甲基莲心碱对MCF-7细胞体外化疗增敏作用

目的 :探讨甲基莲心碱 ( Neferine,Nef)的体外化疗增敏作用。方法 :以人乳腺癌细胞 MCF- 7为研究对象 ,MTT法测定药物的细胞生长抑制率 ,流式细胞仪 ( Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡。结果 :Nef( 5 um ol· L- 1 、10 um ol· L- 1 )分别与阿霉素 ( ADM)、5 -氟尿嘧啶 ( 5 - FU )、顺铂 ( CDDP)合用 ,可增加它们对 MCF- 7细胞的生长抑制率 ,q>1。Nef( 10 um ol· L- 1 可增强 10 umol· L- 1 ADM诱导 MCF- 7细胞凋亡的作用。结论 :Nef具有化疗增敏作用。     

甲基莲心碱对MCF-7细胞体外化疗增敏作用

目的探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)的体外化疗增敏作用.方法以人乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,MTT法测定药物的细胞生长抑制率,流式细胞仪(Flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡.结果Nef(5umol*L-1、10umol*L-1)分别与阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(CDDP)合用,可增加它们对MCF-7细胞的生长抑制率,q＞1.Nef(10umol*L-1可增强10umol*L-1ADM诱导MCF-7细胞凋亡的作用.结论Nef具有化疗增敏作用.     

毫米波和阿霉素对K562细胞的影响

目的 :研究一种较好的毫米波和阿霉素的联合方法 ,用于白血病细胞的体外净化。方法 :将毫米波和阿霉素分别单独以及联合作用于K56 2细胞株 ,通过MTT测定细胞活力和流式细胞仪结合Annexin V/PI测定细胞的凋亡、坏死率来评价体外净化的效果。结果 :毫米波和阿霉素对细胞活力均表现出抑制作用 ,毫米波的抑制作用不呈现功率相关性 ,阿霉素的抑制程度呈现出浓度相关性 ;毫米波和阿霉素联合作用对K56 2细胞株的杀伤作用比单用阿霉素有显著性增加 (P <0 .0 1 )。结论 :毫米波和阿霉素联合作用于人白血病K56 2细胞能产生协同效应。     

甲基莲心碱对Saos-2细胞体外增敏作用的研究

目的　探讨甲基莲心碱(Neferine ,Nef)对骨肉瘤细胞(Saos-2cells)的体外化疗增敏作用。方法　以人骨肉瘤细胞株(Saos-2cells)为研究对象,MTT法测定药物的细胞生长抑制率,流式细胞仪(FlowCytometry ,FCM)检测细胞凋亡。结果　Nef(5,10μmol·L^-1)分别为与阿霉素(ADM) ,5-氟尿嘧啶(5-Fu) ,顺铂(CDDP) ,鬼臼乙叉苷(VP16 )合用,可增加它对Saos 2细胞的生长抑制率,q >1。Nef(10 μmol·L^-1)可增强不同浓度ADM诱导Saos 2细胞凋亡。结论　Nef对Saos-2细胞有化疗增敏作用。     

甲基莲心碱对Saos-2细胞体外增敏作用的研究

目的探讨甲基莲心碱(Neferine ,Nef)对骨肉瘤细胞(Saos-2 cells)的体外化疗增敏作用.方法以人骨肉瘤细胞株(Saos-2 cells)为研究对象,MTT法测定药物的细胞生长抑制率,流式细胞仪(Flow Cytometry , FCM)检测细胞凋亡.结果 Nef(5,10μmol·L-1)分别为与阿霉素(ADM),5-氟尿嘧啶(5-Fu),顺铂(CDDP),鬼臼乙叉苷(VP16)合用,可增加它对Saos-2细胞的生长抑制率,q＞1.Nef(10μmol·L-1)可增强不同浓度ADM诱导Saos-2细胞凋亡.结论 Nef 对Saos-2细胞有化疗增敏作用.     

RNA干扰靶向cyclin D1基因对K562细胞化疗增敏的研究

目的 cyclin D1基因在细胞周期调控中起关键性作用.研究表明其过表达与肿瘤的发生、发展及预后密切相关;并且与肿瘤细胞对化疗药物抗拒性有关.抑制Cyclin D1蛋白表达可达到化疗增敏作用.本研究利用RNA干扰(RNAi)技术体外观测其对K562细胞cyclin D1基因的沉默效应及增强阿霉素(ADM)对K562细胞毒性作用.方法 体外构建靶向cyclin D1基因的小发夹RNA(shRNA)表达质粒,通过壳聚糖介导转染K562细胞,Western blot分析检测转染前后Cyclin DI蛋白表达变化,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率的影响以及MTT法检测K562细胞对ADM敏感性的变化.结果 构建靶向cyclin D1基因的shRNA表达质粒(pshRNA-419和pshRNA-575)经壳聚糖转染后,能显著抑制cyclin D1基因表达;影响K562细胞周期分布,诱导细胞凋亡,并降低ADM半数抑制浓度,提高了化疗敏感性.而设计一碱基突变的序列所构建的质粒并无上述生物学效应.结论 沉默K562细胞cyclin D1基因表达可达到有效的化疗增敏目的.     

