圣草酚对实验性结肠炎小鼠Nrf2 / HO-1 通路的影响

目的:探讨圣草酚(EDT)干预实验性结肠炎小鼠对Nrf2/HO-1通路的影响。方法:将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、DSS模型组、DSS+EDT低剂量组(EDT 20 mg/kg)、DSS+EDT高剂量组(EDT 40 mg/kg)4组,每组8只,小鼠自由饮用3%DSS溶液制成溃疡性结肠炎模型,并同时予以圣草酚腹腔注射7 d。对小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分;比较各组小鼠结肠长度;HE染色观察结肠病理学变化;检测结肠组织MDA含量、MPO和SOD活性;Real-time PCR法检测各组小鼠结肠组织Nrf2、HO-1、NOQ1、TNF-α、IL-6 mRNA表达情况;Western blot检测各组小鼠结肠组织中Nrf2、HO-1、NOQ1变化情况。结果:与DSS组比较,空白组、圣草酚低、高浓度治疗组DAI评分、结肠长度及病理学变化明显改善,差异有统计学意义(P0.05)。空白组、圣草酚低、高浓度治疗组炎症因子TNF-α、IL-6水平,MPO活性及MDA含量显著低于模型组,SOD活性显著高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。与DSS组相比,圣草酚低、高浓度组显著增加Nrf2、H0-1、NOQ1表达(P0.01)。结论:圣草酚对小鼠结肠炎可以起到缓解作用,可能与激活Nrf2/HO-1通路发挥抗氧化、抗炎作用有关。     

袖状胃减容术对2型糖尿病大鼠肝脏Nrf2介导的氧化应激反应的影响

目的观察袖状胃减容术对2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用,初步探讨其作用机制。方法 SPF级SD大鼠45只,采用腹腔注射STZ法诱导2型糖尿病大鼠模型,模型成功后随机分为2型糖尿病大鼠模型组(DM组)、袖状胃减容术干预组(SG组),假手术组(Sham组),术后连续观察8周,ELISA法检测各组大鼠肝损伤标志物ALT、AST及氧化应激细胞因子MDA、SOD、GSH表达水平,HE染色观察病理学变化,Western blot及qPCR法检测Nrf2、HO-1表达水平。结果 STZ诱导后的糖尿病大鼠,于8w后出现明显的肝功能损伤及氧化应激反应,血清ALT、AST、MDA含量明显升高,SOD、GSH含量明显降低,病理学可见肝脏组织结构模糊,肝小叶内出现局灶性坏死,部分肝细胞颗粒样变性。袖状胃减容术术后8w,SG组大鼠肝功能明显得到改善,血清ALT、AST、MDA含量明显降低,SOD、GSHSD明显升高,同时上调Nrf2、HO-1的表达水平。结论袖状胃减容术改善糖尿病大鼠机体内高糖环境下肝功能损伤,与其上调Nrf2、HO-1的表达,抑制肝脏氧化应激反应相关。     

连翘苷对肥胖症大鼠脂代谢紊乱和氧化应激的影响及机制研究

目的 探究连翘苷对肥胖症大鼠模型脂代谢紊乱和氧化应激的影响。 方法 采用高脂饲料喂养 建立肥胖症大鼠模型 (将大鼠随机分为 6 组: 对照组、 模型组、 连翘苷 5 mg / kg 组、 连翘苷 10 mg / kg 组、 连翘苷 20 mg / kg 组和二甲双胍组); 检测大鼠体重; 卷尺测量肛鼻长计算 Lee’s 指数; 血糖仪检测血糖水 平; 油红 O 染色检测脂质蓄积程度; 全自动生化分析仪检测 TC、 TG、 LDL-C 和 HDL-C 水平; 试剂盒检测 ALT、 AST、 ALP 水平和 SOD、 MDA、 GSH-Px 含量。 Western 印迹检测 p-Nrf2、 Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平。 结果 与对照组相比较, 模型组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平升高, TC、 TG 和 LDL-C 水平升高, HDL-C 水平降低, ALT、 AST 和 ALP 水平升高, SOD、 GSH-Px 含量降低, MDA 含量升高, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平降低, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 与模型组相比较, 连翘苷 10、 20 mg / kg 组和 二甲双胍组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平降低, 脂质蓄积程度明显改善, TC、 TG 和 LDL-C 水平降低, HDL-C 水平升高, ALT、 AST 和 ALP 水平降低, SOD、 GSH-Px 含量升高, MDA 含量降低, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平升高, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 结论 连翘苷可改善肥胖症大鼠模型氧化应激 及脂代谢紊乱, 这可能是通过活化 Nrf2 / HO-1 信号通路实现的。     

