丙型肝炎病毒检测与抗体检测的比较

应用ELISA法检测抗-HCV抗体的阳性检出率不及PCR法检测HCV RNA。据文献报道HCV的感染率高于抗-HCV抗体检测的结果,而PCR法可检出携带者血内少量的丙型肝炎病毒,因此被视为较有效的检测手段。我们对本院各科送检丙型肝炎的部分标本及少量献血员标本进行抗-HCV抗体和HCVRNA的检测,以比较两种方法在临床检验中的意义。     

肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒核心区基因及其表达产物的检测

目的　采用多种方法检测丙型肝炎病毒(HCV)核心区基因和表达产物在肝细胞肝癌(HCC)组织中的分布及其在HCC发生和发展中的作用.方法　对39例HCC患者进行免疫组化和原位杂交的检测.IS-RT-PCR法用于检测并定位HCVRNA.微切组织的RT-PCR法分别检测癌与癌旁组织中的HCVRNA.以便能够控制扩增产物的来源.同时还进行血清学ELISA和RT-PCR的检测.结果　血清ELISA的阳性率(30.8%)并不总与RT-PCR的阳性率(43.6%)一致,后者对于反映HCRRNA的存在更为敏感和准确.免疫组化结果显示HCV核心抗原的表达率为38.5%.阳性信号位于癌旁肝细…     

江苏淮阴地区单采浆献血员员丙型肝炎病毒分型及发病情况

目的了解江苏淮阴地区单采浆献血员丙型肝炎病毒(HCV)感染后发病情况和病毒基因分型.方法应用ELISA法及RT-nestedPCR法检测67例单采浆献血员感染HCV后抗-HCV和HCVRNA,并用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)进行病毒基因分型.结果67例单采浆献血员,在感染HCV后,急性丙型肝炎发病率为17.9%(12/67),最终发展成慢性丙型肝炎者49.3%(33/67),HCV慢性持续感染68.8%(46/67).HCV基因分型1b/Ⅱ型占95.5%(64/67),2a/Ⅲ型1.5%(1/67),1b/2a混合型3.0%(2/67).结论淮阴地区单采浆献血员HCV感染以1b/Ⅱ型为优势株,慢性化比例高.     

肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用

目的　探讨丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒感染在非霍奇金淋巴瘤发病中的作用 .方法　采用 EL ISA和反转录 -聚合酶链反应的方法检测了 74例非霍奇金淋巴瘤患者外周血的抗 - HCV抗体和 HCVRNA;同时检测了 110名健康献血员中抗 - HCV抗体和 HCVRNA.用 EL ISA方法检测了 74例非霍奇金氏淋巴瘤患者和 110名献血员 .同时采用聚合酶链反应对于非霍奇金淋巴瘤患者外周血淋巴细胞中 Bcl- 2 / JH 基因重排情况进行了检测 .结果　在 74例非霍奇金氏淋巴瘤中的抗 - HCV抗体阳性的为 4例 ,阳性率为 5 .3% ,HCVRNA阳性者为 6例 ,阳性率为 8.1% ;110名健康献血员的抗 - HCV抗体的阳性率为 0 .9% ;HCVRNA阳性率为 1.8% .非霍奇金淋巴瘤中的抗 - HCV抗体阳性率较健康献血员显著增高 ,而 HCVRNA的阳性率也较健康献血员有增高 .经 χ2检验 P>0 .0 5 ,无显著性差异 .在 74例非霍奇金淋巴瘤中 HBs Ag阳性者有 3例 (4% ) ,而在献血员中为 2名 (1.7% ) .在 74例非霍奇金淋巴瘤中有 18例外周血检测出 Bcl- 2 / JH基因重排 ,且转位均发生在 Bcl- 2的主要断裂点区域 (MBR) .经χ2 testP<0 .0 1,在非霍奇金淋巴瘤中 Bcl- 2 / JH基因重排和 HCV感染有明显的相关性 .结论　HCV和 HBV的感染与非霍奇金氏淋巴瘤的发生可能不存在一定的相     

丙型肝炎患者HCV RNA与转氨酶的关系

目的了解丙型肝炎病毒核糖核酸（HCVRNA）与天冬氨酸转移酶（AST）及丙氨酸氨基转移酶（ALT）之间的关系。方法对119例（自2008年1月～2009年5月）来自湖南省人民医院住院和门诊丙型肝炎患者进行HCVRNA、抗-HCV及AST、ALT检测。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测标本中的HCVRNA,同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测抗-HCV,用全自动生化检测仪测定AST、ALT水平。分析分别在HCVRNA大于临界值组和HCVRNA小于临界值组的病人血清中转氨酶与其的关系。结果本研究的119例标本中有116例抗-HCV均为阳性,其中HCVRNA高于上限值（≥1000copies/mL）87例,二都有很好的相关性;共有70例存在ALT异常,73例存在AST异常,ALT、AST水平与HCVRNA含量对数值无显著相关性,但ALT、AST阳性率与HCVRNA大于临界值有一定的吻合关系。结论HCVRNA是反映HCV复制的可靠指标。结合AST、ALT结果可帮助临床了解HCV在体内的复制状况及肝脏的损伤情况。RT-PCR法检测HCVRNA具有非常好的临床应用价值。     

