不同的脂肪酸对人血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinen dothelialcells，HUVEC）凋亡及生长周期的影响。方法 用不同种类，不同浓度的FFAs培养人血管内皮细胞（VEC），然后应用流式细胞术（FCM）对培养的人VEC生长周期及细胞凋亡进行分析。结果 饱和脂肪酸（SFA）（C16：0，C18：0，C24：0），使培养的人VEC生长受到抑制，随浓度升高细胞凋亡率升高；不饱和脂肪酸（USFA）（C18：1，C18：2），当低浓度时，VEC凋亡率较低（P〉0．05，P〉0．01），而当达400或600μmol／L时凋亡率升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论 SFA对培养的人VEC具有抑制增殖及诱导凋亡的作用。低浓度USFA对VEC凋亡及生长周期的影响不大，但高浓度时，其诱导凋亡的作用增强。     

酞胺哌啶酮对耐顺铂人肺腺癌细胞系血管生成因子的影响

血管生成在恶性肿瘤的增殖与转移中起重要作用[1 ] ,血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)与碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)的促血管生成活性已被公认[2 ] 。近来发现酞胺哌啶酮具有免疫调节及抗炎活性 ,且具有强大的抗血管生成效应。本研究通过采用逆转录 (ＲＴ) 聚合酶链反应 (ＰＣＲ)与免疫细胞化学方法 ,检测酞胺哌啶酮处理耐顺铂人肺腺癌细胞系Ａ549ＤＤＰ前后ＶＥＧＦ和ｂＦＧＦ的表达水平 ,探讨酞胺哌啶酮在降低人肺腺癌细胞系顺铂耐药中的作用。一、材料与方法1 .细胞培养 :用含 1 0 %胎牛血清的Ｄｕｌｂｅｃｃｏ改良培养基在 37℃、5 …     

肺癌与抗血管生成治疗的新进展

肺癌与其它实体瘤一样 ,其发生、发展和转移均依赖于血管生成 ,以新生血管为靶点 ,抑制肿瘤血管生成、阻断肿瘤的营养来源和迁移通道 ,这已成为近年来癌症治疗的新策略。我们就近年来国外此领域的最新进展综述如下。一、肺癌组织中血管生成的调控血管内皮细胞增殖在肿瘤组织中比正常组织中快 30～40倍 ,当肿瘤生长至 1～ 2ｍｍ3 大小后 ,其继续长大必须依赖于新血管的生成 ,而血管生成是一个多步骤的复杂过程 ,并由多种血管生成因子和血管生成抑制因子共同调控所决定的。1 血管生成因子 :在多种血管生成因子中 ,血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)…     

抗肺癌血管生成治疗的进展

没有血管生成,实体瘤直径不会超过3mm。肿瘤的生长和转移都依赖于新生血管的形成。抗肿瘤血管生成治疗是近年来逐渐兴起的一种新的抗癌方法,肿瘤血管生成的机制也成为近年来肿瘤领域研究的热点。本文就两年来抗肺癌肿瘤血管生成治疗进展作一综述。     

循环内皮细胞检测与肺癌抗血管生成治疗研究

血管生成不仅为肿瘤生长提供新陈代谢的营养物质,也为肿瘤细胞的分化、转移提供了潜在的路径。抗血管生成在肿瘤治疗中具有重要意义。循环内皮细胞（circulating endothelial cells,CECs）在恶性肿瘤患者外周血中数量明显增加,CECs和循环内皮祖细胞（circulating endothelial progenitors,CEPs）的活力、动力学特征与患者抗血管生成治疗的反应有关。     

血管内皮细胞迁移与肿瘤血管生成

肿瘤生长和转移均依赖于肿瘤的血管生成,而血管内皮细胞迁移是肿瘤血管生成过程的一个重要环节,有着重要的研究意义.现从肿瘤血管生成过程中促血管生成因子、骨架蛋白解聚、细胞外基质的降解三个方面对血管内皮细胞迁移的影响进行综述.     

