稽留流产绒毛组织中Fas／FasL表达及其意义

目的探讨稽留流产的发生与Fas／FasL表达的相关性。方法采用RT—PCR法检测稽留流产患者与健康早孕人流者绒毛组织中FasL的mRNA表达水平。结果稽留流产组FasL mRNA表达水平为（0．714-0．11）,健康早孕人流组FasL mRNA的表达水平为（1．38±0．41）,P〈0．05。结论FasL表达的降低可能是导致稽留流产的原因之一。     

卵泡抑素样蛋白1在不明原因稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中的表达及意义

目的探讨不明原因稽留流产患者外周血和绒毛蜕膜组织卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)的表达及其临床意义。方法选取2014年1月-2015年12月我院诊治的不明原因稽留流产患者30例为实验组(n=30),另选取自愿要求终止妊娠的健康早孕妇女30例为对照组(n=30)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测两组外周血中FSTL1水平,通过先进的荧光定时PCR技术,检测两组绒毛、蜕膜组织中Fstl1 mRNA的表达水平。结果实验组血清FSTL1高于对照组,差异具有统计学意义(t=10.63,P0.001);实验组绒毛蜕膜组织中Fstl1 m RNA的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论不明原因稽留流产患者血清及绒毛蜕膜组织中FSTL1表达水平明显升高,FSTL1可能在稽留流产发生发展中有一定作用。     

白细胞介素-8蛋白在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的 探讨反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素-8 （IL-8）蛋白水平的表达。 方法 应用免疫组织化学染色和Western blotting 技术,分别对30例反复自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析。 结果 免疫组织化学染色结果显示,在绒毛组织中,流产组和对照组IL-8的蛋白表达主要定位于绒毛上皮细胞的细胞质内;在蜕膜组织中,流产组IL-8蛋白表达于蜕膜细胞的胞质内,对照组蜕膜细胞则为阴性,但两组腺上皮细胞均为阳性反应。Western blotting结果显示,在绒毛组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量明显高于对照组（P﹤0.01）;在蜕膜组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量高于对照组（P﹤0.05）。 结论 流产组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达增强与反复自然流产有关,IL-8可能参与反复自然流产的病理过程。     

稽留流产患者绒毛组织的染色体核型分析

目的通过对稽留流产患者的流产绒毛组织进行染色体核型分析,探讨染色体异常与稽留流产之间的关系。方法对2011年2月至2017年6月,因稽留流产在我院行流产绒毛组织培养和染色体核型分析的286例患者进行回顾性分析。结果 286例稽留流产绒毛组织中,培养成功262例,成功率为91.61%(262/286)。共检出异常核型135例,异常率为51.53%(135/262),其中数目异常占118例(87.41%,118/135),结构异常17例(12.59%,17/135)。结论胚胎染色体异常,尤其数目异常是导致孕妇稽留流产的最主要原因,为流产孕妇提供绒毛组织染色体核型分析可明确其稽留流产原因,对再发风险评估提供科学的理论依据。     

复发性流产患者蜕膜自然杀伤细胞亚群Fas表达的研究

近年来研究发现，Fas-FasL在母胎免疫耐受中起重要作用，即表达FasL的滋养细胞能够杀伤入侵到胎盘绒毛的表达Fas的淋巴细胞，从而使滋养细胞免受母体免疫细胞的破坏。以往大多数研究重点放在母胎界面T细胞的凋亡上，而对妊娠早期蜕膜组织的主要淋巴细胞、NK细胞的凋亡报道较少，我们通过用流式细胞术检测复发性流产（RSA）患者外周血和蜕膜组织淋巴细胞、     