慢性丙型肝炎患者血清中HCV核心抗原的定性检测

目的:应用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)定性检测血清中丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)核心抗原,分析和评价HCV核心抗原检测的临床价值。方法:应用ELISA方法定性检测慢性丙型肝炎患者149份血清中的HCV核心抗原,以健康人血清20份,慢性乙型肝炎患者血清20份作为对照,以证明方法的特异性;并同时应用RT-PCR和ELISA方法分别检测血清中的HCVRNA和抗HCV。结果:健康人血清和慢性乙型肝炎患者血清HCV核心抗原定性检测均呈阴性反应,检测值(OD值)分别为0.022±0.017,0.001±0.012;149份慢性丙型肝炎患者血清HCV核心抗原阳性者74例,阳性率49.66%,阳性检测值(OD值)为0.534±0.457,与阴性检测值比较其差异有统计学意义。HCVRNA和HCV核心抗原检测有54.36%的符合率,两种检测方法之间检测的差异性无统计学意义(P>0.05)。149份抗HCV阳性血清中HCVRNA阳性率为55.03%(82/149),HCV核心抗原阳性率为49.66%(74/149),两者比较无统计学意义(P>0.05)。结论:HCV核心抗原定性检测特异性强,慢性丙型肝炎患者血清中阳性率为49.66%,与HCVRNA有一定的相关性,可能也是反映HCV病毒血症的血清学标志。与HCVRNA同时检测,可提高对慢性丙型肝炎患者的病毒血症和病毒复制诊断率,但其检测的灵敏性还有待进一步提高。     

血清抗-HCV与HCV RNA检测结果比较

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)是目前诊断丙型肝炎(丙肝)的主要方法,但该方法只不过是从感染者体液免疫应答角度间接证实HCV现症感染或既往感染。而采用高敏感性的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)则能直接证实丙肝病毒血症的存在,对HCV现症感染的证实具有重要意义,我们采用ELISA和RT-PCR技术对154例肝病患者的血清进行了抗-HCV和HCVRNA检测,旨在比较ELISA测定抗-HCV诊断丙肝的价值和RT-PCR测定HCV RNA的优越性,现将结果报道分析如下。     

献血员丙型肝炎病毒感染状况分析

本文应用ELISA法检测1012例献血员血清抗－HCV，阳性者19例，阳性率为1．88％；并观察到不同血型献血员HCV的感染状况不同，AB型血型献血员执－HCV阳性率明显高于其它血型献血员。     

116例血清中HCV RNA定量检测与抗-HCV结果对比分析

目的探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和HCVRNA定量检测阳性结果对丙型肝炎诊断治疗的临床意义。方法采用第三代ELISA夹心法检测抗-HCV，荧光定量PCR法检测HCVRNA检测116例血清抗-HCV或HCVRNA阳性标本。结果在116例标本中，抗-HCV( )／HCVRNA( )双阳性者83例，抗-HCV( )／HCVRNA(-)者12例，抗-HCV(-)／HCVRNA( )者21例)。两者阳性符合率为71．6％(83／116)。在HCVRNA定量阳性结果中，则有104例为HCV感染，其中抗-HCV的阳性检出率为80．0％(83／104)。随着血清HCVRNA滴度的增高，抗-HCV的阳性率也增加，两者变化趋势一致。结论抗-HCV检测，HCVRNA荧光定量PCR法检测均有一定的局限性，同时应用抗-HCV和HCVRNA检测对临床上完善HCV诊断、评价抗病毒疗效更为准确。     

应用“套式”PCR检测献血员血清中的丙型肝炎病毒

丙型肝炎病毒(HCV)是引起人类非甲非乙型肝炎的主要病原体。HCV主要经血液制品传播。因此,对献血员进行筛查以检测有无HCV感染是很重要的。作者用“套式”PCR检测40例血清ALT>200U,抗-HAV、抗-EB、抗-CMV、乙肝标志物阴性的献血员血清,10例正常人及10例慢性乙型肝炎患者血清中的HCV。按常规法用酚/氯仿/异戊醇提取HCVRNA经M-MLV逆转录酶合成CDNA。     

应用RT－PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５′端非编码（５′ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测抗－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶＲＮＡ，更早地确诊丙型肝炎。     

湛江地区初次无偿献血者HCV感染情况研究

目的:检测湛江地区初次献血者丙型肝炎病毒(HCV)-RNA,调查初次献血人群HCV感染的"窗口期"情况以及感染HCV的具体基因型.方法:分别采用ELISA法和RT-PCR法检测2 357名在2004年1～12月初次无偿献血者感染HCV的情况.并把经RT-PCR法检测阳性的标本进行基因型检测.结果:在2 357名初次献血者中,ELISA法阳性率为1.64%,而RT-PCR法的阳性率为1.86%,2种方法符合率为99.5%,二者间无显著性差异(P＞0.05).感染者中2型基因型为84.1%,3型基因型为13.6%,2/3混合型为2.27%.结论:RT-PCR法检测血液HCV-RNA能早期发现"窗口期"HCV感染者,湛江地区初次无偿献血者感染丙型肝炎病毒的基因型以2型和3型为主.     

丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用探讨

[目的]探讨HCV核心抗原在HCV感染诊断和治疗中的作用。[方法]对173例HCV感染患者血清和82例健康对照者血清,使用ELISA法分别检测抗-HCV、总的HCV核心抗原,使用荧光定量RT-PCR检测HCV RNA。[结果]173例HCV感染者抗-HCV均为阳性。HCV RNA阳性率为49.7%(86/173);HCV核心抗原阳性率为36.4%(63/173)。二者差异有统计学意义(P<0.05)。86例HCV RNA阳性标本中,HCV核心抗原阳性60例(69.8%);HCV核心抗原阴性26例(30.2%)。82例健康对照者抗-HCV、HCV核心抗原、HCV RNA均为阴性。[结论]在没有HCV RNA检测资格的实验室,HCV核心抗原检测可作为病毒存在和复制的一个指标,作为抗-HCV检测的补充试验。     

原发性肝癌78例血清HCVRNA和抗HCV的观察

用逆转录－聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测了７８例原发性肝癌患者清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标物。     

丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体联合检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体检测联合应用的意义。方法抗-HCV和HCV-cAg用ELISA法检测,HCV-RNA用RT-PCR法检测。结果1761例病人共测得阳性标本57例,其中抗-HCV阳性54例,HCV-cAg阳性22例,同时阳性为19例。3例HCV-RNA而抗-HCV阴性样本中检出HCV-cAg。22例HCV-cAg阳性标本经HCV-RNA检测均为阳性。结论HCV-RNA、抗-HCV和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高检出阳性率,有利于早期诊断。     

丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体联合检测的临床意义

目的探讨丙型肝炎病毒核酸、核心抗原和抗体检测联合应用的意义。方法抗-HCV和HCV-cAg用ELISA法检测,HCV-RNA用RT-PCR法检测。结果1761例病人共测得阳性标本57例,其中抗-HCV阳性54例,HCV-cAg阳性22例,同时阳性为19例。3例HCV-RNA而抗-HCV阴性样本中检出HCV-cAg。22例HCV-cAg阳性标本经HCV-RNA检测均为阳性。结论HCV-RNA、抗-HCV和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高检出阳性率,有利于早期诊断。     

HCV核心蛋白片段的表达、纯化及免疫原性检测

目的：探讨HCV核心蛋白N端119aa片段表达产物的抗原性及用于抗-HCV抗体检测的可能性。方法：把HCV C119-pEq32a／BL21重组菌进行发酵表达，提取包涵体，并用阳离子柱进一步纯化目的蛋白。用Western blot及ELISA分析该融合蛋白的免疫特异性及敏感性。结果：所表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20％，SDS-PAGE结果表明所纯化的目的蛋白纯度大于95％。Western blot及ELISA结果显示该融合蛋白具有良好的免疫特异性，所检测的47份临床HCV感染血清的阳性率为91．5％，而阴性对照及HBV感染血清则未见阳性结果。结论：该HCV Cll9融合蛋白检测HCV感染患血清具有良好的特异性和敏感性，可望用于HCV抗体检测试剂盒的研制。     

Hepatitis C virus infection: Its role in chronic liver diseases

Summary In order to find out the infectious rate of hepatitis C viris (HCV) among chronic liver diseases, we investigated antibodies against hepatitis C virus and HCVRNA by method of ELISA, R1BA and RT-PCR in 410 patients with chronic liver disease. The prevalence of HCV infection was found to be 4%. Whereas the positive rate of HBsAg and HBV-DNA of these cases was 69% and 58%, respectively. There is no statistical significance between HCV infectious rate of patients with positive and negative HBsAg. The relative low infectious rate of HCV infection among chronic hepatic diseases indicates that HBV infection plays a more important role in causing chronic hepatitis than that of HCV. Thus, special emphasis should be paid to the preventive and therapeutic measures against hepatitis B in China.     

丙型肝炎病毒核酸的荧光定量检测及其临床意义

目的:建立实时荧光定量RT-PCR(RFQ-RT-PCR)检测HCV-RNA含量方法的临床应用价值。方法:在HCV基因组5’非编码区(5’-UTR)设计特异性引物和一对杂交探针,PCR扩增目的片段并构建相应基因片段载体,体外转录RNA作为标准品,根据其建立的标准曲线对血清HCV RNA进行定量,同时用传统的巢式RT-PCR进行定性分析。结果:138例样本在HCV抗体阳性患者中,肝硬化和肝癌患者的HCV RNA含量显著高于慢性肝炎患者(P<0.05),而且HCV RNA含量与ALT水平呈正相关(r=0.91)。结论:RFQ-RT-PCR检测HCV-RNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HCV在体内的复制情况。