用聚合酶链反应技术检测急性髓细胞白血病AML_1－ETO融合转录产物

应用一对引物（ＥＴＯＵ＿１／ＥＴＯＤ＿１）通过逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）扩增１７例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患者的ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合转录本，１２例初治患者（Ｍ＿１１１例、Ｍ＿４１例）中一致性扩增到预期的２００ｂｐ大小的片段，其中７例证实有典型ｔ（８；２１）或其变异型。扩增片段大小及其限制性内切醇谱提示ｔ（８；２１）易位的ＡＭＬ＿１和ＥＴＯ基因断裂点局限于一个内含子。５例Ｍ＿２已完全经解２～３８个月仍检测到相同的ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合ｍＲＮＡ，提示体内仍残存少量ｔ（８；２１）异常克隆。ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合转录本的检测是诊断和监测ｔ（８；２１）ＡＭＬ的有力手段。     

急性髓细胞白血病M_（2b）型AML_1－ETO融合基因转录本的检测

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）－Ｍ＿（２ｂ）患者约９０％有ｔ（８；２１）。已经证明它导致ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因。我们应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测了２２例ＡＭＬ＿１－Ｍ＿（２ｂ）其中ｔ（８；２１）阳性１６例，阴性２例，不能确定有无ｔ（８；２１）的４例，发现全部２２例患者均可检出ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因转录本。同时在５例ｔ（８；２１）阴性的ＡＭＬ中，包括Ｍ＿（２ａ）２例，Ｍ＿４２例，Ｍ＿３１例，均未检出上述融合基因转录本。我们的初步结果提示ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因可以作为ＡＭＬ－Ｍ＿（２ｂ）的基因标志。     

急性髓细胞白血病M2b型AML1—ETO融合基因转录本的检测

急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）－Ｍ２ｂ患者约９０％有ｔ（８；２１）。已经证明它导致ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因。我们应用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）检测了２２例ＡＭＬ－Ｍ２ｂ，其中ｔ（８；２１）阳性１６例，阴性２例，不能确定有无ｔ（８；２１）的４例，发现全部２２例患者均可检出ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因转录本。同时在５例ｔ（８；２１）阴性的ＡＭＬ中，包括Ｍ２ａ例，Ｍ3 １例，均未检出上述融合基因转录本     

急性髓细胞白血病(M_2b)与染色体8;21易位——附45例报告

为了更加准确诊断急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）的Ｍ２ｂ型，本文联合常规的细胞形态学、细胞化学、细胞遗传学和分子生物学方法对４５例伴ｔ（８；２１）易位的ＡＭＬ患者进行诊断。结果显示：①染色体ｔ（８；２１）易位与Ｍ２ｂ两者关系密切。本组４５例ｔ（８；２１）ＡＭＬ中Ｍ２ｂ占９７．７％。ｔ（８；２１）常伴性染色体丢失，以Ｙ染色体丢失尤为易见。②异常中幼粒特征性改变主要是高度核浆发育不平衡（不成熟的核与成熟的胞浆），占６％～６６％，中位数３３％。３２例可见Ａｕｅｒ小体，６例骨髓嗜酸细胞明显增多（＞５％）。③用逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）技术检测２９例患者的ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因来自ｔ（８；２１）染色体。１例在完全缓解（ＣＲ）后５个月复查ＡＭＬ－ＥＴＯ转阴性，另１例ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因持续存在，３个月后复发。因此认为检测ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因对无ｔ（８；２１）的ＡＭＬ的诊断及微量残留白血病的监测等方面有重要意义。     

儿童急性淋巴细胞白血病 TEL／AML1融合基因的检测及其临床意义

目的 研究我国儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中伴有ｔ（１２；２１）易位的发生率及其临床预后特征。方法 采用套式逆转录聚合酶链反应（ＰＴ－ＰＣＲ）技术检测ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本。结果 在６０例儿童（Ｂ系４５例，Ｔ系１３例，Ｔ、Ｂ系双表达２例）中共发现８例Ｂ系ＡＬＬ中有ＴＥＬ－ＡＭＬ１融合基因转录本，治疗后８例均获得完全缓解（ＣＲ）。结论 ｔ（１２；２１）Ｂ系ＡＬＬ是儿童ＡＬＬ中最多见且预后     