茯苓酸通过激活Nrf2 / HO-1 信号通路改善OX-LDL 诱导的人脐静脉 内皮细胞损伤

目的:研究茯苓酸(PA)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的影响及其作用的信号通路。方法:预先使用不同浓度的茯苓酸预处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)12 h,再加入OX-LDL刺激HUVEC 24 h,采用CCK-8法检测HUVEC细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,采用WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用蛋白免疫印迹法检测Nrf2蛋白、HO-1蛋白以及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)的表达水平。使用RT-PCR法检测内皮细胞在各种处理条件下Nrf2/HO-1的mRNA表达情况。结果:与对照组相比,OX-LDL作用于HUVEC后,能够明显降低细胞活力,增加细胞凋亡率及促凋亡相关蛋白的表达,并使细胞内ROS产生增多,促氧化物(MDA)表达增加,抗氧化物(SOD)活性降低。而茯苓酸预处理后,能显著改善OX-LDL对内皮细胞活力及凋亡的影响,减轻氧化应激损伤。蛋白免疫印迹法及RT-PCR结果显示相比于OX-LDL组,PA预处理后通路蛋白Nrf2/HO-1表达增加,并且细胞内Nrf2/HO-1的mRNA表达水平上调,而使用HO-1特异性抑制剂锌原卟啉(Znpp)后能消除这一作用。结论:茯苓酸(PA)可通过激活Nrf2/HO-1信号通路,减轻OX-LDL诱导的内皮细胞氧化应激损伤。     

圣草次苷调控MPTP 诱导的慢性小鼠帕金森疾病和机制研究

目的:探究圣草次苷减轻1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的慢性小鼠帕金森疾病和机制。方法:选取75只小鼠采用随机分组法分为:健康对照组、模型组、圣草次苷低剂量组(8 mg/kg)、圣草次苷中剂量组(16 mg/kg)、圣草次苷高剂量组(32 mg/kg),每组各15只;腹腔注射20 mg/(kg·d)的MPTP溶液,持续一周制成帕金森小鼠模型;给药组小鼠分别使用对应剂量的圣草次苷干预2周。使用旷场实验、悬挂实验、游泳实验检测小鼠行为;使用HE染色和TUNEL染色检测小鼠神经元细胞的凋亡情况;使用蛋白质印迹法检测小鼠脑组织Bax、Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9的表达情况;使用试剂盒检测小鼠黑质中SOD、MDA、LDH、GSH的含量;使用ELISA检测小鼠外周血中IL-6、TNF-α、iNOS和IL-10的含量;使用蛋白质印迹检测信号通路Nrf2、HO-1、NQO1的表达情况。结果:HE染色和TUNEL染色结果显示相比空白对照组,模型组小鼠神经细胞凋亡率显著升高(P0.05),相比模型组,使用圣草次苷处理各组小鼠神经细胞凋亡率显著降低(P0.05);相比空白对照组,模型组小鼠旷场移动路程、旷场中心区域活动时间、游泳时间和悬挂时间、SOD水平、Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著降低(P0.05),Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平、MDA、LDH、GSH、TNF-α、IL-6、iNOS水平显著升高(P0.05),IL-10无显著变化(P0.05);相比模型组圣草次苷低剂量组Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著升高,Bax/Bcl-2显著降低(P0.05),其余各指标均无显著变化(P0.05);相比模型组,圣草次苷中剂量组和圣草次苷高剂量组旷场移动路程、旷场中心区域活动时间、游泳时间、SOD、IL-10、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著升高(P0.05),Bax/Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平、MDA、LDH、GSH、TNF-α、IL-6、iNOS显降低(P0.05)。结论:圣草次苷可以通过抑制氧化应激、炎症反应,神经细胞的凋亡并激活Nrf2/HO-1信号通路缓解MPTP诱导的慢性PD。     

