电转人IL－6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＬＴ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体。液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显著的荧光强度；￣（１２５）Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该细胞的ＲＮＡ与￣（３２）Ｐ标记的１．５ｋｂ的ＩＬ－６ＲｃＤＮＡ探针呈明显的杂交信号，证明我们已成功地建立了高表达人ＩＬ－６Ｒ的ＬＴ１２－ＩＬ－６Ｒ￣＋的大鼠急性白血病细胞模型。     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学…

作将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转汾至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性，采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４１８抗性筛选，有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６的克隆株，体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力，集落形成     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞克隆株的建立及其生物学特性的观察

作者将人白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染至ＦＢＬ－３红白血病细胞，建立了高分泌ＩＬ６的ＦＢＬ－３细胞克隆株，并观察了其生物学特性。采用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法将ＩＬ－６表达载体ＢＣＭＧＮｅｏ－ＩＬ－６转移至ＦＢＬ－３细胞中，通过Ｇ４ｌ８抗性筛选、有限稀释法和上清中ＩＬ－６活性的测定，从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌ＩＬ－６（２２５．６Ｕ／ｍｌ）的克隆株。体外观察表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞体外生长能力、集落形成能力均减弱，且其生长抑制程度与分泌ＩＬ－６水平呈正相关。给小鼠皮下接种后肿瘤结节形成率降低，生长速度减慢，荷瘤小鼠存活期延长。以上结果表明，ＩＬ－６基因转染的ＦＢＬ－３细胞致瘤性下降，这为将该细胞制备成新型瘤苗治疗白血病打下了基础。     

IL—6和GM—CSF对人多发性骨髓瘤细胞与血管内皮细胞粘附效应…

用＾５１Ｃｒ标记细胞株的方法，研究了白细胞介素６（ＩＬ－６）及粒－巨噬系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株（Ｕ２６６、ＸＧ－７）、ＥＢ病毒阳性细胞株（Ｄａｕｄｉ）和内皮细胞间粘附的调控作用，观察了粘附作用对ＸＧ－７细胞表面粘附分子表达的影响。结果表明：①ＩＬ－６及其受体（ＩＬ－６Ｒ）ｇｐ１３０相关性生长因子ＧＭ－ＣＳＦ不仅是人ＭＭ细胞体内、外的生长因子，而且可以提高ＭＭ细胞     

IL-6基因转染的白血病细胞不同条件下小鼠体内外分泌IL-6水平的研究

为了解白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞（ＦＢＬ－３－ＩＬ－６＋）株体内外的生物学特性，动态观察在不同剂量６０Ｃｏγ射线照射后其ＩＬ－６的分泌水平，同时动态观察经腹腔、局部皮下注射途径将其移植入Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内后，血清和局部细胞培养上清液中ＩＬ－６含量。结果表明，ＦＢＬ－３－ＩＬ－６＋细胞以８Ｇｙ照射剂量为制备瘤苗的最佳照射剂量，照射后２周内一直保持较高水平的ＩＬ－６分泌量。体内移植时，经腹腔途径注入后可测得一定浓度的血清ＩＬ－６，皮下注入时注射局部细胞培养上清中亦有一定水平的ＩＬ－６。为将该细胞作为治疗白血病瘤苗及其注射间隔时间提供了实验依据。     

重组IL-6和维甲酸诱导肾癌细胞凋亡的研究

目的：探讨重组白细胞介素６（ＩＬ－６０在体外对肾癌细胞ＧＲＣ－１（ＲＣＣ ＧＲＣ－１）凋亡的诱导作用。方法：在ＲＣＣ ＧＲＣ－１细胞培养体系中加入ＩＬ－６诱导，反式维甲酸（ＲＡ）作为对照药物，琼脂糖凝胶电脉和流式细胞仪观察ＩＬ－６和ＲＡ对细胞ＤＮＡ电泳和细胞周期动力学的影响。结果：ＩＬ－６诱导肾癌细胞ＤＮＡ出现典型的梯状改变，ＲＡ有轻度诱导肾癌细胞凋亡作用。流式细胞仪ＤＮＡ直方图上ＩＬ－６诱导肾癌     

