白血病细胞膜相关因子（MAF－J6－1）单克隆抗体的制备及性质

用部分纯化的白血病细胞膜相关因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）对ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞进行体外免疫，然后与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合获杂交瘤，经３次再克隆得到能产生ＭＡＦ－Ｊ６－１单克隆抗体（单抗）的杂交瘤细胞系。用ＡＢＣ免疫酶标法检测，该单抗在Ｊ６－１细胞上产生强阳性反应，并与ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ单抗对ＭＡＦ－Ｊ６－１及ｒｈ－Ｍ－ＣＳＦ产生交叉中和反应。ＭＡＦ－Ｊ６－１单抗还对Ｊ６－２、ＬＣＬ、Ｋ５６２等细胞系呈膜阳性反应，对白血病患者骨髓中部分原始和幼稚的单核、粒细胞呈阳性反应。在２４例被检测的白血病患者中，有三例呈强阳性反应，ＭＡＦ－Ｊ６－１可用作研究ｍ－Ｍ－ＣＳＦ与白血病关系的工具。     

风疹病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及应用

为了建立产生风疹病毒（ＲＶ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株及检测ＲＶ感染的捕获ＥＬＩＳＡ。用ＲＶ抗原免疫后的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合建立杂交瘤细胞株。用相应单抗建立检测血清中ＲＶ行异性ⅠｇＭ的捕获ＥＬＩＳＡ，并以该法与间接ＥＬＩＳＡ进行了比较实验。获得的杂交瘤细胞５Ｄ５、５Ｇ５、２Ｆ７相应单抗均属ⅠｇＧ１，与纯化ＲＶ抗原有强阳性反应。两法比较，阳性血清Ｘ＾２＝０．２５，Ｐ〈０．     

急性髓细胞白血病细胞GM—CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前蜊缔和常数（ｋｄ１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后缔和常数（ｋｄ２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５     

急性髓细胞白血病细胞GM－CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前者缔和常数（ｋｄ＿１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后者缔和常数（ｋｄ＿２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５０００，推测１５００００带为高亲和力受体带，１１５０００和９５０００带为低亲和力受体带。观察了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对２４例ＡＭＬ患者白血病细胞体外原代培养的影响及１６例膜表面受体数与增殖效应的相关性研究，发现８例体外原代培养中ｒｈＧＭ－ＣＳＦ加入与否没有或极少有集落形成，但ｒｈＧＭ－ｃｓＦ促使１４例白血病细胞体外增殖，集落数增加，增殖效应与细胞表面ＧＭ－ＣＳＦ受体数无相关性。     

环磷酰胺联合重组人粒细胞集落刺激因子动员自体外周血干细胞

目的：观察环磷酰胺（ＣＴＸ）联合重组人粒细胞集落刺激因子对自体外周血干细胞（ＡＰＢＳＣ）的动员效果。方法：ＣＴＸ３．７±０．２ｇ／ｍ＾２第１天静滴，白细胞（ＷＢＣ）降至最低点时开始皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ４．５±０．６μｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，直至采集结束前一天，ＷＢＣ恢复至２．５×１０＾９／Ｌ以上时开始连日采集ＡＰＢＳＣ，采集用ＣＳ３０００ｐｌｕｓ或Ｃｏｂｅ血细胞分离机，当累计采集的单个核细胞（     

骨髓基质细胞对人多发性骨髓瘤细胞系自分泌白细胞介素6诱…

研究了小鼠骨髓基质细胞对诱导人白细胞介素６（ＩＬ－６）依赖性多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞自分泌ＩＬ－６的作用。结果表明：人ＭＭ细胞系ＸＧ－１培养上清（ＳＮ１）没有可检测水平ＩＬ－６活性；小鼠骨髓基质细胞系ＭＦ－Ｌ培养上清（ＳＮ２）仅有低水平ＩＬ－６活性（１００Ｕ／ｍｌ）；ＸＧ－１细胞和ＭＦ－Ｌ细胞／上清共同培养上清（ＳＮ３，ＳＮ４）均含极高的ＩＬ－６活性（１０５０Ｕ／ｍｌ），并可被ＩＬ－６单抗ＢＥ－８     

