附子保健品刨附片及炮天雄的急性毒性研究

目的:测定灌胃炮天雄和刨附片对小鼠的急性毒性。方法:待禁食不禁水12h后,各组24h内一次性给药,其中刨附片、炮天雄组均分别灌胃刨附片水煎液25.2g生药/kg或炮天雄水煎液27.2g生药/kg,正常对照组灌胃蒸馏水,给药体积均为40ml/kg,给药后观察并记录小鼠一般行为活动、体重、饮食及死亡等情况,连续观察14d。结果:刨附片组小鼠和炮天雄组小鼠无死亡,一般状态正常,无明显异常行为或变化,体重和摄食量逐日增长,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:刨附片、炮天雄水煎液灌胃小鼠均无明显急性毒性,最大给药量分别为25.2、27.2g生药/kg,若按附子临床人用量为15g/日算,均大于人用量的100倍。     

岭南炮天雄的炮制工艺优选

目的:优化并规范岭南炮天雄的炮制工艺,为提高该产品的生产效率及质量提供参考。方法:以炮天雄中3种单酯型生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)和3种双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱)质量分数为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察浸漂时间、高压蒸制时间和砂炒温度对岭南炮天雄炮制工艺的影响。结果:最佳炮制工艺条件为浸漂时间5 d,高压蒸制时间1.5 h,砂炒温度210~230℃,姜汁比例8%。炮天雄的单、双酯型生物碱质量分数分别为0.120 5,0.031 1 mg·g-1。结论:优选的岭南炮天雄炮制工艺稳定可行,能进一步规范相关指标,提高生产效率和产品质量,为该药材的大规模生产提供参考。     

传统中药炮天雄的研究进展

通过查阅炮天雄的相关文献,从炮制工艺、质量标准和药理作用3个方面综述了炮天雄的研究进展.发现炮天雄尚存有两种炮制方法,分别被岭南和四川地区沿用,已有学者建立了相关的质量标准.认为炮天雄安全无毒,其主要成分为生物碱类,具有温肾助阳、调节免疫、强心等功效.虽然炮天雄现在已经少用,但是其仍具有巨大的药用潜力.     

砂烫生附片与炮附片制备前后6种生物碱的变化

目的研究砂烫生附片代替炮附片(砂烫黑顺片)的可能性。方法泥附子切片制成生附片后砂烫,并观察其外观性状。HPLC法测定单酯型(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)和双酯型(新乌头碱、乌头碱、次乌头碱)生物碱总含有量。结果两种炮制品外观性状均无明显差异。砂烫生附片制备前双酯型生物碱总含有量为0.067 5%,制备后降为0.001 5%;炮附片制备前后均检测不到。砂烫生附片制备前单酯型生物碱总含有量为0.014 1%,制备后增至0.038 2%;炮附片制备前为0.019 5%,制备后降为0.011 4%。两者均符合《中国药典》要求(双酯型生物碱总含有量不得超过0.020%)。结论砂烫生附片(仲景制法)具有低毒高效的特点,值得深入研究。     

炮天雄传统炮制过程中微生物的分离与初步鉴定

目的:揭示炮天雄传统炮制过程中的微生物菌群。方法:应用经典微生物分离纯化方法,结合形态学考察和16S rDNA或18S rDNA基因序列分析,对炮天雄传统炮制过程中样品进行微生物的分离及菌种初步分类鉴定。结果:共分离获得细菌14株、酵母菌11株、丝状真菌2株。14种细菌分别为克雷伯氏菌属菌、肠杆菌属菌、节杆菌属、蜡样芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、形赖氨酸芽孢杆菌、伯格菌属、短黄杆菌、棒状杆菌属、嗜盐球菌、巨大芽孢杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌、食窦魏斯式菌;11种酵母菌分别为浅白色隐球酵母菌、胶红酵母菌、葡萄牙棒孢酵母、热带念珠菌、克鲁维毕赤酵母、毛孢子菌属菌、半乳糖霉菌、地丝菌属、巴氏毕赤酵母、假丝酵母属、白地霉菌;2种丝状真菌分别为产黄青霉菌、卷枝毛霉菌。结论:炮天雄传统发酵炮制工艺涉及多种微生物共同参与发酵过程,这一发现为研究炮天雄现代炮制工艺奠定了微生物菌种基础。     