IL—6基因转染的白血病细胞不同条件下小鼠体内外分泌IL—6水…

为了解白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病细胞（ＦＢＬ－３－ＩＬ－６）株体内外的生物学特性，动态观察在不同剂量＾６０Ｃｏγ射凰其ＩＬ－６的分泌水平，同时动态观察经腹腔、局部皮下注射途径将其移植入Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内后，血清和局部细胞培养上清液中ＩＬ－６含量。结果表明，ＦＢＬ－３－ＩＬ－６细胞以８Ｇｙ照射剂量为制备瘤苗的最佳照射剂量。照射后２周内一直保护较高水平的Ｉ     

白细胞介素6在病毒性肝炎免疫发病机理中的意义

本文观察了１９９中型病毒性肝炎患者血清ＩＬ－６、ＳＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ水平及Ｔ细胞亚群和 液免疫指标的变化，发现血清ＩＬ－６活性均明显增高，且随着肝细胞损害程度的加重而逐渐增高，与血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ及ＣＤ８细胞、ＩｇＧ、ＣＩＣ水平呈明显正相关，与ＣＤ４细胞、ＣＤ４／ＣＤ８细胞、Ｃ３呈明显负相关。提示ＩＬ－６在病毒性肝炎免疫发病机理起着十分重要的作用。     

不同造血生长因子对脐血有核细胞体外扩增作用的实验研究

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对脐血有核细胞的扩增作用以及脐血扩增后Ｔ淋巴细胞和ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞变化情况。方法：在脐血有核细胞体外培养体系中分别加入不同组合的细胞因子，观察细胞数、ＣＤ３４＋细胞、ＣＦＵ－ＧＭ、Ｔ４（ＣＤ４＋ＣＤ８－ＣＤ３＋）细胞、Ｔ８（ＣＤ４－ＣＤ８＋ＣＤ３＋）细胞以及ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞的变化。结果：脐血有核细胞在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的作用下扩增效果最佳。结论：脐血有核细胞在各种造血生长因子的协同作用下可以在体外扩增。脐血扩增后Ｔ４、Ｔ８细胞减少，可能会降低脐血移植急性ＧＶＨＤ发生，但ＨＬＡ－ＡＢ和ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数急剧上升，增加了免疫排斥的可能性。     

FLT3配基—FL研究进展

ＦＬＴ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的与造血调控密切相关的细胞因子。在体外单独ＦＬ对造血的调控作用有限，但ＦＬ可与ＩＬ－３，Ｇ－ＣＳＦ，ＣＳＦ－１，ＧＭ－ＣＳＦ，ＳＣＦ及ＩＬ－６协同促进骨髓及脐血ＣＤ３４＾＋细胞形成粒－巨噬细胞集落，粒细胞集落或巨噬细胞集落；可与ＳＣＦ，ＩＬ－７或ＩＬ－１１协同促进Ｂ淋巴祖细胞的增殖与分化。ＦＬ有望用作造血干祖细胞体外扩增的辅助因子，在临床上用作造血细胞动员剂、免疫     

体外扩增脐血CD34+细胞的实验研究

目的 探讨体外扩增脐血干／祖细胞用于成人脐血移植的可能性。方法 从１０份新鲜的脐血标本中纯化的ＣＤ３４＾＋细胞接种于含体积分数为２０％的胎牛血清（ＦＢＳ）的ＩＭＤＭ培养基的悬 培养体系中,分别加入由ＳＣＦ、Ｆｌｔ－３Ｌｉｇａｎｄ（ＦＬ）与ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－６、Ｇ－ＣＳＦ、Ｅｐｏ（合称１３６ＧＥ）组成的３组细胞因子（Ａ组：１３６ＧＥ＋ＦＬ;Ｂ组：ＳＣＦ＋１３６ＧＥ;Ｃ组：ＦＬ＋ＳＣＦ＋１３     