白血病抑制因子在正常早孕、稽留流产蜕膜绒毛中表达的初步临床研究

目的探讨白血病抑制因子（LIF）在正常早孕、稽留流产蜕膜绒毛组织中的表达,及其与稽留流产发生的关系。方法采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（SP）法对白血病抑制因子（UF）在2组妇女绒毛蜕膜组织中的表达进行组织学定位和表达强弱度分析。通过病理图像分析仪对图片进行观察,并运用所附分析系统软件测量各组平均光密度值（IOD）。采用放射免疫法检测正常早孕妇女（正常早孕组,20例）、稽留流产患者（稽留流产组,25例）血清人绒毛膜促性腺激素（β—hCG）及孕酮（P）水平。结果（1）孕酮及hCG水平在2组孕妇间的比较：正常早孕组孕妇血清中孕酮、hCG水平分别为（37．5±15．2）ng／mL、（9005,8±2134．9）mIU／L,稽留流产组孕妇分别为（19．1±11．6）ng／mL、（3120．3±1213．2）mIU／L,两组孕妇血清孕酮、hCC水平比较,有显著性（P〈0．01）;（2）LIF平均相对含量在2组孕妇蜕膜、绒毛组织中的比较：正常早孕组孕妇分别为0．38±0．15,0．36±0．11;稽留流产组孕妇分别为0．20±0．17,0．18±0．13。正常早孕组与稽留流产组比较,差异有显著性（P〈0．05）。结论LIF在稽留流产蜕膜绒毛组织中的表达量降低,可能是导致hCG及孕酮分泌下降,最终造成稽留流产的原因之一。     

白细胞介素-6在反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的:研究白细胞介素-6(IL-6)在反复自然流产患者绒毛与蜕膜组织中的表达情况,为防治反复自然流产提供理论依据.方法:应用免疫组织化学显色法和图像分析技术,对IL-6蛋白在反复自然流产患者(病例组)和正常人工流产者(对照组)绒毛和蜕膜组织中的表达进行定位和半定量分析;H-E染色法观察反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织的形态学变化.结果:免疫组织化学显色显示,在绒毛组织中,IL-6蛋白定位于滋养层细胞的细胞质内,病例组的IL-6蛋白表达明显低于对照组;在蜕膜组织中,IL-6定位于蜕膜细胞和腺上皮细胞的细胞质内,且病例组蜕膜细胞的表达明显高于对照组,而2组在腺上皮细胞的表达无差异;H-E染色结果显示,病例组绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性、坏死,细胞嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强,蜕膜细胞失去细胞间连接,部分蜕膜细胞解体、核消失,细胞嗜酸性增强.结论:绒毛和蜕膜组织中IL-6蛋白表达的变化与反复自然流产有关,IL-6可能参与反复自然流产的病理过程.     

白细胞介素-2在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的:研究白细胞介素-2(IL-2)在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达水平及意义.方法:应用免疫组织化学和图像分析,分别对30例反复自然流产患者(病例组)和30例正常妊娠者(对照组)绒毛和蜕膜组织中IL-2的表达进行定位和半定量分析;应用显微镜观察反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织的形态学变化.结果:免疫组织化学显色显示,IL-2蛋白定位于绒毛组织的滋养层细胞和蜕膜组织的蜕膜细胞细胞质内,且病例组的IL-2蛋白表达高于对照组.H-E染色结果显示,病例组的蜕膜组织结构模糊、细胞变性坏死、部分细胞连接消失,血管内皮有缺损;绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性坏死,细胞嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强.结论:绒毛和蜕膜组织中IL-2蛋白的高表达与反复自然流产有关,可能参与反复自然流产的病理过程.     

不明原因习惯性流产妇女外周血、蜕膜和绒毛组织TNF-a表达

免疫因素在不明原因习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)妇女中的致病作用已逐渐被学者认知,外周血、蜕膜和绒毛组织都是孕早期母体和胚胎最直接接触部分,在孕早期这些位置的免疫细胞数量、活性及其所分泌细胞因子对维持正常妊娠扮演着至关重要角色,肿瘤坏死因子-α(TINF-a)是其中较重要细胞因子之一.我们观察了25例育龄期RSA妇女外周血、蜕膜和绒毛组织中TNF-α表达变化,并与同期正常怀孕后人工流产妇女相同检测结果比较,报道如下.     