用逆转录－多聚酶链反应监测急性髓系白血病M_（2b）微量残留白血病

急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｍ＿（２ｂ）常伴有ｔ（８：２１）染色体易位，两个染色体重排导致形成ＡＭＬＩ／ＭＴＧ８融合基因，并持续产生融合基因转录本。作者利用逆转录。多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增ＡＭＬ１／ＭＴＧ８融合基因转录本进行ＡＭＬ－Ｍ＿（２ｂ）微量残留白血病的监测，在１３例完全缓解的患者中，１２例可检出残留白血病细胞。经随诊这１２例中，２例已复发，１例死于强化治疗骨髓抑制期，９例仍持续完全缓解。     

用逆转录酶／聚合链反应方法检测急性粒细胞白血病AML1—ETO副合基因

用筑巢式逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测伴ｔ（８；２１）染色体易位的Ｍ２ｂ型白血病ＡＭＬ１－ＥＴＯ融合基因转录本，该方法具有高度敏感性，可以从１０＾４－１０＾５个正常细胞ＲＮＡ中检出１个白血病细胞，对于Ｍ２ｂ型白血病的诊断及监测是一种快速，灵敏，特异的方法。我们研究的１１例Ｍ２ｂ型白血病中有１例未检测到的ＰＣＲ产物，可能与该型患中基因重组的分子异质性有关。     

用逆转录酶／聚合酶链反应方法检测急性粒细胞白血病（M_（2b））AML_1－E

用筑巢式逆转录酶／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测伴ｔ（８：２１）染色体易位的Ｍ＿（２ｂ）型白血病ＡＭＬ＿１－ＥＴＯ融合基因转录本，该方法具有高度敏感性，可以从１０￣４～１０￣５个正常细胞ＲＮＡ中检出１个白血病细胞，对于Ｍ＿（２ｂ）型白血病的诊断及监测是一种快速、灵敏、特异的方法。我们研究的１１例Ｍ＿（２ｂ）型白血病中有１例未检测到ＰＣＲ产物，可能与该型患者中基因重组的分子异质性有关。     

急性髓细胞白血病M2bETO基因重排的研究

应用ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法，检测了２３例Ｍ＿（２ｂ）、４例Ｍ＿（２ａ）、１例Ｍ＿（４ａ）和１例Ｍ＿６的ＥＴＯ基因重排。发现至少７４％的Ｍ＿（２ｂ）患者，包括１５例有ｔ（８；２１）异常和２例核型正常的Ｍ＿（２ｂ）有ＥＴＯ基因重排。研究结果表明检测ＥＴＯ基因重排可作为Ｍ＿（２ｂ）基因诊断及疗效监测的手段之一。     

伴染色体t（8;21）为特征的四倍体克隆的急性白血病二例

目的：报道２例以染色体ｔ（８；２１）为特征的四倍体克隆白血病。方法：用Ｒ显带法对２例急性髓细胞白血病Ｍ２型（ＡＭＬ－Ｍ２）患者骨髓细胞染色体核型进行分析。结果：２例患者除正常细胞外，各有３个相关异常克隆：４６，ＸＹ，ｔ（８；２１）（２％）、４６，ＸＹ，ａｄｄ（７）（ｑ３１），ｔ（８；２１）（６．８％）和９２，ＸＸＹＹ，ａｄｄ（７）（ｑ３１）×２，ｔ（８；２１）×２（８０．６％），见于例１；４６，ＸＸ，ｔ（８；２１）（１３．４％）、４７，ＸＸ，＋４，ｔ（８；２１）（４６．３％）和９４，ＸＸＸＸ，＋４×２，ｔ（８；２１）×２（３９．１％），见于例２。２例化疗后均未获完全缓解且分别生存４和６个月。结论：四倍体或近四倍体克隆与Ｍ２／ｔ（８；２１）白血病有特别的联系且为其继发性改变，通常意味着预后不良。     

t（8;21）急性髓细胞白血病：30例临床和实验室分析

报告３０例ｔ（８；２１）急性髓细胞白血病（ＡＭＬ），２６例为Ｍ＿（２ｂ），４例为Ｍ＿（２ａ）。初始完全缓解率为０．９６２。０．７６２的男性患者伴有－Ｙ，０．２２２的女性患者伴有－Ｘ，０．２６７的患者伴有其它染色体异常。免疫表型分析ＨＬＡ－ＤＲ／ＤＰ阳性率０．１００，ＣＤ＿（３８）为０．８６６，ＣＤ＿（１５）为０．５００，ＨＩＭ＿４、ＨＩＭ＿５均为０．８００。ｔ（８；２１）ＡＭＬ与ＡＭＬＭ＿（２ｂ）的关系需进一步深入研究。     