热疗加阿霉素对慢性白血病K562细胞株的抑制作用

目的观察热疗联合阿霉素对慢性髓系白血病细胞株K562的体外增殖抑制作用及凋亡的影响。方法采用MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃及42℃,体外作用于K562。作用前及48h,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果作用48h后IC50为5μg/ml,以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562细胞有抑制作用(P<0.01),并随温度增高而增强;单纯化疗对K562细胞也有抑制作用;各热化疗组对K562均有明显的抑制作用(P<0.01),随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡,热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高,各组之间有显著性差异(P<0.01)。结论热疗联合阿霉素能增强对K562细胞的体外抑制作用,可以提高肿瘤细胞的凋亡率。     

松茸多糖对K562细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:研究松茸多糖对K562细胞增殖与分化的影响。方法:采用细胞培养方法观察松茸对K562细胞增殖与分化的影响。结果:松茸对K562细胞增殖具有明显的抑制作用。结论:松茸是抑制白血病细胞增殖并诱导其分化的天然诱导剂,但其机理有待进一步探讨。     

环孢菌素A诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的：本实验旨在观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。方法：采用瑞氏染色、DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL法观察环孢菌素A对K562细胞株凋亡的影响。结果：20μmol/L环孢菌素A作用24小时可诱导K562细胞凋亡，瑞氏染色呈瑞典型的凋亡形态学改变，DNA电泳呈“阶梯状”条带，流式细胞仪显示凋亡峰，细胞周期分析环孢菌素A可使K562细胞生长阻滞于G0－G1期，环孢菌素A处理组的凋亡率高于对照组（P＜0．01）。结论：环孢菌素A可诱导K562细胞株凋亡。     

东亚钳蝎毒诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的 研究东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导白血病细胞株K562凋亡的作用。方法 流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用RT．PCR检测野生型p53基因的表达。结果 经BMK作用于细胞后，细胞的总凋亡率均有升高；RT—PCR检测提示经BMK作用后的K562细胞p53基因的表达上调。结论 BMK能诱导K562细胞凋亡，可能促进P53基因表达上调是其机制之一。     

K562白血病株树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

目的将K562细胞诱导分化为树状突细胞(DC),并以K562-DC作为刺激细胞诱导细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应,观察其体外特异性抗肿瘤效应,对白血病细胞来源DC用于白血病免疫治疗进行初步探讨。方法(1)低浓度丙戊酸钠将K562细胞诱导分化为DC(K562-DC)。(2)DC的鉴定:①形态学:倒置显微镜(Olympus)下观察细胞形态并摄相。②免疫表型:PE结合的鼠抗人CD1a、HLADR、CD83、CD80及CD86单抗用流式细胞仪分析检测细胞表面标志。③功能鉴定:采用同种异体混合淋巴细胞反应。(3)MTT杀伤实验检测DC诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞的杀伤活性。结果(1)丙戊酸钠(VPA)培养第7天时,细胞均匀分散,变形,体积增大,数量增多,细胞表面可见多个突起,且具有刺状突起的细胞数量较前增多。(2)通过流式细胞术检测诱导的K562DC表面分子的表达,结果发现丙戊酸钠(VPA)诱导的K562DC各表面标志的表达,与K562细胞相比均明显上调(P<0.05)。(3)丙戊酸钠(VPA)诱导的K562DC具有较强的诱导CTL杀伤肿瘤细胞的能力且随效靶比例增高而增强,并显著高于未负载肿瘤可溶性抗原的DC及单纯T细胞组(P<0.05)。结论以K562细胞为靶细胞,观察VPA对K562细胞诱导向树突状细胞分化作用。进一步的实验证实,VPA可以诱导K562细胞向树突状细胞分化,而且诱导的树突状细胞具有较强的抗原呈递功能和诱导特异性细胞毒性T淋巴细杀伤活性作用。     

一叶秋碱诱导K562细胞凋亡

目的研究一叶秋碱（ＳＥＣ）能否诱导Ｋ５６２细胞凋亡。方法细胞增殖抑制采用ＭＴＴ法;形态学研究采用电子和荧光显微镜;流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂。结果ＳＥＣ１０～１６０ｍｇ·Ｌ－１呈剂量依赖性抑制Ｋ５６２细胞增殖（ｒ＝０９６１３,Ｐ＜００５）;ＳＥＣ作用４８ｈ后,电镜下可见细胞膜完整,核染色质边聚和凋亡小体;荧光显微镜下核染色质凝聚成点状结构;流式细胞仪出现凋亡峰;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳可见“梯状”图谱。结论ＳＥＣ可诱导Ｋ５６２细胞调亡。     