丹参酮IIA对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 研究丹参酮IIA(tanshinone ⅡA, Tan ⅡA)对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的抗氧化、保护作用及其可能的作用机制。 方法 将C57BL/6J小鼠随机分成正常组、CCl4组以及Tan ⅡA保护组(Tan ⅡA 20 mg/kg+CCl4),每组10只。腹腔注射CCl4构建小鼠急性肝损伤模型。计算各组小鼠的肝脏指数,检测血清AST和ALT活性,测定肝组织SOD活性及GSH、MDA含量,HE染色观察肝组织病理变化,免疫组织化学法和Western blot检测肝组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Nrf2和HO-1蛋白表达水平。 结果 与CCl4组相比,Tan ⅡA保护组肝脏指数显著下降(P<0.01),血清AST(P<0.01)和ALT活性降低(P<0.05),肝组织SOD活性(P<0.01)及GSH含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),肝组织病理变化得到显著改善。同时,Tan ⅡA使肝组织p-PI3K和p-Akt表达水平明显升高(P<0.01),显著诱导Nrf2转位入核(P<0.01),促使其下游靶蛋白HO-1表达水平明显升高(P<0.01)。 结论 Tan ⅡA能够显著改善CCl4诱导的急性肝损伤,其机制可能与PI3K/Akt/Nrf2/HO-1信号通路有关。     

葛花总黄酮通过调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨葛花总黄酮(total flavonoids of Pueraria lobate,TFF)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的影响及机制.方法 雄性SD大鼠60只,利用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型.糖尿病大鼠随机分成三组:糖尿病组(DM)、TFF组(200 mg/kg)及二甲双胍组(Met,75 mg/kg,阳性对照)灌胃治疗,另取15只正常大鼠作为对照组(CON).12周后,检测各组大鼠血糖、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色检测大鼠RGC数量,免疫组织化学染色及Western blot检测大鼠视网膜ECH相关蛋白1(ECH-associated protein 1,Keap1)、核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor-2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达.结果 与CON组相比,DM组血糖、MDA含量、Keap1及Nrf2表达明显增加,SOD活性及HO-1表达明显下降.而经过12周治疗后上述表现均有明显改善.结论 TFF通过降低血糖,增强大鼠视网膜的抗氧化能力,保护糖尿病状态下的RGC损伤,与调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路有关.     

丙二醛通过抑制Nrf2/ARE促进肾小球系膜细胞凋亡

目的探索丙二醛(MDA)对糖尿病肾病的影响机制。方法用终浓度为0、1、5、10和50μmol/L的MDA处理肾小球系膜细胞(GMC),MTT法检测细胞活性,Annexin V-FITC法检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot法检测Nrf2,HO-1和γGCL表达。结果 MDA剂量依赖的抑制肾小球系膜细胞的活性。MDA浓度为5μmol/L可诱导细胞内大量活性氧(ROS)产生(P0.05),抗氧化剂t BHQ可缓解MDA诱导的细胞活性的下降。MDA抑制了抗氧化反应原件(ARE)HO-1和γGCL的表达,以及Nrf2的表达水平(P0.05)。结论 MDA可通过抑制Nrf2/ARE来调控ROS生成,抑制肾小球系膜细胞的活性。     