血管内皮细胞生长因子在心脏的表达特点及衰老对血管生成的影响

血管生成及其相关因子表达随生长发育或创伤、缺血/缺氧及炎症反应而有不同的反应,促血管生成治疗是目前治疗血管阻塞导致的肢体和心肌缺血的研究热点,进一步研究血管内皮细胞生长因子及其受体在老年心脏中的表达规律以及老年常见疾病对心脏血管生成的影响,可为促血管生成治疗心肌缺血提供理论基础。     

异长春花碱联合异环磷酰胺、顺铂治疗晚期非小细胞肺癌50例临床观察

晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者已失去手术治疗的时机，预后不佳，需进行以化疗为主的多学科综合治疗以延长患者的生存期、控制病变、改善症状、提高生活质量，因此化疗已成为晚期NSCLC的重要治疗方法之一。我院从2000年2月～2004年2月采用异长春花碱(NVB)联合异环磷酰胺(IFO)、顺铂(DDP)(NIP方案)治疗50例晚期NSCLC患者，取得了较好的疗效，报告如下。     

p53反义RNA对人肺癌细胞表型和顺铂敏感性的影响

目的：研究外源P53反义RNA对有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系恶性表型和顺铂敏感性的影响。方法：构建反义P53cDNA真核细胞表达载体,PEGFP－P53（AS）,经酶切图证明反向联结质粒,Lipofectin介质转染有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系801－D,经G418筛选获耐受克隆,稀释法建立单细胞克隆系,PCR检测外源基因,荧光显微镜检测细胞绿荧光蛋白表达,P53单抗免疫组化染色检测P53突变蛋白表达,体外集落形成,检测细胞恶性生长。流氏细胞仪检测细胞周期,MTTI地检测细胞对顺铂药物敏感性。结果：酶切图证明了P53－cDNA反向联结于质粒,构建了PEGFP－P53（AS）,建立了转染单细胞克隆系PEGFP－P53（AS）－801D及空载细胞系PEGFP－801D。PCR检测外源P53基因和neo基因存在于转染细胞PEGFP－P53（AS－801D。荧光显微镜下发现胞浆有绿荧光蛋白表达,免疫组化染色P53突变蛋白801D细胞系为阳性,而PEGFP－P53（AS）－801为阴性,证明外源反义P53封闭转染细胞内源突变蛋白表达。与母系相比PEGFP－P53（AS）－801D集落形成抑制率为61％（P＜0．01）,流氏细胞仪检测PEGFP－P53（AS）－801D细胞G1期细胞数明显增加,出现G1期阻止的表现,MTT检测PEGFP－P53（AS）－801D对顺铂比母系更为敏感。结论：有P53基因248密码点突变的801D细胞恶性增殖明显,对顺铂耐药,外源P53反义RNA可封闭突变蛋白表达,抑制801D细胞体外恶性增殖,增加对顺铂的药物敏感性,证明P53突变的恶笥表型可以被抑制或野生型P53功能可得到恢复。     

IGF-1对受损血管内皮细胞存活和增殖的影响及其机制

目的 观察胰岛素样生长因子(IGF-1)对受损血管内皮细胞(VEC)增殖的影响.方法 利用不同浓度(10、40、80、160 ng/ml)的IGF-1作用于血管内皮细胞48 h后,通过MTT法检测细胞的生长情况;采用划痕实验观察IGF-1对受损内皮细胞增殖的影响,并用PI染色观察细胞的情况,ELISA法测定VEGF含量.结果 10 ng/ml、20 ng/ml、40 ng/ml、80 ng/ml的IGF-1对血管内皮细胞的增殖都有不同程度的促进作用,IGF-1浓度为40 ng/ml、80 ng/ml的实验组与未加入IGF-1的对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),160 ng/ml的IGF-1对细胞增殖作用下降,但差异无统计学意义(P>0.05).取40 ng/ml IGF-1作用于受损血管内皮细胞48 h后,细胞增殖速度较对照组明显加快,PI染色显示实验组死亡细胞明显减少,实验组培养液上清VEGF含量较对照组高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 IGF-1对受损血管内皮细胞的增殖有促进作用,同时可减少其细胞凋亡,促进受损内皮细胞的修复,其机制可能与IGF-1促进细胞分泌VEGF有关.     