西洋参有效部位对K562细胞凋亡诱导的实验研究

目的利用人的白血病细胞K562对西洋参有效部位(Panaxquinquefolium’effectiveparts,PQEP)的抗癌作用机制进行研究。方法K562细胞进行常规培养后,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法进行PQEP(6.25～400mg·L-1)的细胞毒性测试;利用倒置相差显微镜和荧光显微镜(DAPI染色)来观察细胞形态学改变;凝胶电泳法观察细胞凋亡;通过流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期分布。结果PQEP对K562细胞有明显细胞毒性,呈时间和剂量依赖关系;PQEP能明显诱导细胞皱缩,膜膨胀和核染色质固缩和碎裂,形成大约为180～200bp或其多聚体组成的寡核苷酸片断;流式细胞仪观察显示PQEP剂量依赖性地提高凋亡细胞DNA含量,阻止细胞在G1期。结论PQEP能够诱导K562细胞发生凋亡。     

二(2-吡啶基-N-氧化物)二硫化物对K562细胞增殖的抑制作用

目的研究二(2-吡啶基-N-氧化物)二硫化物(L)对K562细胞增殖的影响。方法应用MTT比色法检测L对K562细胞增殖的影响;应用透射电镜检测L对K562细胞凋亡形态学的影响;应用流式细胞仪检测L对K562细胞周期的影响。结果 L可抑制K562细胞的增殖,呈现浓度依赖性;L可使K562细胞呈现凋亡形态学特征;L可使K562细胞周期发生阻滞。结论 L在体外具有抑制K562细胞增殖的作用。     

乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的实验研究

目的通过体外细胞实验,证实乌索酸对柔红霉素(DNR)诱导的K562耐药细胞株(K562/DNR)有细胞毒和诱导凋亡作用,并摸索出作用的最佳浓度和时间,为乌索酸治疗血液系统恶性肿瘤奠定理论基础。方法利用WST-8分析,研究不同浓度和作用时间的乌索酸对K562/DNR细胞的体外细胞毒作用情况;利用流式细胞仪技术,研究不同浓度和作用时间的乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的情况。结果乌索酸对K562/DNR细胞增殖具有明显抑制作用,诱导凋亡作用亦显著,并呈现一定的时间、浓度依赖性。结论乌索酸对于K562/DNR细胞具有确切的抗肿瘤活性。     

单子叶植物内生菌多糖对人红白血病K562细胞株抑制作用

目的：研究单子叶植物内生菌多糖对人红白血病K562细胞株的影响。方法：检测单子叶植物内生菌多糖对K562细胞剂量毒性和时间毒性作用，用凝胶电泳DNA梯度图谱定性分析肿瘤细胞凋亡，以及对K562细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响。结果：单子叶植物内生菌多糖可诱导K562细胞产生凋亡；使K562细胞fax基因和bax基因表达增多（P〈0．05或P〈0．01）；bcl-2基因表达明显降低（P〈0．01）。结论：单子叶植物内生菌多糖抗肿瘤活性的机制可能与引起肿瘤细胞凋亡密切相关。     

辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的体内外研究

目的通过体内、外实验研究辛伐他汀对K562细胞Ras-MAPK信号通路的影响,探讨辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的可能机制。方法体外培养CML细胞株K562细胞,做以下实验:①用流式细胞术(FCM)检测辛伐他汀处理K562细胞后其凋亡率的变化,②18只Balb/c-nu/nu裸小鼠皮下接种K562细胞,构建裸鼠的K562细胞移植瘤模型,③TUNEL法检测辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞早期凋亡的变化,④RT-PCR检测裸鼠体内外K562细胞N-ras、c-Raf-1、ERK1mRNA水平的变化。结果辛伐他汀在体外能明显诱导K562细胞凋亡,Ras-MAPK通路大多数基因出现差异表达。不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞凋亡,并随剂量的增加凋亡率逐渐增高(P<0.01);辛伐他汀能够引起N-ras、c-Raf-1、ERK1mRNA水平的明显差异表达(P<0.01)。结论辛伐他汀在体内外均能够引起参与K562细胞凋亡的Ras分子和Ras分子下游分子mRNA水平的变化,从一定角度说明辛伐他汀能依赖Ras-MAPK信号通路诱导K562细胞凋亡。     

人参皂苷compound K对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的探讨人参皂苷compound K（CK）对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法应用MTT法检测CK对K562细胞增殖的影响,用流式细胞仪分析细胞周期,DNA Ladder实验观察CK对K562细胞凋亡的影响。结果人参皂苷CK能显著抑制K562细胞的增殖,呈浓度依赖性,细胞阻滞于G2/M期;CK能诱导K562细胞的凋亡,呈浓度依赖性。结论人参皂苷CK具有抑制K562细胞增殖和诱导凋亡作用。     

K562白血病细胞系HLA-II等位基因型

目的:测定K562白血病细胞系HLA -II等位基因型。方法:采用聚合酶链反应 -限制性片断长度多态性技术对K562白血病细胞系HLA -II类抗原基因进行DNA分型。结果:K562细胞系的HLA -II基因型均为纯合子型 ,等位基因分别是 :DRB1*0301/*0301,DQB1*0201/*0201,DPB1*0402/*0402。结论:提高对K562白血病细胞系HLA -II基因型的认识,可为髓系白血病分子免疫遗传学基因型研究提供初步的检测资料