Nrf2/HO-1信号通路在6-羟基多巴胺帕金森病模型大鼠神经损伤中的作用

目的探究核因子E2-相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在6-羟基多巴胺诱导帕金森病(PD)模型大鼠神经损伤中的作用。方法将大鼠分为对照组、PD组、Nrf2激活剂(Hesperin)组、Nrf2抑制剂(Brusatol)组,每组12只,APO旋转诱导实验评估大鼠神经行为学变化并观察各组大鼠异常不自主(AIM)评分;免疫组化检测脑组织黑质中酪氨酸羟化酶(TH)阳性表达情况;透射电镜观察大鼠神经元细胞形态变化;对比各组脑黑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。体外培养SH-SY5Y细胞诱导PD模型细胞,将细胞分为对照组、PD组、Hesperin组、Brusatol组,MTT检测各组细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测脑黑质部以及细胞中Nrf2、HO-1、Bcl2、caspase3、Bax蛋白表达情况。结果与对照组相比,PD组APO诱导圈数、AIM评分均升高,转棒滞留时间缩短,脑组织黑质区TH神经元比例降低,细胞核皱缩,核内异染色质变多呈小块状分布;SOD、GSH-Px、CAT水平降低,MDA水平升高,PD组细胞增殖抑制率、凋亡率升高,脑黑质组织以及细胞中Nrf2、HO-1、Bcl2蛋白表达降低,caspase3、Bax蛋白表达升高,差异均具有显著性(P0.05);与PD组相比,Hesperin组和PD组APO诱导圈数、AIM评分均降低,转棒滞留时间增长,脑组织黑质区TH神经元比例升高,细胞核形态明显恢复;SOD、GSH-Px、CAT水平升高,MDA水平降低,细胞增殖抑制率、凋亡率降低,脑黑质组织以及细胞中Nrf2、HO-1、Bcl2蛋白表达升高,caspase3、Bax蛋白表达降低,差异均具有显著性(P 0.05);与PD组相比,Brusatol组APO诱导圈数、AIM评分均升高,转棒滞留时间缩短,脑组织黑质区TH神经元比例降低,细胞核严重皱缩;SOD、GSH-Px、CAT水平降低,MDA水平升高,PD组细胞增殖抑制率、凋亡率升高,脑黑质组织以及细胞中Nrf2、HO-1、Bcl2蛋白表达降低,caspase3、Bax蛋白表达升高,差异均具有显著性(P 0.05)。结论激活Nrf2/HO-1信号通路可缓解PD大鼠神经损伤,可能与PD的发生发展有关。     

赶黄草配伍葛花对乙醇诱导下L-02肝细胞的影响

目的:探究赶黄草配伍葛花制备的含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞的影响及其可能机制。方法:分别制备不同配比含药血清后,将L-02肝细胞分为6组进行实验:空白对照组,模型组,赶黄草配伍葛花1∶1组、2∶1组和1∶2组,凯希莱组。MTT法检测含药血清对乙醇诱导的L-02细胞存活率的影响;酶标法检测培养液中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)及受损细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平;realtime PCR法和Western blot检测赶黄草配伍葛花对L-02肝细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达的影响。结果:与空白对照组相比,模型组ALT、AST及MDA水平明显升高,SOD活性明显降低(P0.01);与模型组相比,各药物组ALT、AST及MDA水平明显降低,SOD活性明显升高(P0.01)。机理研究中,与空白对照组相比,模型组TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达显著升高,Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组相比,各配伍组TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达显著降低,Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达显著升高(P0.01)。结论:赶黄草配伍葛花含药血清可能通过下调TNF-α和IL-6的表达,上调Nrf2和HO-1的表达,从而降低L-02肝细胞的炎症反应并减轻氧化应激,进而发挥治疗酒精性肝损伤的作用。     