炮天雄质量标准研究

目的: 建立炮天雄的质量标准。 方法: 采用薄层色谱法对苯甲酰新乌头原碱进行定性研究;采用高效液相色谱方法,选用Eclipse XDB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,柱温35℃,流动相A为0.1 mol·L^-1醋酸铵溶液（每1 000 mL加冰醋酸0.5 mL）,B为四氢呋喃-乙腈（15∶25）,梯度洗脱,体积流量1 mL·min^-1,检测波长235 nm。 结果: 炮天雄中水分为10.1%~12.3%;定性鉴别专属性强;苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱分别在0.049 4~1.976,0.023 32~0.932 8,0.049 95~1.998,0.024 46~0.978 56,0.024 91~0.996 48,0.022 02~0.880 8 μg进样量呈良好线性关系,r均为0.999 9;平均回收率分别为98.79%,100.66%,97.06%,97.91%,103.58%,102.77%;RSD分别为1.90%,2.23%,1.91%,1.96%,1.08%,2.19%。 结论: 该方法操作简便,结果准确,可作为炮天雄的质量控制方法。     

炮附片HPLC特征图谱及炮制前后比较研究＊

目的 建立炮附片HPLC特征图谱，分析炮附片炮制前后物质基础差异。方法 AgilentExtend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；乙腈（A）-40 mM乙酸铵缓冲液(氨水调PH为10.5)（B），梯度洗脱，检测波长为240 nm，柱温为30℃，进样量为20 μL。结果 建立了炮附片HPLC特征图谱。生附子经炮制成为黑顺片后，11个峰的峰面积显著减小，3种单酯型生物碱含量降低，3种双酯型生物碱基本检测不到。黑顺片经砂炒制成炮附片后，3种单酯型生物碱含量进一步降低，且无新成分峰出现。结论 生附子经炮制成为炮附片后，可使生附子的成分发生量变和质变。炮附片与黑顺片特征图谱基本一致，含量略有差别。     

附片指纹图谱研究及6种酯型生物碱含量测定

目的:采用高效液相色谱法建立白附片、黑附片的HPLC指纹图谱,并同时测定6种酯型生物碱的含量,为附子炮制和附片安全使用提供科学依据。方法:采用Phenomenex Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.04 mol.L-1醋酸铵溶液(浓氨溶液调pH10.0)梯度洗脱。用国家药典委员会"相似度评价软件2004AB"处理分析,建立白附片、黑附片的HPLC指纹图谱,并测定白附片、黑附片、黄附片、生附子和盐附子中6种酯型生物碱的含量。结果:各批次白附片、黑附片指纹图谱相似度高,6种酯型生物碱分离度良好,黄附片、生附子指纹图谱与白附片、黑附片的对照图谱显著不同。结论:本研究所建立的方法可靠、简便易行。附片指纹图谱专属性强,结合6种酯型生物碱含量能较全面地反映其内在质量,为附片的安全使用及其质量控制提供科学依据。     

基于酯型生物碱含量变化选择蒸制附片

目的基于6种酯型生物碱含有量的变化,选择合适的蒸制附片。方法采用HPLC法,测定鲜附片、生附片、浸附片中3种双酯类生物碱(中乌头碱、乌头碱、次乌头碱)和3种单酯类生物碱(苯甲酰中乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)的含有量。结果蒸制过程中双酯型生物碱的含有量迅速减少,而单酯型生物碱的含有量迅速增加,然后稳定在一定水平,但随蒸制时间延长会逐渐降低。结论鲜附片更适合进行蒸制,蒸制时间以4~10 h为宜。     

