一例急性早幼粒细胞白血病同时伴有ins(15;17),t(2;17;20)和三体8异常

目的 对1例伴有ins(15;17),t(2;17;20),+8复杂异常的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytie leukemia,APE)病例进行细胞和分子遗传学研究.方法 按常规制备染色体,以R显带技术进行核型分析,并先后作多色荧光原位杂交(multiplex fluoresence in situ hybridization,M-FISH)、染色体涂染和PML-RARa双色FISH检测.结果 R显带核型分析为47,XY,2q-,+8,17q+,20p+;M-FISH检测为:47,XY,t(2;17;20)(q24;q21;p13),+8;染色体涂染证实了2qZ4以下片段易位到17q21上和17q21以下片段易位到20p13上;双色FISH示17号染色体上RARa(retinoic acid receptora,RARe)基因部分片段插入到15号染色体形成PNL-RARa融合基因,即ins(15;17)(q22;q21.1q21.3).结论 FISH技术是明确隐匿/插入易位的可靠手段,凡形态学拟诊为APL而常规核型分析未发现t(15;17)者均应进行FISH检测.     

伴有22三体的t(5;17)变异易位急性早幼粒细胞白血病

目的 探讨一例核型为47,XY,t(5;17),+22的少见急性早幼粒细胞白血病(acute promyelo-cytic leukemia,APL)的临床和实验特征.方法 在常规核型分析的基础上,应用荧光原位杂交(fluorescencein situ hybridization,FISH)和多重荧光原位杂交(multiplex fluorescence in situ hybridization,M-FISH)技术进一步检测该病例的细胞遗传学异常,并结合文献分析此类少见变异易位的临床特点.结果 FISH检测PML-RARa阴性,但77%的细胞显示存在17号RARa基因的重排或复制;BCR-ABL阴性,但74%的细胞显示有22号染色体的复制或重排.M-FISH明确RARa基因重排系5号与17号染色体易位所致,并证实了22号三体的存在.结论 变异型t(5;17)易位,形成NPM-RARa融合基因的急性早幼粒细胞白血病是APL中少见的类型.骨髓形态表现为奥氏小体缺如,核型中常伴有其它附加染色体异常,全反式维甲酸(all-trans retinoicacid,ATRA)联合化疗有效,但易复发,合并弥漫性血管内凝血及高白细胞者预后凶险.     

建立实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARa融合基因转录本

目的 建立实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)法榆测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)PML/RARa融合基因转录本,评价其在APL患者诊断和微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-PCR法对长型(L-form)、短型(S-form)、变异型(V-form)不同类型PML/RARa阳性模板进行扩增,并检测6例APL患者PML/RARa融合基因转录本含量.结果 RQ-PCR法最低可检测到10个拷贝/μL的阳性模板,但重复性较差,而108～102拷贝/μL阳模的重复性良好,止常对照无扩增信号.6例初诊APL患者不同类型PML/RARa融合基因转录本绝对含量为4.27×103～3.36×105拷贝/50 ng(中位4.33×104拷贝/50 ng),ABL纠正后的相对含量为29.38%～600.53%(中位48.12%).1例患者诱导缓解后PML/RAHa融合基因转录本下降,复发时义明显升高.结论 RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者的诊断和MRD监测.     

伴t（2；14）（p16;q32）染色体易位的急性早幼粒细胞白血病一例北大核心CSCD

患者男,59岁,因“牙龈出血10余天”且症状逐渐加重,于2015年2月10日收入我院治疗。患者入院时有头晕不适。鼻衄,痔疮出血。查体：浅表淋巴结不大。肝脾未及,静脉注射处有陈旧瘀斑。     

FISH在免疫表型特殊的急性早幼粒细胞白血病诊断中的应用

为探讨荧光原位杂交(fluoresence in situ hybridization,FISH)技术在免疫表型特殊的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)诊断中的应用,作者用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测APL患者骨髓中单个核细胞的免疫表型,并用FISH检测患者是否存在PML/RARα融合基因.结果发现,少数APL患者免疫表型为CD13 ,CD33 ,CD34-和HLA-DR ,而利用FISH技术检测后,发现存在PML/RARα融合基因,与典型的APL患者HLA-DR-、PML/RARα融合基因( )的结果不同,提示临床上不能只将免疫表型作为诊断白血病的独立指标,而应该结合传统的FAB分型及新兴的分子诊断技术如FISH、PCR等来协助诊断.     