HO-1对糖尿病大鼠早期肾损伤的影响

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)水平的变化对糖尿病肾损伤时肾脏内皮功能及肾损伤的影响。方法链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,分成4组:对照组、糖尿病(DM)组、Hemin(HO-1诱导剂)+DM组、ZnPP(HO-1抑制剂)+DM组。在5、10、15周时收集标本;IHC及RT-PCR法观察肾组织HO-1的表达,检测MDA含量、SOD活性、NO及iNOS、eNOS水平的变化。同时收集各组大鼠24 h尿液测尿白蛋白排泄率(UAER)指标。结果与对照组比较,DM时大鼠肾脏局部MDA增加,HO-1的表达在5周时即增强,10周时有显著性差异(P<0.05)。在对照组肾组织中iNOS高于eNOS、DM时,iNOS下降而eNOS明显升高;与DM5周组比较,Hemin+DM组HO-1表达明显增强(P<0.05),MDA含量下降,eNOS升高受抑制,UAER减少(P<0.05);ZnPP+DM组HO-1表达减弱,MDA含量升高(P<0.01),eNOS增加,NO、UAER明显增加(P<0.05)。结论提高肾脏HO-1表达水平可减缓DM早期肾脏损伤。     

汉黄芩素对LPS-ATP 诱导的巨噬细胞氧化应激的抑制作用

目的:探究汉黄芩素对巨噬细胞炎症反应中氧化应激的抑制作用。方法:将巨噬细胞RAW264.7分为对照组(正常培养不予刺激),模型组(LPS和ATP联合刺激,LPS刺激4 h后加入ATP刺激30 min),汉黄芩素干预组(同样予以LPS和ATP联合刺激,LPS刺激的同时加入汉黄芩素)。检测试剂盒检测SOD、NO、MDA分泌水平,免疫荧光检测各组细胞Nrf2的核转位情况,RT-qPCR检测Nrf2和抗氧化酶mRNA转录水平。结果:与模型组相比,汉黄芩素可减少LPS-ATP联合刺激的巨噬细胞MDA、NO分泌水平,上调Nrf2 mRNA的表达并促进胞浆内Nrf2的核转位,上调胞内抗氧化酶HO-1、SOD、GPx、CAT及NQO-1 mRNA的转录,增加SOD的活性。结论:汉黄芩素对LPS-ATP诱导的巨噬细胞氧化应激具有抑制作用,可能是通过抑制氧化应激来下调ROS水平,起到减轻炎症反应的作用。     

基于Keap1-NF-E2相关因子2/抗氧化反应元件探讨干燥综合征模型大鼠心功能变化的机制

目的基于Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)-NF-E2相关因子-2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)探讨干燥综合征(SS)模型大鼠心功能变化的机制。方法 30只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组,每组15只。模型组大鼠两后足的足跖部皮下注射完全弗氏佐剂联合同种鼠颌下腺抗原造模,诱导SS模型。致炎30 d后观察大鼠的体质量变化、饮水量变化、颌下腺指数、脾指数、腺体的组织学变化;有创血流动力学监测SS大鼠心功能的变化;ELISA检测血清中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAC)、IL-18、IL-35;免疫组织化学方法检测ROS、活性氮自由基(RNS)、谷胱甘肽(GSH)、硫氧还蛋白(TrX)蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Keap1、Nrf2、巨噬细胞活化因子(Maf)、ARE mRNA的表达;Western blot法测定大鼠心肌组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠饮水量变化显著升高(P0.01),颌下腺指数、脾指数及体质量显著下降(P0.05);模型组大鼠心率(HR)、心脏指数(HI)、左室收缩期压(LVSP)、左室舒张期压(LVEDP)显著升高(P0.05),左室内压上升下降最大速率(±dp/dtmax)显著下降(P0.05);模型组IL-18、MDA、RNS、TAC、ROS含量均升高,而TrX、GSH、IL-35、SOD含量下降;同时,心组织Keap1、Maf、Nfr2的mRNA,HO-1、γ-GCS蛋白表达水平亦上升(P0.01)。结论 SS大鼠免疫平衡失调可能与Keap1、Maf、Nfr2的mRNA,HO-1、γ-GCS表达上调有关。     

