CD117在白血病免疫分型中的意义

目的 观察细胞表面分化抗原（ＣＤ）１１７在各型白血病中的表达及其意义。方法 采用单标或双标直接免疫荧光标记法标记２０种细胞表面分化抗原,经流式细胞仪测定。对１８５例白血病患者骨髓或外血白血病细胞的免疫分型及ＣＤ１１７的表达进行分析。结果 ＣＤ１１７在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中表达率极低,仅占１．５％,ＣＤ１１７在急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）＿ＭＯ,Ｍ１,Ｍ２中表达率较高;ＡＭＬ－Ｍ３患者,表达率     

bcl—XL在急性髓系白血病细胞的表达及化疗敏感性的关系

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞凋亡径路的特征及调控模式。方法：运用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ电泳、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｏｌｔ分析技术，观察了化疗药物足叶乙甙（Ｖｐ１６）作用于原代ＡＭＬ细胞前后，ｂｃｌ－Ｘ１表达与凋亡的敏感性、临床特征、预后的关系。结果：绝大部分ＡＭＬ高表达ｂｃｌ－Ｘ１ｍＲＮＡ病例经Ｖｐ１６处理后，其ｂｃｌ－Ｘ１虽然下调，但仍维持较高水平，并对凋亡诱导不敏感，与高白细胞     

从AML细胞表面标记特点看AML,ALL鉴别时髓系单抗的选择

应用一组单克隆抗体（单抗），采用免疫荧光法分析了２１８例急性髓系细胞白血病（ＡＭＬ）患者细胞的免疫表型。结果提示ＣＤ＿（３３）、ＣＤ＿（１３）和ＣＤ＿（１５）为ＡＭＬ的主要标记；免疫分型在一定程度上有助于ＡＭＬ各亚型的鉴别。强调指出：在ＡＭＬ和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）鉴别时，ＣＤ＿（３３）、ＣＤ＿（１３）和ＣＤ＿（１５）应联合应用。配以胞浆抗原的检测，将是ＡＭＬ和ＡＬＬ鉴别时行之有效的髓系单抗选择方案。     

抗T淋巴细胞单克隆抗体对重型再生障碍性贫血造血祖细胞的影响

报告抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体（ＭｃＡｂ－Ｔ）对重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）造血祖细胞的影响。发现经ＭｃＡｂ－Ｔ体外清除（ＳＡＡ）骨髓中的ＣＤ＿３或ＣＤ＿８细胞后，１９例ＳＡＡ中有１０例患者的粒－单核系祖细胞集落及红系祖细胞集落产量明显增多（Ｐ＜０．０１）。提示部分ＳＡＡ的发病与Ｔ淋巴细胞的免疫抑制有关。在体内应用ＭｃＡｂ－Ｔ（抗ＣＤ＿３和抗ＣＤ＿８）治疗后，该１０例患者临床疗效显著，其中基本治愈、缓解共６例，明显进步４例。结果表明，ＭｃＡｂ－Ｔ能特异性地抑制相应的Ｔ淋巴细胞，解除Ｔ淋巴细胞对造血功能的直接或间接抑制作用，从而使ＳＡＡ患者的造血功能得以恢复。     

bcl-X_L在急性髓系白血病细胞的表达及与化疗敏感性的关系

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞凋亡径路的特征及调控模式。方法：运用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ电泳、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术，观察了化疗药物足叶乙甙（Ｖｐ１６）作用于原代ＡＭＬ细胞前后，ｂｃｌ－ＸＬ表达与凋亡的敏感性、临床特征、预后的关系。结果：绝大部分ＡＭＬ高表达ｂｃｌ－ＸＬｍＲＮＡ病例经Ｖｐ１６处理后，其ｂｃｌ－ＸＬ虽然下调，但仍维持较高水平，并对凋亡诱导不敏感，与高白细胞数、髓外浸润等不良预后特征相关，化疗后不易缓解，处于长期缓解中的病例经Ｖｐ１６处理后，ｂｃｌ－ＸＬ亦表达下调，但凋亡率远低于ＡＭＬ细胞。结论：ｂｃｌ－ＸＬ高表达与ＡＭＬ的发生、维持和化疗耐药性相关，ｂｃｌ－ＸＬ高表达下调是凋亡启动的基础，但本身不足以引致凋亡。     

