兔实验性心肌缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡的关系

目的　探讨实验性心肌缺血再灌注损伤时心肌细胞是否凋亡及凋亡率的大小。方法　阻断左冠状动脉的左室支建立家兔心肌缺血模型 ,达到预定的缺血时间后 ,使血管再通 ,建立心肌的缺血再灌注模型。采用透射电镜、原位末端探针标记 ,图像分析 ,对缺血再灌注损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果　电镜观察显示缺血再灌注损伤区呈现明显的心肌细胞凋亡征象 ,TUNEL检测结果显示缺血再灌注损伤区出现心肌凋亡阳性细胞 ,平均凋亡率为 2 1 10 %。结论　心肌缺血再灌注损伤的发生与凋亡机制有关 ,并可能是其发生的重要原因。     

中药通过调控线粒体自噬保护心肌缺血再灌注损伤的研究进展

缺血性心脏病严重危害人类健康,临床血运重建的治疗手段会引起心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI),进一步诱发心肌功能障碍,因此如何预防和减少再灌注损伤是临床上亟待解决的问题.近年来研究表明,线粒体自噬在缺血性心脏疾病中起着重要作用,调控心肌细胞线粒体自噬可能为缺血性心脏病的防治提供新的方向.中医药具有多靶点、多途径的治疗优势,近年来在心血管疾病的防治方面发挥重要作用,越来越多研究证实中药提取物或复方可通过调控线粒体自噬来保护损伤心肌.本文对可影响线粒体自噬的中药及复方进行归纳总结,以期为心肌缺血再灌注损伤的临床治疗提供新的研究方向.     

兔心肌缺血再灌注损伤的超微结构变化及凋亡检测

目的　探讨实验性心肌缺血再灌注损伤时心肌超微结构变化及心肌细胞凋亡的发生。方法　选家兔 6只 ,阻断左冠状动脉的左室支建立心肌缺血模型 ,达到预定的缺血时间后 ,使血管再通 ,建立心肌的缺血再灌注模型。采用透射电镜、原位末端探针标记 (TUNEL)对不同损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果　电镜观察显示缺血再灌注损伤中心区呈现明显的心肌细胞凋亡征象 ,在缺血再灌注损伤交界区可见心肌细胞凋亡的早期征象 ,TUNEL检测结果显示缺血再灌注损伤中心区出现较多的凋亡阳性细胞 ,而损伤交界区出现较少的凋亡阳性细胞。结论　心肌细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤的重要特征 ,这与心肌的缺血性损伤存在不同     

异丙酚对心肌缺血再灌注损伤的保护

在特定的时间范围内，局部心肌缺血后恢复正常灌注，缺血区的组织损伤反而比单纯缺血时更严重，这种损伤被称为心肌缺血再灌注损伤。随着体外循环下心脏手术、器官移植手术、溶栓治疗等的开展，缺血再灌注损伤这一临床常见的病理生理变化正逐渐受到人们的重视。缺血再灌注损伤是在缺血的基础上恢复血流后导致的细胞损害和组织器官的损伤加重的现象。迄今为止，对心肌缺血再灌注损伤的确切机制尚未完全阐明。     

益母草治疗心肌缺血或再灌注损伤及其机制研究

目的 :观察益母草对心肌缺血或再灌注损伤的疗效并探讨其机制。方法 :30只新西兰白兔等分为正常组、缺血再灌注对照组、益母草治疗组。治疗组兔、5 2例冠心病及 30例无症状性心肌缺血患者 ,用益母草注射液静滴治疗。 5 4例心肌缺血患者用益母草片治疗。结果 :治疗组兔缺血及再灌注的心功能 ,心肌酶释出明显改善 ;血浆及心肌组织的丙二醛含量降低 ,血浆及心肌组织SOD、全血GSH Px、心肌组织ATP酶活性高于对照组 ,心肌组织Ca2 +含量低于对照组。心肌缺血患者用益母草治疗后 ,症状、体征、心电图、血脂、微循环及血液流变性明显改善。结论 :益母草对心肌缺血及再灌注损伤有明显疗效。其机制与减少氧自由基及细胞内钙超载对心肌细胞损伤、改善缺血区心肌微循环及血液流变性有关。     