IL－6和GM－CSF对人多发性骨髓瘤细胞与血管内皮细胞粘附效应作用的研究

用￣（５１）Ｃｒ标记细胞株的方法，研究了白细胞介素６（ＩＬ－６）及粒－巨噬系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株（Ｕ２６６、ＸＧ－７）、ＥＢ病毒阳性细胞株（Ｄａｕｄｉ）和内皮细胞间粘附的调控作用，观察了粘附作用对ＸＧ－７细胞表面粘附分子表达的影响。结果表明：①ＩＬ－６及其受体（ＩＬ－６Ｒ）ｇｐ１３０相关性生长因子ＧＭ－ＣＳＦ不仅是人ＭＭ细胞体内、外的生长因子，而且可以提高ＭＭ细胞－内皮细胞间的粘附能力，有助于ＭＭ细胞的扩散；②粘附作用亦能引起肿瘤细胞ＸＧ－７表面ＣＤ＿（１１ａ）、ＣＤ＿（５４）、ＣＤ＿（４４）、ＣＤ＿（４９ｄ）表达的异常改变；③ＣＤ＿（４９ｄ）及其配体的相互作用可能参与了ＭＭ细胞与内皮细胞的粘附过程。     

人骨髓瘤细胞Sko-007中的白细胞介素6信号转导途径研究

目的 研究人骨髓瘤细胞系Ｓｋｏ－００７中的白细胞介素６（ＩＬ－６）信号转导途径。方法 采用凝胶阻滞电泳和免疫常常方法观察ＩＬ－６刺激前后Ｓｋｏ－００７细胞中ＩＬ－６相关转录因子ＳＴＡＴ３、ＮＦ－ＩＬ－６、ＮＦ－ｋＢ和参与ＩＬ－６信号转导功能的蛋白激酶ＥＲＫ、ＪａｋＩ的诱导活化状态并确定该细胞中的ＩＬ－６信号转导通路。结果 转录因子ＳＴＡＴ３、ＮＦ－ＩＬ－６和蛋白激酶ＥＲＫ、Ｊａｋｌ都能在Ｓｋｏ－０     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞增殖活性的影响

本研究表明，灵芝多糖（ＧＬＰ）能直接刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖，并能协同ＰＨＡ刺激ＣＢＭＣ增殖在ｒＩＬ－２诱导人脐血ＬＡＫ细胞（简称ＣＢ－ＬＡＫ）早期加入ＧＬＰ，能明显增强ＣＢ－ＬＡＫ细胞增殖活性，最佳浓度１０μ／ｍｌ；ＧＰＬ本身不能诱导ＣＢＭＣＩＬ－２Ｒ的表达，但能协同ｒＩＬ－２提高ＣＢ－ＬＡＫ细胞表达ＩＬ－２Ｒ的表达。     

八种细胞因子对人白血病细胞系（J6－1，J6－2）增殖的调节

测定了Ｍ－ＣＳＦ，Ｃ－ＣＳＦ，ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－３，ＩＬ－６，ＭＧＦ，ＬＩＦ和ＴＧＦ－β＿１８种重组人生长因子单个或不同组合对白血病细胞系Ｊ６－１，Ｊ６－２集落形成率的影响。单个因子除ＴＧＦ－β＿１和ＬＩＦ表现出明显抑制效应外，其它因子均有不同程度的刺激活性。而在双因子协同下，ＴＧＦ－β＿１除与Ｍ－ＣＳＦ协同外，仍表现出明显的抑制作用，表明ＴＧＦ－β是Ｊ６－１，Ｊ６－２细胞系重要的负调节因子。从三种因子组合结果看出Ｍ－ＣＳＦ是Ｊ６－１细胞必需的细胞因子。值得注意的是，ＴＧＦ－β＿１与Ｍ－ＣＳＦ的组合对Ｊ６－１细胞有很强的增殖刺激效应。另外由Ｊ６－１细胞膜分离出的膜相关细胞因子（ＭＡＦ－Ｊ６－１）单独和与ＴＧＦ－β＿１联合，对Ｊ６－１，Ｊ６－２细胞的作用与Ｍ－ＣＳＦ的作用相似     