槲皮苷联合电针疗法对免疫抑制小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响

为探讨槲皮苷(quercitrin, QI)联合电针(electroacupuncture, EA)刺激对免疫抑制小鼠免疫功能的影响,将实验小鼠随机分为对照组(Control)、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)模型组、QI组和QI+EA联合治疗组。用CTX建立免疫抑制小鼠模型后,第2 d起各组分别给予生理盐水、QI灌胃及QI灌胃联合EA刺激,连续治疗14 d。治疗结束后,称重法测定胸腺及脾脏指数;HE染色法观察脾脏组织学变化,吉姆萨染色法测定腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数;ELISA检测小鼠血浆IgG和IgM、IL-2和IL-4水平以及抗氧化相关指标如超氧化物歧化酶(superoxide diamutase, SOD)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)、过氧化氢酶(catalase, CAT)水平;FACS检测脾脏CD4~+、CD8~+T细胞亚群以及组织活性氧类(reactive oxygen species, ROS)水平;Western blotting检测脾脏组织Nrf2总蛋白及核蛋白、总NQO1、HO-1蛋白、NF-κB p65及TLR2蛋白的表达水平。结果显示,CTX组的免疫器官指数、巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数、IgG、IgM、IL-2、IL-4、SOD、CAT及CD4~+、CD8~+T细胞亚群等指标均较对照组明显降低(P0.05),而脾脏组织损伤程度、MDA、ROS及Nrf2、NQO1、HO-1、NF-κB p65、TLR2水平则均显著升高(P0.000 1);相较于CTX组,QI组小鼠免疫功能相关指标及SOD、CAT水平和Nrf2、NQO1、HO-1蛋白水平均显著升高(P0.05),而脾脏组织损伤程度、MDA、ROS及NF-κB p65、TLR2蛋白水平均显著下降(P0.05);联合EA可进一步加强QI的上述作用(P0.000 1)。由此,EA联合QI对免疫抑制小鼠有保护作用,可通过提高免疫器官功能及抗氧化水平促进小鼠的免疫力,具体作用机制可能是通过激活抗氧化应激Nrf2/ARE通路而起到提高免疫力的作用。     

比索洛尔激活Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激缓解急性心肌梗死大鼠心肌损伤

目的 探索比索洛尔对急性心肌梗死大鼠氧化应激损伤的影响及可能机制.方法 大鼠随机分为假手术组(Sham)、急性心肌梗死大鼠模型组(AMI)、比索洛尔治疗组(Bis)和比索洛尔+锌原卟啉9组(Bis+ZnPP),每组10只.造模后第8天,超声检测各组大鼠心功能;TTC染色后计算心肌梗死面积;HE和MASSON染色观察心肌损伤和纤维化程度;ELISA检测各组大鼠血清中磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH-Px)含量;Western blot检测各组大鼠心肌中核因子E2相关因子2(Nrf2)及HO-1蛋白表达情况.结果 比索洛尔显著提升心肌梗死大鼠缩短分数(FS％)及射血分数(EF％),降低左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)及左室舒张末期后壁厚度(LVPWd),减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤,抑制纤维化,降低血清中CK、CK-MB、LDH含量,降低心肌组织中MDA含量,并升高SOD、GSH-Px活性,上调心肌中Nrf2与HO-1蛋白的表达(P＜0.05).而给予HO-1抑制剂ZnPP后,Bis的上述作用均被减弱或抑制.结论 比索洛尔减轻急性心肌梗死大鼠氧化应激,与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.     

