吉西他滨诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的实验研究

目的：研究吉西他滨诱导人乳腺癌细胞系MCF-7细胞产生凋亡。方法：应用MTT法、DNA电泳技术观察吉西他滨诱导人MCF-7细胞凋亡。结果：应用吉西他滨后，细胞生长抑制率随药物作用浓度的增加而逐渐增大。吉西他滨可以诱导MCF-7细胞产生典型的梯形DNA条带(DNA Ladder)，大小约180bp的整倍数递增，随吉西他滨作用时间延长和浓度的增加而逐渐增强。结论：吉西他滨可以诱导乳腺癌细胞产生细胞凋亡，并呈时间和剂量依赖性。     

白毛藤对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的:探讨Bcl-xl、p53基因在白毛藤诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中的作用。方法:不同浓度白毛藤作用于MCF-7细胞48h后,荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡情况,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化。结果:白毛藤能诱导MCF-7细胞凋亡,并且上调p53和降低Bcl-xl表达。结论:白毛藤抑制人乳腺癌MCF-7细胞细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与激活p53、抑制Bcl-xl表达有关。     

异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用及其机制研究

目的研究异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法体外培养MCF-7细胞,分为对照组及不同浓度异乌药内酯处理组。采用MTT实验检测异乌药内酯对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术和TUNEL染色法检测异乌药内酯对MCF-7细胞周期、线粒体膜电位及细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测与细胞凋亡密切相关的蛋白表达情况。结果异乌药内酯以时间和剂量依赖性抑制MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡;能够将MCF-7细胞周期阻滞在G2/M期,诱导线粒体膜电位去极化;上调cleaved Caspase-3和促凋亡蛋白Bax表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导MCF-7细胞的凋亡。结论异乌药内酯对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性,其作用机制可能是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

苦参碱对MCF-7细胞Fas、VEGF及端粒酶活性的影响

目的 研究苦参碱对人乳腺癌MCF-7细胞Fas、VEGF及端粒酶活性的影响。方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,随机分组,实验组细胞加入苦参碱溶液,对照组或阴性对照组细胞加入等量培养液,阳性对照组细胞加入端粒酶抑制剂莪术油。采用倒置显微镜下观察细胞形态学变化;TRAP-ELISA法检测端粒酶活性;免疫细胞化学法检测MCF-7细胞中Fas、VEGF蛋白表达情况。结果 苦参碱对乳腺癌细胞有明显的生长抑制作用和促凋亡作用;不同浓度苦参碱处理MCF-7细胞24、48、72 h后,端粒酶活性随苦参碱浓度增加和作用时间延长而逐渐下降,呈剂量—效应正相关和时间—效应正相关;苦参碱能够上调MCF-7细胞Fas蛋白表达和下调MCF-7细胞VEGF蛋白表达。结论 苦参碱对MCF-7细胞具有明显的生长抑制作用和促凋亡作用,可能是通过上调Fas蛋白表达、抑制端粒酶活性诱导乳腺癌细胞凋亡及通过下调VEGF蛋白表达,抑制肿瘤血管形成等实现的。     

万寿菊叶黄素对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响

目的:研究万寿菊叶黄素对乳腺癌MCF-7细胞株增殖和凋亡的影响。方法:选用对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞为研究对象。按随机分配原则,将其分为六组:叶黄素(lutein)处理组浓度分别为5、10、20、40、50μg/m L,未处理组作为对照组。用不同浓度的叶黄素分别处理MCF-7细胞,并培养12、24、48h,噻唑蓝(MTT)法计算乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率;流式细胞法检测MCF-7乳腺癌细胞凋亡率。结果:乳腺癌MCF-7细胞在相同的培养条件下,随着叶黄素浓度升高,叶黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用及凋亡率显著增加。差异有统计学意义(P0.05)。即相同的作用时间,用药浓度越大时,对MCF-7细胞的抑制作用和凋亡作用越强。用相同浓度的叶黄素处理MCF-7细胞,随着细胞的培养时间逐渐增加,细胞的增值抑制率及凋亡率呈明显上升趋势。且差异有统计学意义(P0.05)。结论:万寿菊叶黄素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖有抑制作用,并能诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

四氢姜黄素对MCF-7细胞增殖、凋亡及转移的作用

目的 探讨四氢姜黄素对乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡及转移的作用.方法 采用CCK8和克隆形成试验测定四氢姜黄素对MCF-7细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测四氢姜黄素对MCF-7细胞凋亡的作用,细胞划痕试验、Transwell试验检测四氢姜黄素对MCF-7细胞转移、侵袭能力的影响,Western blot法检测四氢姜...     

阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞 抑制作用机制的研究

目的:研究小鼠阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用的机制。方法:用1.08 g.mL-1阳和汤按小鼠体重20 mL.kg-1连续ig 7 d,末次给药1 h采血,分离得含阳和汤1 g.mL-1的血清(YHDS)。用SMY培养细胞24 h,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖,软琼脂克隆形成法检测细胞分化,Western blotting检测Bax/Bcl-2表达,原位末端标记检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位。结果:小鼠阳和汤血清能促进阿霉素引起的MCF-7细胞生长抑制(抑制率为61.25%±1.66%,P<0.05),上调MCF-7细胞Bax/Bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。小鼠阳和汤血清对MCF-7细胞有诱导分化作用(与对照组比较克隆数减少了68.4%,P<0.05)。结论:阳和汤血清有增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用,其机制与易化肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞分化有关。     

逍遥散诱导乳腺癌细胞凋亡实验研究

目的:研究逍遥散提取液诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。方法:应用形态学观察和流式细胞术等方法对逍遥散提取液处理的人乳腺癌(MCF-7)细胞进行了检测和观察,并运用caspase-3抑制剂检测凋亡。结果:逍遥散提取液处理后24h细胞具有典型的凋亡形态特征;用流式细胞仪测定细胞周期,可见明显的凋亡峰;caspase-3抑制剂阻碍凋亡的发生。结论:逍遥散提取液可诱导人乳腺癌(MCF-7)细胞发生凋亡,其诱导细胞凋亡的机制可能部分是通过Caspase-3途径。     

基于肿瘤干细胞学说探究天花粉蛋白干预乳腺癌耐药株SP细胞的实验研究

目的:研究天花粉蛋白(TCS)对乳腺癌紫杉醇耐药株侧群细胞(MCF-7/PTX-SP细胞)的诱导凋亡作用,从干细胞角度探讨其作用机理。方法:FACS分选MCF-7/PTX细胞中的SP细胞,流式细胞仪检测SP细胞、非SP细胞中CD~+_(44)CD~-_(24)细胞比例、软琼脂克隆形成实验对其进行鉴定;流式细胞仪检测不同浓度TCS对SP细胞的促凋亡作用;RT-PCR法检测不同浓度TCS对SP细胞内Bcl-2和Bax基因表达的影响。结果:非SP细胞及SP细胞中CD~+_(44)/CD~-_(24)细胞的比例分别为0.47%和59.14%;与非SP细胞相比,SP细胞具有更高的体外克隆形成能力;TCS对SP细胞具有凋亡诱导作用,随着药物浓度的增高,SP细胞的凋亡率也随之升高,差异有统计学意义(t1=-13.751,P0.01;t2=-10.892,P0.01;t3=-6.999,P0.01);不同浓度TCS处理后SP细胞内Bax mRNA的表达量呈明显的剂量依赖性上升趋势(P0.01),而Bcl-2 mRNA的表达变化无统计学差异(P0.05)。各浓度组Bcl-2/Bax值呈减少趋势(P0.01)。结论:天花粉蛋白对乳腺癌耐药株侧群细胞具有凋亡诱导作用,其机制可能与上调Bax基因的表达有关。     

人参皂苷Rg3对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响

目的:研究人参皂苷Rg3对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的作用机制。方法:将人乳腺癌细胞株MCF-7作为研究对象,用CCK-8、流式细胞仪等方法检测人参皂苷Rg3对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖及凋亡的影响。结果:人参皂苷Rg3对抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖作用在一定范围内具有时间和浓度呈正相关的特点,随着时间的延长及药物浓度的增加,增殖抑制的作用增强,且呈剂量依赖性关系,24 h、48 h、72 h的IC50值分别为210.26μg/mL、145.78μg/mL、91.78μg/mL。药物作用24 h后,G2期细胞百分比明显增加,G1、S期细胞百分比明显减少。随着人参皂苷Rg3浓度的增加,明显增强诱导细胞的凋亡(P 0.05)。结论:人参皂苷Rg3可对MCF-7细胞产生抑制作用,使细胞阻滞于G1期,并诱导细胞凋亡。     

