冰片与苯扎氯铵合用对红细胞及角膜上皮细胞的损伤效应

目的 考察冰片与苯扎氯铵合用对红细胞及角膜上皮细胞的毒性。方法 实验分为溶剂对照组、冰片组、苯扎氯铵组、冰片+苯扎氯铵组,分别测定各组红细胞半数溶血浓度（HC50）和角膜上皮细胞半数抑制浓度（IC50）,根据等辐射分析法和响应面分析法判断联合作用类型和趋势,并观察二者合用对眼角膜上皮细胞增殖的影响。结果 苯扎氯铵对红细胞及角膜上皮细胞的毒性作用呈明显的量效关系,加入冰片后能降低其HC50和IC50值。结论 冰片与苯扎氯铵对红细胞的溶血效应表现为协同作用,冰片能增强苯扎氯铵对角膜上皮细胞的毒性作用,受损一定程度内的细胞可恢复。     

3种清凉剂与苯扎氯铵合用的体外溶血效应比较

目的比较薄荷脑、冰片和樟脑3种清凉剂对红细胞的溶血效应及与苯扎氯铵合用后溶血效应的变化。方法以溶血百分率(Hemolysis Rate,HR)、半数溶血浓度(Half Hemolysis Concentration,HC50)为指标,比较薄荷脑、冰片和樟脑的溶血作用;分别考察相同浓度的清凉剂与苯扎氯铵合用后对红细胞的溶血作用,并采用等辐射线法分析合用后相互作用类型。结果薄荷脑、冰片和樟脑的HC50分别为2.59 7,3.59 3,11.36 mmol·L-1;清凉剂与苯扎氯铵合用后,溶血曲线左移,HC50均落在两药单用HC50的95%置信区间内。结论薄荷脑对红细胞的溶血效应最大,冰片次之,樟脑最小;清凉剂均可增强苯扎氯铵的溶血作用。     

电针对干眼症兔结膜细胞凋亡及相关蛋白Caspase-3、Fas和Bcl-2表达的影响

目的:通过观察电针对干眼症兔结膜细胞凋亡及相关蛋白Caspase-3、Fas和Bcl-2表达的影响,从细胞凋亡角度探讨电针治疗干眼症的作用机制.方法:雄性新西兰兔随机分为正常组、模型组、电针组和假电针组.采用0.1%苯扎氯铵滴眼制作兔干眼症模型.检测各组兔泪液分泌量、泪膜破裂时间;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)法检测结膜细胞凋亡情况;应用免疫组化法检测结膜细胞Caspase-3、Fas和Bcl-2蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组兔泪液分泌量降低,泪膜破裂时间缩短(均P<0.01);与模型组、假电针组比较,电针组兔泪液分泌量增多,泪膜破裂时间延长(均P<0.05).与正常组比较,模型组兔结膜细胞凋亡增加(P<0.01),Caspase-3和Fas蛋白表达增加(均P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01);与模型组、假电针组比较,电针组兔结膜细胞凋亡减少(均P<0.01),Caspase-3和Fas蛋白表达减少(均P<0.05),Bcl-2蛋白表达增加(均P<0.01).结论:电针能抑制干眼症兔结膜细胞凋亡,下调凋亡相关蛋白Caspase-3和Fas表达,上调Bcl-2蛋白表达,该作用可能是电针治疗干眼症的作用机制之一.     