隐匿型t(15;17)易位伴inv(11)(p12q23)核型的急性早幼粒细胞白血病

为进一步探讨无ｔ（１５；１７）易位而伴有其它染色体改变的急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者分子生物学变化与预后的关系，应用短期细胞培养、胰酶消化、Ｇ显带技术进行骨髓细胞染色体检测及使用巢式ＲＴ／ＰＣＲ技术检测ＰＭＬ／ＲＡＲａ融合基因及ＨＲＸ基因。在被检测的３２例ＡＲＬ患者中，发现１例４６，ＸＸ，ｉｎｖ（１１）（ｐ１２ｑ２３），无ｔ（１５；１７）易位的ＡＰＬ患者。分子生物学见ＰＭＬ／ＲＡＲａ融合基因转录本，未见ＨＲＸ基因重排。该患者使用全反式维甲酸诱导治疗１０５天，无缓解征象，改用ＨＯＡＰ方案化疗也未显效。     

免疫荧光动态监测急性早幼粒细胞白血病患者PML-RARα融合蛋白变化

背景：实时定量RT-PCR只能间接地反映融合基因表达量的变化,并不能在细胞原位直观反映急性早幼粒细胞白血病患者细胞内PML-RARα融合蛋白在全反式维甲酸治疗前后的相对表达量。 目的：探讨免疫荧光技术检测融合蛋白PML-RARα表达的动态变化在判断急性早幼粒细胞白血病的全反式维甲酸早期治疗的效果。 方法：应用免疫荧光技术检测全反式维甲酸干预的急性早幼粒细胞白血病经典细胞株NB4细胞或来源于急性早幼粒细胞白血病患者的NB4细胞PML-RARα蛋白的表达,以实时定量RT-PCR检测细胞PML-RARα mRNA的表达作为对照,以评价免疫荧光技术的可靠性。 结果与结论：免疫荧光染色显示,无论是体外培养的NB4细胞,还是患者骨髓内的NB4细胞,在全反式维甲酸干预前细胞内均可见大量红色的融合蛋白PML-RARα,大小不均一、形状不规则,全反式维甲酸干预后,NB4细胞内红色的融合蛋白PML-RARα形状逐渐规则,弥散状态变为散在分布,且随着全反式维甲酸干预时间的延长,原有的弥散状态逐渐消失。实时定量RT-PCR测得的PML-RARα mRNA的变化趋势与免疫荧光相一致。说明免疫荧光技术检测PML-RARα能够更为直观地判断全反式维甲酸的治疗效果。 关键词：免疫荧光;实时定量RT-PCR;PML-RARα;急性早幼粒细胞白血病;NB4细胞;U937细胞 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.036     

