急性白血病免疫球蛋白和T细胞受体基因重排及其…

免疫球蛋白和Ｔ细胞受体基因重排不仅发生在Ｔ、Ｂ细胞起源的恶性肿瘤中，而且偶尔也可发生在其它分化序列的细胞上，即序列交叉或序列失真现象。本文综合最近文献对此现象及其机制等作一简要综述。     

免疫球蛋白重链和T细胞受体基因重排与急性髓细胞白血病的关系

目的:探讨急性髄细胞白血病(acutemyeloidleukemia,AML)患者的免疫球蛋白重链(IgH)、T细胞受体(TCR)基因重排对疾病预后的影响。方法:用聚合酶链反应(PCR)方法检测IgH、TCR基因重排。结果:38例患者中12例发生IgH基因重排(31.6%),8例TCR基因重排(21.1%)。阳性病例完全缓解率低;缓解期长的病例阳性率低;初发或复发时阳性率高。结论:IgH、TCR基因重排提示AML患者预后不良,需密切随访。     

免疫球蛋白重链基因重排与急性B淋巴细胞白血病

免疫球蛋白重链(IGH)基因重排被认为是急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的特异性的指标,几乎所有的急性B淋巴细胞淋巴细胞白血病病人IGH-PCR检测都是阳性。IGH基因重排阳性可以用于辅助诊断B-ALL。而且对IGH-PCR动态观测可反应化疗的效果,同时是重要的预后指标,并能用于指导实施个体化治疗和BMT治疗。本文就免疫球蛋白重链基因重排与急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的关系作一综述。     

急性淋巴细胞白血病T细胞受体δ基因不完全重排的研究

应用ＤＮＡ多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术对急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）δ基因重排的研究，并获得了３个ＡＬＬ患者ＴＣＲδ基因的Ｖ－（Ｄ）－Ｄ结合部顺序（Ｎ顺序）。证明ＡＬＬ，特别是Ｂ细胞ＡＬＬ中，ＴＣＲδ基因不完全重排的发生率比较高，最常见的两种重排类型为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３和Ｄδ１／２－Ｄδ３。δ基因的不完全重排是早期淋巴分化调控中一个重要的内容。δ基因Ｖ－（Ｄ）－Ｊ结合部     

儿童急性白血病T细胞受体δ、γ基因重排连接区序列的动态分析

目的 探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患在初诊、完全缓解（ＣＲ）及复发不同时期的Ｔ细胞３受体（ＴＣＲ）δＶ－Ｄ,γＶ－Ｊ基因重排连接区序列的差异及其意义。方法 采用Ｔ－载体分子克隆测离１限制性酶团及聚合酶链反应等技术,对３４丛ＡＬＬ患标本进行ＴＣＴδ、γ连接区序列动态分析。结果 ３４丛ＡＬＬ患标本进行ＴＣＲ－５γ连接区序列动态分析。结果 ３４份ＡＬＬ患标本的ＴＣＲ５、γ基因重排序列在初     

急性B淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链基因克隆性重排的研究

目的：初步阐明急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫球蛋白重链(IgH)基因克隆性重排的发生及其异质性。方法：通过逆转录，聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光双脱氧核苷酸末端终止法以及生物信息学技术，对25例经细胞形态学、免疫表型和细胞遗传学确诊为B-ALL患的IgH基因克隆性重排进行了测序研究。结果：25例患中有24例(96％)IgH基因发生了克隆性重排，其中54．2％(13／24)为单克隆性重排，45．8％(11／24)为寡克隆性重排。根据同一个体不同寡克隆CDR3区的同源性，这些寡克隆可分为不相关(54．5％)、部分相关(27．3％)和完全相关(18．2％)。结论：25例B—ALL患的IgH基因中96％发生克隆性重排，其中54．2％为单克隆性重排，45．8％为寡克隆性重排，个体的寡克隆之间54．5％存在异质性。     

多重PCR法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病患者克隆性免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

目的 应用多莺PCR方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的克隆性免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排,为实时定量RT-PCR(RQ-PCR)法监测ALL患者体内的微量残留病(MRD)奠定基础.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和(或)TCR检测方法,设计96条不同的PCR引物,分成14个混合管,通过多重PCR,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD克隆性基因重排.结果 在22例成人B系ALL患者中,Ig克隆性重排检出率为96%,其中IgH为86%,IgK为14%.在18例成人T系ALL患者中,TCR克隆性重排检出率为100%,其中TCRB为83%,TCRG为78%,TCRD为39%.两个及两个以上克隆性标志物的检出率在B和T系ALL中分别为91%(22例中20例)和89%(18例中16例).结论 BIOMED-2协作组设计的14管多重PCR引物和方法,几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性T、B细胞增殖群体,方法简便、可靠、覆盖面广,适用于成人ALL患者基因重排检测和MRD监测.     

