急性冠脉综合征患者CD4+CD25+调节性T细胞分析

动脉粥样硬化(AS)是涉及内皮细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞和淋巴细胞间相互作用的多因素过程[1].斑块的增长影响器官血液灌流,导致脑血管事件和急性冠脉综合征(ACS)的发生.AS是一种慢性炎症性病变,受机体免疫反应的影响,抗原特异性效应T细胞(主要为CD4+T细胞)促进了斑块的产生和演变[2];调节性T细胞(Tregs)通过直接细胞接触机制和细胞因子调节机制对T细胞和B细胞产生调节作用,维持机体的免疫稳态;其中,CD4+CD25+Trges能通过对效应T细胞的抑制作用产生抗AS作用[3-4].为了解ACS患者外周血CD4+CD25+Trges数目变化和功能改变,我们检测了ACS患者外周血     

急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞检测及其对细胞凋亡的作用

目的研究CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在急性白血病患者外周血中的检测,并探讨其对细胞凋亡的作用。方法将65例急性白血病患者(包括急性淋巴细胞性白血病33例和急性髓系白血病32例)分为未缓解组(28例)和缓解组(37例),25例健康志愿者作为对照组。根据是否合并感染又分为合并感染组(39例)和未合并感染组(26例)。采用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3表达,并与正常对照组进行比较。同时,利用荧光定量PCR的方法的检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达。结果与正常对照相比,急性白血病患者(未缓解组和缓解组)外周血中CD4~+CD25~+Foxp3~+比例明显提高,且治疗缓解后CD4~+CD25~+Foxp3~+表达下调(P0.05)。凋亡相关基因Bcl-2表达上调,Bax、P53表达下调。结论急性白血病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞明显升高,并且,影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达,提示CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞可能通过细胞凋亡信号通路影响急性白血病的发展。     

CD4+CD25+调节性T细胞的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其功能紊乱或数目下降是导致自身免疫性疾病的重要原因之一。近年来,研究发现Foxp3在调控CD4^＋CD25^＋Treg细胞的发育和功能上起着重要作用。本文就CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制机制、Foxp3在其发育和功能上的作用、IL-2和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）等对其产生、维持及活化的作用等方面作一综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞及其与GVHD的关联性

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一群表型和功能特异的T细胞亚群，具有免疫无能和免疫抑制两大特性，通过细胞直接接触或分泌抑制性细胞因子发挥对CD4^＋CD25^＋T细胞的抑制作用。GVHD是异基因造血干细胞移植最严重的并发症之一，近来有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与GVHD关联性的研究得出了两种截然相反的结论，即该类细胞可有效防治GVHD的发生及该类细胞与GVHD的发生率成正比。这一研究结果的明确将为GVHD的临床治疗提供新的思路。本文就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其免疫表型、特性、免疫调节作用机制及CD4^＋CD25^＋T细胞与GVHD的关联性的一些新的研究进展作一综述。     

补肾健脾对原因不明复发性流产患者血CD4+CD25+调节性T细胞表达频率的研究

目的:探讨补肾健脾法对原因不明复发性流产(URSA)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)的影响.方法:对南昌大学第四附属医院及江西省中医院2008年1月至2009年12月就诊的20例URSA患者,采用双荧光标记流式细胞分析技术,检测补肾健脾治疗前后外周血CD4+CD25+Tr细胞表达频率的变化.结果:补肾健脾中药治疗后,URSA患者外周血中CD4+CD25brightTr较治疗前明显增加(P＜0.05),CD4+CD25dimTr表达频率较治疗前降低(P＜0.05),中药安胎妊娠成功妇女CD4+CD25brightTr显著高于妊娠失败者.结论:补肾健脾可提高外周血CD4+CD25brightTr数量,能够提高机体保护性免疫功能,维持机体内环境稳定,为URSA的有效治疗方法.     

