急性髓细胞白血病细胞GM－CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前者缔和常数（ｋｄ＿１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后者缔和常数（ｋｄ＿２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５０００，推测１５００００带为高亲和力受体带，１１５０００和９５０００带为低亲和力受体带。观察了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对２４例ＡＭＬ患者白血病细胞体外原代培养的影响及１６例膜表面受体数与增殖效应的相关性研究，发现８例体外原代培养中ｒｈＧＭ－ＣＳＦ加入与否没有或极少有集落形成，但ｒｈＧＭ－ｃｓＦ促使１４例白血病细胞体外增殖，集落数增加，增殖效应与细胞表面ＧＭ－ＣＳＦ受体数无相关性。     

慢性髓系白血病细胞来源的树突状细胞

慢性髓系白血病（ＣＭＬ）细胞起源于ＣＭＬ多能造血干细胞,树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ,ＤＣ）是功能强大的抗原提呈细胞。ＣＭＬ细胞在ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４、ＴＮＦ－α等细胞因子的共同作用下,在体外可以诱导生成ＣＭＬ－ＤＣ,在自体或异体条件下均能刺激Ｔ细胞的显增殖,发挥特异性的抗ＣＭＬ细胞毒效应。     

人GM—CSF基因转染小鼠肝癌细胞及其致瘤性研究

为建立以腺病毒为载体的ＧＭ－ＣＳＦ基因转染瘤苗，并研究其体内抗肿瘤作用，应用携带有人ＧＭ－ＣＳＦ基因的重组腺病毒（Ｒ－Ａｄ５）载体转染ＢＡＬＢ／ｃ小鼠肝癌细胞株（Ｈ２２），体外应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ法），检测ＧＭ－ＣＳＦ表达水平，以ＧＭ－ＣＳＦ基因转染的Ｈ２２细胞进行致瘤性研究。结果：（１）重组腺病毒载体能成功地介导ＧＭ－ＣＳＦ基因转染Ｈ２２细胞并能持续有效表达２６￣３１天，瘤苗的辐照处     

慢性髓性白血病来源的树突状细胞的功能研究

为研究慢性髓性白血病（ＣＭＬ）来源的树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ,ＤＣ）的功能,将ＣＭＬ骨髓和外周血单个核细胞在含ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－４,ＴＮＦ－α的培养基中培养７－１４天。利用流式细胞术对培养细胞进行表型鉴定,通过ＦＩＴＣ－ＤＸ（ＦＩＴＣ标记的葡聚糖）摄入实验,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ＭＴＴ实验,以及ＬＤＨ释放试验,分别检测不成熟ＤＣ对外源抗原的摄入能力,成熟ＤＣ对外源和内源抗原的呈递能     

干扰素－a对慢性粒细胞白血病细胞作用的体外研究

作者通过体外骨髓半固体和长期液体培养（ＬＴＢＭＣ），研究了干扰素－ａ（ＩＦＮ－ａ）对慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的作用。在半固体琼脂培养体系中，ＩＦＮ－ａ能抑制正常对照和ＣＭＬ患者７天和１０天ＣＦＵ－ＧＭ，而不抑制１４天及其后的ＣＦＵ－ＧＭ。在ＬＴＢＭＣ中，于培养开始只加一次ＩＦＮ－ａ（１０￣２Ｕ／ｍｌ，１０￣３Ｕ／ｍｌ，１０￣４Ｕ／ｍｌ），对非贴壁层细胞数和基质细胞层的形成均无明显影响，但大剂量ＩＦＮ－ａ（１０￣３Ｕ／ｍｌ和１０￣４Ｕ／ｍｌ组）对非贴壁层的ＣＦＵ－ＧＭ抑制明显；每周连续加用ＩＦＮ－ａ（１０Ｕ／ｍｌ，１０￣２Ｕ／ｍｌ，１０￣３Ｕ／ｍｌ），对非贴壁层细胞数和ＣＦＵ－ＧＭ均有抑制作用，而且ＩＦＮ－ａ浓度愈高，贴壁层的形成愈少。上述结果表明：ＩＦＮ－ａ优先抑制晚期ＣＦＵ－ＧＭ，对基质细胞也有一定抑制作用。     