儿童急性淋巴细胞白血病IgH基因重排的定量检测研究

目的建立免疫球蛋白重链（IgH）的实时定量（RQ）-PCR检测体系，以用于儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）微小残留病（MRD）检测。方法采用定性PCR筛选109例儿童B细胞ALL（B-ALL）IgH基因单克隆重排，根据连接区序列设计等位基因特异性引物，应用RQ-PCR技术，采用胚系Taqman探针与引物，在41例患儿中建立RQ-PCR定量检测方法，并分析其敏感度、特异性等。结果109例儿童B-ALL初诊标本中IgH单克隆重排有48例，经测序分析发现，V、D、J片段频率最高的分别为V3家族、D3家族和J4家族。RQ-PCR方法扩增48例IgH单克隆重排的初诊DNA，其中41例可重复敏感度和最大敏感度均≤10^-4，非特异性扩增的循环阈值（Ct值）均〉40，与特异性扩增Ct值的差距均〉3。标准曲线斜率均值为-3．314±0．19，截距均值为37．664±1．23，相关系数均为0．97以上。结论以IgH基因重排为靶分子，采用RQ-PCR方法和胚系探针策略检测儿童B-ALL，敏感性≤10^-4，并具有较高的特异性，适于MRD的定量研究。     

B系急性淋巴细胞白血病与基因重排

分子生物学是当今生命科学中最热门的前沿学科,尽管它在恶性血液病中的应用尚处于起始阶段,对细胞学诊断的影响也还有限。但是愕然回首,它已深深地影响到我们对细胞形态学和细胞遗传学,以及它们与临床之间诸多联系的理解,对肿瘤细胞生物行为和临床行为之间的了解,分子生物学检查能提供精确的证据、超前的信息和崭新的视角。本文就B系细胞白血病的相关基因重排与临床表型之间的关系作一综述。1　相关基因的结构与功能在B系急性淋巴细胞白血病(acutelymphoblasticleukaemia ,ALL)中,已检测到t(8;14 ) (q2 4 ;q32 )、t(2 ;8) (p11～12 ;q2 4 …     

应用PCR方法检测淋巴细胞白血病IgH和TCRγ基因重排

本文应用PCR方法扩增IgH基因重排产生的CDR-Ⅲ区序列和TCRγ基因重排产生的V_9区序列,共检测了20例淋巴细胞白血病病人,其中15例B淋巴细胞白血病均发生IgH基因重排,并有2例出现两种基因扩增产物,它的大小为70-140bp;另5例T淋巴细胞白血病中有2例发生TCRγ基因重排,扩增产物的大小为170-230bp,而在正常人和非淋巴细胞白血病中均未发现有IgH和TCRγ基因重排。     

多发性骨髓瘤患者免疫球蛋白重链基因重排的检测及意义

目的 探讨免疫球蛋白重链（IgH）基因重排在多发性骨髓瘤（MM）诊治中的应用。方法 采用半巢式PCR技术,分别用MM患者的IgH基因的CDR2和CDR3区的两组引物,对61份MM患者的骨髓和外周血单个核细胞进行扩增。结果 27份骨髓标本中,IgH基因重排Fr2A阳性率为70．4％（19／27）,34份外周血标本阳性率58．8％（20／34）。骨髓标本的Fr2A阳性率略高于外周血标本,而Fr3A的阳性率两者无明显差异。MM患者的IgH基因重排与Ig型别,临床分期及浆细胞数有关。IgG和IgH基因重排阳性率高于IgA型及轻链型;Ⅲ,期患者IgH基因重排阳性率高于Ⅰ,Ⅱ期患者;浆细胞数大于5％时,IgH基因重排阳性率略高;7例达临床完全缓解的患者中,仅有1例IgH基因重排Fr2A,Fr3A均转为阴性。结论 PCR技术检测MM患者IgH基因重排可作为诊断,疗效观察,预后判断及微小残留病监测的参考指标之一。     