t（8;21）急性髓细胞白血病：30例临床和实验室分析

报告３０例ｔ（８；２１）急性髓细胞白血病（ＡＭＬ），２６例为Ｍ＿（２ｂ），４例为Ｍ＿（２ａ）。初始完全缓解率为０．９６２。０．７６２的男性患者伴有－Ｙ，０．２２２的女性患者伴有－Ｘ，０．２６７的患者伴有其它染色体异常。免疫表型分析ＨＬＡ－ＤＲ／ＤＰ阳性率０．１００，ＣＤ＿（３８）为０．８６６，ＣＤ＿（１５）为０．５００，ＨＩＭ＿４、ＨＩＭ＿５均为０．８００。ｔ（８；２１）ＡＭＬ与ＡＭＬＭ＿（２ｂ）的关系需进一步深入研究。     

急性髓系白血病细胞CD34抗原表达的研究：Ⅰ表达特点和临床意义

对５６例初发急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞ＣＤ＿（３４）抗原的表达作了检测，分析了ＣＤ＿（３４）抗原表达与临床表现及化疗疗效的关系。结果显示，ＡＭＬ细胞的ＣＤ＿（３４）表达率存在很大差别，从１％～８５％；５６例ＡＭＬ中ＣＤ＿（３４）阳性表达病例为２３例，占４１．１％。ＣＤ＿（３４）抗原表达与ＦＡＢ形态学分型无关，但Ｍ＿３型的表达阳性率明显低于Ｍ＿１、Ｍ＿２型。ＣＤ＿（３４）￣＋病例组与ＣＤ＿（３４）￣－病例组在年龄、性别及初发时白细胞总数、血红蛋白浓度、血小板计数等均无明显差异；在诱导化疗疗效上，ＣＤ＿（３４）￣＋组完全缓解率为４３．５％，明显低于ＣＤ＿（３４）￣－组的７２．７％。研究结果提示，ＡＭＬ细胞在ＣＤ＿（３４）抗原的表达上存在异质性；并具有一定的预后判断价值，建议对ＣＤ＿（３４）￣＋病例施行更为有效的、可能需与ＣＤ＿（３４＿￣－病例不同的化疗。     

ⅡCD34抗原表达与对化疗药物的敏感性

体外细胞毒法（四唑盐法）检测３６例急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、高三尖杉酯碱（ＨＨｒ）、柔红霉素（ＤＮＲ）、阿克拉霉素（Ａｃｌａ）、长春新碱（ＶＣＲ）、足叶乙甙（ＶＰ－１６）的敏感性，同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法检测其ＣＤ＿（３４）抗原，并与临床化疗疗效比较。发现Ａｒａ－Ｃ、ＨＨｒ、ＶＰ－１６中敏组ＣＤ＿（３４）抗原的表达较高敏组高（Ｐ＜０．０５），ＤＮＲ、Ａｃｌａ、ＶＣＲ耐药组较中敏组高，差异亦显著（Ｐ＜０．０５），六种化疗药物耐药组ＣＤ＿（３４）抗原的表达均较高敏组高（Ｐ＜０．０５）。诱导化疗第一疗程后骨髓原始细胞减少指数（ＭＢＤＩ）值＜４０组，４０～６０组及＞６０组组间ＣＤ＿（３４）抗原的表达差异显著（Ｐ＜０．０５）。ＡＭＬ化疗完全缓解，部分缓解与未缓解组组间ＣＤ＿（３４）抗原表达差异亦显著（Ｐ＜０．０５）。复发患者ＣＤ＿（３４）抗原的表达较初诊者高（Ｐ＜０．０５）。ＣＤ＿（３４）阳性白血病细胞对化疗药物具有抗药性，除因其处于静止期（Ｇ＿０期）外，可能与多药耐药基因（ＭＤＲ１）的高水平表达有关。     

