有氧运动对大鼠大脑皮质和海马组织Wnt/β-Catenin信号通路的影响

目的:探讨有氧运动对大鼠大脑皮质和海马组织Wnt/β-Catenin信号通路的影响,为揭示有氧运动改善神经系统功能提供一定的理论基础。方法:雄性6周龄SD大鼠(n=40)随机分为安静对照组(CG组,n=20)和运动组(EG组,n=20)。EG组大鼠进行为期8周的跑台训练。最后一次训练结束后48小时,分离所有大鼠大脑皮质和海马组织。通过荧光定量PCR和Western blot检测各组大鼠大脑皮质和海马组织中Wnt、β-Catenin、LRP5、LRP6、Axin1、CK1以及GSK3βmRNA和蛋白含量及其磷酸化水平。结果:经过8周跑台训练后,EG组大鼠大脑皮质和海马组织Wnt1和Wnt3两种亚型mRNA和蛋白含量均显著高于CG组;β-Catenin mRNA水平虽未发生显著变化,但其蛋白含量却显著高于CG组,同时其Ser33/Ser37和Thr41/Ser45位点的磷酸化水平显著低于CG组。EG组LRP5和LRP6 mRNA和蛋白含量均显著高于CG组;而Axin1和CK1 mRNA和蛋白含量均显著低于CG组。EG组GSK3βmRNA和蛋白含量并未发生显著改变,但其Ser9位点的磷酸化水平显著高于CG组。结论:有氧运动能够提高大鼠大脑皮质和海马组织中Wnt和Wnt受体蛋白LRP5及LRP6的含量;降低Axin1和CK1的含量;抑制GSK3β的活性;从而降低了β-Catenin的磷酸化水平,提高其稳定性。因此,有氧运动能够增强大鼠大脑皮质和海马组织Wnt/β-Catenin通路信号活性,激活下游基因的转录。     

有氧运动对APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织线粒体氧化磷酸化功能的影响

目的:探讨有氧运动对APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织线粒体氧化磷酸化功能的影响,为有氧运动防治阿尔茨海默症提供理论依据。方法:雄性APP/PS1小鼠随机分为安静对照组(T-CG组)和运动组(T-EG组),野生型C57BL/6J小鼠也随机分为安静对照组(W-CG组)和运动组(W-EG组),T-EG和W-EG组小鼠进行为期8周的跑台训练。在第9周进行Morris水迷宫实验检测所有小鼠的认知能力。水迷宫实验结束后,分离所有小鼠大脑皮质和海马组织。通过试剂盒检测大脑皮质和海马组织ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅰ～Ⅴ相对酶活性和线粒体膜电位情况;通过Western blot检测线粒体Cox5a、Cox2、Nd1和Sdhc的蛋白水平。结果:与W-CG组相比,T-CG组小鼠大脑皮质和海马组织ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅰ～Ⅴ相对酶活性、线粒体膜电位以及Cox5a、Cox2、Nd1和Sdhc的蛋白水平均显著下降;Morris水迷宫实验逃逸时间和逃逸距离显著增加。而经过8周跑台训练后,与T-CG组相比,T-EG组小鼠大脑皮质和海马组织ATP含量显著上升;大脑皮质线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的相...     