稽留流产患者绒毛凋亡情况和IGF-Ⅱ表达情况分析

目的通过观察绒毛组织凋亡发生和胰岛素样生长因子-2(IGF-Ⅱ)表达情况,来探讨稽留流产发生的可能原因。方法分别选择30例无明显诱因导致的稽留流产患者和正常早孕要求人工流产的患者作为研究对象,采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL法)检测绒毛滋养细胞的凋亡情况;采用SABC法检测绒毛组织中IGF-Ⅱ的表达情况。结果稽留流产组滋养细胞凋亡指数明显高于对照组,前者IGF-Ⅱ的表达明显高于后者。结论滋养细胞过度凋亡及IGF-Ⅱ缺乏可能是导致稽留流产的重要原因。     

复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8的表达

目的:研究复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的表达。方法:应用免疫组化法及图像分析技术,对30例复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析;H- E染色后光镜下观察绒毛及蜕膜组织的形态学变化。结果:在绒毛组织中,IL-8蛋白定位于绒毛上皮细胞的细胞质内,且病例组的表达明显高于对照组;在蜕膜组织中,病例组蜕膜细胞的胞质内可见IL-8蛋白表达,且高于对照组;H- E染色可见病例组绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性甚至坏死、嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞失去细胞间连接,部分蜕膜细胞解体、核消失。结论:病例组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达的增强与复发性自然流产有关,IL-8可能参与复发性自然流产的病理过程。     

不明原因习惯性流产妇女外周血、蜕膜和绒毛组织TNF-ɑ表达

免疫因素在不明原因习惯性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)妇女中的致病作用已逐渐被学者认知,外周血、蜕膜和绒毛组织都是孕早期母体和胚胎最直接接触部分,在孕早期这些位置的免疫细胞数量、活性及其所分泌细胞因子对维持正常妊娠扮演着至关重要角色,肿瘤坏死因子-浕(TNF-浕)是其中较重要细胞因子之一。     

半乳糖凝集素-3在复发性流产子宫蜕膜及绒毛组织中的表达

目的检测复发性流产患者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3（galectin-3）表达,为进一步探讨不明原因复发性流产提供理论依据。方法对41D例不明原因复发性流产患者及32例正常妊娠行人工流产患者,采用RT—PCR、免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶链接法（sp法）检测其子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达。结果复发性流产者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达明显低于正常妊娠组。结论半乳糖凝集素-3与妊娠早期绒毛及子宫蜕膜发育相关,其表达降低可能是导致复发性流产的原因之一。     

胚胎停育者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及意义

目的 了解MMP-9、TIMP-3在正常早孕和胚胎停育者绒毛和蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法 选取60例正常早孕自愿终止妊娠的妇女作为照组,60例为胚胎停育组,均给与负压吸宫术;均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组化法测定绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3表达情况。结果 胚胎停育患者绒毛和蜕膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P0.05),两组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P0.05),胚胎停育组绒毛和蜕膜组织中MMP-9/TIMP-3的比值高于对照组(P0.05)。结论 金属基质酶MMP-9在胚胎停育发生过程中起关键的作用,MMP-9/TIMP-3的平衡失调可能是导致胚胎停育的主要原因之一。     

米非司酮流产蜕膜组织中白血病抑制因子表达的研究

目的探讨早孕妇女米非司酮药物流产与非药物人工流产的蜕膜组织中白血病抑制因子（LIF）表达的差异,分析米非司酮的致流产作用与LIF维持妊娠作用之间的关系。方法运用免疫组织化学技术检测23例米非司酮流产妇女蜕膜组织LIF蛋白的表达,并与20例非药物人工流产蜕膜组织进行对照。结果LIF蛋白在所有蜕膜标本中均有表达,其表达强度在米非司酮流产蜕膜组织和非药物人工流产蜕膜组织中无明显差异（P〉0.05）。结论米非司酮对早孕蜕膜组织中LIF的表达可能无明显影响。     