多重PCR检测基因抗原受体重排在儿童急性淋巴细胞白血病诊断中的应用

目的 建立多重PCR方法检测免疫球蛋白（Ig）和T细胞受体（TCR）基因重排,探讨在儿童急性淋巴细胞白血病诊断和鉴别中的作用.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和（或）TCR检测方法,对儿童ALL患儿114 例,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRG和TCRB基因重排.结果 在105例B系儿童ALL患者中,克隆重排的检出率分别为IgH 73%、IgK34%、TCRG 44%和TCRB 35%,所有B-ALL患者Ig基因重排检出率可达85%;在11例T系ALL患者中,克隆重排的检出率分别为TCRB 82%和TCRG 73%,T-ALL 患者TCR基因重排检出率可达100%.结论 BIOMED-2引物系统可以检测出绝大多数儿童ALL患者的Ig/TCR基因重排,是一种有效的检测工具,值得在临床中推广使用.     

急性淋巴细胞白血病初发和难治复发时基因重排类型改变 …

目的：为进一步了解难治复发急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）基因类型的变化。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测５６例初治及其中２２例难治复发ＡＬＬ患者ＩｇＨ,ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排。结果：７１．４％（４０／５６）,８０．４％（４５／５６）及５８．９％（３３／５６）,初始ＡＬＬ存在ＩｇＨ,ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排,４０例ＩｇＨ基因重排阳性病人中,１７     

聚合酶链反应检测克隆性免疫球蛋白重链基因重排

目的 建立较简便、敏感的Ｂ细胞恶性肿瘤微小残留病（ＭＲＤ）检测方法。 方法 根据免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的保守序列设计引物，应用半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增技术检测克隆性ＩｇＨ基因重排。结果 该方法敏感性达１０＾－３。６２例Ｂ细胞恶性肿瘤患者，５１例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，阳性率为８２％，假阴性率为１８％（１１／６２）。同时检测３５例非Ｂ细胞恶性肿瘤患者和２０例正常人均阴性，无假阳     

多重PCR检测急性淋巴细胞白血病IgH及TCRγ链重排基因

多重ＰＣＲ检测急性淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲγ链重排基因徐兵周淑芸孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排，可作为淋巴细胞白血病特异性基因标志。应用多聚酶链（ＰＣＲ）技术检测重排基因以其灵敏、快速等特点而优于其它传统方法。但目前Ｐ...     

成人急性T淋巴细胞白血病T淋巴细胞受体β链基因重排的特点及其在微小残留病定量检测中的意义

目的 建立以TCR β基因重排为分子标志,基于ASO引物的RQ-PCR方法,检测成人T-ALL患者的TCR β基因重排,以利于动态监测患者的MRD.方法 20例成人T-ALL患者的初诊DNA标本经多重PCR检测方法设计38条引物,分成3管,分别扩增TCR β基因完全重排和不完全重排,克隆产物经电泳和双色基因扫描鉴定.对其中4例患者进行基因测序和序列比对分析,根据克隆特异性序列信息,利用软件设计4条ASO引物,作为RQ-PCR检测的上游引物,合成通用的Jβ下游引物和TaqMan探针,对患者的随访标本定量监测MRD.结果 20例患者中有17例可检测到克隆性TCR β基因重排,克隆检出率为85.0%(17/20).其中16例可检测到至少1个Vβ-Jβ完全重排(94.1%,16/17),7例患者有Dβ-Jβ的不完全重排(41.2%,7/17),完全Vβ-Jβ和不完全Dβ-Jβ重排之间的比例约为2∶1.双色基因扫描分析显示Jβ2家族的使用频率为73%,Jβ1家族的使用频率为27%,Jβ2家族的使用频率明显高于Jβ1家族.4例患者使用ASO引物RQ-PCR扩增TCR β重排靶基因的标准曲线的斜率为-3.60～-3.27,相关系数＞0.99,敏感性达4×10-5μg/μl,荧光背景信号不显示或较低.监测4例T-ALL患者在疾病治疗各随访时间点的TCR β重排靶基因水平,包括诱导完全缓解、巩固治疗等时间点,RQ-PCR显示其MRD水平随病情的缓解呈逐渐下降的趋势.结论 以克隆性TCR β基因重排为靶分子的特异性寡核苷酸引物RQ-PCR方法可对T淋巴细胞系统的恶性克隆进行准确定量,适用于成人T-ALL患者MRD的随访监测.