨基端前肽(PINP)、I型胶原羧基端肽(CTX-I)、骨钙素(OCN)和尿脱氧吡啶林(DPD)的量;用放免法测定血清碱性磷酸酶(ALP)的活性;分别用骨密度仪、Viva CT和万能试验机评价骨组织结构变化。结果女贞子水提液可以明显抑制去卵巢引起的大鼠体质量上升,升高去卵巢大鼠S-Ca、S-P、HDL-C和PINP量,降低U-Ca/Cr和U-P/Cr水平,降低血清中LDL-C、TC、TG、ALP、OCN和CTX-I水平以及尿中DPD的量(P0.05、0.01)。女贞子水提液可以升高去卵巢大鼠的股骨和椎骨骨密度(BMD),改善股骨的微结构,增加骨强度。结论女贞子水提液能升高去卵巢大鼠的BMD,提高骨强度,其作用机制与调节钙、磷代谢,胶原蛋白和非胶原蛋白代谢有关。