八种细胞因子对人白血病细胞系（J6－1，J6－2）增殖的调节

测定了Ｍ－ＣＳＦ，Ｃ－ＣＳＦ，ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＭＧＦ，ＬＩＦ和ＴＧＦ－β＿１８种重组人生长因子单个或不同组合对白血病细胞系Ｊ６－１，Ｊ６－２集落形成率的影响。单个因子除ＴＧＦ－β＿１和ＬＩＦ表现出明显抑制效应外，其它因子均有不同程度的刺激活性。而在双因子协同下，ＴＧＦ－β＿１除与Ｍ－ＣＳＦ协同外，仍表现出明显的抑制作用，表明ＴＧＦ－β是Ｊ６－１，Ｊ６－２细胞系重要的负调节因子。从三种因子组合结果看出Ｍ－ＣＳＦ是Ｊ６－１细胞必需的细胞因子。值得注意的是，ＴＧＦ－β＿１与Ｍ－ＣＳＦ的组合对Ｊ６－１细胞有很强的增殖刺激效应。另外由Ｊ６－１细胞膜分离出的膜相关细胞因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）单独和与ＴＧＦ－β＿１联合，对Ｊ６－１，Ｊ６－２细胞的作用与Ｍ－ＣＳＦ的作用相似     

惠尔血联用静脉丙种球蛋白对白血病化疗后感染的影响

为了更好地治疗和预防急性白血病（ＡＬ）患者化疗后的继发感染，４４例初治ＡＬ患者被分成惠尔血联用静脉丙种蛋白组（ｒｈＣ－ＣＳＦ－ＩＶＩＧ）、惠尔血组（ｒｈＧ－ＣＳＦ）和对照组进行临床研究。结果显示：（１）ｒｈＧ－ＣＳＦ－ＩＶＩＧ组和ｒｈｇ－ＣＳＦ组的发热持续天数，周转血白细胞数（ＷＢＣ）〈２．０×１０＾９／Ｌ以及中性粒细胞数（ＡＮＣ）〈０．５×１０＾９／Ｌ的持续天数均明显小于对照组（Ｐ值均小于０．０     

骨髓基质细胞对人多发性骨髓瘤细胞系自分泌白细胞介素6诱导作用的研究

研究了小鼠骨髓基质细胞对诱导人白细胞介素６（ＩＬ－６）依赖性多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞自分泌ＩＬ－６的作用。结果表明：人ＭＭ细胞系ＸＧ－１培养上清（ＳＮ＿１）没有可检测水平ＩＬ－６活性；小鼠骨髓基质细胞系ＭＦ－１培养上清（ＳＮ＿２）仅有低水平ＩＬ－６活性（１００Ｕ／ｍｌ）；ＸＧ－１细胞和ＭＦ－Ｌ细胞／上清共同培养上清（ＳＮ＿３，ＳＮ＿４）均含极高的ＩＬ－６活性（１０５０Ｕ／ｍｌ），并可被ＩＬ－６单抗ＢＥ－８特异性中和，而且不同浓度的ＳＮ＿３，ＳＮ＿４可以促进其他依赖外源性ＩＬ－６的人ＭＭ细胞系（ＸＧ－２，４，６）生长。鉴此证实了小鼠骨髓微环境基质细胞可以诱导ＭＭ细胞自分泌ＩＬ－６，后者可促进ＭＭ细胞生长。     

P—170在亲本S—180和抗药S—180—R瘤细胞中的表达

目的探讨ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）在亲本Ｓ－１８０及抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中的表达，（２）方法，用ＡＢＣ免疫组化方法，按日本ＤＡＫＯ公司免疫药盒程序进行，单抗为Ｃ２１９，ＬｉｎＫｉｎｇｒｅａｇｅｎｔ１：４００，Ｓｔｒｅｐｔａｉｖｄｉｎｒｅｇａｇｅｎｔ１：４００，ＤＡＢ染色，苏木精复染。（３）结果，Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中，有明显的Ｐ－１７０表达，亲本Ｓ－１８０细胞则无此表达，抗阿抗     