RARα／MYL融合mRNA是诊断和监测急性早幼粒细胞白血病的特异标志

应用四条引物（Ｒ＿５，Ｒ＿６，Ｄ＿３，Ｄ＿４）通过逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了２０例初治急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者的ＲＡＲα／ＭＹＬ融合ｍＲＮＡ。建立的方法可在０．１ｎｇ细胞总ＲＮＡ中检出ＲＡＲα／ＭＹＬ融合ｍＲＮＡ，相当于在１０￣４～１０￣５个正常细胞中检出一个ＡＰＬ细胞，扩增产物的特异性经ＫｐｎＩ酶切法确认。１８例患者表达Ｂ型融合ｍＲＮＡ（２９０ｂｎ片段），２例表达Ａ型（３１１ｂｐ片段）。２例患者在完全缓解（ＣＲ）达４周和１６周时仍可检出融合ｍＲＮＡ。１例患者在ＣＲ期ＲＴ－ＰＣＲ检测持续阳性，４周后；临床复发。４例在ＣＲ期随访９～２９周融合ｍＲＮＡ均阴性。２例急性白血病在维甲酸治疗前拟诊ＡＰＬ，但ＲＴ。ＰＣＲ检测阴性，这２例对维甲酸治疗无效，核型分别是ｔ（８；２１）和正常。我们认为，ＲＡＲα／ＭＹＬ融合ｍＲＮＡ与ＭＹＬ／ＲＡＲα融合ｍＲＮＡ一样，也是诊断和监测ＡＰＬ的一个敏感和特异的标志。     

伴有8;21染色体易位的骨髓增生异常综合征的新评价

伴有ｔ（８；２１）易位的骨髓增生异常综合征的约占ｔ（；２１）易位患者总的２％－３％，其临床和生物学特征和急性髓细胞白血病相似而不同于ＭＤＳ。绝大多数患者在短期内随着骨髓原始细胞百分比迅速上升而转为Ｍ２－ＡＭＬ，对他们一开始就应给予ＡＭＬ的联合化疗。     

M2／t（8;21）急性髓系白血病表达CD19的临床意义

ｔ（８;２１）是急性髓系白血病（ＡＭＬ）－Ｍ２的特征性染色体异常。ｇ（８;２１）ＡＭＬ特别是Ｍ２／ｔ（８．２１）高表达ＣＤ１９和ＣＤ３４,低表达ＣＤ３３。ＣＤ１９与ｔ（８;２１）密切相关,Ｃ１９配合ＣＤ３４可预测ｔ（８;２１）核型。ＣＤ１９与ｔ（８;２１）两均是ＡＭＬ预后好的指标。流式细胞术（ＦＣＭ）免疫表型分析检测技术的敏感性较间接免疫荧光显微镜法（ＩＩＦ）要高,可靠性好。     

急性心肌梗死患者血浆内皮素-1浓度的动态变化

内皮素－１（ＥＴ－１）主要是由血管内皮细胞产生的迄今所知体内最强的收缩血管物质。它是内皮素（ＥＴ）家族成员之一。虽然国内有急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者血浆ＥＴ－１浓度动态观察的报道［１－２］，但与国外报道的结果不一致［３～４］。本研究对ＡＭＩ患者血浆 ＥＴ－ １浓度进行了进一步的动态观察。１对象与方法１．１对象所有患者均为符合 ＷＨＯ诊断标准［５］的 ＡＭＩ住院病人，共３５例，分为有和无并发症两组，另选健康者２０例作为对照组。１．１．１ＡＭＩ无并发症组 ２４例，男１６例，女８例；年龄３７－５２岁（平均…     