慢性丙型肝炎患者中CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达及意义

目的：探讨 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在慢性丙型肝炎（HCV）患者中的表达及其临床意义。方法收集 HCV 患者67例,并根据是否吸毒分为吸毒丙肝组35例和非吸毒丙肝组32例;健康体检人员32例作为对照。采用流式细胞仪检测患者外周血中 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达;应用实时荧光定量 PCR 的方法检测其HCV RNA 含量。结果慢性 HCV 患者中的吸毒感染组与非吸毒感染组的外周血中 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在 CD4+ T 细胞中所占比率分别为：3.84±1.95%、4.44±1.67%,明显低于对照组6.10±1.65%（ P <0.01）;而吸毒组与非吸毒组慢性 HCV 患者血液 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值相比差异无统计学意义;HCV 患者抗病毒治疗前血液 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值明显低于治疗后和正常对照组（ P <0.01）。结论 HCV 患者治疗前患者外周血 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞参与了 HCV 患者的机体免疫过程,而 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在外周血中的表达水平可能成为监测 HCV 患者体内细胞免疫状态和机体抗病毒免疫应答的指标。     

CD4+CD25+调节性T细胞的体外扩增和免疫治疗进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Regulaory T cell Treg)在控制对自身抗原的外周免疫耐受方面起了很重要的作用,但其数量低,对T细胞受体(T cell recpter TCR)刺激的无反应性和增殖无能的表型,限制了这一强大的致免疫耐受群体在自身免疫性疾病和移植输注治疗中的应用,能否有效地在体外扩增CD4+CD25+Treg,是CD4+CD25+Treg能否应用于临床治疗的关键.本文就近几年CD4+CD25+Treg,尤其是抗原特异性CD4+CD25+Treg的体外扩增方法及其免疫治疗进展进行综述,以利于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病治疗方法的深入研究.     

CD4+CD25+调节性T细胞与造血干细胞移植免疫

CD4 CD25 调节性T细胞是抑制性T细胞的一种亚群,能抑制效应细胞CD4 T细胞和CD8 T细胞的活化与增殖。CD4 CD25 调节性T细胞在免疫调节中发挥重要作用,并能诱导移植免疫耐受。本文就CD4 CD25 调节性T细胞与造血干细胞移植免疫进行综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制作用机制的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞是一群具有免疫抑制作用的负性调控细胞,在人体自身免疫、维持免疫系统稳态及许多疾病中发挥重要作用.目前有关CD4+CD25+调节性T细胞分化发育的确切机制及行使功能的作用机制尚不清楚.本文就其免疫抑制作用机制的研究进展作一综述.     

老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的表达及其临床意义

目的:通过对CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25high Treg)在老年消化道肿瘤患者外周血中表达情况的研究,探讨其与肿瘤发生、发展的关系.方法:采用流式细胞术检测26例健康青年人、26例健康老年人及41例老年消化道肿瘤惠者外周血CD4+CD25high Treg的水平,并进行统计学分析.结果:与健康青年人相比,健康老年人外周血CD4+CD25high Treg水平升高[(1.98±0.50)%vs(1.73±0.22)%,P＜0.05];而老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high Treg水平比健康老年人显著升高[(3.53±1.83)%vs(1.98±0.50)%,P＜0.01];进一步的分层分析显示:随着疾病的进展,外周血CD4+ CD25high Treg水平升高,在肿瘤进展期(Ⅲ～Ⅳ期)尤其明显,与Ⅰ～Ⅱ期比较,差异有统计学意义[(4.06±1.24)%vs(2.82±0.76)%,P＜0.05].结论:老年消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25high Treg比率升高,可能在老年消化道肿瘤的发生、发展中起重要作用.     

成人急性髓细胞白血病免疫分型特点及临床预后分析

目的探讨成人急性白血病病人免疫分型特点及临床预后。方法采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行多色流式细胞术免疫表型分析。并观察了给予标准化疗后的治疗效果。结果146例急性髓细胞白血病（AML）主要表达CD33（82．9％）、CD13（81．5％）和CD117（78．O％）。30．8％的AML患者伴有淋系抗体表达,最常见为CD7（19．2％）,其次是CD19（6．8％）,共发现急性混合细胞白血病4例。伴有淋系抗原表达的AML（Ly＋ AML）化疗后cR率显著低于未伴有淋系抗原表达的AML（Ly—AML）患者（P〈0．05）。CD7＋患者cR率低于CD7-患者,有统计学差异。结论流式细胞术对白血病的诊断及治疗预后分析有重要意义,伴淋系抗原表达的AML、CD7＋的AML化疗后CR率低。     

CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化

目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者发病机制中的作用。方法应用流式细胞术检测ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4^＋CD25^highT细胞、CD4^＋FOXP3^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的数量；实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3 mRNA的表达水平。将ITP患者和正常人CD4^＋CD25^highT细胞与自身CD4^＋CD25^-T细胞混合培养，检测CD4^＋CD25^high T细胞免疫抑制功能。结果ITP患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞约占CD4^＋T细胞的（15．64±5．82）％，明显高于正常对照组（9．30±3．95）％（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞比例为（1．53±0．66）％，与对照组[（1．36±0．55）％]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4^＋FOXP3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞分别为（1．82±1．42）％和（1．25±0．94）％，均明显低于对照组[（3．90±1．37）％和（2．65±0．92）％]（P值均〈0．01）。ITP患者外周血FOXP3 mRNA表达水平较正常人明显下调（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞的抑制活性较正常人减弱（P〈0．01）。结论ITP患者中CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3表达水平降低，抑制活性减弱。     

CD+4 Foxp3+调节性T淋巴细胞在儿童急性白血病中的表达及其与微小残留病的关系

目的 研究调节性T淋巴细胞(regulatory T cell,Treg)在白血病患者体内的表达情况,探讨Treg的增高与白血病疗效监测与白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD)预后指标之间的关系.方法 建立Foxp3-FITC/CD-25PE/CD4-PerCP/CD3-APC四色流式细胞术检测Treg的方法 ;比较10例正常骨髓标本以及33例白血病初发患者[急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)17例,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)9例,急性髓细胞白血病(AML)7例]骨髓标本中Treg的数量;结合56例临床缓解患者MRD监测结果 ,评估Treg作为白血病患者预后判断评价指标的价值.结果 正常骨髓组Treg占CD+4T淋巴细胞的比例中位数(M)为8.09%,初发自血病组M为12.77%,两者差异有统计学意义(U=3.41,P<0.01);而在B-ALL、T-ALL和AML组的差异无统计学意义(H=1.22,P>0.05).Treg数量与临床病理学参数无显著相关性.此外,Treg数量在MRD阳性组(M=14.74%)与MRD持续阴性组(M=11.3%)中的差异有统计学意义(t=252.5,P<0.05).结论 白血病初发患儿体内的Treg数量显著增高,且患儿中Treg表达水平与MRD有关联.高水平Treg预示白血病患儿预后较差,存在复发的可能.     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平及临床意义。方法采用流式细胞仪对25例AIHA患者治疗前后和15例正常对照者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比例进行了检测。结果25例AIHA患者治疗前CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋细胞的比例与正常对照组比较明显降低,（4．47±2．11）％VS（9．82土2．98）％（P〈0．001）,治疗后CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例与治疗前比较显著升高,（7．60±2．50）％VS（4．47±2．11）％（P〈0．001）,但仍低于正常人,（7．60±2．50）％VS（9．82±2．98）％（P〈0．05）。治疗后完全缓解患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与治疗无效组比较明显升高,（9．55±2．36）％VS（5．68±2．67）％（P〈0．05）,无效组患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与正常时照组比较仍然降低,（5．68±2．67）％vs（9．82±2．98）％（P〈0．01）。结论AIHA患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例较正常对照明显降低,有效治疗后得到恢复,提示CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能参与了疾病的发生。     

