表皮生长因子受体对支气管哮喘小鼠气道黏液分泌的影响及机制

目的探讨支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道黏液分泌与表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子α（TGFα）的关系以及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（AG1478）的干预作用。方法32只小鼠随机分为4组：正常对照组、哮喘模型组、AG1478组和地塞米松干预组。建立哮喘小鼠模型,对肺组织切片行过碘酸雪夫染色显示气道黏膜杯状细胞的增生情况。应用免疫组织化学方法检测TGF—α的蛋白及RTPCR方法检测EGFR mRNA表达的变化。结果哮喘组出现气道壁增厚、杯状细胞增多、黏液分泌增加,EGFR、TGF—α水平增高。地塞米松组和AG1478组较哮喘组均有所改善,EGFR、TGF—α表达降低（P〈0．05）。结论EGFR、TGF—α参与哮喘小鼠气道黏液分泌过程,AG1478可抑制气道黏液分泌。AG1478可能通过下调EGFR、TGF-α的表达以及抑制依赖于EGFR下游的细胞信号转导级联反应来发挥其效应。     

表皮生长因子受体对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠急慢性气道炎症的作用以及阻断EGFR的激活对气道炎症的影响.方法 将45只sD大鼠按随机数字表法分为对照组(A1、A2、A4组)、哮喘组(B1±、B2、B4组)和治疗组(C1、C2、C4组),每组5只,其中1、2和4分别表示激发1、2和4周.治疗组在每次卵清白蛋白激发前1 h给予酪氨酸激酶抑制剂(TKI)金雀异黄素(genistein)20 mg/kg腹腔注射.末次激发后收集BALF行细胞总数及分类计数.肺组织HE染色并行气道黏膜下炎症评分.免疫组织化学及免疫荧光染色观察气道上皮EGFR表达及其酪氨酸磷酸化(活化的ECFR)程度.两组数据间的比较采用单因索方差分析,多组间比较采用g检验.结果 (1)B组各时段BALF中细胞总数及各类细胞绝对计数均高于A组相应时段组(均P<0.05),嗜酸粒细胞在2周末达高峰;C组各时段BALF中细胞总数[分别为(48±6)、(51±9)和(57±12)×105]及嗜酸粒细胞计数[分别为(2.5±0.5)、(2.7±0.6)和(2.6±0.5)×105]均低于相应B时段组[细胞总数分别为(70±10)、(88±8)和(72±10)×105>,嗜酸粒细胞数分别为(5.6±0.8)×105、(6.6±0.6)×105和(4.3±0.4)×105],差异有统计学意义(均P<0.05);C组各时段BALF中中性粒细胞及淋巴细胞计数与相应时段B组比较差异无统计学意义;C1组BALF中上皮细胞数[(2.5±0.5)×105]低于B1组[(4.9±0.7)×103](q=4.671,P<0.05),C4组BALF中上皮细胞数[(5.7±1.2)×105]高于B4组[(4.3±0.4)×105](q=4.012,P<0.05).(2)C4组气道黏膜下炎症评分(3.6±0.6)低于B4组(5.1±0.6)(q=4.923,P<0.05).(3)B组各时段各级气道EGFR蛋白表达均高于相应时段A组(均P<0.01);气道上皮EGFR活化程度A组分别为(1.84±0.26)、(1.43±0.29)和(1.67±0.32),B组分别为(3.69±0.43)、(3.57±0.29)和(4.46±0.47),C组分别为(3.12±0.24)、(3.00±0.28)和(2.69±0.54),B组各时段气道上皮EGFR活化程度均高于相应时段A组(均P<0.05);C组各时段气道上皮EGFR活化程度均弱于相应时段B组(均P<0.05).(4)相关分析显示气道上皮EGFR表达及其活化程度均与BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞绝对计数,以及气道炎症评分呈明显正相关.结论 哮喘大鼠气道上皮EGFR参与气道炎症,TKI金雀异黄素有一定抑制哮喘大鼠急慢性气道炎症的作用.     