48例急性早幼粒细胞白血病的细胞遗传学研究

目的　探讨不同病期急性早幼粒细胞白血病 (APL)的细胞遗传学特点及意义。方法　随机选取 4 8例APL患者 ,采集新鲜骨髓 ,采用 2 4h预加秋水仙素的短期培养法制备染色体 ,应用G显带技术进行核型分析并照相。结果　本研究4 8例患者 (未缓解期 16例 ,复发期 3例 ,完全缓解期 2 9例 )中 ,具有染色体异常的有 2 8例 ,其中未缓解期 16例 (16 /16 ) ,复发期 3例 (3/3) ,完全缓解期 9例 (9/2 9)。异常类型以染色体易位和片段缺失比例较高 ,其中具有典型t(15 ;17)易位者 7例 ,为未缓解期或复发期患者 ;易位涉及 8q2 2者 5例。其中 ,同时具有t(15 ;17) ,t(8;2 1)易位 1例 ;同时具有t(5 ;8) ,t(15 ;17)易位 1例 ;t(5 ;8)易位 1例 ;t(8;17)易位 1例 ;以t(8;2 1)为基础的复杂易位 1例。具有 17q2 1-者 6例。结论　对白血病进行细胞遗传学研究不但具有十分重要的诊断和预后价值 ,而且能发现与疾病发生有关的新基因及涉及白血病转化和增殖的分子损伤位点。     

合并t（8；16）（p11；p13）易位的急性髓系白血病一例CSCD

目的探讨1例合并t（8;16）（p11;p13）易位的罕见急性髓系白血病的临床及实验室特征。方法应用骨髓细胞学、白血病免疫分型、细胞遗传学、多重PCR、逆转录-PCR、二代测序等方法对患者进行综合检测。结果该例急性髓系白血病患者继发于胸腺癌化疗后,临床表现为乏力、皮肤瘀斑,同时伴弥散性血管内凝血;染色体分析发现t（8;16）（p11;p13）易位,逆转录-PCR和测序结果证实存在MYST3-CREBBP及CREBBP-MYST3两种融合基因,诱导化疗达完全缓解后短期内复发,总生存时间仅7个月。结论t（8;16）（p11;p13）易位可致MYST3基因发生重排,与CREBBP形成融合,患者具有独特的临床表现及实验室特点,常规化疗疗效差,生存期短。     

t(15;17)的变异型插入易位ins(17;15)(q21;q14q22)的细胞遗传学和分子遗传学研究

目的　报道 1例 t(15 ;17)的变异型插入易位 ins(17;15 ) (q2 1;q14 q2 2 )病例及其染色体涂染、逆转录 - PCR的研究结果。方法　骨髓细胞经直接法或 2 4 h培养和外周血单采白血病细胞培养 6天后制备染色体标本 ,以 R显带技术进行核型分析 ;以 15号和 17号整条染色体涂染探针进行染色体涂染 ;以逆转录 -PCR技术检测 PML - RARα和 RARα- PML融合基因的转录本。结果　该患者骨髓细胞和外周血白血病细胞染色体 R显带核型分析结果均提示 15 q-和 17q ;涂染研究证实 17号染色体长臂插入一段 15号染色体来源的染色体片段 ;逆转录 - PCR检出 PML- RARα融合基因短型转录本 ,未检出 RARα- PML 融合基因的转录本 ,符合 ins(17;15 )所致的遗传学改变。结论　染色体涂染和逆转录 - PCR技术是明确急性早幼粒细胞白血病患者涉及 15和 17号染色体插入易位的可靠手段。     

A possible specific chromosome marker for monocytic leukemia: three more patients with t(9;11)(p22;q24) and another with t(11;17)(q24;q21), each with acute monoblastic leukemia

An apparently balanced 9;11 reciprocal translocation with break points most likely at 9p22 and 11q24 was found in 3 patients with acute monocytic leukemia [M5 in the French-American-British (FAB) classification schema]. This translocation was not observed in 6 other patients with M5 acute nonlymphocytic leukemia (ANLL) or in chromosome studies on 143 patients with other types of ANLL. This study supports the previously published suggestion that such 9;11 translocations may be associated with some patients with M5 ANLL. In this report, we have also included a patient with M5 ANLL who had an 11;17 translocation with break points apparently at 11q24 and 17q21. Perhaps this is a variant translocation of chromosome No. 11, which may also be associated with monocytic leukemia.     