白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡

目的 研究白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin-V和PI细胞染色和流式细胞仪检测，观察白藜芦醇(0．1、0．2、0．5 mmol／L)对脱落培养胃癌细胞BGC823、SGC7901和HGC27的生长状态、细胞周期的影响及诱导脱落凋亡的作用。结果 倒置显微镜下发现脱落培养的胃癌细胞聚集成团生长，0．1mmol／L白藜芦醇作用细胞后可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团；流式细胞仪检测和Annxin-V和PI细胞染色表明0．5mmol／L白藜芦醇可分别阻滞脱落培养的BGc823、sGc7901和HGc27细胞于G0／G1、S、G2／M期，并可诱导这3株胃癌细胞发生脱落凋亡，其中自藜芦醇诱导HGC27细胞脱落凋亡比例达19．3％，远高于其他两株胃癌细胞。结论自藜芦醇可诱导胃癌细胞发生脱落凋亡。     

贝母素甲抑制人乳腺癌细胞MCF-7/TAM增殖及其对细胞凋亡的影响

目的:探讨贝母素甲抑制耐三苯氧胺人乳腺癌细胞MCF-7/TAM的增殖及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测贝母素甲作用于MCF-7/TAM细胞后的抑制率;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用免疫细胞化学法检测Bcl-2表达变化。结果:贝母素甲对MCF-7/TAM细胞有明显的抑制作用,呈浓度和时间依赖性。作用48h后能诱导细胞凋亡,细胞周期被阻滞于G1期(P0.05)。免疫细胞化学法检测Bcl-2表达减弱(P0.01)。结论:贝母素甲可抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

姜黄素对结肠癌SW-480细胞抗失巢凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对结肠癌细胞抗失巢凋亡的影响。方法:采用不同浓度的姜黄素处理结肠癌SW-480细胞,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TUNEL)法检测结肠癌细胞抗失巢凋亡,采用软琼脂集落形成试验检测细胞的生长增殖。结果:姜黄素能有效地抑制结肠癌SW-480细胞锚着不依赖性增殖,且呈浓度依赖性。结肠癌细胞经姜黄素处理后,可促进失巢凋亡且与时间和浓度相关。结论:姜黄素可有效地抑制结肠癌细胞锚着不依赖性增殖,其机制可能与促进失巢凋亡有关。     

温肾活血法中药对人乳腺癌MCF-7细胞株体内外生长的影响

目的：通过对MCF－7细胞株体内外的研究,揭示温肾活血法中药抑制乳腺癌的作用机理。方法：体外实验用MTT法测定药物血清对细胞的杀伤作用,并用FCM检测各组细胞的细胞周期,体内实验观察药物对体内移植瘤生长的影响。结果：温肾活血中药血清在培养液中浓度为10%、20％和30％时,对MCF－7的体外生长抑制率达22.7%、33.1％和37.4%(P＜0.05）。温肾活血法中药灌饲MCF－7荷瘤裸小鼠后,在剂量为8g/kg、4g/kg、2g/kg时抑瘤率分别为47.5％、44.2％、51.0％。结论：温肾活血法中药可以抑制乳腺癌,其机理可能是通过抑制癌细胞的DNA合成而达到抑制癌细胞的生长。     

中药方剂R1对耐阿霉素人乳腺癌细胞P糖蛋白表达的影响

免疫细胞化学技术和Western blot分析证实MCF7adr细胞P-糖蛋白(PGP)过量表达，而MCF7细胞无PGP表达。1：60R1(复方R1)和1：90R1处理细胞2小时、3小时均使MCF7adr细胞PGP表达下降，并且与药物作用时间和浓度有关。Northern blot分析示MCFT7adr细胞mdr2 mRNA高表达，而MCFT细胞无表达。1：60R1、1：90R1处理2小时或3小时均使MCF7adr细胞mdr1 RNA表达降低，且随着时间的延长而更加明显。浓度(1：60R1,1：90R1)改变对耐药细胞mdr1 mRNA表达下降的影响程度无明显差异。结果提示R1的逆转作用机理之一可能与其从蛋白质和mRNA水平使耐药细胞PGP表达下降，从而增加细胞内药物聚集量和抗癌药细胞毒性有关。     