致敏大鼠气道黏液异常分泌与生长因子受体信号调节

目的探讨致敏大鼠黏液高分泌与转化生长因子α(transfroming growth factor-α,TGF-α)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)通路之间的关系。方法应用析因设计方法,随机将大鼠分为12组,每组4只。采用卵蛋白(OVA)腹腔注射加雾化吸入致敏;HE染色和AB-PAS染色测定杯状细胞化生/增生(GCH/GCM)指数;免疫组织化学检测支气管上皮细胞MUC5AC蛋白和EGFR蛋白表达水平;放射免疫方法检测血清中TGF-α。结果①哮喘气道上皮杯状细胞增生肥大,大量黏液形成,小气道内有黏液栓形成。MUC5AC蛋白表达和GCH指数明显增高,呈动态演变。且与EGFR蛋白表达和血清TGF-α水平呈正相关。②析因分析表明,不同处理因素,MUC5AC蛋白表达、GCH/GCM指数、EGFR蛋白表达和血清TGF-α水平差异有统计学意义(P<0.01),MUC5AC除外。不同的处理时间,MUC5AC蛋白表达、GCH/GCM指数、EGFR蛋白表达和血清TGF-α水平差异有统计学意义(P<0.01)。处理因素和处理时间有交互作用(P>0.05)。结论哮喘组MUC5AC蛋白表达和GCH/GCM指数明显增高,且随着激发时间呈动态演变。Genistein通过抑制EGFR通路活性降低MUC5AC高表达和GCH/GCM指数。     

干预支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌的研究

目的 探讨表皮生长因子受体（EGFR）阻滞剂吉非替尼抑制支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌的作用.方法 将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和吉非替尼治疗组（干预组）.采用苏木精-伊红（HE）染色法、过碘酸-雪夫（PAS）特殊染色法、免疫组化法、原位末端转移酶标记法分别检测各组小鼠气道炎症及杯状细胞的数量和黏液分泌、p-EGFR蛋白表达、细胞凋亡等状况,western blot法检测各组小鼠肺组织中p-EGFR变化.结果 与正常组相比,哮喘组小鼠出现典型的哮喘激发症状,肺组织中出现明显的以淋巴细胞和嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润等病理改变;哮喘组小鼠小气道杯状细胞数显著增加,干预组数量明显减少,差异具有统计学意义（P均＜0.05）;与哮喘组相比,干预组小气道中p-EGFR阳性、Bcl-2阳性杯状细胞数量分别显著减少,细胞凋亡、Bax阳性杯状细胞数量分别显著增加,差异具有统计学意义（P均＜0.05）.结论 吉非替尼可抑制支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌,其机制可能足阻滞EGFR通路,抑制黏液分泌的同时,诱导分泌黏液的杯状细胞凋亡.     

表皮生长因子受体与肺癌

表皮生长因子受体(EGFR)所介导的信号传递通道是肿瘤发生和发展的关键调节因素之一。EGFR的异常表达和激活常导致细胞的转化和肿瘤的发生和发展。本文目的是对EGFR与肺癌的研究进展作一综述。     

表皮生长因子受体与气道黏液高分泌

黏液高分泌是慢性气道炎症性疾病的重要病理特征之一,也是患者病情加剧恶化的重要因素.表皮生长因子受体(EGFR)是一种受体酪氨酸激酶(RTK),在气道黏液高分泌的信号转导通路中居于中心地位,各种炎性介质、病原微生物及其产物、活性氧等可通过多种信号转导通路活化EGFR,活化相关转录因子引起黏蛋白5AC基因表达上调.明确EGFR上下游信号通路势必对慢性气道炎症性疾病的防治提供指导.     

表皮生长因子受体对支气管哮喘大鼠气道重塑的影响

支气管哮喘 (简称哮喘 )大鼠气道重塑是气道上皮反复损伤修复导致气道结构的改变 ,在此过程中表皮生长因子及其受体 (EGF/EGFR)具有重要作用。我们的实验选用酪氨酸激酶抑制剂 4′ ,5 ,7 三羟基异黄酮 (Genistein ,商品名 :金转停 ,河北石家庄荣立药物研究所 )阻断EGFR的激活 ,旨在观察抑制哮喘动物气道上皮EGFR的激活对气道重塑的影响 ,进一步深化对哮喘发病机制的认识。材料与方法　哮喘大鼠模型的建立及分组 :30只雄性SD大鼠 ,清洁级 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g ,购于四川大学华西医学实验动物中心 ,按随机数字表法将大鼠分为哮喘组 (…     