QHF复方联合小剂量顺铂对小鼠H22肝癌血管生成的抑制作用

目的:探讨QHF复方联合小剂量化疗药物顺铂(DDP)对小鼠H22肝癌血管生成的影响,观察其抑瘤效果和不良反应.方法:48只BALB/c小鼠右腋皮下注射小鼠H22肝癌细胞建立荷瘤模型,随机分设为QHF复方组、小剂量DDP、联合用药组(QHF+DDP)及生理盐水组(NS).以抑瘤率为指标,观察各药物对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;以小鼠的一般状况及脾指数为指标,观察各药物对荷瘤小鼠的不良反应;光镜观察肿瘤组织形态;免疫组织化学方法检测各药物对小鼠肝癌组织中的微血管密度(MVD).结果:QHF组、DDP组和联合用药组的瘤质量均较NS对照组明显降低(0.63 g±0.16 g,0.45 g±0.23 g,0.33 g±0.15 g vs 1.22 g±0.22 g,均P<0.01),联合用药组较QHF组显著降低(P<0.01).抑瘤率分别为47.45%、63.11%和72.95%.QHF组、DDP组和联合用药组小鼠移植瘤组织内的MVD数量较NS对照组明显降低(11.00±1.56,10.33±1.49,6.87±0.97 vs19.93±1.02,均P<0.01);联合用药组与各单药组相比明显降低(均P<0.01).QHF与DDP联合应用组的不良反应较单用DDP组轻,生存质量较好.结论:QHF复方与小剂量DDP均具有抗肝癌血管生成的作用;QHF复方与小剂量DDP联合应用具有协同抗肝癌血管生成的作用,同时QHF复方具有提高生存质量和降低化疗药物不良反应的作用.     

肺癌与抗血管生成基因治疗

肺癌生长和转移依赖于血管生成,抑制肺癌组织血管生成,阻断其营养来源和迁移通道已成为近年来肺癌治疗的新策略,本就近年来国外有关抗血管生成基因治疗肺癌的研究进展作一综述。     

Vasostatin基因对胰腺癌细胞和血管内皮细胞增殖的影响

目的研究Vasostatin转基因对胰腺癌细胞、血管内皮细胞的作用，探讨其对胰腺癌生长抑制的作用机制。方法应用腺病毒载体将Vasostatin基因转入人胰腺癌细胞SW1990、人脐静脉血管内皮细胞ECV304，应用MTT方法检测转基因后细胞的生长活力。同时，应用小管形成实验研究Vasostatin对血管内皮细胞ECV304体外血管生成的影响。结果Vasostatin转基因对人胰腺癌SW1990细胞生长无显著影响。Vasostatin转基因（MOI分别为25和50）对人脐静脉血管内皮细胞ECV304作用72h后，Ad-Vasostatin组的ECV304细胞数目显著少于PBS组和Ad-lacZ组（P〈0．05）。小管形成实验结果显示，Ad-Vasostatin组内皮细胞数目较少，细胞排列连续性差，可见条索状的细胞链，但中空闭合的管状结构缺如。结论腺病毒介导的Vasostatin基因可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增殖，抑制其体外血管生成，而对人胰腺癌肿瘤细胞SW1990的体外细胞增殖无明显影响。     

肺癌与抗血管生成基因治疗

肺癌生长和转移依赖于血管生成,抑制肺癌组织血管生成,阻断其营养来源和迁移通道已成为近年来肺癌治疗的新策略,本文就近年来国外有关抗血管生成基因治疗肺癌的研究进展作一综述。     