有氧运动通过激活APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路抑制神经细胞凋亡

目的:探讨有氧运动对APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织神经细胞凋亡的影响,以及是否通过PI3K/Akt信号通路发挥作用,为阐明有氧运动防治阿尔茨海默症提供一定的理论依据。方法:40只雄性APP/PS1小鼠随机分为安静组(T-SE,n=10)、运动组(T-EX,n=10)、GNE-317处理安静组(T-SEG,n=10)和GNE-317处理运动组(T-EXG,n=10)。T-EX和T-EXG组小鼠进行为期8周的跑台训练,T-SEG和TEXG组小鼠给予GNE-317处理8周。最后一次训练结束后48小时,分离所有小鼠大脑皮质和海马组织。通过TUNEL染色观察各组小鼠大脑皮质和海马组织细胞凋亡情况;通过Western blot检测各组小鼠大脑皮质和海马组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关促凋亡蛋白(Bad)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切形式含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-7、Caspase-9、线粒体细胞色素C(Cytochrome C)蛋白含量及磷酸化水平。结果:(1)8周跑台训练后,T-EX组大脑皮质和海马组织中PI3K p110和p85亚基的蛋白含量及Akt Thr308和Ser473位点的磷酸化水平均高于T-SE组(P<0.01);T-EX组TUNEL染色阳性细胞数量低于T-SE组(P<0.05);T-EX组抗凋亡因子Bcl-2的含量高于T-SE组(P<0.05),而促凋亡因子Bad、Bax、Cytochrome C、Caspase-9、Caspase-7和Cleaved Caspase-3的含量均低于T-SE组(P<0.05)。(2)经GNE-317处理后,TSEG和T-EXG组Akt Thr308和Ser473位点的磷酸化水平分别低于T-SE和T-EX组(P<0.05);T-SEG和T-EXG组TUNEL染色阳性细胞数量分别高于T-SE和T-EX组(P<0.05);T-SEG和T-EXG组抗凋亡因子Bcl-2的含量分别低于T-SE和T-EX组(P<0.05),而促凋亡因子Bad、Bax、Cytochrome C、Caspase-9、Caspase-7和Cleaved Caspase-3的含量分别高于T-SE和T-EX组(P<0.05)。结论:有氧运动通过激活APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织中PI3K/Akt信号通路活性,提高了抗凋亡因子Bcl-2的含量,同时降低促凋亡因子Bad、Bax、Cytochrome C、Caspase-9、Caspase-7和Cleaved Caspase-3的含量,从而有效抑制神经细胞凋亡。     

有氧运动对APP/PS1小鼠脑血流量的影响及其机制

目的：探讨有氧运动对APP/PS1小鼠大脑皮质和海马组织血流量的影响及其相关机制,为阐明有氧运动预防和延缓阿尔茨海默症提供理论依据。方法：雄性APP/PS1小鼠随机分为安静对照组（TCG组,n=10）和运动组（T-EG组,n=10）;野生型C57BL/6J小鼠也随机分为安静对照组（W-CG组,n=10）和运动组（W-EG组,n=10）。T-EG和W-EG组小鼠进行为期8周的跑台训练。在第9周进行Morris水迷宫实验,检测小鼠的认知能力。然后利用磁共振成像系统检测各组小鼠皮质区和海马区血流量。分离大脑皮质和海马组织后,通过试剂盒检测各组小鼠大脑皮质和海马组织活性氧的水平。通过Western blot方法检测各组小鼠大脑皮质和海马组织中内皮素1、Aβ42的水平。结果：Morris水迷宫实验发现各组小鼠的潜伏期均逐日递减。与W-CG组相比,W-EG组潜伏期在第2天开始出现减少（P<0.05）;与W-CG组相比,T-CG组潜伏期在第1天开始出现增加（P<0.05）;与T-CG组相比,T-EG组潜伏期在第3天开始出现减少（P<0.01）;与W-EG组相比,T-EG组潜伏期在第...     