脐血血浆增强阿糖胞苷抗白血病效应的实验研究

目的研究脐血血浆（ＣＢＰ）对２８例急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞体外对阿糖胞苷（ＡｒａＣ）敏感性的影响。方法以基因重组人粒巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）和空白组作对照,采用ＭＴＴ法检测ＡｒａＣ的细胞毒作用。结果ＡＭＬ细胞对ＡｒａＣ的敏感性表现出异质性,但使用ＣＢＰ及ｒｈＧＭＣＳＦ均可显著增强ＡｒａＣ对耐药ＡＭＬ细胞的毒性,与空白对照组相比,差异有显著性（Ｐ＜００５）,尤以ＣＢＰ为优。结论ＣＢＰ与ｒｈＧＭＣＳＦ类似,可能通过促进耐药ＡＭＬ细胞进入增殖周期,从而增强ＡＭＬ细胞对ＡｒａＣ的敏感性,预示ＣＢＰ与ＡｒａＣ联合运用治疗耐药ＡＭＬ的潜在价值。     

外周血干细胞的动员和采集及移植后造血重建研究

对２４例外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植的三种动员方案、采集及移植后的ＰＢＳＣ数量与造血重建关系进行研究。２４例中急性白血病１３例，多发性骨髓瘤６例，非霍奇金淋巴瘤４例，晚期乳癌１例。三组动员方案：化疗＋四氢叶酸＋氟美松；化疗＋ｒｈＧＭ－ＣＳＦ＋氟美松；化疗＋ｒｈＧ－ＣＳＦ＋氟美松。用流式细胞仪双染色直接免疫荧光法测定ｒｈＧ－ＣＳＦ组中９例ＣＤ３４＋ＣＤ３３＋细胞。结果表明：ｒｈＧ－ＣＳＦ组ＰＢＳＣ产率最高，平均每例单个核细胞（９．８６±６．０１）×１０８／ｋｇ，ＣＦＵ－ＧＭ（２１．０８±１６．８６）×１０４／ｋｇ，ＣＤ３４＋细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ正相关（ｒ＝０．６８）。动员后再用ｒｈＧ－ＣＳＦ１周，ＣＤ３４＋细胞显著增多，可连续每日采集，当≥５×１０６／ｋｇ即可停止；采集与回输的ＰＢＳＣ数与造血重建时间密切相关。     

重组人转化生长因子－β_1对人白血病细胞系（J6－1，J6－2，Namalva）增殖的调节

用ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交和常规细胞生物学方法研究重组人转化生长因子－β＿１（ｒｈ－ＴＧＦ－β＿１）对Ｊ６－１，Ｊ６－２和Ｎａｍａｌｖａ细胞的作用。ｒｈ－ＴＧＦ－β＿１对Ｊ６－１细胞增殖抑制作用呈明显的剂量依赖和双相时间依赖关系。对Ｊ６－１细胞的抑制主要通过抑制ＤＮＡ合成，对Ｊ６－２的抑制则通过抑制ＤＮＡ合成和促进凋落，Ｎａｍａｌｖａ细胞对它不敏感。ｒｈ－ＴＧＦβ＿１对细胞基因表达的影响也因株而异：同时下调三个细胞系ｃ－ｍｙｃ、ＬＩＦ和ｐ５３的表达，上调ｖ－ｓｉｓ的表达；对Ｊ６－２和Ｎａｍａｌｖａ的众多基因表达以下调为主，却上调Ｊ６－１细胞多个癌基因的表达，提示ＴＧＦ－β可能使某些白血病细胞更趋恶性。     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

成人慢性髓性白血病细胞β1整合素功能障碍的研究

为了探讨Ｐｈ（＋）慢性髓性白血病（ＣＭＬ）骨髓细胞是否存在β１整合素活化障碍,我们以１０例正常及１２例ＣＭＬ骨髓单个核细胞（ＮＢＭＭＮＣ及ＣＭＬＢＭＭＮＣ）为研究对象,用β１整合素活化抗体８Ａ２和粒巨噬系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）作活化剂,用流式细胞术测定上述细胞与可溶性纤连蛋白（ＦＮ）的结合能力及其β１整合素跨膜区９ＥＧ７表位的表达,并观察了ＡＢＬ激酶抑制剂ＣＧＰ５７１４８Ｂ预处理对上述细胞β     