HepG2型人肝癌细胞表达多种细胞因子基因

细胞因子参与了多种肝细胞功能的调节,一般认为肝细胞本身只是各种细胞因子的靶,而不产生细胞因子。为了证实肝细胞是否具有产生各种调节性因子的作用,作者分析了分化程度高的人ＨｅｐＧ２肝癌细胞进行培养,并用反转录技术测定其中多种细胞因子基因的表达。结果表明：ＨｅｐＧ２细胞表达ＩＦＮ－α、ＴＮＦ－α、ＴＧＦ－β、Ｍ－ＣＳＦ、ＯＳＭ抑制素、ＩＣＡＭ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－７、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２和ＩＬ－６受体（ＩＬ－６Ｒ）等的ｍＲ－ＮＡ,而不表达ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－６、…     

造血生长因子对脐血CD34^＋细胞的体外扩增作用

为探讨造血生长因子不同组合方式对脐血ＣＤ３４＋细胞的扩增作用、扩增细胞性能改变及合理的扩增时机，利用吸附单克隆抗体——磁珠分离系统分选出９５％～９９％纯度的脐血ＣＤ３４＋细胞，在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ－６、粒－巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的不同组合扩增１～３周。结果表明，脐血ＣＤ３４＋细胞具有良好的扩增效应，细胞总数、集落形成细胞（ＣＦＣｓ）和ＣＤ３４＋细胞可分别扩增５００．０±８２．５倍、９４．０±２８．６倍和２４．０±３．８倍；ＳＣＦ是扩增最重要的生长因子，ＳＣＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ组合的扩增效率最高；ＣＦＣｓ和ＣＤ３４＋细胞在１～２周维持在较高水平，以后即快速衰减；此外，扩增也加速了细胞的分化，至第３周时９３％ＣＦＣｓ为ＣＦＵ－ＧＭ，极少部分形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ。因此，合理组合生长因子，把握适宜扩增时机，将有助于扩增细胞在质和量上满足移植和基因治疗等的要求。     

人胎盘无细胞是悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用

为了探讨人胎盘无细胞悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用及与已知的几种细胞因子进行比较,用人胎盘无细胞悬液及ＩＬ－３,ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＦＰＯ作为刺激因子,并应用甲基纤维素半固体培养体 对骨髓ＧＭ－ＣＦＵ,ＧＭ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ进行了培养和比较,研究结果表明,人胎盘无细胞悬液对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ,ＣＦＵ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ体外扩增最适蛋白浓度是２００－３００μｇ／Ｌ,人胎盘无细胞悬液作刺激因子对骨髓血干／祖细胞的体外扩增效果优于单独ＩＬ－３,单独ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＥＰＯ组。结论提示,人胎盘无细胞悬液可能含有多种细胞因子,用人胎盘无细胞悬液作扩增剂体外扩增骨髓造血干／祖细胞细胸具有有效而价廉的特点。     

中枢神经系统疾病患者脑脊液中的IL—2R

本文采用双抗体夹心酶标法检测了１０２例中枢神经系统疾病病人ＣＳＦ及３５例正常人ＣＳＦ中ｓＩＬ－２Ｒ水平。结果显示：结核性脑膜炎组（ＴＢＭＧ）、病毒性脑炎（ＤＭＧ）脱髓鞘性疾病组（ＤＭＤＧ）ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于其它神经系统疾病（ＯＮＤ）和正常人（ＮＣ）组（Ｐ〈０．０１）。ＴＢＭＧ进展期与恢复期比较，ｓＩＬ－２Ｒ水平有非常显著差异（Ｐ〈０．０１）。缓解期ＶＭＧ、ＤＭＤＧ的ｓＩＬ－２Ｒ水平与进展期比