不同时间一次有氧运动对小鼠骨骼肌Nrf2与Keap1结合作用的影响

目的:探讨不同时间一次有氧运动对小鼠骨骼肌NF-E2相关因子(NF-E2-related factor 2,Nrf2)与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein-1,Keapl)结合作用的影响。方法:C57BL/6J小鼠30只,按体重随机分为安静对照组(0 h组)和一次有氧运动3小时组(3 h组)、一次有氧运动6小时组(6 h组),每组10只。0 h组安静饲养,3 h组和6 h组小鼠分别进行3小时和6小时的一次有氧跑台训练,跑速为15 m/min,坡度为0。运动后即刻取后腿骨骼肌。高质荧光测定法检测小鼠骨骼肌活性氧(ROS)水平;免疫共沉淀法测Nrf2/Keap1结合量;Western Blot法测定骨骼肌总Nrf2、Keap1蛋白表达量和细胞核Nrf2蛋白表达量。结果:与0 h组相比,6 h组ROS水平显著高于0 h组(P<0.05);3h、6 h组小鼠骨骼肌中Nrf2/Keap1结合量显著降低(P<0.05);3 h、6 h组小鼠骨骼肌总Nrf2蛋白表达显著升高(P<0.05),6 h组小鼠骨骼肌细胞核Nrf2蛋白表达显著增加且与3h组相比也显著增加(P<0.05);小鼠骨骼肌总Keap1蛋白表达基本无变化。结论:一次有氧运动对小鼠骨骼肌Nrf2与Keap1解绑和Nrf2转位入核的影响与运动时间的长短有关。     

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织内Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路的影响

【摘要】 目的 探讨皮肤再生医疗技术 (MEBT/ MEBO) 对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系 2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/ 醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。 方法 选取90只SPF级 Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO 组和贝复新组,每组18只。 其中空白组大鼠只做备皮处理, 对照组大鼠建立急性创面模型, 模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理, MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理, 对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/ 创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白与 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平。结果 干预第 3 天, 各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05); 干预第 7、14 天, 各组大鼠创面愈合率尤以 MEBO 组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05)。 HE 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天,对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少, 成纤维细胞与毛细血管逐渐增多,而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显; Masson 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天, 对照组?MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整, 而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多, 但排列仍较紊乱。 干预第 7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 MDA 表达水平均明显低于模型组 (P均＜0.05); 干预第 3、7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 SOD 表达水平均明显高于模型组 (P均＜0.05)。 干预第 3、7 天, MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白以及 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组 (P均＜0.05), 且干预第 7天, MEBO 组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1 蛋白以及 HO-1 mRNA 表达水平均明显低于贝复新组 (P均＜0.05)。结论 MEBT/ MEBO 可能能够通过激活 Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤, 促进创面再生修复。     

有氧运动对阿尔兹海默症小鼠Notch信号通路甲基化的影响

目的：观察有氧运动后阿尔茨海默病（AD）小鼠大脑Notch信号通路相关因子表达及甲基化水平的变化,探究有氧运动如何影响AD小鼠Notch信号通路。方法：将3月龄APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为两组：对照组（ADC组）,运动组（ADE组）,每组20只。对照组不进行运动,运动组进行每周5天、每天30min、持续5个月的跑台运动干预。干预5个月后取小鼠脑组织,采用Real-time PCR、免疫荧光及Western Blot技术分别检测海马组织Notch1、Hes1及神经元素2(Neurogenin2,Ngn2)蛋白和mRNA的表达,采用甲基化特异性PCR检测海马组织Notch1、Hes1、Ngn2的甲基化水平。结果：与ADC组相比,ADE组小鼠大脑海马组织Notch1、Hes1蛋白和mRNA表达显著降低（P<0.01）,海马DG区Notch1阳性细胞数量、Hes1阳性细胞数量显著降低（P<0.01）,Hes1免疫阳性产物荧光强度显著降低（P<0.05）;而ADE组小鼠海马Ngn2蛋白和mRNA表达显著升高（P<0.05）,海马DG区Ngn2阳性细胞数量显著升高...     

