维生素C对培养人胚成纤维细胞LDL受体活性的影响

研究了维生素Ｃ对培养的人胚皮肤成纤维细胞低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体活性的影响。从ＬＤＬ受体饱和分析和Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图以及单点分析表明，维生素Ｃ可增加细胞ＬＤＬ受体数量，但不影响受体对ＬＤＬ的亲和力。提示维生素Ｃ可通过增加ＬＤＬ受体数量而促进胆固醇的代谢，具有一定的抗动脉粥样硬化作用。     

扰动剪切流场对体外培养的血管内皮细胞LDL受体的影响

利用能更好体外模拟血液流动情况的带后向台阶的流动腔装置,对在扰动剪切流场作用下血管内皮细胞低密度脂蛋白(LDL)受体的表达进行了研究.结果显示,扰动流作用于内皮细胞后,细胞表面LDL受体表达较层流区域降低.提示扰动剪切流场会降低LDL受体的表达而降低对LDL的转运,引起LDL在内皮下沉积,从而易于诱发动脉粥样硬化.     

饱和及多不饱和脂肪酸对金黄地鼠肝LDL受体影响的研究

雄性金黄地鼠６０只随机分成４组：Ｃ１组（对照组），Ｃ２组（胆固醇组），Ｓ组（胆固醇加饱和脂肪酸组）及Ｐ组（胆固醇加多不饱和脂肪酸组）。选用玉米油为多不饱和脂肪酸和猪油为饱和脂肪酸的来源，５周后进行血脂测定和肝ＬＤＬ受体分析。结果表明：在等量胆固醇条件下，和Ｃ２组比较，多不饱和脂肪酸可显著降低血清甘油三酯，总胆固醇，低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇，而高密度脂蛋白胆固醇则升高，饱和脂肪酸使这     

氧化LDL和抗氧化剂对人脐静脉内皮细胞信号转导物DAG的影响

低密度脂蛋白（ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＤＬ）发生氧化修饰形成氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＯＸ－ＬＤＬ）是ＬＤＬ致动脉粥样硬化（ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，ＡＳ）的关键步骤。...     

前列腺素E2对LDL氧化修饰和巨噬细胞清道夫受体活性的影响

应用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ酶联免疫技术、免疫组化和油红Ｏ组织化学等方法观察了氧化ＬＤＬ对巨噬细胞清道夫受体活性的影响和前列腺素Ｅ＿２（ＰＧＥ＿２）等的保护作用。结果显示，氧化ＬＤＬ组的巨噬细胞含脂量、清道夫受体活性及免疫组化阳性颗粒三项指标均明显高于ＰＧＥ＿２和亚硒酸钠两用药组。表明ＰＧＥ＿２和亚硒酸钠均有明显抗氧化作用，而ＰＧＥ＿２作用还略优于抗氧化剂亚硒酸钠。     

高血脂对血细胞和血管内皮细胞的损伤

目的研究血清胆固醇 (cho)升高和氧化低密度脂蛋白 (OX -LDL)在血细胞和血管内皮细胞 (VEC)损伤中的作用。方法采用高胆固醇血症家兔模型研究血清cho对红细胞变形性 ,白细胞自发活化率及粘附分子 (CD11b/CD18)表达的影响。采用人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)研究OX -LDL对VEC粘附分子 (ICAM -1、VCAM -1)和MCP-1表达的影响。结果动物模型的结果指出随着血清cho升高 ,红细胞变形性降低 ,白细胞SAR和CD11b/CD18表达增加。由HUVEC获得如下结果 :(1)培养的HUVEC能少量表达ICAM -1和MCP -1及蛋白 ;(2)OX -LDL可显著增强ICAM -1、MCP -1及蛋白表达。对VCAM -1表达无影响 ;(3)OX -LDL有细胞毒性 ,引起VEC形态异常。结论血清cho升高引起红细胞变形性降低 ,白细胞SAR升高 ,活化的白细胞通过释放超氧阴离子自由基 (O·2-)和蛋白酶 ,损伤VEC ,从而破坏内皮的完整性。因此 ,血清cho升高是AS和心、脑血管病的重要危险因素之一。     

生长因子对成纤维细胞合成低密度脂蛋白受体的影响

用免疫印迹方法,以抗LDL受体的抗体为探针,直接检测细胞膜蛋白中的LDL受体蛋白,并对受体蛋白进行定量。用本方法分析了生长因子(PDGF)对培养的人成纤维细胞合成LDL受体的影响,结果表明,在PDGF作用4小时以后,细胞合成LDL受体始出现增加,8小时为对照细胞的2.2倍,至16小时增加至5倍。提示PDGF的作用机制是在基因转录水平。     