β-catenin及DDK1在URSA患者的绒毛滋养层细胞和蜕膜组织中表达

目的分析β-链蛋白(β-catenin)及重组人Dickkopf相关蛋白1(DDK1)在不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者的绒毛滋养层细胞和蜕膜组织中表达,为URSA的诊断与治疗提供理论依据。方法以2014年2月~2016年2月,医院收治的URSA患者40例,作为研究对象,入选病例组,另选择同期收治的正常妊娠早期女性40例,纳入对照组。人工流产术后,取蜕膜以及绒毛组织,一部分迅速放入无RNA酶的EP管中,液氮下保存,进行实时定量PCR,免疫组化染色镜下检查,另一部分直接采用4%福尔马林溶液固定,进行蛋白提取与Western blot分析。结果病例组的绒毛组织、蜕膜组织β-catenin蛋白光密度与细胞中β-catenin蛋白表达低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);病例组绒毛组织、蜕膜组织β-catenin蛋白高表达率低于对照组,病例组细胞滋养细胞膜浅黄色着色率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。病例组绒毛组织、蜕膜组织中的DKK1 m RNA水平分别是对照组的1.84、2.34倍。结论 URSA患者的绒毛滋养层细胞和蜕膜组织中β-catenin蛋白表达显著下降,DDK1 m RNA水平上升。     

复发性流产患者蜕膜组织NK细胞受体的表达

为探讨子宫蜕膜组织NK细胞受体的表达与复发性流产发病之间的关系,采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组织化学法检测复发性难免流产及正常早孕蜕膜组织的NK细胞受体KIR2DL4、ILT-2、ILT-4 mRNA及其蛋白的表达水平。研究结果显示:难免流产组KIR2DL4、ILT-2、ILT-4 mRNA水平明显低于正常妊娠组,免疫组化的结果也显示难免流产组KIR2DL4、ILT-2的分布密度低于正常妊娠组。该结果提示:NK细胞受体的表达水平与难免流产有一定关联。推测复发性流产患者KIR2DL4表达下调,可能会影响早孕期蜕膜化的关键进程,进而对妊娠结局产生不良影响;而ILT-2、ILT-4表达下调,可能使得免疫细胞活化阈值下降,导致局部效应细胞功能紊乱,最终发生流产。     

细胞凋亡基因及相关蛋白在早期自然流产胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达

目的探讨自然流产和正常人流患者胎盘绒毛和蜕膜组织细胞增殖与凋亡的变化规律,及相关细胞因子在胎盘组织生长发育中的表达意义。方法应用免疫组织化学、末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记法（terminal de-oxynucleotidy transferase mediated dUTP-biotin nick end labing,TUNEL）检测第40-90天自然流产和正常人流患者胎盘组织中细胞凋亡的表达状况。结果第40-90天的正常人流患者的绒毛和蜕膜组织细胞的增殖占主导地位,大部分细胞增殖活跃,细胞的增殖与凋亡始终处于一种动态平衡;而自然流产患者的绒毛和蜕膜组织中,凋亡细胞的比例明显增大,细胞增殖与凋亡的动态平衡被打破。结论妊娠妇女胎盘组织内细胞凋亡比例增高,细胞增殖与凋亡的动态平衡被打破是自然流产发生的基础。     

Bcl-2和Bax蛋白在人早孕胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达

目的探讨Bcl-2和Bax蛋白在人早孕绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测Bcl-2和Bax蛋白在孕5~7周绒毛和蜕膜组织细胞中的表达,用真彩色病理图像分析系统4.0图像分析软件测定Bcl-2和Bax蛋白表达的积分吸光度值。结果Bc1-2蛋白主要分布于孕5~7周绒毛合体滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质和细胞核中,蛋白表达积分吸光度值依次降低,其差异无统计学意义(P>0.05)。Bax蛋白在孕5~7周绒毛细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞中均未见表达;孕6周,Bax蛋白表达于极少部分蜕膜细胞的细胞质中。结论Bc1-2和Bax蛋白在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。     

CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的研究CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学染色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者（病例组）和正常人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中的表达情况;HE染色后光镜下观察不明原因自然流产患者绒毛与蜕膜组织的形态学变化。结果免疫组化染色结果显示：两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层、蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均强于对照组,两组比较,有显著性差异（P〈0.01）。病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性;HE染色可见不明原因自然流产患者绒毛组织的滋养层变薄、滋养层细胞变性甚至坏死、滋养层嗜酸性增强、绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞连接松散、蜕膜细胞空泡化、蜕膜组织中有大量炎细胞浸润。结论 CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程。