抗阻运动对大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨抗阻运动对大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路及下游底物的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为安静对照组(SG组)和抗阻运动组(RG组)。抗阻运动组大鼠进行为期8周的爬梯训练。最后一次训练结束后48小时,分离大脑皮质和海马组织。通过荧光定量PCR和Western blot检测各组大鼠大脑皮质和海马组织中PI3K、Akt、GSK3β以及tau蛋白mRNA和蛋白含量及其磷酸化水平。结果:经过8周抗阻运动,抗阻运动组大鼠大脑皮质和海马组织PI3K p110和p85亚基mRNA和蛋白含量显著高于安静对照组;Akt和GSK3βmRNA和总蛋白含量与安静对照组并无显著性差异,但Akt Thr308和Ser473以及GSK3βSer9位点的磷酸化水平显著高于安静对照组,GSK3βTyr216位点的磷酸化水平显著低于安静对照组;tau蛋白mRNA和总蛋白水平与安静对照组也无显著性差异,而其Ser202、Thr231和Ser396位点的磷酸化水平却显著低于安静对照组。结论:抗阻运动能够提高大鼠大脑皮质和海马组织PI3K mRNA和蛋白含量,增强其磷脂酰肌醇激酶活性;提高Akt Thr308和Ser473位点的磷酸化水平,激活Akt;活化的Akt磷酸化GSK3βSer9位点,抑制GSK3β的活性;最终导致tau蛋白多个位点的磷酸化水平降低。因此,抗阻运动能够提高大鼠大脑皮质和海马组织PI3K/Akt信号通路活性,并对下游底物产生积极影响。     

地骨皮乙素对低温爆震肺氧化应激损伤影响研究

目的 探讨地骨皮乙素对低温爆震肺氧化应激损伤的影响及机制。方法 将24只雄性C57/BL小鼠随机分入对照组、模型组、地骨皮乙素组,每组各8只。地骨皮乙素组灌胃给予地骨皮乙素4.0 g/kg,每天1次,连续4周;对照组和模型组分别灌胃给予等体积生理盐水。将模型组和地骨皮乙素组小鼠进行低温爆震处理。湿干重检测肺组织含水率;酶联免疫吸附试验检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);反转录酶-聚合酶链锁反应和Western-blot检测肺组织Nrf2、Keap1、ARE mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠肺组织含水量升高(P<0.05);与模型组比较,地骨皮乙素组小鼠肺组织含水量降低(P<0.05)。模型组小鼠SOD1、SOD2、MDA水平均高于对照组(P<0.05),地骨皮乙素组小鼠SOD1、SOD2、MDA水平均低于模型组(P<0.05)。模型组小鼠Nrf2、Keap1、ARE mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05),地骨皮乙素组小鼠Nrf2、Keap1、ARE mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05)。与对照组...     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠压力负荷性心力衰竭保护作用研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠压力负荷性心力衰竭的保护作用。方法将30只普通级8周龄雄性SD大鼠分入对照组、模型组和NAC给药组。所有大鼠术后干预3周,饲养至第7周后,测量每组剩余大鼠心脏质量,并计算心脏质量指数(HWI),通过实时聚合酶链反应和Western blot技术检测黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、肌醇依赖酶1α(IRE1α)、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)和氧化应激Nrf2/Keap1通路关键基因及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏质量、HWI显著增加,氧化应激指标MDA5与IRE1αmRNA及蛋白表达均明显升高,SOD-1 mRNA及蛋白表达显著降低,氧化应激通路Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白表达均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,给药组大鼠心脏质量、HWI显著降低,MDA5与IRE1αmRNA及蛋白水平明显降低,而SOD-1 mRNA及蛋白水平明显升高,Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白平均明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NAC对大鼠压力负荷性心力衰竭有保护作用,其作用机制可能通过调控氧化应激Nrf2/Keap1通路有关。     

卵巢切除对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响

目的研究雌激素对APP/PS1双转基因小鼠脑内老年斑及自噬的影响,探讨雌激素缺乏导致阿尔茨海默病(AD)的病理机制。方法将3月龄雌性APP/PS1双转基因AD模型小鼠分为卵巢切除组与假手术组,术后2个月采用免疫组化染色及透射电镜观察两组小鼠脑内老年斑及自噬功能的变化,同时检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达情况。结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠脑内老年斑显著增加,分布更广,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1阳性神经元数量均显著下降。电镜观察可见,与假手术组相比,卵巢切除组小鼠海马神经元及突起肿胀明显,暗神经元增加,神经元突起周围自噬小泡显著增多。结论雌激素缺乏可导致自噬泡成熟受阻、活性降低、自噬功能减弱,从而导致AD病理改变加重。     