不同剪切力对内皮细胞表面凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的 研究不同剪切力对内皮细胞表面凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,将其种植于载玻片上,放入流室系统分别施加以不同的剪切力.按施加剪切力的不同分为实验组和对照组:实验组分为低剪切力组(4.2 dyne/cm2,n=5)、中等剪切力组(8.4 dyne/cm2,n=5)和高剪切力组(15.0 dyne/cm2,n=5);对照组(n=5)静态条件下培养,不施加剪切力.剪切力加载1、2、4、8 h后RT-PCR测定各组内皮细胞LOX-1 mRNA的表达.结果 低剪切力(4.2 dyne/cm2)作用下,内皮细胞LOX-1表达随时间延长而增加.与对照组比较,中等剪切力(8.4dyne/cm2)作用2、4、8 h内皮细胞LOX-1的表达水平均降低[2 h:0.2346±0.0397比0.2948±0.0128,4 h:0.1747±0.0585比0.2985±0.0204,8 h:0.0256±0.0067比0.2968±0.0175,均P＜0.05].高剪切力(15.0dyne/cm2)作用下,血管内皮细胞LOX-1表达一直维持在极低水平.结论 不同剪切力可以影响内皮细胞的LOX-1表达水平.     

胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:评价胰岛素对培养的牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法: 取新生的小牛胸主动脉,做血管内皮细胞原代及传代培养,取4-6代培养细胞分组,应用不同浓度的胰岛素(30 mU/L、300 mU/L、3 000 mU/L)干预培养过程,48 h后应用免疫组化法测定内皮细胞VEGF及其受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达水平。结果: 低浓度胰岛素组(30 mU/L、300 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显高于不用胰岛素组(P<0.01);高浓度组(3 000 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显低于不用胰岛素组(P＜0.05);各组内皮细胞VEGF受体(flt-1及flk-1/KDR)的表达无明显差异(P＞0.05)。结论: 低浓度胰岛素促进小牛主动脉血管内皮细胞VEGF表达;高浓度胰岛素可抑制血管内皮细胞VEGF表达;胰岛素对小牛主动脉血管内皮细胞VEGF受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达无直接影响。     

胆囊结石患者肝细胞LDL受体活性的变化

目的:研究肝细胞低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)活性改变与胆囊胆固醇结石发病机制的关系。方法:运用[¹²⁵I]-LDL结合法,对比检测了胆囊结石患者及无胆囊结石对照组各20例的肝细胞LDLR活性。结果:胆囊胆固醇结石患者肝LDLR的Bmax均较对照组高,以<50岁年龄组显著[(378 3±6.3)g g vs(286 6±8.3)g g,(389 2±9.5)g g vs(301±9.1)g g,P<0.05],①胆囊胆固醇结石患者伴有血LDL-C水平降低[(1.62±0.32)mmol L vs(2.00±0.31)mmol L,P<0.05]。结论:胆囊胆固醇结石患者肝LDLR活性增高,原因可能在于受体数目增加;②±肝LDLR活性升高在<50岁年龄胆囊胆固醇结石发病机制中可能具有一定作用。     

具有血管内皮细胞生长因子受体-2酪氨酸激酶抑制作用的链霉菌次生代谢产物2754R的研究

目的分离鉴定链霉菌I06A-02754发酵液中具血管内皮生长因子受体-2酪氨酸激酶(VEGFR2-CD)抑制活性的强极性次生代谢产物。方法采用大孔吸附树脂、阴离子交换树脂、MPLC、HPLC等分离手段对次生代谢产物进行分离纯化;通过UV、IR、HR-ESI质谱、1D-NMR和2D-NMR对其结构进行鉴定,以ELISA法检测其次生代谢产物对VEGFR2-CD的抑制活性;以MTT法检测化合物对肿瘤细胞的抑制活性。结果从发酵液的水溶性部分分离得到一个极性较大的胡桃霉素类次生代谢产物——2754R;其化学结构与胡桃霉素D一致,对VEGFR2-CD表现出一定的抑制活性;MTT实验显示化合物2754R对HepG2细胞、MCF-7细胞和BEL-7402细胞没有明显的抑制活性(IC50>10μmol/L)。结论化合物2754R是具有VEGFR2-CD活性的胡桃霉素类次生代谢产物。     

血管内皮生长因子受体-1促进肝癌细胞侵袭和转移的初步研究

目的 检测不同转移潜能的肝癌细胞中有无血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)及其配体(VEGF)的表达以探讨VEGFR-1在肝癌侵袭转移中的作用.方法 分别用RT-PCR、ELISA和/或Western blot法检测四种肝癌细胞株MHCC97-H、MHCC97-L、SMMC 7721和HepG 2有无VEGFR-1 mRNA和蛋白表达,用VEGFR-1的特异性配体VEGF-B处理MHCC97-H细胞以研究VEGFR-1活化对肝癌细胞迁移、侵袭和增殖等的影响.结果 MHCC97-H、MHCC97-L和SMMC 7721有VEGFR-1 mRNA和蛋白表达,但4种肝癌细胞都有VEGFR-1的配体VEGF-A和VEGF-B的表达;VEGFR-1活化能促进肝癌细胞MHCC97-H侵袭和迁移;VEGFR-1依赖的侵袭和迁移能被VEGFR-1的中和抗体18F1阻断,VEGFR-1活化不能促进细胞增殖和存活.结论 VEGFR-1及其配体的表达与肝癌细胞的侵袭转移有关,肝癌中的VEGF过表达可以自分泌的方式激活表达VEGFR-1的肝癌细胞,VEGFR-1及其配体可能是防治原发性肝癌侵袭转移的新靶点.     