肾炎康血清干预嘌呤霉素氨基核苷诱导足细胞损伤研究

目的:探讨复方肾炎康对嘌呤霉素氨基核苷诱导足细胞损伤的保护作用。方法:原代培养大鼠足细胞,随机分为正常组,对照组,肾炎康低、中、高剂量组,厄贝沙坦组除正常组外,其余各组分别予以嘌呤霉素氨基核苷,正常组加正常大鼠血清,肾炎康低、中、高剂量组分别加肾炎康低、中、高剂量,厄贝沙坦组加厄贝沙坦,均干预48h。用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,实时定量PCR方法检测P53、Caspase 3 m RNA,western印迹检测细胞中P53、Caspase 3蛋白变化。结果:嘌呤霉素氨基核苷作用下的各组足细胞凋亡率、P53、Caspase 3m RNA及蛋白表达均显著高于正常组(P0.05,P0.01),药物干预的各组足细胞凋亡率、P53、Caspase 3 m RNA及蛋白表达均显著低于对照组(P0.05,P0.01),肾炎康高剂量组足细胞凋亡率、P53、Caspase 3 m RNA及蛋白表达与厄贝沙坦组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:中药复方肾炎康能抑制嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡,其机制可能与抑制P53、Caspase 3表达有关。     

润目灵颗粒对水液缺乏性干眼兔泪腺形态学及细胞凋亡的影响

目的探讨润目灵颗粒治疗水液缺乏性干眼的作用机制。方法用1%硫酸阿托品滴眼液滴眼制备兔水液缺乏性干眼模型,给予润目灵颗粒治疗14 d。对全部实验兔行Schirmer I试验,测定泪膜破裂时间,观察角膜染色,光、电镜观察其泪腺形态学的变化,免疫组化法对泪腺组织中凋亡相关基因蛋白进行检测。结果与模型组比较,Schirmer I试验检测显示,润目灵组泪液量明显增加(P0.01),泪膜破裂时间明显延长(P0.05,P0.01),角膜染色分值明显减小(P0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中凋亡相关因子(factor-related apoptosis,Fas)及其配体(Fas ligand,Fas L)阳性表达的细胞数明显减少(P0.05),泪腺细胞的形态学损伤明显减轻。结论润目灵颗粒可能通过抑制水液缺乏性干眼兔泪腺组织的细胞凋亡及腺体萎缩,达增加泪液分泌、维持泪膜稳定的作用。     

双苯氟嗪抗大鼠全脑缺血再灌注所致海马CA1区神经元凋亡

 目的 研究L-型钙通道拮抗剂双苯氟嗪在大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元中的抗凋亡作用及与CD95(Fas)分子启动的死亡信号转导通路之间的关系。方法 四血管阻断法制备全脑缺血再灌注损伤模型(缺血15 min，再灌注3 d)，双苯氟嗪（20，40和80 mg·kg^-1）每日灌胃给药1次。激光扫描共聚焦显微镜(Confocal)和HE染色观察海马CA1区神经元细胞形态学改变，流式细胞仪(FCM)分析海马DNA含量变化；Western-blotting和RT-PCR方法检测CD95(Fas)分子启动的死亡信号转导通路相关蛋白Fas,FasL和Caspase3蛋白及mRNA表达变化。结果 全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元呈现典型凋亡细胞形态学改变，凋亡细胞百分率明显上升（P<0.01）。双苯氟嗪明显改善海马CA1区神经元形态，显著降低凋亡细胞百分率（P<0.01）。Western blotting及RT-PCR结果显示，双苯氟嗪显著降低CD95(Fas)分子相关蛋白Fas、FasL和Caspase3在蛋白及核酸水平的表达。结论 双苯氟嗪对缺血性脑损伤的保护作用可能通过抑制CD95(Fas)分子启动的死亡信号转导通路，从而发挥其抗脑缺血再灌注损伤作用。     