特发性血小板减少性紫癜患者CD4+CD25+Treg细胞的表达

目的:近年研究发现,CD4 CD25 Treg细胞不论数量缺失或功能紊乱均可导致免疫异常的发生,对调节性T细胞的深入认识,将会对免疫异常疾病如自身免疫性疾病、移植物抗宿主病、过敏性疾病等发病机制的揭示有着深远的意义.实验将进一步验证CD4 CD25 Treg细胞与特发性血小板减少性紫癜发病的关系及町能机制.方法:实验于2007-06/09 在中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所实验室完成.①实验材料:中国协和医科大学血液病医院住院的特发性血小板减少性紫癜患者27例治疗前后外周血,患者确诊符合血液病诊断及疗效标准.正常人外周血15份,实验均征得患者或家属知情同意.②实验方法:应用流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜患者、正常对照、以及治疗前后患者外周血中CD4 CD25 Treg细胞的比例.对其中治疗有效的23例患者,采用密度梯度离心法从治疗前后的外周血中提取单个核细胞,以RT-PCR方法检测其中Foxp3 mRNA的表达水平.结果:①特发性血小板减少性紫癜患者外周血中CD4 CD25 Treg细胞的比例以及CD4 CD25 Treg细胞在总CD4 T细胞中所占比例明显均低于正常对照组(P<0.05).②有效治疗后的特发性血小板减少性紫癜患者CD4 CD25 Treg细胞的比例与治疗前相比无明显改变(P>0.05),但Treg细胞中Foxp3mRNA的表达水平比治疗前明显增加(P<0.05).结论:特发性血小板紫瘢患者体内存在CD4 CD25 Treg细胞的异常,数量的减少、Foxp3表达的降低所造成的CD4 CD25 Treg细胞免疫抑制功能受损可能是特发性血小板减少性紫瘢发病的一个重要因素.     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型及CD4+CD25+T调节细胞检测

背景:在急性淋巴细胞白血病发病过程中,CD4+CD25+T调节细胞对机体免疫反应可能起着一定的调节作用.目的:观察急性淋巴细胞白血病患者的免疫分型及外周血CD4+CD25+T调节细胞的变化情况.方法:采用流式细胞仪对35例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫分型,并检测外周血CD4+CD25+T调节细胞的数目,与18名健康对照作比较.结果与结论:急性B细胞淋巴细胞白血病22例,急性T细胞淋巴细胞白血病13例;22例急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19的阳性表达率最高(100%),而13例急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高(100%).急性B细胞淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞和急性T细胞淋巴细胞白血病患者差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于健康对照(P < 0.05).表明急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19阳性表达率最高,急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高,同时急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞水平显著增高.     

骨髓中CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞与儿童急性B淋巴细胞白血病的相关性研究

目的通过检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达及CD4+细胞中调节性T细胞(Treg)比例,探讨Treg与儿童B-ALL发生及预后的关系。方法用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测10名正常儿童、35例初发B-ALL患儿及68例临床缓解患儿骨髓中Foxp3mRNA水平;用流式细胞术检测上述骨髓标本中CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨髓中细胞因子白细胞介素10(IL-10)的表达情况。结果骨髓中Foxp3 mRNA表达水平在B-ALL初发患儿组是对照组的4.44倍,微小残留病(MRD)阳性组是阴性组的2.39倍;B-ALL初发患儿骨髓中Treg占CD4+T淋巴细胞的比例[中位数(M)=12.77%]较对照组(M=8.09%)增高,差异具有统计学意义(P<0.01);MRD阳性组Treg比例(M=14.74%)与MRD持续阴性组(M=11.30%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后MRD阳性组骨髓中IL-10水平[(24.69±11.73)pg/mL]显著高于MRD持续阴性组[(9.19±5.82)pg/mL,P<0.05]。结论 B-ALL初发和MRD阳性患儿骨髓中Foxp3 mRNA水平和Treg比例显著增高,且骨髓中IL-10水平与Treg的比例变化趋势相一致。Treg可作为评价B-ALL患儿预后和复发的指标,Treg可能是通过分泌抑制性细胞因子IL-10而发挥其抑制作用。     

染色质组装因子1,b亚单位在急性髓系白血病细胞中的表达研究

目的 探讨染色质组装因子1,b亚单位（chromatin assembly factor 1,subunit b,CAF1b）在急性髓系白血病（AML）中的表达情况及其特异性.方法 建立流式细胞术检测胞内蛋白的方法,测定AML细胞株KG1a及正常人、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、AML、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）、多发性骨髓瘤（MM）患者的骨髓单个核细胞中CAF1b的表达情况,利用WinMDI 2.9软件分析流式数据,并行统计分析,比较之间的差异.结果 AML患者骨髓单个核细胞和KG1a细胞CAF1b的表达率分别为（21.40±2.91）％、（27.87±1.48）％,均明显高于正常人、ITP、ALL、CML-CP、MM患者（P均＜0.05）.结论 CAF1b在AML有核细胞中表达特异性增高,提示其可能为AML特异性肿瘤抗原.