有氧运动训练对ApoE~(—/—)小鼠肝脏铁调素蛋白和血清IL-6、MCP-1含量的影响

目的:观察有氧运动训练对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE~(—/—))小鼠肝脏铁调素(Hepcidin)蛋白表达及血清IL-6、MCP-1水平的影响,探讨有氧运动防治ApoE~(—/—)小鼠动脉粥样硬化(AS)的作用。方法:20只8周龄雄性ApoE~(—/—)小鼠随机分为对照组(C组,10只)和运动组(E组,10只),对照组小鼠不运动,运动组小鼠进行14周递增负荷跑台训练,每周5次,即小鼠由第1~5周10 m/min,30 min,逐渐递增至13 m/min,60 min,跑台坡度为0°。14周运动干预结束后取材,对小鼠主动脉进行包埋并进行冰冻切片,然后经苏木精-伊红(HE)和油红O(ORO)染色,观察主动脉的病理变化,采用Western blot方法检测肝脏Hep-cidin蛋白表达水平,同时采用双抗夹心酶联免疫(ABC-ELISA)方法检测血清Hepcidin、白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量。结果:对照组小鼠主动脉血管壁纤维板断裂,可见大量泡沫细胞浸润和纤维斑块,运动组小鼠较对照组主动脉病变减轻;运动组小鼠Hepcidin蛋白表达及血清水平显著低于对照组(P<0.01);运动组小鼠血清IL-6、MCP-1水平显著低于对照组(P<0.01)。结论:长期有氧运动训练降低了ApoE~(—/—)小鼠肝脏Hepcidin蛋白表达和血清水平,同时降低了小鼠血清中炎症因子IL-6、MCP-1的水平,从而发挥了防治ApoE~(—/—)小鼠动脉粥样硬化的作用。     

低氧复合运动抑制低氧诱导的骨骼肌NLRP3炎性小体活化

目的:观察低氧复合运动是否能抑制低氧诱导的NLRP3炎性小体活化,并探讨Nrf2在其间的生物角色。方法:32只雄性SD大鼠随机分为常氧组(NC)、常氧运动组(NT)、低氧组(HC)和低氧复合运动组(HT),每组8只。低氧干预为常压低氧帐篷,11.3%氧浓度持续暴露4周。运动干预为跑台训练(5°,15 m/min),60 min/d,5 d/周,共4周。各组大鼠末次低氧后即刻处死,分离双侧股四头肌,单侧肌肉采用差速离心法提取线粒体,二氯荧光素法检测线粒体ROS生成速率,高效液相色谱法检测线粒体DNA中8-oxod G含量,ELISA法检测骨骼肌IL-1β含量,比色法检测骨骼肌Caspase-1活性,Western blot法检测骨骼肌NLRP3、ASC、Nrf2和NQO1蛋白表达。结果:HC组线粒体ROS生成速率和线粒体DNA中8-oxod G含量显著高于NC组(P<0.01),骨骼肌Caspase-1活性和IL-1β含量显著高于NC组(P<0.01),NLRP3和ASC蛋白表达显著高于NC组(P<0.01),Nrf2和NQO1蛋白表达显著低于NC组(P<0.05,P<0.01)。HT组线粒体ROS生成速率和线粒体DNA中8-oxod G含量显著低于HC组(P<0.01),骨骼肌Caspase-1活性和IL-1β含量显著低于HC组(P<0.05,P<0.01),NLRP3和ASC蛋白表达显著低于HC组(P<0.05,P<0.01),Nrf2和NQO1蛋白表达显著高于HC组(P<0.01)。结论:低氧复合运动可上调Nrf2表达,通过减少ROS产生和促进抗氧化酶表达,抑制低氧诱导的NLRP3炎性小体活化。     