LncRNA MALAT1在衰老大鼠心肌缺血后处理自噬水平降低中的作用

背景:缺血后处理可缓解心肌缺血再灌注损伤,但是其具体机制尚不清楚。目的:探讨lncRNA MALAT1在缺血后处理所引起衰老心肌自噬水平降低中的作用。方法:(1)27只22-24月龄SD大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,每组9只,采用苏木精-伊红染色和Masson染色观察心肌组织形态学变化;(2)体外使用8 mg/mL D-半乳糖诱导大鼠心肌(H9C2)细胞9 d后,分为正常氧组、缺氧复氧组和缺氧后处理组。Western blot检测衰老心肌组织及衰老心肌细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的表达;采用qRT-PCR检测衰老心肌组织和衰老心肌细胞中MALAT1相对表达;转染自噬双标腺病毒(RFP-GFP-LC3)观察衰老心肌细胞自噬流的变化;衰老心肌细胞转染MALAT1干扰片段和过表达质粒,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的表达。结果与结论:(1)与缺血再灌注组比较,缺血后处理组心肌组织结构基本清晰,细胞核完整,心肌组织间蓝色胶原纤维沉积减少;(2)与缺血再灌注组比较,缺血后处理组LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低且p62表达增高(P <0.05)...     

不同时段的心肌缺血后再灌注损伤与心肌细胞凋亡的实验研究

目的　探讨实验性不同时段的心肌缺血后再灌注损伤是否致心肌细胞凋亡、凋亡率的大小及不同的缺血时间与凋亡率的关系。方法　阻断左冠状动脉的左室支建立心肌缺血模型 ,达到预定的缺血时间后 ,使血管再通 ,建立心肌的缺血再灌注模型。采用透射电镜、原位末端探针标记、图像分析和统计处理对缺血灌注损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果　电镜观察和原位未端标记 (TUNEL)检测发现在经历了不同的缺血时间后 ,再灌注均可致心肌细胞凋亡 ,但不同的缺血时间后再灌注致心肌细胞的凋亡率不同 ,实验Ⅰ～Ⅲ组平均凋亡率分别为 3 2 7%、18 4 3%和 2 0 2 8%。缺血时间越长凋亡率越高。结论　心肌缺血再灌注损伤的发生与凋亡机制有关 ,且凋亡率的大小在一定的时间段内可能与心肌的缺血时间呈正相关     

细胞自噬水平在大鼠缺血/再灌注肺组织内变化及其作用

目的 探讨大鼠肺缺血再灌注后肺组织内自噬水平的变化和自噬在肺缺血再灌注损伤中的作用.方法 大鼠分为假手术组和缺血1 h再灌注0、2、6 和24 h组,免疫印迹法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ的表达,电子显微镜观察细胞内自噬体.自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和安慰剂分别预处理假手术组和缺血再灌注2 h组大鼠,HE染色和血气分析检测肺组织损伤程度.结果 LC3-Ⅱ/Actin比值在缺血1h时即有升高,再灌注2～6h达高峰(P＜0.01),再灌注24 h恢复至接近假手术组水平.主要在Ⅰ型肺泡上皮细胞和血管内皮细胞内观察到自噬体.3-MA预处理降低肺组织损伤评分,升高血氧分压,减轻肺缺血再灌注损伤(P＜0.05).结果证实,肺缺血及再灌注诱发肺组织呼吸膜细胞自噬激活,3-MA预处理通过抑制自噬改善肺缺血再灌注损伤.结论 细胞自噬可能是肺缺血再灌注病理生理过程中加重损伤的因素.     