茶黄素和表皮生长因子受体对气道黏液分泌的影响

目的 探讨茶黄素对炎症反应时气道上皮细胞黏液分泌的影响.方法 通过人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)刺激人肺腺癌细胞A549,构建炎症反应时气道黏液高分泌模型,以茶黄素和表皮生长因子受体(EGFR)阻断剂表皮生长因子受体阻断剂(AG1478)进行干预,观察黏蛋白5AC(MUCSAC)、EGFR、磷酸化EGFR(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(P-ERK1/2)、兔抗磷酸化p38(P-p38)及磷酸化JNK丝裂原活化蛋白激酶(P-JNK)的表达.用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活性,再将A549细胞分为对照组、HNE处理组、茶黄素组、AG1478组和茶黄素+AG1478组.用逆转录PCR方法检测各组MUC5AC mRNA、EGFR mRNA的变化;Western blot法检测EGFR、P-EGFR、P-ERK1/2、P-p38和P-JNK蛋白的表达;酶联免疫吸附测定法观察MUCSAC蛋白表达的变化,并用细胞免疫激光共聚焦显微镜观察作用前后黏蛋白的分布.两样本均数间比较采用t检验,多样本均数间比较采用单因素方差分析.结果 HNE处理组MUC5AC的mRNA和蛋白的积分吸光度值分别为0.99±0.03和(169±6)μg/mg,EGFR mRNA和蛋白表达的积分吸光度值分别为0.98±0.02和(0.89±0.03)μg/mg,均较对照组[0.53±0.02、(105±4)μg/mg和0.61±0.11、0.21±0.05]明显升高;P-EGFR、P-ERK1/2的蛋白表达也较对照组显著增加,而P-p38的表达则有较低幅度的增强,P-JNK无明显变化.给予茶黄素及AG1478预处理后,与HNE刺激组相比,EGFR、P-EGFR、P-ERK1/2、P-p38均明显下调,P-JNK无相应改变;而茶黄素+AG1478组MUCSAC mRNA和MUC5AC的下调较单独用茶黄素或AG1478处理更为明显,其积分吸光度值分别为0.20±0.02和(125±3)μg/mg,差异均有统计学意义(t值分别为3.02和1405.94,均P<0.05).结论 茶黄素可通过下调EGFR水平、减少EGFR的活化、部分阻遏EGFR信号转导途径及细胞外信号调节激酶来实现对下游途径的影响,从而发挥茶黄素抑制炎性气道黏液高分泌形成的作用.     

阿司匹林对表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂诱导小鼠皮疹的改善作用及其机制

目的 探讨阿司匹林对表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂（EGFR-TKI）诱导的小鼠皮疹的改善作用,并探讨其可能的机制。方法 将给予EGFR-TKI靶向药物厄洛替尼成功建立皮疹模型的40只雄性Balb/c小鼠随机分为模型组及阿司匹林高、中、低剂量组,每组10只,另取正常雄性Balb/c小鼠10只作为对照组。阿司匹林高、中、低剂量组分别灌胃给予阿司匹林1.13、0.75、0.38 mg,对照组灌胃给予100 mg/kg蒸馏水,1次/天,共30 d。记录各组小鼠皮肤情况及饮食、饮水、排尿、排便、精神状态、瘙痒等情况,皮肤水分测试分析仪检测皮肤水分,并进行皮肤炎症情况评分。处死后取背部皮肤,HE染色后观察皮肤病理改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果 对照组小鼠皮肤及一般情况均正常;模型组、阿司匹林低剂量组小鼠背部皮肤出现皮疹、结痂、脱屑,从第1周开始出现饮食减少、饮水增多、排尿增多、排便减少等情况,伴随焦躁不安、抓挠背部等行为;阿司匹林高、中剂量组小鼠皮肤皮疹、结痂、脱屑等均较模型组好转,从第2周开始饮食慢慢恢复正常。仅模型组小鼠出现轻度...     

气管腺样囊性癌表皮生长因子受体基因突变的检测

目的了解气管腺样囊性癌肿瘤组织表皮生长因子受体（EGFR）18、19、20、21位点基因突变情况,为气管腺样囊性癌的分子靶向治疗奠定基础。方法将自2004年至2013年在煤炭总医院经气管镜下取出的气管腺样囊性癌共36例蜡块标本,提取肿瘤细胞DNA,采用ARMS法进行EGFRl8、19、20、21位点基因突变检测。采用Fisher精确概率法比较两组之间阳性率的差别。P〈0．05为差异有统计学意义。结果36例气管腺样囊性癌蜡块包埋标本中,EGFR基因突变阳性率为31％（11／36）。14％（5／36）存在双突变（19外显子缺失突变及21外显子突变）,0％（0／36）出现EGFR基因20外显子突变。临床分期为Ⅳ期的标本EGFR基因突变率为63％（5／8）,临床分期为Ⅱ～Ⅲ期的标本中EGFR基因突变率为21％（6／28）,两组间有明显差异（P〈0．05）。结论气管腺样囊性癌EGFR基因突变率介于肺腺癌与鳞癌之间。气管腺样囊性癌EGFR基因突变在已有血行转移的患者中阳性率明显高于无血行转移者,晚期气管腺样囊性癌患者可能从EGFR-酪氨酸激酶抑制剂治疗中获益。     