hGM-CSF基因在哺乳动物细胞中稳定转染表达质粒的构建和鉴定

目的：获得具有天然糖基化结构的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）。方法：采用含ｓＲα启动子和新霉素抗性基因的真核细胞表达载体ｐＭＥｎｅｏ，接上ＸｈｏＩ接头，与ＸｈｏＩ酶切ｈＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ片段连接，构建了可在哺乳动物细胞中稳定表达的ｐＭＥｎｅｏ－ｈＧＭ－ＣＳＦ质粒。结果：２２个ｐＭＥｎｅｏ重构载体克隆中，８个含有ｈＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ片段，酶切鉴定插入方向为５个顺式，１个顺式串珠，２个反式。结论：将上述各式以ＤＥＡＥ法转染ＣＯＳ细胞，瞬时表达鉴定，用ＴＦ１细胞ＭＴＴ法测定培养液上清的ｈＧＭ－ＣＳＦ活性，顺式和顺式串珠培养上清活性为１×（１０３～１０４）Ｕ／ｍｌ，反式插入方向培养上清没有活性     

人粒系巨噬系克隆刺激因子基因导入真核细胞及其表达

目的：获得带糖链、近天然的重组人粒系巨噬系克隆刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ），以期为临床提供更安全、稳定的细胞因子。方法：采用基因重组技术，构建编码ｈＧＭ－ＣＳＦ的稳转载体ｐＭＥｎｅｏ－ｈＧＭ－ＣＳＦ，以酶切和猴肾细胞ＣＯＳ瞬时转染鉴定后，用磷酸钙－ＤＮＡ共沉淀法将重组质粒导入中国仓鼠卵细胞（ＣＨＯ）。结果：经Ｇ４１８加压筛选（８００μｇ／ｍｌ～１ｍｇ／ｍｌ），获得可表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的细胞株。常规或载体培养ＣＨＯ－ｈＧＭ－ＣＳＦ细胞株上清可直接刺激ｈＧＭ－ＣＳＦ依赖细胞株的增殖，ＭＴＴ测定活性单位可达１×１０７ｕ／Ｌ原液。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析显示ｒｈＧＭ－ＣＳＦ主带在２８ＫＤ位左右，为２Ｎ糖链型。结论：此ＣＨＯ－ｈＧＭ－ＣＳＦ细胞株表达稳定，活性较高，具有开发价值。     

组胺 H_2 受体阻滞剂阻断再生障碍性贫血患者 CD_8~ 细胞抑制正常 CFU-GM 生长的作用

目的：探讨再生障碍性贫血（再障）患者ＣＤ８＋细胞的组胺Ｈ２受体在造血抑制中的作用。方法：在１７例正常人粒－巨噬细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养体系中分别加入１７例再障患者外周血ＣＤ８＋细胞，再障患者外周血ＣＤ８＋细胞＋甲氰咪胍和单加甲氰咪胍。结果：再障患者外周血ＣＤ８＋细胞在体外能抑制正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的生长，０．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ和１．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的甲氰咪胍均能解除这种抑制作用。１．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ甲氰咪胍本身可使正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的产率有所下降，但０．５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ甲氰咪胍对正常人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ的生长无抑制作用。结论：组胺Ｈ２受体阻滞剂甲氰咪胍在体外能解除再障患者ＣＤ８＋细胞对正常ＣＦＵ－ＧＭ生长的抑制作用。     