中药功劳木对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1的作用研究

目的：研究中药功劳木对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1的作用。方法：应用台盼蓝拒染试验测试应用功劳木后ADM对MCF7/ADM的活细胞率：MTT法测试功劳木的细胞毒性及对ADM的增效;Rh123荧光技术检测应用功劳木对耐药细胞内药物浓度的影响,流式细胞仪检测功劳木对MDR1的影响。结果：实验组浓度为10 mg/L以及20mg/L时对MCF7/ADM的抑制分别为（0.218±0.081）,（0.202±0.033）,均明显高于对照组（0.146±0.062）,（0.153±0.018）,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组对MCF-7/S以及MCF7/ADM的抑制分别为（0.204±0.076）,（51.08±0.63）,明显高于对照组的（0.075±0.032）及（36.55±0.53）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：GLM对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1具有抑制作用。     

Selective Inhibition of Cell Proliferation by Lycopene in MCF‐7 Breast Cancer Cells In vitro: A Proteomic Analysis

Lycopene, a red pigmented carotenoid present in many fruits and vegetables such as tomatoes, has been associated with the reduced risk of breast cancer. This study sought to identify proteins modulated by lycopene during cell proliferation of the breast cancer cell line MCF‐7 to gain an understanding into its mechanism of action. MCF‐7 breast cancer cells and MCF‐10 normal breast cells were treated with 0, 2, 4, 6, 8, and 10 μM of lycopene for 72 h. 3‐(4,5‐Dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide (MTT) tetrazolium reduction assay was used to measure cell proliferation and two‐dimensional fluorescence difference gel electrophoresis to assess the changes in protein expression, which were identified using MALDI‐ToF/ToF (matrix‐assisted laser desorption ionization tandem time‐of‐flight) and Mascot database search. MTT and cell proliferation assays showed that lycopene selectively inhibited the growth of MCF‐7 but not MCF‐10 cells. Difference gel electrophoresis analysis revealed that proteins in the MCF‐7 cells respond differently to lycopene compared with the MCF‐10 cells. Lycopene altered the expression levels of proteins such as Cytokeratin 8/18 (CK8/18), CK19 and their post translational status. We have shown that lycopene inhibits cell proliferation in MCF‐7 human breast cancer cells but not in the MCF‐10 mammary epithelial cells. Lycopene was shown to modulate cell cycle proteins such as beta tubulin, CK8/18, CK19 and heat shock proteins. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

Cytotoxicity of plants from Malaysia and Thailand used traditionally to treat cancer

The SRB cytotoxicity assay was used to screen extracts and isolated constituents of some traditional medicinal plants from Malaysia and Thailand against two human cancer cell lines, COR L23 lung cancer cell line and MCF7 breast cancer cell line and the non-cancer MCF5 cell line. Five out of the seven species tested, i.e. Thai Alpinia galanga, Alpinia officinarum, Cayratia japonica, Physalis minima, Tabernaemontana divaricata, exhibited interesting cytotoxicity activity and this is the first report of cytotoxicity from any Cayratia species. Following bioassay-guided fractionation, 1′-acetoxychavicol acetate (48 h exposure against COR L23 cells, IC₅₀ 7.8 μM against MCF7 cells, IC₅₀ 23.9 μM) was isolated as the major cytotoxic component of the Alpinia species, physalin F as the major cytotoxic component of Physalis minima (48 h exposure against COR L23 cells IC₅₀ 0.4 μM against MCF7 cells, IC₅₀ 0.59 μM). The Malaysian Alpinia galanga showed weak activity compared with the Thai sample and this was shown to be due to the relatively high amounts of 1′-acetoxychavicol acetate present in the Thai sample.     

透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的:探讨透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞体外增殖的影响。方法:用不同浓度的透骨草提取物分别处理肿瘤细胞,采用MTT法和集落形成试验观察透骨草提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果:3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞增殖抑制率与对照组相比显著增加(P<0.05)。3.125～100μg/mL透骨草提取物处理的肿瘤细胞集落形成率与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:透骨草提取物对人卵巢癌SK-OV-3细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人宫颈癌胞Hela细、人肝癌HepG-2细胞、人肺癌A549细胞增殖有显著的抑制作用,且呈一定的剂量依赖性。