甘草酸抑制UVB诱导HaCaT细胞凋亡的机制研究

目的:研究甘草酸抑制中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)凋亡的机制。方法:以不同浓度的甘草酸作用于人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞),噻唑蓝比色(MTT)法筛选药物的有效安全浓度;用30 mJ/cm~2的UVB照射Ha Ca T细胞,制备光老化模型,MTT法检测细胞增殖率;流式细胞仪检测各组细胞总凋亡率;实时定量PCR(RT-PCR)法检测Bax、Bcl-2 m RNA表达水平变化;Western Blot法检测各组细胞上清中Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L甘草酸为最佳有效安全浓度。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01);细胞总凋亡率显著显著升高(P0.01);Bax m RNA表达水平显著升高,Bcl-2m RNA表达水平显著降低(P0.01);Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低(P0.01)。与UVB组比较,1×10~(-7)、1×10~(-6)、1×10~(-5)mol/L甘草酸+UVB组细胞增殖率显著升高(P0.01);细胞总凋亡率显著降低(P0.01);Bax m RNA表达水平显著降低,Bcl-2 m RNA表达水平显著升高(P0.01,P0.05);Bax蛋白表达量显著降低,Bcl-2蛋白表达量显著升高(P0.01,P0.05)。结论:甘草酸能抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡,其机制与其下调促凋亡基因Bax m RNA和蛋白的表达,上调抑凋亡基因Bcl-2 m RNA和蛋白的表达有关。     

柚皮苷通过Fas膜受体通路调控髓核细胞凋亡的机制研究

[目的]观察中药骨碎补单体柚皮苷(Naringin)对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响,为治疗椎间盘退变提供理论依据。[方法]对体外培养的人退变椎间盘髓核细胞利用番红O染色和甲苯胺蓝染色进行鉴定,并对P3代细胞分别用柚皮苷0 g/m L(对照组)、柚皮苷20 g/m L、柚皮苷40 g/m L、柚皮苷80 g/m L的培养基培养人髓核细胞48 h,噻唑蓝(MTT)法选择其抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡的最佳浓度,并用流式细胞仪测定各组细胞凋亡率。实时定量聚合酶链锁反应(q RT-PCR)检测Fas、Fas L、Caspase-8基因表达。蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测Fas蛋白表达。[结果]MTT法和流式细胞检测均测定20 g/m L柚皮苷为抑制髓核细胞凋亡的最佳浓度(P0.05)。q RT-PCR检测20 g/m L柚皮苷能够抑制Fas、Fas L、Caspase-8 m RNA表达(P0.05)。Western-blot检测显示20 g/m L柚皮苷能够抑制Fas、Fas L、Caspase-8蛋白表达。[结论]柚皮苷可能通过调控Fas/Fasl死亡受体凋亡通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡。     

疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H_1N_1感染的A549细胞凋亡的影响

目的:探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌上皮细胞A549,甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后,以达菲为药物对照组,利用基因芯片技术通过KEGG pat hway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研究疏风宣肺方与解表清里方凋亡信号通路中基因转录的变化;同时采用荧光定量PCR检测各组细胞中的肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)、Fas配体(Fas L)及天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)m RNA表达的变化;West er n bl ot t i ng法检测各组细胞中蛋白的变化。结果:与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp8、Casp9、Fas、Fasl明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Casp8、Casp7、Fas、Fasl明显下调;q RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均显著升高(P0.01);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05),解表清里组Caspas e-3、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05)。同时疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Wes t er n bl ot t i ng结果显示,H1N1感染组Fas、Fas L蛋白细胞较对照组显著升高(P0.05)。与H1N1感染组比较,2种方药的Fas、Fas L表达均显著降低(P0.05);q RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论:疏风宣肺方与解表清里方均可调控甲型流感病毒感染后的Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L表达,可对抗流感病毒感染后的细胞凋亡。     

益胃祛瘀消痰方对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:研究益胃祛瘀消痰方治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制。方法:将实验大鼠随机分为正常组、模型组、益胃祛瘀消痰方高、低剂量组以及维霉素组、三九胃泰组,采用复合因素造模法复制大鼠慢性萎缩性胃炎模型,观察各组大鼠胃组织病理形态学、胃组织细胞凋亡及相关基因Caspase3、Bcl-2和Fas蛋白表达的变化。结果:模型组大鼠胃组织细胞凋亡率明显升高,Caspase3和Fas蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,益胃祛瘀消痰方能降低胃组织细胞凋亡率,减弱Caspase3和Fas蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达。结论:益胃祛瘀消痰方可通过调控Caspase3、Bcl-2和Fas的蛋白表达,以降低胃组织细胞凋亡率,为该方治疗慢性萎缩性胃炎提供了实验依据。     

