补肾化瘀及补肾健脾化瘀调整小鼠免疫衰老的对比研究

根据中医理论、临床经验及实验研究,我们认为“正虚(主要指脾肾气虚)夹瘀是导致衰老的主要原因/机制。为了验证上述观点,探讨中医衰老的本质和延缓衰老的有效方法和途径,本课题通过体内外实验从淋巴细胞IL-2产生的水平、自由基代谢、细胞膜流动性等方面对比研究了补肾化瘀八味丹坤汤(补化)和补肾健脾化瘀八味参芪丹坤汤(补健化)的抗衰老作用。实验结果表明,八味参芪丹坤汤提高老年小鼠和臭氧早衰模型小鼠IL-2产生的水平优于八味丹坤汤(p<0.01,p<0.05)。体外实验也表明八味参芪丹坤汤对恢复老年小鼠和H_2O_2损伤的淋巴细胞产生IL-2的作用均优于八味丹坤汤(p<0.01,p<0.05)。八味参芪丹坤汤在提高老年小鼠红细胞自由基清除酶SOD(超氧化物歧化酶)和CAT(过氧化氢酶)活性方面也优于八味丹坤汤(p<0.05)。并且,八味参芪丹坤汤组(补健化组)与八味丹坤汤组(补化组)相比,其稳定老年小鼠淋巴细胞膜流动性的效果更佳(p<0.05)。综上结果可见,补肾健脾化瘀复方八味参芪丹坤汤在调整衰老小鼠免疫功能、改善自由基代谢、抗自由基损伤和改善细胞膜功能等方面均优于补肾化瘀八味丹坤汤。其结果为“正虚夹瘀是衰老的主要原因/机制”,以及“补肾健脾化瘀法是延缓衰老的主要途径”的论点提供了实验依据。     

补肾化瘀方药调整免疫衰老的机理研究

本实验从三方面研究八味丹坤调整免疫衰老与改善自由基代谢的关系。结果表明老年小鼠白细胞介素２（ＩＬ－２）产生降低，过氧化脂质（ＬＰＯ）含量增加，过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性下降，给药后上述指标均得到调整，臭氧入小鼠的上述指标出现类似衰老的变化，给药后，ＬＰＯ含量降低，同时ＣＡＴ和ＩＬ－２活性得到增强，且两者呈线性相关，在脾淋巴细胞培养液中另入过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），发现可使淋巴细胞ＩＬ－２产生明显减少，同     

补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞对延缓大鼠衰老作用

目的:观察补肾化瘀生新法协同静脉注射骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)延缓大鼠衰老的有效性,明确中医药协同静脉注射BMSCs治疗延缓机体衰老的可行性。方法:75只SD大鼠随机分为补肾化瘀生新方高、中、低剂量组、模型组和正常组。每组12只,按照125 mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量颈背部皮下每日1次注射D-半乳糖溶液,连续45 d,建立大鼠衰老模型。补肾化瘀生新方高、中、低剂量组(27.28,13.64,6.82 g·kg~(-1))灌胃给药,模型组生理盐水灌胃,正常组不给药,早晚各1次,连续45 d。同时尾静脉注射BMSCs注射3.0×10~6个/m L的BMSCs,每周1次,连续4次。免疫荧光法测定脑、肝、肺、心中CD105,p53,p21,p16~(INK4a)阳性细胞数,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠的脑、肝、肺、心中p16~(INK4a),p53,p21 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显降低,p16~(INK4a),p21,p53阳性细胞数明显升高(P0.05),大鼠的脑、心脏、肺脏、肝脏中p16~(INK4a),p53,p21 mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组比较,补肾化瘀生新各剂量组大鼠脑、心脏、肺脏、肝脏中CD105阳性细胞数明显升高,p16~(INK4a),p53,p21阳性细胞数明显降低(P0.05),补肾化瘀生新各剂量组均能明显降低脑、肝、肺、心组织中p16~(INK4a),p53,p21阳性细胞数mRNA表达明显下降(P0.05)。结论:补肾化瘀生新法协同静脉注射BMSCs可能影响p16~(INK4a)/Rb和p53/p21途径上的关键基因p16~(INK4a),p53,p21的表达而延缓BMSCs衰老,显示了中医药协同静脉注射BMSCs抗衰防衰的可行性。     

补肾化瘀与抗衰老

中医关于衰老的论述主要有肾精亏耗,气血阳气衰惫,脾胃虚弱,元气不足,阴虚生热等学说,其中以肾虚、脾虚致衰为最。历代医家多从补肾健脾来调补。笔者在多年的临床中发现,无论健康或体弱多病的老人均存在肾虚的征象,其中大多数同时兼有“血瘀”征象,尤以患病者为甚。因此,认为肾虚血瘀也是衰老的一个重要原因,而补肾化瘀是延缓衰老的重要法则之一。     