MKP-1在APP/PS1双转基因小鼠脑内的分布及表达

目的 研究丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)在APP/PS1双转基因小鼠脑中的分布和表达,探索MKP-1与阿尔茨海默病(AD)的关系。方法 选取3、8、12月龄的APP/PS1双转基因雄性小鼠(AD小鼠)各5只,以同窝野生型雄性小鼠作为正常对照(n=5)。采用免疫组化和Western blotting检测MKP-1在小鼠脑内的分布和表达情况。结果 免疫组化检测显示,MKP-1在AD小鼠脑内广泛表达,包括大脑皮质、海马、丘脑等;3月龄AD小鼠脑内MKP-1阳性神经元数目(8824±1397)明显高于8月龄AD小鼠(5278±1764,P=0.008),且8月龄AD小鼠阳性神经元数目明显高于12月龄AD小鼠(2864±1464,P=0.046)。Western blotting结果与免疫组化结果一致(F=18.052,P=0.003)。与8月龄AD小鼠比较,同窝野生型小鼠脑内MKP-1阳性神经元数目(10 121±3657)明显增高(P=0.028)。8月龄AD小鼠脑内MKP-1可以染出斑块,且斑块数目(6.00±4.06)明显低于4G8所染的老年斑数目(25.60±5.86,P=0.000),免疫荧光共聚焦观察到二者有部分共表达现象。结论 MKP-1在AD小鼠脑内的表达随年龄增长而下调,且可能与老年斑的形成及AD的发生相关。     

氢气通过诱导血红素加氧酶1表达减轻氧中毒急性肺损伤的实验研究

目的 研究氢气(H2)对于防治氧中毒急性肺损伤(HALI)的作用机制.方法 将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:正常对照组、氧中毒模型组(HALI组)和H2治疗组(H2组).其中正常对照组大鼠仅暴露于常压空气,HALI组和H2组大鼠暴露于100%医用纯氧,每隔12 h分别腹腔注射医用生理盐水和氢饱和生理盐水(10 ml/kg).60 h后对各组大鼠进行动脉血氧分压检测和肺组织病理学检查,并应用RT-qPCR和Western印迹技术检测肺组织中血红素加氧酶1(human heme oxygenase 1,HO-1)的mRNA转录水平和蛋白表达水平.结果与HALI组相比,H2组大鼠因慢性纯氧暴露导致的肺损伤程度明显减轻,动脉血氧饱和度升高,HO-1蛋白及其mRNA在肺组织中的表达显著升高.结论 HO-1可能在H2防治大鼠HALI中发挥重要作用.     

有氧运动对12月龄大鼠腓肠肌PGC-1α/Sirt3的影响

目的:探讨运动预防增龄性骨骼肌衰减中去乙酰化酶3(Sirtuin3,Sirt3)的调控机制,为运动预防肌肉衰减提供理论依据。方法:20只12月龄雄性SD大鼠随机分为对照组(CG)和运动组(EG,15 m/min,第1周30 min/d,每周递增5min,跑台坡度为5%,6 d/w,4 w),每组10只。腓肠肌切片HE染色计算横截面积百分比;测定大鼠腓肠肌Mn-SOD、MDA含量;ELISA法测定8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2deoy-guanosine,8-OHd G)含量;Western Blot法检测大鼠腓肠肌细胞内Sirt3和PGC-1α蛋白含量变化。结果:(1)HE染色的组织切片中运动组大鼠腓肠肌所占面积百分比显著高于对照组(P<0.05)。(2)运动组大鼠腓肠肌Mn-SOD活性高于对照组(P<0.01);MDA、8-OHd G含量低于对照组(P<0.05,P<0.01);(3)运动组大鼠腓肠肌PGC1-α和Sirt3蛋白表达量高于对照组(P<0.01)。结论:适度有氧运动通过促进12月龄大鼠腓肠肌PGC1-α和Sirt3蛋白表达,提高抗氧化酶活性,减轻骨骼肌过氧化损伤,预防增龄性骨骼肌衰减。     