用流式细胞仪测定小儿急性白血病细胞DNA及其临床意义研究

应用流式细胞仪（ＦＣＭ）对９４例急性白血病（ＡＬ）骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）进行了ＤＮＡ含量测定。在４７例初诊／复发ＡＬ中，５０％（１７／３４）的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）及３８．５％（５／１３）的急性非淋巴细胞白血病（ＡＶＬＬ）检出ＤＮＡ异倍体；４７例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期患儿异倍体检出率为１０．６％。１４例非白血病患儿无异倍体检出。ＡＬ初诊病例的Ｃ＿０／Ｇ＿１％高于ＣＲ及对照组，Ｓ％及（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％低于ＣＲ及对照组；复发病例（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％高于初诊组；在ＡＬ－ＣＲ组，Ｓ％和（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％均与对照组无显著性差异。２０例ＡＬ的自身对照发现，１１例初诊、复发时的异倍体在ＣＲ期消失。     

急性髓细胞白血病患者mdr1基因产物p—170与其免疫表型和FAB…

应用ＪＳＢ－１单克隆抗体（单抗），采用间接免疫荧光法对１０３例初诊急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患ｍｄｒ１基因表达产物ｐ－１７０进行检测，发现ｐ－１７０表达率为２６％；ＡＭＬ亚型中以Ｍ５的ｐ－１７０表达率最高；ｐ－１７０表达与化疗反应及预后高度相关。同时应用一组相关单抗，采用同样方法分析了其中６７例患细胞免疫标记与ｐ－１７０表达及预后的关系。结果显示：ＣＤ１４或ＣＤ３４表达与ｐ－１７０表达及预后高     

人FⅧ基因高效表达质粒的构建及其在Cos-7细胞中的表达

目的：构建人ＦⅧ真核表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋＦⅧＤＢ并观察其在Ｃｏｓ－７细胞中的表达活性。方法：采用缺失大部分Ｂ结构域的人凝血因子ⅧｃＤＮＡ（ＦⅧＤＢ），长度为４．６ｋｂ，将其插入含腺病毒序列表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋ１，构建了ＦⅧ真核表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋＦⅧＤＢ，用脂质体介导法将其转染Ｃｏｓ－７细胞，转染后２４，４８，７２小时分别用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、ＥＬＩＳＡ法及一期法测定培养细胞中ＦⅧＤＢｍＲＮＡ及ＦⅧ的含量与活性。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法可检测到ＦⅧＤＢｃＤＮＡ转录的ｍＲＮＡ，ＥＬＩＳＡ法测得７２小时后ＦⅧ的含量为每２４小时１８ｎｇ／１０６细胞，一期法测得活性为每２４小时０．６Ｕ／１０６细胞，相当于正常人血浆中１００μｇ／ＬＦⅧ所产生的凝血活性的６０％。结论：所构建的ＦⅧ真核表达质粒在Ｃｏｓ－７细胞中具有一定的表达活性。     

神经元特异烯醇化酶单克隆抗体的制备

用ＮＳＥ粗制品免疫雌性ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，经免疫小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０的融合，ＥＬＩＳＡ法筛选，建立了四株持续分泌抗ＮＳＥ单抗的杂交瘤细胞。免疫沉淀法，单抗亲和柱纯化抗原鉴定等方法证实所分泌单抗对ＮＳＥ具有良好的特异性，注入同系小鼠腹腔可诱生含较高效价的抗ＮＳＥ的腹水。这四株细胞分泌ＩｇＧ１亚类抗体、且检查其染色体数目均大于９０条。     

家兔脑缺血再灌注损伤机制的研究

用家兔四动脉闭塞法建立急性完全性脑缺血后给予再灌注，观察缺血前后及再灌注后脑组织部分电解质和含水量、脑组织和血液丙二醛（ＭＤＡ）、环核昔酸（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ）、血栓烷Ｂ＿２（ＴｘＢ＿２）、６－酮－前列腺素Ｆ＿（１α）（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）含量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱苷肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性改变。结果：再灌注后实验组脑组织Ｃａ￣（２＋）、ＭＤＡ、ＴｘＢ＿２和ｃＡＭＰ较对照组升高（Ｐ＜０．０５），ＧＳＨ－Ｐｘ活性、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）含量降低（Ｐ＜０．０５）；实验组血液中ｃＡＭＰ含量高于对照组（Ｐ＜０．０５）。提示脑组织Ｃａ￣（２＋）过载、氧自由基增多、ｃＡＭＰ／ｃＯＭＰ和ＰＧＩ＿２／ＴＸＡ＿２比值异常在脑缺血再灌注损伤中起着重要的作用。