三氧化二砷对骨髓增生异常综合征粒单系细胞体外作用的研究

为了探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）粒单系细胞的体外作用,用半固体、液体培养及ＡＰＡＡＰ法检测不同浓度Ａｓ２Ｏ３对２４例ＭＤＳ患ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＤ３３,ＣＤ１５,ｂｃｌ－２表达的影响,结果发现,Ａｓ２Ｏ３随着浓度的增加对ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用增强;０．３８８μｍｏｌ／Ｌ时对丛的抑制大于集落,其中低危组７０．７８％对３４．０５％,高危组８６．７６％对６５．８６％（Ｐ〈０．０１）;０．１９４μｍｏｌ－Ｌ时使低危组丛减少,而使集落增加,高危组丛减少,集落不变。高浓度（１．９４μｍｏｌ／Ｌ）时ＣＤ３３与ＣＤ１５表达降低,ｂｃｌ－２表达减少,细胞出现核染色质固缩,低浓度（０．１９４μｍｏｌ／Ｌ）时低危组ＣＤ３３减少,ＣＤ１５增加,高危组ＣＤ３３减少,ＣＤ１５不变,ｂｃｌ－２减少,且出现上述细胞     

粒—巨噬细胞集落刺激因子对Vp16诱导白血病细胞凋亡的调控作用

目的：探讨粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｖｐ１６诱导白血病细胞凋亡的调控作用，指导白血病临床治疗中正确使用ＧＭ－ＣＳＦ。方法：在构建高效表达ＧＭ－ＣＳＦ的逆转录载体Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ＧＭ－ＣＳＦ表达系统的基础上，对转ＧＭ－ＣＳＦ基因和未转ＧＭ－ＣＳＦ基因的白血病ＨＬ－６０细胞进行研究。结果：未转ＧＭ－ＣＳＦ基因及转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞经Ｖｐ１６处理后均出现凋亡的特征性表现：ＤＮＡ电泳呈梯状；流式细胞仪ＤＮＡ直方图上呈现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰；透射电镜观察细胞形态可见凋亡的特征性改变。结论：Ｖｐ１６具有诱导白血病细胞发生凋亡的作用，而ＧＭ－ＣＳＦ能够抑制Ｖｐ１６诱导的细胞凋亡。以上结果表明，白血病临床治疗中为预防和改善化疗所致骨髓抑制而应用ＧＭ－ＣＳＦ时，应谨慎地选择时机，在化疗前和化疗期间不宜使用，以避免白血病细胞对抗癌药物诱导的凋亡产生抵抗而导致耐药。     

电转入IL—6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＩＬ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体－液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显的荧光强度，＾１２５Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该     

阳离子脂质体介导hGM-CSF真核表达载体在骨髓基质细胞系中的表达

目的 构建人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ,并观察其在人骨髓基质细胞系ＨＦＣＬ中的表达,方法 用ＤＮＡ重组技术,将ｈＧＭ－ＣＳＦ ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ的多砍隆位点中,获得阳性重组载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ。以脂质体介导法转染人骨髓基质细胞系ＨＦＣＬ细胞筛选获得的阳性细胞用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分别检测其基因组ＤＮＡ整合和ｍＲＮＡ转录,用ＥＬＩＳＡ及依赖株（ＴＦ－１）法检测其蛋白表达量和活性。结果 酶切鉴定表明成功地构建了重组真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ;ｈＧＭ－ＣＳＦ基因已整合到ＨＦＣＬ细胞基因组ＤＮＡ中,在ｍＲＮＡ和蛋白质水平上均可检测到其表达;ｈＧＭ－ＣＳＦ的表     

电转人IL－6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＬＴ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体。液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显著的荧光强度；￣（１２５）Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该细胞的ＲＮＡ与￣（３２）Ｐ标记的１．５ｋｂ的ＩＬ－６ＲｃＤＮＡ探针呈明显的杂交信号，证明我们已成功地建立了高表达人ＩＬ－６Ｒ的ＬＴ１２－ＩＬ－６Ｒ￣＋的大鼠急性白血病细胞模型。     