柴胡提取物对CVB3m感染小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨柴胡提取物调节心肌细胞凋亡的作用机制。方法以柯萨奇病毒嗜心肌株（CVB3m）腹腔注射诱导BALB／c小鼠病毒性心肌炎模型,将实验小鼠分为正常对照组、模型组、柴胡提取物组,柴胡提取物组每天予0．2ml／10g的浓度为2mg／ml的柴胡提取物灌胃,正常对照组、模型组予以等量生理盐水灌胃,于造模后第10天处死,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,采用免疫组化、RT—PCR法检测各组小鼠心肌中Fas、Bcl-2、Caspase3表达。结果正常组小鼠心肌未检测到凋亡的心肌细胞,Fas、Bcl-2、Caspase3均有不同程度表达,模型组可见大量心肌细胞凋亡,且Fas、Bcl-2、Caspase3表达均强于对照组（P〈0．01）,柴胡提取物组心肌细胞凋亡明显减少,与模型组比较差异显著（P〈0．01）,Fas、Caspase3表达明显降低,Bcl-2表达轻度升高。结论柴胡提取物可以抑制病毒性心肌炎时心肌细胞凋亡,明显下调Fas及Caspase3表达,轻微上调Bcl-2表达。     

白英生物碱通过激活FAS途径诱导人肺癌A549细胞凋亡的研究

目的 探讨白英生物碱(STA)诱导人肺癌A549细胞凋亡及其对Fas途径相关基因表达的影响.方法 采用STA处理体外培养的A549细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI双染后用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Fas、FasL、Cleaved caspase-8和Cleaved caspase-3蛋白表达.结果 STA能抑制A549细胞增殖,STA各组细胞抑制率显著升高且呈剂量依赖性,与正常对照组比较差异有统计学意义(P ＜0.01);STA各组细胞凋亡率明显升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜ 0.01);Caspase-8/Caspase-3抑制剂能抑制STA诱导细胞凋亡,与同剂量STA组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);STA各组细胞Fas、FasL、Cleaved caspase-8和Cleaved caspase -3表达显著上升,与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 Fas介导的死亡受体途径参与STA诱导肺癌A549细胞凋亡.     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素(50、25、12.5μg/m L)组和顺铂(40μg/m L)组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)m RNA、Bcl-2相关X蛋白(Bax)m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素(50、25μg/m L)组细胞周期G2/M期比例显著提高(P0.05),细胞凋亡率显著升高(P0.01),Bcl-2 m RNA表达显著下调且Bax m RNA表达显著上调(P0.05或P0.01),Bax/Bcl-2值显著提高(P0.01),cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调(P0.05或P0.01)。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

二至天癸颗粒对肾气虚不孕患者颗粒细胞Fas通路的影响

目的:探讨补肾益天癸之二至天癸颗粒对肾气虚不孕患者颗粒细胞Fas通路的影响。方法:分析2013年12月—2015年9月就诊于山东中医药大学附属医院生殖与遗传中心,符合病例选择标准的肾气虚不孕症患者72例,随机分为治疗组(二至天癸颗粒+IVF标准长方案)和对照组(安慰剂+IVF标准长方案),取卵日收集卵泡GC,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测颗粒细胞Fas L、Fas、Caspase8、Caspase3蛋白的含量,实时荧光定量PCR测定mRNA含量,观察组间差异。结果:两组患者GC中均有Fas L、Fas、Caspase8、Caspase3的mRNA和蛋白表达,且在治疗组的表达均低于对照组(P0.05);与未妊娠者相比,妊娠者GCFas L、Fas、Caspase8、Caspase3的mRNA和蛋白表达均较低(P0.05)。结论:二至天癸颗粒可以下调Fas通路四个蛋白的表达。推测这可能是其抑制颗粒细胞凋亡,提高卵细胞质量和胚胎质量从而提高临床妊娠率的机制之一。     