用流式细胞仪测定小儿急性白血病细胞DNA及其临床意义研究

应用流式细胞仪（ＦＣＭ）对９４例急性白血病（ＡＬ）骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）进行了ＤＮＡ含量测定。在４７例初诊／复发ＡＬ中，５０％（１７／３４）的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）及３８．５％（５／１３）的急性非淋巴细胞白血病（ＡＶＬＬ）检出ＤＮＡ异倍体；４７例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期患儿异倍体检出率为１０．６％。１４例非白血病患儿无异倍体检出。ＡＬ初诊病例的Ｃ＿０／Ｇ＿１％高于ＣＲ及对照组，Ｓ％及（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％低于ＣＲ及对照组；复发病例（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％高于初诊组；在ＡＬ－ＣＲ组，Ｓ％和（Ｓ＋Ｇ＿２）／Ｍ％均与对照组无显著性差异。２０例ＡＬ的自身对照发现，１１例初诊、复发时的异倍体在ＣＲ期消失。     

筑巢式PCR检测白血病微量残留bcr／ablmRNA

采用逆转录－筑巢式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）技术检测３３例不同临床阶段的慢性粒细胞白血病（ＣＭｕ及１８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ。结果：３３例ＣＭＬ中３１例阳性，其中２１例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，７例表达ｂｃｒｅｘｏｎ２／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例同时表达这两种ｍＲＮＡ。在１８例ＡＬＬ中阳性６例，其中４例表达ｈｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ，２例表达ｂｃｒｅｘｏｎ３／ａｂｌｅｘｏｎ２＋ｂｃｒｅｘｏｎｌ／ａｂｌｅｘｏｎ２ｍＲＮＡ。本实验的敏感度达１０￣（－６）～１０￣（－７）水平，有助于临床上白血病微量残留病的早期诊断。     

急性白血病免疫表型分析

目的探讨成人急性白血病(AL)的抗原表达及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测分析45例AL的免疫表型。结果19例急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系抗原阳性表达率为16.3%,其中CD13为14.6%,CD33为8.4%,ALL髓系抗原阳性表达率的CR率明显低于髓系抗原阴性表达的CR率(分别为35.2%和69.7%)。26例急性髓性白血病(AML)淋系抗原表达率为23.8%,其中CD7为12.4%,CD19为9.7%;AML淋系抗原阳性表达的CR率低于淋系抗原阴性表达的CR率(分别为41.6%和62.1%)。结论急性白血病免疫表型使诊断更精细、确切,对判断预后、鉴别诊断等方面意义重大。     

儿童急性白血病免疫分型及其临床意义

目的 探讨儿童急性白血病（AL）抗原表达规律及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测46例儿童AL的免疫表型。结果 46例AL中,急性淋巴细胞白血病（ALL）30例,急性髓细胞白血病（AML）10例,杂合型6例。30例ALL中,T系ALL 4例（13.3%）,B系ALL 26例（86.7%）。ALL中3例（10%）有髓系抗原表达,以CD33阳性最常见;AML中4例（40%）有淋系抗原表达,以CD7阳性率最高。儿童AML淋系抗原表达阳性率高于儿童ALL髓系抗原表达（χ^2=4.32,P〈0.05）。B系ALL中CD34阳性率为56.5%。AML中CD34的表达频率为40.0%,其中M2的CD34阳性率为66.6%,高于其他AML病儿的CD34阳性率（χ^2=5.42,P〈0.05）。结论 应用免疫分型可以较好地分析每例白血病病儿,尤其是对于混合型白血病及抗原交叉表达者更有意义。     