转化生长因子α对小鼠气道平滑肌细胞的促增殖作用

目的 探讨转化生长因子α(transforming growth factog alphg,TGF-α)对小鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMC)促增殖作用及其机制.方法 用四唑盐(MTT)比色法和3H-TdR掺人法测定加入TGF-α后小鼠ASMC的增殖情况.本实验采用3H-TdR掺入法和MTT比色法观察选择性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(AG1478)、EGFR中和抗体225(225mAb)、MEK抑制剂(U0126)、PI-3K抑制剂(Wonmannin)对加入TGF-α后促ASMC增殖的影响.通过Western Blot方法测定加入TGF-α及加用AG1478、225mAb后ASMC磷酸化EGFR蛋白表达.结果 用MTT比色法和3H-TdR掺入法测定ASMC培养液中加入TGF-α后ASMC增殖情况比对照组明显增加.加入AG1478、225mAb、U0126、Wortmannin可抑制TGF-α促ASMC增殖作用(P＜0.01).经Western Blot检测,TGF-α引起ASMC磷酸化EGFR蛋白表达增高.AG1478、225mAb抑制TGF-α所致ASMC磷酸化EGFR蛋白表达的增加(P＜0.01).结论 TGF-α激活EGFR为磷酸化EGFR,从而通过:①ras-raf-MEK-erk/MAPK途径;②PI3K-PKC-IKK途径;促进体外培养的小鼠ASMC的增殖.     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌研究进展

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)已成为晚期非小细胞肺癌治疗的研究热点.在有EGFR突变的患者中,一线单药EGFR-TKI能显著延长患者无进展生存期;EGFR突变是EGFR-TKI治疗获益的有效预测指标.虽然EGFR-TKI与化疗同步联合未能显示出生存优势,但在序贯联合的研究中能延长无进展生存期.EG...     

Factors that predict progression-free survival in Chinese lung adenocarcinoma patients treated with epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors

Background

Although first-generation epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors (EGFR-TKIs) have shown efficacy in patients with advanced lung cancers, survival predictors with these drugs have not been extensively investigated. This study was performed to explore factors that may predict progression-free survival (PFS) in Chinese lung adenocarcinoma patients treated with EGFR-TKIs.

Methods

We retrospectively collected clinicopathologic data on 208 patients who received either gefitinib, erlotinib or icotinib, including the patients’ EGFR mutation status and levels of six serum tumor markers [carcinoembryonic antigen (CEA), neuron-specific enolase (NSE), cancer antigen 125 (CA125), squamous cell carcinoma antigen (SCC), cytokeratin-19 fragments (CYFRA21-1) and lactate dehydrogenase (LDH)]. Univariate and multivariate survival analyses were performed to identify independent prognostic factors associated with PFS.

Results

At the study cutoff date, 189 (90.9%) of the patients met the Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) version 1.0 criteria for progressive disease (PD), while 19 (9.1%) had stable disease (SD). The median PFS of the 208 patients was 12.4 months (95% CI, 11.0–13.8 months). In the multivariate analysis using a Cox proportional hazard model, a non-smoking history [hazard ratio (HR) =2.460; 95% CI, 1.484–4.079; P<0.001], first-line treatment (HR =1.500; 95% CI, 1.062–2.119; P=0.021), and a high pretreatment serum level of CEA (HR =1.424; 95% CI 1.026–1.977; P=0.035) were found to be significant predictors of a longer PFS.