补肾化瘀生新方改善缺血缺氧性微环境延缓骨髓间充质干细胞衰老的作用

目的:观察补肾化瘀生新方改善细胞生存的不同微环境对p16/pRb和p53/p21信号通路调控作用,探讨其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)衰老的影响。方法:采用无血清的1640培养基和低氧细胞工作站培养24 h建立缺血缺氧微环境细胞体外模型。随机分为空白组,模型组,补肾化瘀生新方组(24. 58 g·kg-1),复合培养基组;复合培养基组加入复合培养基,模型组完全培养基培养;补肾化瘀生新方组加入含有补肾化瘀生新方的血清培养基,均在低氧细胞工作站培养24 h;空白组加入完全培养基正常培养;采用流式细胞仪检测BMSCs细胞周期、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p16INK4a,p53,p21 mRNA表达、及存活素(Survivn),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测β-catenin和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组S期细胞数增多,G0/G1期明显降低,p16INK4a,p53,p21,Survivn,Caspase-3,PARP mRNA表达明显升高,β-catenin和GSK-3β蛋白表达明显升高(P0. 05);与模型组比较,补肾化瘀生新方组S期细胞数减少,G0/G1期比值明显升高(P0. 05),p16INK4a,p53,p21,Survivn,Caspase-3,PARP mRNA表达明显降低,β-catenin和GSK-3β蛋白表达明显降低(P0. 05)。结论:补肾化瘀生新方通过改善缺血缺氧性微环境调控p16/pRb和p53/p21信号通路延缓BMSCs衰老。     

自由基衰老学说、肾虚与衰老及补肾抗衰老研究

<正> 本世纪二十年代自由基学说创立引起了许多科学者的极大兴趣,已涉及到化学、生物学、医学等诸多学科。其中自由基在衰老机制的分子水平研究成为极活跃的领域。最近研究表明:自由基衰老学说与中医学肾虚衰老、补肾抗衰老有密切关系。本文就自由基-肾虚-衰老-补肾抗衰老作一初步阐述。     

机体衰老与肾脏刍议

从中医理论渊源,中医药方论述,现代药理研究三方面,探讨机体衰老与中医肾脏有着必然的内在联系。以中医理论为指导,依靠现代科技,进一步开展机体衰老与中医肾脏的研究,扩大科研成果,造福人类社会。     

补肾益气化瘀方对衰老大鼠免疫功能的影响

目的：观察补肾益气化瘀方对衰老大鼠免疫功能的改善作用,并探讨其作用机理。方法：Wistar青年大鼠70只,随机分成空白对照组、模型对照组、药物（低、中、高剂量）组,共5组（n=14）。除空白对照组外,每组腹腔注射D-半乳糖连续6周,建立亚急性衰老大鼠模型。模型建立后,药物组每天分别用不同浓度补肾益气化瘀方提取液灌胃,空白对照组、模型对照组用生理盐水灌胃,连续4周,然后检测大鼠免疫功能指标。结果：补肾益气化瘀方能明显提高衰老大鼠CD4＋、CD8＋、IL-2及IL-4含量（P≤0.01）,显著提高巨噬细胞吞噬功能及半溶血素含量（P≤0.01）,及大鼠脾指数、胸腺指数。结论：补肾益气化瘀方通过调节细胞因子水平和体液免疫功能,达到抗衰老的作用。     

从中医衰老理论认识细胞衰老与肿瘤

细胞衰老与肿瘤有着密切的关系。肿瘤细胞往往因具有衰老障碍而表现出无限增殖的能力,恢复肿瘤细胞的衰老通路是肿瘤治疗的一个很有前途的研究方向。中医"脾肾虚衰致衰老"的衰老理论对细胞衰老的研究及诱导细胞凋亡与衰老等相关研究具有潜在的意义和作用。     

化瘀生新合剂制备工艺优化

目的:优化化瘀生新合剂的制备工艺,为制剂提供稳定可靠的生产参数。方法:采用单因素筛选法考察挥发油提取工艺;以固形物质量及毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为考察指标,采用正交设计法对水提工艺的提取时间、加水量、提取次数进行优选;以毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量保留率为指标,考察浓缩工艺;再考察抑菌剂、矫味剂等对成型工艺的影响。结果:挥发油提取工艺为加水8倍量,回流提取6 h;水提工艺为提取2次,加水8倍量,每次提取1 h,综合评分达到97.96;减压浓缩较常压浓缩指标成分保留率高;蔗糖用量2.8%、苯甲酸钠0.3%时成型工艺达到最优。结论:所选工艺科学、合理、稳定,适合工业化生产。     