TGF-β3诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型的实验研究

目的探讨TGF-β3体外诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的可行性。方法分离培养骨髓间充质干细胞,鉴定其表面抗原,用含10%胎牛血清以及10ng/mL转化生长因子TGF-β3的条件培养基诱导,诱导后细胞通过软骨细胞特征性染色鉴定。结果骨髓间充质干细胞表面抗原CD29、CD44、CD105阳性,CD34、CD45、CD106以及HLA-DR阴性。诱导后细胞形态明显改变,甲苯氨蓝以及Ⅱ型胶原染色结果阳性。结论TGF-β3具有促进骨髓间充质干细胞在体外分化为软骨细胞的能力,可以作为组织工程种子细胞的一种有效来源。     

93例急性白血病免疫表型分析

目的探讨流式细胞术免疫分型在急性白血病诊断及治疗中的意义。方法采用CD45侧向角光散射(SSC)双参数散点图设门四色流式细胞术,对93例急性白血病患者进行免疫表型分析。结果 69例急性髓性白血病患者主要表达CD13、CD33、人类白细胞抗原(HLA)-DR、CD117;20.2%的患者伴有淋巴细胞系抗原CD7表达;CD7+与CD7-的完全缓解率(CR)比较差异有统计学意义(P<0.05)。13例急性B淋巴细胞白血病患者主要表达CD19、CD34、HLA-DR、CD20、CD22。31%的患者伴有髓细胞系抗原CD13表达;CD13+与CD13-的CR比较差异无统计学意义(P>0.05)。7例急性T淋巴细胞白血病患者主要表达CD5、CD3、CD7、CD34。结论采用流式细胞术对急性白血病进行免疫分型,对白血病诊断的准确性及分型、选择治疗方案及判断预后具有重要临床意义。     

急性白血病系列特异性抗原表达分析

目的探讨细胞系列特异性抗原在急性白血病（AL）中表达的差异及其临床意义。方法采用CD45／SSC双参数设门流式细胞术检测183例AL患者幼稚细胞表面及胞浆抗原表达。结果在AML中,细胞膜抗原CD13、CD33、CD117表达最常见,分别为95．0％、95．7％和81．4％,但CD117特异性高于CD13和CD33（P〈0．01）;胞浆抗原cMPO敏感性和特异性与CD117比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;在B-ALL中胞膜抗原CD19敏感性高于CD20（P〈0．01）,两者特异性比较,差异无统计学意义;胞浆抗原cCD79a敏感性与CD19比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,但特异性高于CD19（P〈0．01）;T-ALL中胞膜抗原CD7敏感性较高,达95．0％,但特异性仅为70．8％,胞浆抗原cCD3敏感性和特异性分别为85．0％和95．7％。结论多参数流式细胞术检测细胞系列特异性胞膜／胞浆抗原表达是诊断AL的一项可靠技术。     

Immunophenotypic differences between diagnosis and relapse in childhood AML: Implications for MRD monitoring

BACKGROUND: Determination of antigen expression patterns is, in addition to morphologic analysis, essential to the diagnosis of acute myeloid leukemia (AML). The present study was performed to determine (a) the degree of changes in immunophenotype and their consequences on the monitoring of minimal residual disease (MRD) in childhood AML and (b) whether certain clusters of changes in antigen expression patterns exist between diagnosis and relapse. METHODS: Bone marrow specimens of 48 children enrolled in the German AML-BFM-93/98 (Acute Myeloid Leukemia-Berlin-Frankfurt-Munster) studies were analyzed immunologically, morphologically, and genetically at diagnosis and at first relapse. RESULTS: The immunophenotypes by flow cytometry differed by at least one antigen between samples at presentation and relapse in 42 of 48 children (88%). More children displayed an immature phenotype at relapse (43 of 47, 91.5%, vs. 37 of 48, 77%; P = 0.05) with expression of CD34 and/or CD117. This was reflected by a gain of markers that are associated with lineage immaturity in 18 of 25 (72%) of cases, whereas the loss of such antigens was observed in 6 of 25 (24%) patients. We did not observe significant changes for lineage specific markers, with comparable occurrences of loss or gain of myeloid and lymphoid antigens in the sample pairs. Only minimal changes were seen for morphologic and genetic features. CONCLUSION: An antigenic shift was observed in 88% of cases in this study. The antibody panels used for MRD monitoring in childhood AML should therefore not be restricted to the immunophenotype detected at presentation but should include in particular markers of lineage immaturity. The clinical observation of a shift toward a more immature phenotype of the myeloblasts is consistent with the model of a clonal evolution of a leukemic stem cell.     