慢性再生障碍性贫血患者血清粒细胞集落刺激因子水平的研究

目的：从粒系角度探讨再生障碍性贫血的发病机制与治疗。方法：通过自行制备抗ｒｈＧ－ＣＳＦ单克隆抗体，建立ＥＬＩＳＡ法，对５４例慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）患者（男３１例，女２３例，平均年龄３６岁）进行血清Ｇ－ＣＳＦ测定与研究。结果：７０．４％ＣＡＡ患者血清Ｇ－ＣＳＦ水平升高（２７２．７６±５８．３９ｎｇ／Ｌ），其血清Ｇ－ＣＳＦ水平与白细胞计数呈负相关（ｒ＝－０．５３５，Ｐ＜０．０１），对其中的１２例患者进行了ＣＦＵ－ＧＭ的测定，结果ＣＦＵ－ＧＭ较正常对照明显降低（为１７．９２±１０．２８／２×１０５有核细胞）。结论：ＣＡＡ患者粒系造血祖细胞受损，Ｇ－ＣＳＦ靶细胞及靶细胞受体受损；部分患者白细胞降低Ｇ－ＣＳＦ并不升高，可能是由于微环境中内皮、成纤维细胞受损，或由于免疫缺陷产生某些因子抑制内皮、成纤维细胞的上调作用，因此对于这类患者的治疗除应用Ｇ－ＣＳＦ外，尚可应用免疫抑制剂及改善微环境的治疗。     

紫外线照射对恶性肿瘤患者粒—单造血祖细胞集落形成和细胞活？…

目的 研究短波紫外线照射对恶性肿瘤患者粒－单造血祖细胞集落形成和细胞活力的影响。方法 应用０．５０、１００,３００、４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２的ＵＶＣ照射应用干细胞生长因子动员后白细胞外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）,观察７ｄ后粒－单系造血祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）以及于ＵＶＣ照射后１,３,５,７ｄ观察细胞活力。结果 ５０,１００,２００,４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２ＵＶＣ照射后ＣＦＵ－ＧＭ集落个     

部花青（MC540）介导的光敏作用体外净化自体骨髓移植物的实验研究

用氩离子激光（波长５１４ｎｍ）照射，部花青（ＭＣ５４０）介导的光敏作用对白血病细胞系ＨＬ－６０、Ｋ５６２，急性髓细胞白血病原代祖细胞（ＣＦＵ－Ｌ）以及正常骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的杀伤敏感性作了比较；用电镜观察处理前后Ｋ５６２细胞的超微结构变化。单纯激光照射或仅有ＭＣ５４０而不照光，对ＨＬ－６０细胞集落产率及ＣＦＵ－ＧＭ产率无明显影响。当ＭＣ５４０浓度为２５μｇ／ｍｌ、激光照射能量密度为７９．５１／ｃｍ￣２的条件处理，ＨＬ－６０集落产率下降２．８个对数级、ＣＦＵ－Ｌ减少２．２个对数级，而骨贿ＣＦＵ－ＧＭ尚能保留６４．０±７．０％；含１％Ｋ５６２细胞的模拟白血病骨贿经同样处理，Ｋ５６２集落产率能下降１．３６对数级，而ＣＦＵ－ＧＭ尚存７４．０±１９．０％。电镜观察发现处理后的Ｋ５６２细胞体积增大，肿胀，胞膜洞孔样破坏。结果提示，氩离子激光照射，ＭＣ５４０介导的光敏作用能选择性杀伤白血病细胞系，原代白血病祖细胞同样敏感。其对细胞的杀伤作用可能主要因直接造成胞膜破坏。该方法将可能成为一种有前途的自体骨髓移植物体外净化手段。     