电针对干眼症兔角膜TNF-α、IL-6、MHC-Ⅱ调节作用的研究

目的通过观察电针对干眼症兔角膜组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和组织相容性复合体-Ⅱ(MHC-Ⅱ)表达的影响,探讨电针治疗干眼症的作用机制。方法24只雄性新西兰兔随机分为正常组、模型组、电针组和西药组,每组6只。正常组不造模、不干预。模型组仅给予0.1%苯扎氯铵滴眼造模,造模成功后不予任何干预处理。电针组造模后给予电针干预,取穴为双侧攒竹、太阳、丝竹空和风池,攒竹和太阳连接电针。西药组造模后给予聚乙二醇滴眼液治疗。实验结束后检测泪液分泌量和泪膜破裂时间,应用免疫组化法检测角膜组织TNF-α、IL-6和MHC-Ⅱ蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组兔泪液分泌量降低,泪膜破裂时间缩短(P<0.01);与模型组比较,电针组兔泪液分泌量增多、泪膜破裂时间延长(P<0.01),西药组泪液分泌量无明显变化(P>0.05)、泪膜破裂时间延长(P<0.01)。与正常组比较,模型组兔角膜组织TNF-α、IL-6和MHC-Ⅱ蛋白表达均增加(P<0.05);与模型组比较,电针组、西药组兔角膜组织TNF-α、IL-6和MHC-Ⅱ蛋白表达均减少(P<0.05)。结论电针可以改善实验性干眼症兔泪液分泌量和泪膜破裂时间,下调角膜组织TNF-α、IL-6和MHC-Ⅱ的表达。     

独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用SD大鼠制备独活寄生汤含药血清,弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,分离提取原代滑膜成纤维细胞。滑膜成纤维细胞分为6组,分别是空白组、模型组、甲氨喋呤组、独活寄生汤高、中、低剂量组,每组5个复孔,分别加入相应的药物。CCK8法检测各组细胞增殖率;荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞Bax、Bcl-2、caspase3 m RNA和蛋白水平的表达变化。结果:空白组细胞在各时间点未见明显的变化;模型组细胞随时间延长,增殖抑制率升高(P0.05);甲氨喋呤组和独活寄生汤高、中、低剂量组细胞随干预时间的延长,增殖抑制率降低(P0.05)。与空白组比较,模型组细胞在各时间点的增殖抑制率均升高(P0.05);与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤各剂量组细胞在各时间点的增殖抑制率均降低(P0.05),尤以高剂量组的抑制率更为明显。与空白组比较,模型组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平降低,Bcl-2 m RNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤中、高剂量组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平升高,Bcl-2 m RNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),高剂量组的作用更为明显。结论:独活寄生汤能抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖,其作用机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和caspase3的表达有关。     

蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏细胞Fas和Fas-L表达的影响

目的:研究中药蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Fas和Fas-L表达的影响,探讨该药对糖尿病肾病的防治机制.方法:大鼠腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,用蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠进行干预治疗,采用全自动生化分析仪测定大鼠血、尿代谢指标,原位末端标记法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化和流式细胞术检测肾皮质Fas和Fas-L的表达.结果:模型组血糖(Glu)、尿素氮(BUN)、尿蛋白(Upro)较正常组明显升高(P＜0.01),中药组则有明显改善.模型组较正常组大鼠肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多(P＜0.01),Fas和Fas-L的表达显著增强(P＜0.01);中药组较模型组大鼠凋亡细胞数明显减少(P＜0.01),Fas和Fas-L表达减弱(P＜0.01).结论:蜂贝化瘀胶囊可能通过影响凋亡相关蛋白Fas和Fas-L的表达而抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥对肾脏的保护作用.     