饱和氢盐水对大鼠心肌缺血再灌注损伤致炎性细胞因子的影响

急性心肌梗死目前主要还是集中在溶栓、介入治疗和冠状动脉旁路移植术方面,但这些治疗面临心肌缺血后再灌注引起的损伤.炎性反应在心肌梗死及缺血再灌注损伤可引起血管内皮损伤、心肌微循环障碍、组织再灌注不良及白细胞浸润心肌等,最终会导致心肌细胞凋亡,心功能损伤.近期研究发现氢气通过抗感染、抗氧化损伤、减轻凋亡等机制对心血管疾病具有治疗作用[1],并可以减轻心肌缺血再灌注诱发的心肌功能障碍及细胞凋亡.本实验探讨炎性因子在饱和氢盐水治疗大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.     

离体灌流大鼠心脏的pH反常

心肌缺血-再灌注损伤的发病机理迄今尚未完全阐明,近年发现再灌注时迅速纠正缺血组织的酸中毒是促进心肌损伤加重的重要因素之一,称为pH反常,因而缺血组织能量代谢障碍与再灌注损伤之间     

非心脏缺血性预处理的心肌保护作用

非心脏缺血性预处理对缺血 /再灌注心肌有保护作用。非心脏缺血性预处理包括非缺血性心脏预处理、远程缺血预处理和药物模拟性预处理。缺血预处理的心肌保护效应有减轻心肌组织损伤 ,增强心脏收缩功能。对非心脏缺血性预处理的深入研究 ,不仅有助于阐明心肌缺血 /再灌注损伤机制 ,而且具有潜在的临床应用价值     

大鼠心肌缺血/再灌注损伤基因表达谱特征的初步观察

目的:观察心肌缺血/再灌注损伤前后基因差异表达,探讨缺血/再灌注后心肌细胞损伤的分子生物学机制。方法:提取大鼠缺血/再灌注前后心肌组织mRNA并纯化,用Affymetrix RAT 230A基因表达谱芯片,对表达差异基因进行检测。结果:按差异显著阳性标准,从14000个基因中筛选出缺血/再灌注后差异表达基因179条,其中123条表达上调,56条表达下调,包括原癌基因、细胞周期、信号转导、细胞外基质、细胞骨架蛋白、转录因子、DNA损伤修复基因、凋亡相关蛋白及核糖体蛋白等相关编码基因。结论:用cDNA表达谱芯片分析心肌缺血/再灌注后基因表达,能快速筛选出再灌注损伤相关基因,为临床上更有效地预防缺血/再灌注损伤提供根据。     

缺血/再灌注损伤时心肌内源性11, 12-环氧二十碳三烯酸的变化

目的: 测定大鼠心肌缺血/再灌注前后心肌组织中11, 12-环氧二十碳三烯酸(11, 12-EET)含量的变化情况。方法: 实验分为2组: 缺血/再灌注组和假手术组, 测定各组心功能的同时采用气相色谱法测定各组心肌组织中11, 12-EET的含量。结果: 心肌组织中11, 12-EET在缺血/再灌注损伤后明显增加(P<0.01)。结论: 内源性11, 12-EET含量的增加可能是缺血/再灌注损伤的机制之一。     

心肌缺血再灌注损伤的机制和治疗

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)常见的机制有Ca2+超载、氧化应激、凋亡与自噬等,一些微小RNA及TLRs等也参与其中,这些机制相互联系,相互作用。MIRI的防治措施也不再是单一的药物治疗,缺血预处理和针对一些小分子的新药及基因治疗等新手段也逐渐开始从基础走向临床。     

线粒体自噬与心血管疾病

线粒体自噬是一种细胞内针对功能异常线粒体的选择性降解机制,在细胞的线粒体质量控制中发挥重要作用.近年来,越来越多的研究发现线粒体自噬参与心血管疾病的发生、发展,如高血压、动脉粥样硬化、心肌缺血/再灌注损伤和心力衰竭等.因此,本文就线粒体自噬的定义、线粒体自噬的两大类活化启动机制(包括泛素依赖型和受体依赖型两大途径及其分...     