Conclusions

In Chinese lung adenocarcinoma patients treated with EGFR-TKIs, a non-smoking history, first-line EGFR-TKIs treatment and a high serum level of CEA were independent predictors of a longer PFS along with an EGFR-activating mutation.     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂与化疗联合应用治疗非小细胞肺癌的研究进展

吉非替尼联合化疗的Ⅲ期临床试验INTACT1和INTACT2的结果表明,与单纯化疗相比,吉非替尼与健择+顺铂或紫衫醇+卡铂联合,不能提高非小细胞肺癌治疗的有效率和生存率.对于这一阴性结果,部分学者认为是由于缺乏对敏感人群的选择以及化疗药与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrasine kinase inhibitors,EGFR-TKI)同时使用可能存在相互拮抗作用.基础实验及临床试验表明,化疗后序贯给予EGFR-TKI维持或化疗间期间断给予EGFR-TKI的联合治疗方式,有较好的临床应用前景.     

Role of the fibroblast growth factor receptor axis in cholangiocarcinoma

Advanced cholangiocarcinoma (CCA) is a highly lethal disease with limited therapeutic options beyond cytotoxic chemotherapy. Molecular profiling of CCA has provided insights into the pathogenesis of this disease and identified potential therapeutic targets. The fibroblast growth factor receptor (FGFR) axis is important for maintaining tissue homeostasis. Aberrations in FGFR activity have been implicated in the development and progression of CCA and other malignancies, which has generated significant interest in exploring FGFR's therapeutic potential. FGFR2 fusion events are present in up to 17% of intrahepatic CCAs and appear to predict sensitivity to FGFR inhibitors even after progression on chemotherapy. These observations have led to a clinical trial evaluating FGFR inhibition in patients with CCA enriched for FGFR alterations. This review summarizes current knowledge about the role of the FGFR pathway in cholangiocarcinogenesis and ongoing work in developing FGFR‐directed therapies as an antineoplastic strategy for CCA.     

Expression of transforming growth factor alpha and epidermal growth factor receptor in human hepatocellular carcinoma

Abstract: Transforming growth factor alpha (TGF-alpha) is thought to be involved in liver regeneration, cellular proliferation, and hepatocarcinog-enesis. We have looked at the relationship between TGF-alpha and it's receptor, and have attempted to relate the expression of TGF-alpha and it's receptor to the differentiation of hepatocellular carcinoma (HCC) on serial sections of HCC. We examined immunohistochemically the expression of the TGF-alpha and of epidermal growth factor receptor (EGFR) proteins in the same area of 53 nodules (<5 cm in diameter) of HCC obtained from patients. Immnnoreactive proteins were visualized by using a biotin-streptoavidin system (LSAB Kit, Dako). TGF-alpha was strongly expressed in 29 of 53 (54.7%) nodules. Specimens strongly positive for TGF-alpha were found mainly in well-differentiated HCC, while specimens positive for EGFR were found mainly in poorly differentiated HCC (p<0.05). In the tissues that stained weakly positive for TGF-alpha, the expression of EGFR differed significantly, according to the degree of HCC histologic differentiation (p<0.05). These results led us to speculate that the expression of TGF-alpha and EGFR might be related to the pattern of histologic differentiation of HCC.     

甲状腺增殖性疾患组织表皮生长因子及其受体的表达

目的　探讨表皮生长因子 (EGF)及其受体 (EGFR)在甲状腺增殖性疾患中的表达及其作用。方法　应用免疫组化ABC染色方法观察 70例甲状腺组织切片EGF及EGFR的表达。结果(1)EGF在正常、肿瘤及非肿瘤组织中几乎均无表达。 (2 )乳头状、滤泡型甲状腺癌及其混合癌EGFR阳性表达高于非癌疾患及正常组织 (P <0 .0 5 ) ,阳性表达程度以强阳性为主。 (3)在正常组织、良性腺瘤、结节性甲状腺肿及桥本病 ,弱或中度的EGFR阳性表达率各组间差异无显著性。正常组织阳性表达率虽高达 83.3 % ,但 2 / 3表达为弱阳性。 (4 )乳头状甲状腺癌以细胞浆表达EGFR占优势 ,滤泡型及混合型甲状腺癌主要为混合着色 ,但与非癌混合着色不同的是多数以胞浆表达占优势 ;良性疾患以混合染色为主 ,但结节性甲状腺肿以膜着色居多。正常组织为浆、膜混合着色。结论　 (1)对EGFR强阳性表达尤其细胞浆为主者应高度疑及甲状腺癌。 (2 )各甲状腺良性疾患均有不同程度EGFR表达 ,虽无统计学意义上的差别 ,却可说明EGFR对于良性肿瘤及非肿瘤增殖性疾患的生成均有不应忽视的作用。