cMPO/cCD79α/cCD3/CD45抗体组合在交叉系列抗原表达急性白血病诊断中的应用

目的探讨cMPO／cCD79α／cCD3／CIM5抗体组合在胞膜交叉系列抗原表达急性白血病（AL）诊断中的意义。方法采用流式细胞术对269例成人初发AL患者中胞膜交叉系列抗原表达的60例患者加做胞质抗体组合cMPO／cCD79α／cCD3／CD45。结果269例AL患者中有54例（20．1％）加做胞质抗原组合后仅出现一种胞质抗原表达而诊断为交叉系列抗原表达白血病，交叉系列抗原表达白血病在T细胞急性淋巴细胞白血病（T—ALL）、B—ALL及急性髓系白血病（AML）中的比例分别为28．6％、43．6％及13．4％。CD7、CD19、CD5和CD20在交叉系列抗原表达AML中的出现频率依次为65．4％、15．4％、11．5％和7．7％；CD13、CD33、CDl5在交叉系列抗原表达ALL中的出现频率依次为89．3％、21．4％、3．6％；6例（2．3％）患者出现二系胞质抗原表达，诊断为急性双表型细胞白血病，其中T／B型2例、B／M（B／髓系）型4例。结论胞质抗体具有系列特异性，四色组合流式细胞．免疫表型技术能提供快速多参数的分析数据。为保证实验结果的准确性，在对异常细胞免疫分型时应以CD45／SSC设门和正常细胞作内部参照。     

急性双表型白血病细胞形态学和免疫表型的研究

目的探讨骨髓细胞免疫表型在急性双表型白血病中的诊断价值及其与骨髓细胞形态学的比对研究。方法对190例急性白血病患者采用流式细胞仪四色免疫荧光直接标记技术检测细胞免疫表型,通过骨髓细胞形态学分型进行分析。采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术检测11例双表型急性白血病患者,根据欧洲白血病免疫分类协作组(EGIL)积分标准进行免疫学分型。结果 190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性髓系白血病88例(占46.3%),急性淋系白血病88例(占46.3%),未分化白血病3例(占1.6%),与骨髓细胞形态学和组织化学诊断具有高符合率。190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性双表型白血病11例(占5.8%),其中髓系与B系共表达的抗原7例(占3.7%),均共同表达cCD79a和cMPO,胞膜抗原CD19和CD10表达量较高;髓系与T系共表达的抗原3例(占1.6%),均共同表达cCD3和cMPO,胞膜抗原CD5和CD7表达量较高;髓系、B系与T系均表达的抗原1例(占0.5%)。此外,急性双表型白血病患者高表达CD34胞膜抗原(占81.8%),提示预后不良。结论急性双表型白血病发病率较低,骨髓细胞免疫表型对诊断及鉴别双表型急性白血病有特异性,以髓系和B系抗原共表达为主。采用骨髓细胞形态学和流式细胞术联合检测急性双表型白血病可提高诊断准确性,能有效地指导临床制订治疗方案和进行预后判断。     

成人急性髓性白血病的反常免疫表型

对58例未经治疗的成人AML骨髓细胞用FCM及13种MoAB进行免疫表型测定。53.4%患者骨髓单个核细胞呈现纯髓系抗原表达(Ly~-AML)。34.5%患者的骨髓细胞除髓系外伴有淋巴系抗原表达(Ly~+AML)。在Ly~+FKAML,其淋巴系抗原表达的荧光强度明显弱于其髓系抗原的。在同样的诱导缓解治疗方案下,Ly~+AML组达完全缓解天数明显长于Ly~-AML组。AML细胞这种免疫表型特点是监测残存白血病细胞的良好标志,亦对临床提示应采用相应的治疗方案。