小鼠c-kit~＋Sca-1~＋和c-kit~＋Sca-1~－细胞代表不同分化阶段的造血干／祖细胞

为深入研究造血干细胞（ＨＳＣ）的生物学功能，根据表面标志，采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的ＨＳＣ亚群ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋和ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞。体外集落培养表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞对ＩＬ－３或ＧＭ－ＣＳＦ单独刺激无反应，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则可形成大小不等的细胞集落。多种造血生长因子［ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ＋干细胞生长因子（ＳＣＦ）］联合可诱导ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞形成大的细胞集落，但在培养１２天时尚无ＢＦＵ－Ｅ和粒、单核、红和巨核系细胞集落（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）形成；而同样条件下，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞可形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ以及其它各类集落。体内实验表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞在培养８天时无脾集落（ＣＦＵ－Ｓ）形成，与ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞显著不同（Ｐ＜０．０１）。相反，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞包含了骨髓造血重建活性细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则缺乏。结果提示ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞为早期的具重建长期造血功能的干细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则为相对分化后期的造血祖细胞。     

GM—CSF基因修饰,抗原预激的树突状细胞体内诱导白血病细胞分化？…

目的：探讨树突状细胞在肿瘤治疗过程中的作用及机制。方法：以小鼠ＦＢＬ－３红白血病细胞皮下接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠建立荷瘤模型，采用流式细胞仪分析和透射电镜等技术，观察了粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）基因修饰的抗原预激的树突状细胞体内治疗作用。结果：采用ＧＭ－ＣＳＦ基因修饰的抗原预激的树突状细胞治疗，可以明显抑制白血病细胞生长；白血病细胞表达ＣＤ３４水平增加，同时ＭＨＣ－Ⅱ，Ｂ７－１，Ｂ７－     

紫外线波段B对脐血免疫活性和造血活性抑制的体外研究

目的：探讨紫外线波段Ｂ（ＵＶＢ）对脐血淋巴细胞和造血细胞的作用差别。方法：选择０，５，１０，２０，５０ｍＪ／ｃｍ２等不同剂量ＵＶＢ照射脐血单个核细胞（ＭＮＣ），分别进行活力检测，混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ），粒－单系祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）培养和ＣＤ３４＋细胞比率检测。结果：脐血细胞ＭＬＣ的免疫增殖反应活性、免疫激活能力及ＣＦＵ－ＧＭ数均呈照射剂量依赖性下降（Ｐ＜０．０１），但在１０ｍＪ／ｃｍ２照射范围内脐血免疫活性下降幅度显著高于ＣＦＵ－ＧＭ。在脐血ＭＮＣ悬液内加入２０％小牛血清后不仅使ＵＶＢ的作用减弱，还加大了ＵＶＢ对脐血淋巴细胞和造血细胞失活作用的差别。ＵＶＢ照射前后ＣＤ３４＋细胞比率无明显变化。结论：小剂量ＵＶＢ照射可选择性降低脐血淋巴细胞的增殖反应活性，而对造血细胞活性影响少，提示运用ＵＶＢ预防脐血移植引起的移植物抗宿主病是可能的。     

人粒-巨噬细胞集落刺激因子受体在NIH3T3细胞中的功能表达

目的　探讨人类粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ） 受体（ＧＭＲ） 在ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中表达的功能特性。方法　将编码人ＧＭＲα和β亚单位的ｃＤＮＡ 转染到无人ＧＭＲ表达的小鼠ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞中,并检测其阳性转染子在配体刺激后的增殖信号传导与酪氨酸磷酸化。结果　重建的功能性ＧＭＲα／β可以介导细胞增殖与细胞集落形成,并诱导βｃ、Ｊａｋ２、Ｓｈｃ 及Ｓｈｃ 相关蛋白Ｐ１４５（ＳＨＩＰ） 酪氨酸磷酸化,然而,人ＧＭＣＳＦ并不能激活仅含ＧＭＲα的ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞出现有丝分裂信号表达。结论　人ＧＭＲα与β亚单位同时转染入ＮＩＨ３Ｔ３ 细胞后,可通过βｃ 磷酸化,激活Ｊａｋ２ 、Ｓｈｃ 和ＳＨＩＰ信号传导途径,而导致配体依赖性细胞生长与集落形成