干扰素诱导蛋白16对血管内皮细胞增殖的影响

目的观察干扰素诱导蛋白16(IFI16)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的血管内皮细胞(VEC)增殖的影响及可能机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,分为阴性对照组(对照组)、α干扰素(IFN-α)诱导组(IFN组)和IFI16小干扰RNA(siRNA)干扰组(siRNA组),各组均用bFGF(终浓度为100μg/L)刺激24h后IFN组加IFN-α、siRNA组转染IFI16基因的siRNA,分别干预6h,干预后24、48和72h,用MTT法测定细胞活力反映细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用半定量RT-PCR法和Western blot分别检测IFI16和p21 mRNA和蛋白表达,同时观察Ras蛋白的表达。结果 IFN-α可诱导VEC IFI16 mRNA和蛋白表达上调,降低VEC细胞活力和细胞周期G1/S转换[S期细胞(8.16±1.10)%比(13.84±0.92)%],伴p21 mRNA和蛋白表达上调及Ras蛋白表达下调。转染IFI16siRNA可抑制IFI16和p21表达,促进Ras蛋白表达,提高VEC细胞活力和促进细胞周期G1/S转换[S期细胞(17.03±0.52)%比(13.84±0.92)%]。结论 IFI16表达可抑制bFGF诱导的VEC的增殖,该效应可能与激活p21及抑制Ras的表达有关。     

Vasostatin基因对胰腺癌细胞和血管内皮细胞增殖的影响

目的研究Vasostatin转基因对胰腺癌细胞、血管内皮细胞的作用,探讨其对胰腺癌生长抑制的作用机制.方法应用腺病毒载体将Vasostatin基因转入人胰腺癌细胞SW1990、人脐静脉血管内皮细胞ECV304,应用MTT方法检测转基因后细胞的生长活力.同时,应用小管形成实验研究Vasostatin对血管内皮细胞ECV304体外血管生成的影响.结果 Vasostatin转基因对人胰腺癌SW1990细胞生长无显著影响.Vasostatin转基因(MOI分别为25和50)对人脐静脉血管内皮细胞ECV304作用72 h后,Ad-Vasostatin组的ECV304细胞数目显著少于PBS组和Ad-lacZ组(P < 0.05).小管形成实验结果显示,Ad-Vasostatin组内皮细胞数目较少,细胞排列连续性差,可见条索状的细胞链,但中空闭合的管状结构缺如.结论腺病毒介导的Vasostatin基因可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增殖,抑制其体外血管生成,而对人胰腺癌肿瘤细胞SW1990的体外细胞增殖无明显影响.     

Vasostatin基因对胰腺癌细胞和血管内皮细胞增殖的影响

目的研究Vasostatin转基因对胰腺癌细胞、血管内皮细胞的作用,探讨其对胰腺癌生长抑制的作用机制。方法应用腺病毒载体将Vasostatin基因转入人胰腺癌细胞SW1990、人脐静脉血管内皮细胞ECV304,应用MTT方法检测转基因后细胞的生长活力。同时,应用小管形成实验研究Vasostatin对血管内皮细胞ECV304体外血管生成的影响。结果Vasostatin转基因对人胰腺癌SW1990细胞生长无显著影响。Vasostatin转基因(MOI分别为25和50)对人脐静脉血管内皮细胞ECV304作用72h后,Ad-Vasostatin组的ECV304细胞数目显著少于PBS组和Ad-lacZ组(P<0.05)。小管形成实验结果显示,Ad-Vasostatin组内皮细胞数目较少,细胞排列连续性差,可见条索状的细胞链,但中空闭合的管状结构缺如。结论腺病毒介导的Vasostatin基因可显著抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的体外细胞增殖,抑制其体外血管生成,而对人胰腺癌肿瘤细胞SW1990的体外细胞增殖无明显影响。