内毒素休克兔循环血一氧化氮和内皮素—1的动态观察

目的：观察内毒素休克兔循环血一氧化氮（ＮＯ）和内皮素１（ＥＴ１）的动态变化，进一步探讨内毒素休克的发病机制。方法：新西兰白兔２５只，经颈外静脉一次性注射大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ，Ｅ．ｃｏｌｉＯ１１１Ｂ４８．０×１０９ｃｆｕ／ｋｇ），观察平均动脉压（ＭＡＰ）、血浆肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、ＮＯ－２和ＥＴ１的动态变化，以及组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性与器官功能变化。结果：一次性注射ＬＰＳ后，ＭＡＰ呈双相下降；血浆ＴＮＦα活性变化呈陡直的单峰曲线；ＮＯ－２含量于实验后３０分钟迅速增高，实验后６小时达峰值，实验后２４小时仍高于实验前；实验后２４小时心脏组织中ＮＯＳ活性明显高于肝、肺和肾组织；血浆ＥＴ１含量呈双相增高（０．５小时、８小时），实验后２４小时仍高于注射前；血浆ＮＯ－２与ＥＴ１含量呈显著正相关；肝、肾功能损害进行性加重。结论：一次性静注ＬＰＳ后，ＮＯ的生成迅速而持久地增加，ＥＴ１的合成与释放则呈双相增加。ＮＯ与ＥＴ呈显著正相关     

尿液外泌体长链非编码 ＲＮＡ ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 对膀胱癌诊断的价值

摘要：目的 检测膀胱癌患者尿液外泌体中人肺腺癌转移相关转录因子 １ （ＭＡＬＡＴ １）和缺氧诱导因子 １α 反义 ＲＮＡ２ （ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２）的表达水平，分析其与患者临床病理参数的关系，探讨其在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法 收集 ２０１９ 年 １ 月至 ２０２０ 年 １２ 月于西安医学院第一附属医院就诊的膀胱癌、膀胱良性疾病患者及健康人各 ４０ 例尿液样本，采用 ＥＬＩＳＡ 法 检测各组尿液外泌体中 ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 的表达水平。进一步分析其与膀胱癌患者临床病理参数的相关性；绘制 ＲＯＣ 曲线并分析 ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 对膀胱癌的诊断价值。结果 膀胱癌组中 ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 的表达水平显著高于膀 胱良性疾病和健康人对照组，差异具有统计学意义 （Ｐ＜０．０５）；ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 的表达水平与膀胱癌患者的病理分级 和分期的差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而与肿瘤的大小密切相关（Ｐ＜０．０５）；尿液外泌体中 ＭＡＬＡＴ１ 诊断膀胱癌的曲线下面 积（ＡＵＣＲＯＣ ）为 ０．７４８，敏感性为 ７５．０％，特异性为 ６６．２５％；ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 诊断膀胱癌的 ＡＵＣＲＯＣ 为 ０．７５７，敏感性为 ７５．０％，特异性 为６８．７５％；ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 联合检测诊断膀胱癌的 ＡＵＣＲＯＣ 为 ０．８２０，敏感性为 ８５．０％，特异性为 ８１．２５％，均高于两项指 标的单独诊断价值。结论 尿液外泌体中高表达的 ＭＡＬＡＴ１ 和 ＨＩＦ１Ａ ＡＳ２ 可作为膀胱癌诊断的潜在生物学标志物。     

乙双吗啉治疗银悄病所致继发性白血病的染色体研究

报道１４例乙又吗啉所致继发性急性非淋巴细胞白血病的染色体研究结果。患发病前均有因银屑病而服用乙双吗啉史。骨髓细胞染色体显带分析全部患均有史隆性核型异，即ｔ（１５；１７）见于８例Ｍ３，ｔ（８；２１）见于４例Ｍ２，７ｑ－见于１例Ｍ４和１例Ｍ５。本研究提示，本组白血病很可能系乙双吗啉所致治疗相关性白血病（ＴＲＬ）；可能存在着另一种以特异性染色体易位为特征的ＴＲＬ，它的临床，血液学和预后均不同于烷化剂     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

急性淋巴细胞白血病染色体易位与癌基因研究的进展

急性淋巴细胞白血病染色体易位能引起一系列癌基因异常。本文就ＡＬＬ时ｔ（１；１９）易位和Ｅ２Ａ－ＰＢＸ，ｔ（８；１４）易位和Ｃ－ｍｙｃ，ｔ（１；４）易位和ｔａｌ－１，ｔ（７；１９）易位和ｌｙｌ－１（１１；１４）易位和Ｔｔｇ－１以及ｔ（１０；１４）易位和ＨＯＸ１１（ＴＣＬ３）等的表达及特点做一综述。