附子炮制品炮天雄对急性心力衰竭大鼠血流动力学和神经体液因子的影响

目的:探讨附子炮制品炮天雄对急性心力衰竭大鼠血流动力学和神经体液因子的影响。方法:对健康成年大鼠采用左心室插管方法监测其心室内压及频率,盐酸普罗帕酮复制急性心力衰竭模型,造模成功后,分别对各组大鼠给药:模型组十二指肠给予蒸馏水,阳性组股静脉注射参附注射液(3.33 mL/kg),炮天雄高、中、低剂量组分别经十二指肠给予炮天雄水煎液5,2.5,1.25 g生药/kg。记录造模前后以及给药后5 min、10 min、20 min、30 min、60 min时心脏频率(HR)和左心室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))、左心室内压最大下降速率(-dp/dt_(max))的变化。观察60 min后腹主动脉取血,采用酶联免疫法测定血清中Ang-I、ALD、ET-1、ANP和TNF-α含量。结果:不同剂量的炮天雄可不同程度的升高模型大鼠各时间点的HR和+dp/dt_(max),降低-dp/dt_(max);并能降低模型大鼠血清中Ang-I、ALD、ET-1、ANP、TNF-α水平。结论:炮天雄对盐酸普罗帕酮诱导的急性心力衰竭大鼠具有强心作用,能够改善其血流动力学,降低与心力衰竭有关的神经体液因子的分泌。     

HPLC法测定黄连药材及其炮制品中六种生物碱的含量

目的：测定黄连药材及其炮制品中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量,制定2015年版《中国药典》中黄连及其炮制品的质量标准。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.25 mol·L-1乙酸铵和8 mmol·L-1十二烷基硫酸钠（SDS）水溶液（氨水调节pH 9.3）（36：64）为洗脱剂,流速1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温35 ℃。结果：盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围依次为0.006 96-0.233、0.004 75-0.152、0.003 30-0.528、0.006 31-1.010、0.004 71-0.753、0.017 8-2.884 μg·mL-1;加样回收率依次为99.65%、98.59%、98.49%、98.66%、98.64%、98.63%,RSD依次为0.03%、0.15%、0.21%、0.12%、0.28%、0.23%。结论：该方法简便、准确、可靠,可作为2015年版《中国药典》（一部）黄连质量标准中的含量测定方法。     

甲橙比色法测定附子、附子须根及4种附片的总生物碱含量

<正> 测定乌头类生物碱含量,已报道有中和法、紫外分光光度法、非水滴定法、比色法和高压液相色谱法等,但这些方法在基层单位工作中不十分理想。本文根据离子对萃     

附子炮制品水煎液对比格犬心脏急性毒性研究

目的:比较附子不同炮制品(刨附片、炮天雄、黑顺片)对比格犬的心脏急性毒性的影响。方法:比格犬16只,随机分为空白对照组、刨附片组、炮天雄组、黑顺片组,按照4g生药/kg灌胃比格犬浓缩液,检测灌胃前和灌胃后1h,1d、3d、7d和14d后比格犬体重、体温变化和心电图心率变化,并测定血液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量。结果:给药后1h内黑顺片组犬出现呕吐,其余组未观察到症状;给药后14d内比格犬体重、体温正常,给药组乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶含量,心电图心率与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:刨附片,炮天雄,黑顺片水煎液按照4g生药/kg给犬灌胃,没有明显心脏毒性。     

炮天雄多糖硫酸酯衍生物的制备及生物活性研究

目的制备岭南炮天雄多糖（PTXP）硫酸酯化衍生物,评价其抗氧化、免疫调节和抗肿瘤活性。方法 使用三氧化硫-吡啶法制备炮天雄多糖硫酸酯衍生物,用红外光谱测定炮天雄多糖硫酸酯衍生物的结构,用氯 化钡-明胶比浊法测定硫酸基的取代度（DS）,通过体外抗氧化实验检测炮天雄多糖硫酸酯衍生物的抗氧化能 力,用CCK-8 法检测炮天雄多糖硫酸酯衍生物对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响,以HepG2 肝癌细胞增殖实 验探究炮天雄多糖硫酸酯衍生物的抗肿瘤活性。结果炮天雄多糖的硫酸基取代度随着三氧化硫吡啶复合物用 量增加而增加。红外光谱检测发现1 220 cm-1 与810 cm-1 附近分别出现S=O 与C-O-S 的吸收峰,说明炮天雄 多糖分子上已经成功引入硫酸基团。体外抗氧化实验结果说明炮天雄多糖的硫酸酯衍生物有清除DPPH 和 ABTS 自由基能力（P＜0.05）。小鼠脾淋巴细胞增殖实验结果说明炮天雄多糖硫酸酯衍生物的炮天雄多糖-S2 （PTXP-S2）能促进小鼠脾淋巴细胞的增殖（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。抗肿瘤细胞增殖实验则说明PTXP-S2 有一定的抗肿瘤活性（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。结论炮天雄多糖经硫酸酯化修饰后有一定的抗氧化与 免疫调节活性,但抗肿瘤活性不明显。     