天麻素调控Nrf2信号通路在癫痫中的抗炎作用

目的:探讨天麻素调控nuclear factor erythroid 2-related factor 2(Nrf2)信号通路在癫痫中的抗炎作用及发挥神经保护作用的新机制。方法:100只SD大鼠,随机分为5组:空白对照组,模型组,50 mg/kg天麻素治疗组,100 mg/kg天麻素治疗组,200 mg/kg天麻素治疗组。模型组构建氯化锂-匹罗卡品SD大鼠癫痫模型,治疗组采用天麻素进行干预。Racine分级标准判断模型是否构建成功,免疫印迹法及免疫荧光染色的方法检测Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达含量。结果:与空白对照组相比,模型组小胶质细胞中抗氧化蛋白Nrf2和HO-1表达略有上调,炎症因子iNOS表达显著增加;经天麻素预处理的治疗组小胶质细胞中Nrf2和HO-1蛋白表达较模型组增加,而炎症因子iNOS的表达减少。结论:天麻素可能通过调控Nrf2/HO-1经典抗氧化信号通路,降低炎症因子iNOS的表达,从而在癫痫中发挥神经保护作用。     

基于Nrf2通路姜黄素抑制卡介苗感染巨噬细胞氧化应激

目的：基于Nrf2通路探讨姜黄素对卡介苗（BCG）感染巨噬细胞氧化应激的抑制作用。方法：以THP-1源性巨噬细胞建立感染模型,分为4组：对照组、BCG组、BCG+姜黄素组、BCG+姜黄素+ML385组。采用活性氧（ROS）检测试剂盒,荧光显微镜下观察各组细胞ROS荧光强度;采用比色法检测细胞还原型谷胱甘肽（GSH）含量;Western blot检测Nrf2及其下游靶基因NQO1、HO-1的蛋白表达;MTT法检测各组细胞增殖率。结果：BCG感染显著增强ROS荧光强度,降低细胞GSH含量（P<0.01）,抑制Nrf2及其下游靶基因NQO1、HO-1的蛋白表达,抑制细胞增殖（P<0.01）;而姜黄素可显著减弱ROS荧光强度,提高GSH水平（P<0.05）,促进Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达及细胞增殖（P<0.01）;Nrf2抑制剂ML385则逆转了姜黄素的上述作用。结论：姜黄素可以通过增加Nrf2的表达,诱导下游抗氧化分子的转录从而减轻BCG诱导的巨噬细胞氧化应激。     

青藤碱通过调节 Nrf2 通路保护心肌细胞免受缺氧复氧损伤 #br#

【摘要】 目的 探究青藤碱通过调节 Nrf2 通路对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响。 方法 建立缺氧复氧损伤细胞模型, CCK-8 法检测细胞存活率; 乳酸脱氢酶试剂盒检测 LDH 水平; 肌酸激酶同工酶测试盒检测CK-MB 水平; 肌钙蛋白测定测试盒检测 cTnⅠ 水平; DCFH-DA 探针检测 ROS 含量; 总超氧化物歧化酶测定试剂盒检测 SOD 含量; 测定试剂盒检测 MDA 含量; 过氧化氢酶测定试剂盒检测 CAT 含量; 谷胱甘肽过氧化物酶测试盒检测 GSH-Px 含量。 ELISA 检测 TNF-α、 IL-6 和 IL-1β 水平; Hoechst 染色检测细胞凋亡率;Western 印迹检测 Cleaved caspase-3、 Cleaved caspase-9、 Keap1、 Nrf2、 p-Nrf2、 HO-1、 NQO1 蛋白表达水平;利用 siRNA 敲减 Nrf2 低表达 Nrf2 后再次检测上述指标变化。 结果 与 OGD / R 组比较, 各剂量组细胞存活率降低, LDH、 CK-MB、 cTnⅠ 水平降低, ROS、 MDA 含量降低, SOD、 CAT 和 GSH-Px 含量升高, TNF-α、IL-6 和 IL-1β 水平降低, 细胞凋亡率降低, Cleaved caspase-3、 Cleaved caspase-9、 Keap1蛋白水平降低, pNrf2 / Nrf2、 HO-1、 NQO1 蛋白水平升高。 通过 siRNA 敲减 Nrf2 低表达 Nrf2 后, 氧化应激, 炎性反应和相关蛋白表达被逆转。 结论 青藤碱通过调节 Nrf2 通路保护心肌细胞免受缺氧复氧损伤。     