枳实消痞丸配合西药对幽门螺杆菌感染小鼠胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的影响

目的:观察枳实消痞丸配合西药对幽门螺杆菌(Hp)感染小鼠胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的影响,探讨中西药合用提高幽门螺杆菌感染相关性胃炎疗效的作用机制.方法:采用5％ NaHCO3溶液及幽门螺杆菌国际标准菌株SS1灌喂BALB/c小鼠,建立Hp感染动物模型.对造模动物分别投以中药、西药和中西药联用,分别采用HE染色、TUNEL法和免疫组化(sABC法)观察胃黏膜损伤程度(LI)、细胞凋亡指数(AI)和Fas蛋白表达的变化.结果:3个治疗组均能抑制胃黏膜上皮细胞Fas蛋白的过高表达,模型组表达为(28.30 ±2.36)％,抑制程度中西药合用组＞西药组＞中药组[Fas表达依次为(15.50±2.39)％,(22.0±1.90)％,(25.90±2.34)％];3个治疗组对胃黏膜损伤有不同程度的改善,中西药合用组强于单用中药组、西药组[LI依次为(1.10±0.18),(1.80±0.25),(1.30±0.26)分];3个治疗组能对抗Hp所引起的细胞凋亡增加,模型组、中药组、西药组、中西药合用组AI依次为(16.60±1.74)％,(11.60±1.11)％,(8.70±0.88)％,(5.10±0.67)％,合用组抑制作用最强.结论:对细胞凋亡和胃黏膜上皮细胞Fas蛋白表达的抑制可能是枳实消痞丸合用西药三联提高幽门螺杆菌感染相关性胃炎疗效的机制之一.     

银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

目的:观察银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞凋亡的影响并初步探讨可能机制。方法:体外培养ARPE-19细胞株,分为正常组(5.5 mmol·L-1葡萄糖),高糖组(30 mmol·L-1葡萄糖),银杏叶提取物组(30mmol·L-1葡萄糖+12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测定B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原-2(Bcl-2),白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关因子(Fas),Fas受体(Fas L)mRNA和蛋白的表达。Western blot检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化及核JNK表达变化。结果:高糖组吸光度A明显低于正常组(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组A明显升高(P0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常组,12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组比高糖组细胞凋亡率明显降低(P0.05);与正常组比较,高糖组Bax和Caspase-3,Fas和Fas L表达升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物组能降低Bax和Caspase-3的表达,升高Bcl-2表达水平,降低Fas和Fas L表达(P0.05);与正常组比较,高糖组JNK磷酸化及核JNK蛋白水平升高(P0.05),12.5,25,50,100 mg·L~(-1)银杏叶提取物降低JNK磷酸化及核JNK表达(P0.05)。结论:银杏叶提取物能通过JNK通路,抑制细胞凋亡,改善糖尿病视网膜病变。     

补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方抑制卵巢早衰(POF)小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的作用机制。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。取40只清洁级雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性药组、补肾活血方组。补肾活血方组给予补肾活血方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续15 d。取卵巢、子宫、胸腺进行称重,计算其脏器指数;HE染色观察颗粒细胞凋亡情况;采用放射免疫法检测雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平;采用RT-PCR分析卵巢颗粒细胞中Fas、Fas-L m RNA表达情况。结果与空白组比较,模型组卵巢、胸腺、子宫质量和E2水平显著降低(P0.05,P0.01),FSH、LH水平和Fas、Fas-L m RNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,给药组颗粒细胞凋亡明显减少,卵巢指数、子宫指数、胸腺指数增加(P0.05),E2水平升高(P0.01),FSH、LH水平及Fas、Fas-L m RNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肾活血方可调节下丘脑-垂体-卵巢轴的激素水平,通过降低Fas、Fas-L的m RNA表达抑制细胞凋亡。