性激素水平及主动脉雌激素受体的变化对鹌鹑动脉粥样硬化形成 …

本文探讨了高血脂，性激素及其受体与动脉粥样硬化病变之间的关系。结果表明，高血脂可影响性腺细胞３－β－羟基甾体脱氢酶含量及脂质贮存量，导致动物人性激素环境异常及动脉壁细胞雌激素受体水平改变。提示高脂血症作为ＡＳ的始动因子之一。不仅影响动脉壁细胞的脂质代谢，还可诱发机体性激素水平紊乱，从而影响动脉壁细胞雌激素受体的表达，使之生物学行为改变，促进ＡＳ的发生发展。     

氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）诱导血管平滑肌细胞增殖的机制

ox-LDL能诱导血管平滑肌细胞增殖 ,是致动脉粥样硬化的重要因素。近几年来 ,从细胞内信号、内含增殖活性成分、生长因子作用及氧化效应等方面深入探讨了其作用机制。ox LDL诱导血管平滑肌细胞增殖可能存在多种机制 ,目前还有许多问题有待研究     

免疫活化血小板对人脐静脉内皮细胞COX-2及PPAR-α表达与活性的影响及LDL的作用

目的:观察免疫活化血小板对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)环氧合酶2(COX-2)及过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPAR-α)表达及活性的影响,并探讨低密度脂蛋白(LDL)对其作用。方法:利用腺苷二磷酸(ADP)刺激血小板免疫活化,然后利用免疫活化血小板与HUVECs加或不加LDL共孵育,利用实时定量RT-PCR、Westernblotting分别检测HUVECsCOX-2及PPAR-αmRNA及其蛋白的表达,ELISA法检测PGE2浓度反映COX-2活性、核因子活性检测试剂盒检测PPAR-α活性。结果:血小板活化组COX-2及PPAR-αmRNA表达量较血小板对照组均有较明显升高(1.49±0.27vs0.68±0.21,1.45±0.21vs1.17±0.16,均P0.01);血小板活化组COX-2及PPAR-α蛋白表达量较血小板对照组亦有较明显升高(1.600±0.145vs0.700±0.073,1.630±0.143vs0.960±0.073,均P0.01),血小板活化组孵育液中PGE2浓度较血小板对照组明显升高[(42.46±5.57)ng/Lvs(23.73±2.53)ng/L,P0.01],但血小板活化组PPAR-α活性较血小板对照组无明显变化;LDL本身无明显增加HUVECsCOX-2及PPAR-α的表达及活性,但其能增加免疫活化血小板的这一作用。结论:免疫活化血小板显著促进HUVECsCOX-2表达及活性增加,亦能显著促进HUVECsPPAR-α表达,但并不改变PPAR-α活性;一般浓度的LDL并不对HUVECsCOX-2、PPAR-α的表达及活性产生影响,但能促进免疫活化血小板对内皮细胞的这一作用。     

氧化型低密度脂蛋白受体在动脉粥样硬化发病机制中的作用

<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)引起的冠心病、脑梗死和外周血管病等疾病,已成为全世界范围内人口死亡的首要原因[1],同时也是以脂质代谢紊乱、内皮不完整、单核-巨噬细胞增生及斑块形成为主要病理特征的慢性疾病[2]。在AS病变演化历程中,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox LDL)作为关键分子[3],与受体结合后,刺激单核-巨噬细胞摄取大量ox LDL,转变为泡沫细胞,产生大量炎性因子,启动一系列炎症反应,     

可溶性AGE受体对AGE诱导牛主动脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用

目的 :研究可溶性糖化终末产物 (AGE)受体 (sRAGE)对AGE诱导牛主动脉内皮细胞 (BAECs)NF κB激活的抑制作用。方法 :分别用AGE修饰白蛋白和羧甲基赖氨酸 (CML)修饰白蛋白培养BAECs ,凝胶迁移率改变实验检测加入sRAGE或RAGE反义寡核苷酸前后NF κB的DNA结合活性 ,并定量分析蛋白条带的密度积分。结果 :AGE修饰白蛋白和CML修饰白蛋白能通过结合BAECs表面RAGE诱导NF κB的激活 ,sRAGE和RAGE反义寡核苷酸均能有效的抑制AGE对NF κB的激活 ,sRAGE几乎能完全抑制AGE对NF κB的激活 ,而RAGE反义寡核苷酸抑制NF κB激活的作用是有限的。结论 :RAGE在AGE诱导BAECsNF κB的激活中起关键作用 ,sRAGE的应用可能为糖尿病并发症的防治提供一条新的途径     

胰岛素、高密度脂蛋白、植物血凝素对淋巴细胞低密度脂蛋白受体活性的影响

采用生物素—亲和素—酶联法测定低密度脂蛋白受体活性，研究了胰岛素、ＨＤＬ３、ＰＨＡ对淋巴细胞ＬＤＬ受体活性的影响，结果表明：胰岛素、ＨＤＬ３、ＰＨＡ能不同程度地影响淋巴细胞ＬＤＬ受体的活性。