疏肝健脾化瘀生新治肝硬化

本文对肝硬化的形成及治疗进行阐述，特别采用疏肝健脾、活血化瘀生新治疗肝硬化疗效好，从而使硬化之肝得柔软，使肝功能恢复。     

补肾化瘀生新方协同静脉溶栓治疗急性脑梗死临床研究

目的:观察补肾化瘀生新方协同静脉溶栓治疗急性脑梗死的临床疗效及对脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-as-sociated phospholipase A2,Lp-PLA2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotei-nase-9,MMP-9)、超氧化物歧化酶(su-peroxide di...     

化瘀祛痰、通络补肾治疗颈动脉粥样硬化

全国名老中医药专家陈美华教授认为,颈动脉粥样硬化的病机关键在于肾气不足、痰瘀互结,应用中医药化瘀、祛痰、通络补肾法治疗该病收效良好,值得临床推广。     

补肾中药枸杞子、淫羊藿抗细胞衰老的对比研究

临床及动物实验表明,枸杞子、淫羊藿能有效地改善一些与衰老有关的症状,在整体水平上具有某种抗衰老的作用。但是,它们对寿命的影响以及抗衰老的分子途径仍不清楚。我们采用人二倍体成纤维细胞(human diploid fibroblasts,HDF)国内标准株2BS,比较分析了一定浓度的枸杞子、淫羊藿水提取液对2BS 细胞寿命以及原癌基因 c-fos 表达的影响。现将结果报告如下。     

自拟补肾化瘀生精散治疗男性不育症30例

目的观察自拟补肾化瘀生精散治疗男性不育症的临床疗效。方法选取肾亏血瘀型60例男性不育症患者根据治疗方法不同分为治疗组和实验组各30例,实验组给予口服自拟补肾化瘀生精散治疗1~3个疗程,对照组给予西药对症治疗,进行两组疗效对比。结果实验组总有效率为90%(27/30),对照组总有效率73%(22/30),实验组显著优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论自拟补肾化瘀生精散治疗男性不育症疗效显著。     

机体衰老的机理与抗老防衰

人的一生均经历生、长、壮、老、死的过程.为什么人到一定年龄会衰老呢?因为这是大自然的刻意安排.清代医学家徐灵胎称之为"定数".一个人由盛转衰的时期,它的发生和发展直接影响到人的寿命,所以引起广大医学家们的重视.     

补肾生血干膏冲剂治疗肾性贫血34例

补肾生血干膏冲剂治疗肾性贫血３４例查平导师陈以平安徽省安庆市中医院（安庆２４６００４）肾性贫血是由慢性肾功能衰竭所导致，表现于慢性肾衰的全过程。陈以平教授自拟补肾生血干膏冲剂，治疗肾性贫血，对改善或稳定肾功能有一定疗效。现将临床资料总结如下。１病例选...     

补肾化瘀生新方对不同代次骨髓间充质干细胞增殖、凋亡影响的研究

目的:探讨补肾化瘀生新方对不同代次骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、凋亡的影响。方法:对BMSCs进行提取纯化、分选及培养,第3代细胞随机分为正常组,加入杜氏培养液(Dulbecco’s modified eagle medium,DMEM);补肾化瘀生新组,加入补肾化瘀生新含药血清;生理盐水组,加入生理盐水含药血清。MTT法检测各组不同时间点和不同代次BMSCs细胞活性、生长曲线和群体倍增时间;比色法检测β-半乳糖苷酶活性变化。流式细胞术检测不同时间点和不同代次羧基荧光素乙酰乙酸(Carboxy-fluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)标记、BMSCs增殖率和细胞周期变化;实时荧光PCR技术检测不同代次BMSCs端粒酶活性表达情况。结果:与正常组比较,生理盐水组β-半乳糖苷酶活性、24 h、48 h、72 h时间点不同代次BMSCs增殖率和群体倍增时间、端粒酶活性、不同代次G0/G1期差异无统计学意义(P 0.05);与生理盐水组比较,补肾化瘀生新组不同代β-半乳糖苷酶活性、端粒酶活性降低,24 h、48 h、72 h时间点不同代次BMSCs增殖率、群体倍增时间、不同代次G0/G1期升高(P 0.05)。结论:补肾化瘀生新方延缓细胞衰老作用可能与降低β-半乳糖苷酶活性、激活端粒酶活性、提高BMSCs增殖分化能力有关。