附子和附片质量标准研究

 目的 采用薄层色谱法和高效液相色谱法建立附子和附片的质量控制方法。方法 采用薄层色谱法分别对附子中的双酯型生物碱和附片中的单酯型生物碱进行鉴别。采用高效液相色谱法同时对附子中的单酯型生物碱和双酯型生物碱进行限量检查和含量测定、对附片中的双酯型生物碱和单酯型生物碱进行限量检查和含量测定。结果 TLC鉴别方法分离良好、斑点清晰;6种乌头碱类成分的HPLC限量检查和含量测定方法在5～100 μg·mL-1内线性关系良好,检出限在1 μg·mL-1,平均回收率均在95%～105%之间。结论 本方法专属性强、结果准确、耐用性好,可更好地控制附子和附片的质量。     

黄芪炮制品中多糖成分含量的比较研究

目的：研究黄芪不同炮制品中多糖成分的差异。方法：通过溶剂提取法提取黄芪多糖,分段沉淀法精制多糖。利用硫酸-苯酚法测定黄芪不同炮制品中总多糖成分的含量。结果：黄芪不同炮制品中多糖含量不同,其中以蜜黄芪多糖含量最多,盐麸炒黄芪含量次之,生黄芪含量再次之,炒黄芪含量较少。结论：不同的炮制方法可以明显影响黄芪中多糖成分的含量。     

小青龙汤加炮附片治疗小儿发热病的探讨

经方小青龙汤临床诊治咳喘居多,余以小儿发热案例作一分析。     

黄芪炮制品中皂苷成分含量的比较研究

目的研究黄芪不同炮制品中皂苷成分的差异。方法通过溶剂法和沉淀法提取精制了总皂苷。利用香草醛-冰醋酸、高氯酸显色法测定黄芪不同炮制品中总皂苷成分的含量。结果黄芪不同炮制品中总皂苷含量不同,其中以蜜黄芪和盐麸炒黄芪总皂苷含量最高,生黄芪总皂苷含量次之,炒黄芪总皂苷含量较少。结论不同的炮制方法可以明显影响黄芪中总皂苷等成分的含量。     

草乌及其炮制品中6种生物碱类成分的含量测定

目的: 测定不同产地草乌及草乌炮制品中6种生物碱的含量,综合评价其安全性和有效性。 方法: 采用HPLC同时测定6种生物碱含量,比较草乌炮制前后有效成分含量变化。 结果: 草乌生品中单酯型生物碱含量0.408 1～1.718 2 mg·g^-1,双酯型生物碱含量0.660 4～8.653 2 mg·g^-1;炮制后双酯型生物碱大大减少,而单酯型生物碱则明显增加。 结论: 不同产地草乌中6种生物碱的含量差异较大,常压蒸、煮法具有一定科学性,炮制后双酯型生物碱<0.04%,而单酯型生物碱常超出限量要求。     

黄芪不同炮制品中黄酮类成分的含量比较

目的:比较黄芪经不同方法炮制前后黄酮类成分含量变化.方法:采用Kromasil C18柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1;检测波长为260 nm,柱温35℃.结果:在上述条件下,毛蕊异黄酮-7-0-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素-7-0-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的质量浓度分别在2.120 ～ 42.40,1.360～ 27.20,1.060 ～21.20,0.360 0～7.200 mg·L-1与色谱峰面积呈良好的线性关系,低、中、高浓度的平均加样回收率(n=3)均在95.1 ～98.5％,RSD均＜3.0％.酒制黄芪中毛蕊异黄酮的含量较黄芪生品有所增加,蜜制黄芪中4神黄酮成分及总黄酮含量均较生品组有所降低.米制、盐制黄芪中4种黄酮成分和总黄酮含量略显降低,但未见统计学差异.结论:黄芪经酒制后毛蕊异黄酮含量增加,蜜制后黄酮类成分含量降低,盐制、米制未对黄芪的黄酮类成分产生显著影响.