PI3K/Nrf2通路在内毒素休克兔肾损伤中的作用

 目的: 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/核因子E2相关因子2(PI3K/Nrf2)信号通路在内毒素休克兔急性肾损伤中的作用。方法: 健康清洁级雄性新西兰大白兔50只,随机分为5组(每组10只):对照组(C组)、内毒素休克模型组(L组)、渥曼青霉素+内毒素休克组(WL组)、渥曼青霉素组(W组)和二甲基亚砜组(D组)。W组、WL组经耳缘静脉注射渥曼青霉素0.6 mg/kg,D组注射二甲基亚砜0.08 mL/kg,C组和L组注射等容量生理盐水。30 min后,L组和WL组静脉注射脂多糖5 mg/kg(溶于2 mL生理盐水),C组、W组和D组注射等容量生理盐水。注射脂多糖或生理盐水后6 h处死兔,取肾组织进行肾损伤评分(HSK),测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿α1-微球蛋白(α1-MG)浓度,检测肾组织MDA含量及SOD活性,检测肾组织Nrf2和HO-1的mRNA总Akt蛋白、p-Akt蛋白、总Nrf2蛋白、p-Nrf2蛋白、核Nrf2蛋白和HO-1蛋白水平。结果: 与C组、W组及D组比较,L组和WL组HSK、BUN、Cr、α1-MG及MDA含量升高,SOD活性降低,肾组织Nrf2和HO-1的mRNA、p-Akt蛋白、Nrf2总蛋白、p-Nrf2蛋白、Nrf2核蛋白及HO-1蛋白的水平上调(P<0.05)。C组、W组和D组之间上述指标差异无统计学显著性。与L组比较,WL组HSK、BUN、Cr、α1-MG及MDA含量升高,SOD活性降低,肾组织Nrf2和HO-1的mRNA、p-Akt蛋白、Nrf2总蛋白、p-Nrf2蛋白、Nrf2核蛋白及HO-1蛋白的水平降低(P<0.05)。结论: PI3K/Nrf2通路激活是内毒素休克诱发兔急性肾损伤时机体的适应性调节反应机制之一。     

连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的改善作用

目的　研究连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的影响及相关机制。 方法　将15只 SD雌性老年大鼠（24月龄）随机分成3组,每组5只,老年对照组（Aged rats）,老年连翘苷元低剂量组[Aged rats+FA(20 mg/kg)],老年连翘高剂量组[Aged rats+FA(100 mg/kg)]。另取5只12周龄SD雌性大鼠为青年对照组（Young rats）。连翘苷元低、高剂量组大鼠灌胃给药60 d。考马斯亮蓝检测24 h尿液总蛋白并分析血清肌酐和尿素氮水平。HE染色和TUNEL染色检测肾组织病理损伤情况。Western Blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达。检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）的水平。ELISA检测血清中炎症因子IL-18和IL-1β水平。Western Blot检测核因子E2相关因子（Nrf 2）、血红素氧合酶1（HO-1）和还原型辅酶/醌氧化还原酶（NQO-1）的表达。 结果　老年对照组与青年对照组相比,尿中蛋白含量显著提升,血清中肌酐和尿素氮含量显著上升;肾组织细胞排列不规则,出现大量炎性细胞浸润,凋亡细胞比率显著提高;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著上调;SOD活性显著降低,MDA含量显著上升,GSH含量显著下降;血清中IL-18和IL-1β含量显著升高;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著下调。连翘苷元低、高剂量组与老年对照组相比,尿液中蛋白含量显著降低,血清肌酐和尿素氮含量显著下降;肾组织细胞排列趋向规则,炎性细胞浸润明显减弱,凋亡细胞比率显著下降;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著下调;SOD活性显著提高,MDA含量显著降低,GSH含量显著上升;血清中IL-18和IL-1β含量显著降低;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著上调。 结论　连翘苷元抑制老年大鼠氧化应激反应,改善老年大鼠肾功能,其作用机制可能与Nrf 2-ARE通路激活相关。