自噬与p62/SQSTM1在肝缺血再灌注中的作用

自噬是溶酶体依赖性的降解系统,p62作为重要的蛋白载体,可促进受损蛋白经蛋白酶体和自噬体清除。p62在线粒体自噬等选择性自噬中发挥重要作用。p62与Keap1结合并通过自噬清除Keap1,这导致游离的Nrf2水平增加,而Nrf2又可促进p62表达。因此自噬、p62、Nrf2三者间存在密切的联系,相互调控。同时,Nrf2还可促进谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和硫氧还蛋白(Thioredoxin,TXN)等多种分子的表达,而在肝缺血再灌注损伤过程中,肝细胞内这些分子可能参与细胞死亡的过程。因此,自噬与p62在肝缺血再灌注中的具体机制仍需进一步研究明确。     

缺血预处理对肌肉组织保护作用的研究进展

在各种组织中,心肌和骨骼肌对缺血的耐受性相对较差,短暂的心肌缺血即可造成心肌梗死,骨骼肌缺血超过3小时亦将发生严重的缺血再灌注损伤,有时损伤是不可逆的。缺血再灌注(ischemia induced reperfusion,I/R)损伤是引起肌肉组织缺血坏死的一个重要原因,此外,在I/R过程中,细胞能量耗竭,微循环紊乱等也是导致组织变性坏死的     

氟伐他汀对缺血再灌注损伤兔心肌细胞间粘附分子的影响

目的:探讨氟伐他汀短期预处理对缺血再灌注损伤兔心肌的保护作用及其机制。方法:日本大耳白兔21只随机分为3组:①假手术对照组(Sham组),②缺血再灌注组(IR组),③氟伐他汀干预组(F组)。实验中持续监测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LWEDP)、左室内收缩压最大上升速率和下降速率(±dp/dtmax)的变化,再灌注结束后用伊文氏蓝和TTC染色法确定缺血和梗死心肌范围,用RT-PCR进行心肌局部ICAM-1 mRNA表达测定。结果:缺血再灌注后,F组上述心功能各项指标较IR组明显改善,心肌组织ICAM-1 mRNA水平较IR组显著降低;心肌梗死面积较IR组明显减小。结论:氟伐他汀短期预处理可降低心肌缺血再灌注后心肌ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能,对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

非编码RNA调节心肌缺血再灌注损伤中自噬的作用及机制

背景:越来越多的研究表明自噬在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用,适度的自噬有助于维持心脏的正常和代谢功能.非编码RNAs包括长链非编码RNA(lncRNAs)、环状RNA(circRNAs)和微小RNA(miRNAs),能够通过调控自噬参与维持心肌缺血再灌注损伤进程,从而维持心肌细胞稳态和保护心肌细胞.目的:对非编码R...     

DJ-1拮抗ROS介导Beclin-1上调在缺氧复氧HL-1心肌细胞中的作用

 目的 探讨DJ-1拮抗氧化应激诱导过度自噬在缺血再灌注心肌损伤中的保护机制。方法 以慢病毒为shRNA DJ-1载体感染心肌HL-1细胞系构建缺氧复氧损伤模型。Western blot检测shRNA DJ-1沉默效率和LC3、Beclin-1和DJ-1蛋白表达,流式细胞术AnnexinⅤ和PI染色分别检测凋亡和坏死,MDC和DCFH-DA染色分别检测细胞内自噬体和氧自由基（ROS）水平,激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬体数量变化。结果 1）慢病毒为shRNA DJ-1载体感染心肌HL-1细胞后DJ-1表达水平下调;2）缺氧复氧显著上调ROS,而shDJ-1加剧缺氧复氧ROS水平上调,NAC可以有效下调细胞内ROS水平;3）Western blot检测LC3、Beclin-1自噬标志蛋白和MDC染色细胞内自噬体结果均认为缺氧复氧促进自噬,而shDJ-1加剧缺氧复氧导致的自噬上调,NAC抑制自噬上调;4）流式细胞术检测显示shDJ-1增加缺氧复氧凋亡,NAC可以减少心肌细胞凋亡。 结论 DJ-1拮抗ROS介导beclin-1上调参与保护缺血再灌注心肌。