一例伴t(14;14)(q11;q32)易位的B细胞急性淋巴细胞白血病的临床和分子细胞遗传学研究

目的 报告1例伴t(14;14)(q11;q32)易位的罕见B细胞急性淋巴细胞白血病(B-lineage acute lymphoblastie leukemia,B-ALL)病例,阐明其临床和分子细胞遗传学特征.方法 分析1例伴t(14;14)(q11;q32)易位B-ALL患者的临床资料;将患者骨髓细胞24h培养后按常规方法制备染色体标本,采用R显带技术进行核型分析;分别应用IGH双色断裂点分离探针、CEBPE双色断裂点分离探针、4号全染色体涂染探针和ALL组合探针进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析.结果 常规细胞遗传学分析显示患者核型为47,XX,+4,t(14;14)(q11;q32)[20],FISH分析进一步证实了这种核型异常.IGH双色断裂点分离探针FISH分析表明t(14;14)(q11;q32)易位累及IGH基因,CEBPE双色断裂点分离探针FISH分析提示t(14;14)(q11;q32)易位中IGH的伙伴基因为CEBPE基因.结论 在B-ALL中t(14;4)(q11;q32)易位同时累及IGH和CEBPE基因为少见的再现性遗传学异常,该异常可定义B-ALL中一种新的亚型.伴有t(14;14)(q11;q32) IGH/CEBPE易位的B-ALL患者可能预后较好.     

联合间期和中期荧光原位杂交检测发现11q23异常伴D13S319缺失急性髓系白血病一例

目的对1例出现11q23异常伴D13S319缺失的罕见急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者进行多途径细胞遗传学分析,为诊断、治疗及预后分层提供依据。方法应用G+R显带技术对患者24 h培养后的中期分裂相进行染色体核型分析,联合分裂间期和中期荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对患者染色体的特定位点进行检测,明确复杂易位和微小缺失片段。结果患者存在混合系白血病基因(mixed lineage leukemia,MLL)重排,形成了MLL-AF10融合基因,并伴有13号染色体D13S319位点的缺失。结论MLL基因重排合并D13S319位点缺失在急性白血病中是否具有双重打击效应应引起临床的重视。在AML患者核型中发现13q-、del(13)(q14)、-13或der(13)任意一种克隆性异常时,应行FISH检测论证及明确缺失片段的大小,以便进行靶向治疗。     

Identification of t(17;22)(q22;q13) (COL1A1/PDGFB) in dermatofibrosarcoma protuberans by fluorescence in situ hybridization in paraffin-embedded tissue microarrays

Dermatofibrosarcoma protuberans is genetically characterized by the translocation t(17;22)(q22;q13) resulting in the PDGFB/COL1A1 fusion gene. Fluorescence in situ hybridization with specific probes enables a rapid detection of this gene. In this study, the presence of the translocation t(17;22)(q22;q13) by fluorescence in situ hybridization in paraffin-embedded tissue microarrays was analyzed. Two tissue microarrays including 40 cases of dermatofibrosarcoma protuberans and 20 dermatofibromas were evaluated. Fluorescence in situ hybridization analyses were performed using a dual-color dual-fusion noncommercial probe. Clinical and histopathologic features were examined, and the association with fluorescence in situ hybridization results was assessed. A total of 29 samples of dermatofibrosarcoma protuberans and 16 of dermatofibromas were successfully evaluated. Twenty-five (86%) dermatofibrosarcoma protuberans samples were positive for the translocation, which was absent in all samples of dermatofibromas. Two of the negative dermatofibrosarcoma protuberans showed unusual, hypercellular areas with marked cytologic atypia, whereas 1 case exhibited overlap features with dermatofibroma. Tumors with fibrosarcomatous areas seemed to have a higher percentage of positive cells and the number of copies of the COL1A1/PDFGB gene. In conclusion, the COL1A1/PDGFB fusion gene was present in most of the dermatofibrosarcoma protuberans tissue samples. The detection of the translocation may be an additional diagnostic tool in cases of dermatofibrosarcoma protuberans showing nonconclusive histologic features.