人参皂苷对肺癌细胞增殖、凋亡影响及作用机制

目的探讨人参皂苷Rg3对非小细胞肺癌细胞系NCI-H292细胞增殖、凋亡的作用及其与相关信号通路的关系。方法用不同浓度(0、20、40、60μmol/L)人参皂苷Rg3处理NCI-H292细胞。CCK8法检测人参皂苷Rg3对NCI-H292细胞增殖的影响;流式细胞术检测人参皂苷Rg3对NCI-H292细胞凋亡的影响;Western blot检测caspase-3和Bcl-2蛋白表达;反转录聚合酶链反应检测Keap1 mRNA和Nrf2 mRNA表达,观察人参皂苷Rg3对Keap1-Nrf2/ARE信号通路的调节作用;通过检测活性氧水平评价细胞内氧化应激水平。结果与对照组(人参皂苷Rg3为0μmol/L)比较,随着人参皂苷Rg3浓度增加,细胞的增殖能力和Nrf2 mRNA表达下降,细胞的凋亡能力、caspase-3和Bcl-2蛋白表达量、Keap1 mRNA表达、活性氧水平上升,且均呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可能通过抑制Keap1-Nrf2/ARE信号通路而抑制非小细胞肺癌细胞增殖,并促进其凋亡。     

运动疲劳对小鼠海马GDNF及其受体GFRα-1 mRNA表达的影响

目的:观察运动疲劳对小鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及其受体GFRα-1 mRNA表达的影响,探讨运动疲劳的神经生物学机制。方法:20只昆明种小鼠随机分为对照组和实验组,实验组进行连续4周的无负重递增强度游泳,每周游泳时间依次为30、60、90和120分钟,每天训练1次,每周6天,休息1天。对照组动物于相同条件下常规饲养,不参加游泳训练。最后一次运动后即刻取材。观察两组小鼠体重,血清肌酸激酶、尿素氮、睾酮指标,并采用实时荧光定量PCR法分析两组小鼠海马GDNF、GFRα-1 mRNA表达水平。结果:实验组体重、血清睾酮水平较对照组明显降低,血清肌酸激酶、尿素氮值较对照组显著升高,海马GDNF、GFRα-1 mRNA表达水平较对照组显著升高(P<0.05)。结论:运动疲劳引起小鼠海马GDNF和GFRα-1 mRNA表达水平上调,提示GDNF和GFRα-1参与了运动疲劳产生的神经生物学调控过程。     

有氧运动对小鼠动脉血红素加氧酶-1表达的影响及在动脉粥样硬化形成中的作用研究

目的:探讨有氧运动对小鼠动脉血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的影响及其在抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中的作用。方法:采用8周龄C57小鼠和ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠,饲以高脂饮食饲料建立动脉粥样硬化模型),分为ApoE-/-安静组(AC组)、ApoE-/-运动组(AE组)、C57运动组(CE组)、C57安静组(CC组)4组,每组15只。运动组进行12周中等强度跑台运动(10米/分×30→13米/分×60分,5次/周)。实验12周后安静时取材,采用HE染色、免疫组织化学方法及图像分析系统测定主动脉弓、腹主动脉、颈动脉组织解剖结构及HO-1表达。结果:CC组和CE组动脉组织结构正常。AC组主动脉多为纤维粥样硬化期病变,AE组多为脂纹脂斑早期病变。CC组主动脉无HO-1表达,CE组主动脉内皮层有HO-1表达。AC组主动脉内皮细胞和斑块可检测到HO-1大量表达,AE组比AC组表达减少。经图像分析,和AC组比,AE组主动脉弓、腹主动脉和颈动脉HO-1表达显著下降(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05),其中主动脉弓减少比腹主动脉、颈动脉明显。结论:有氧运动增强正常动脉的抗氧化能力(HO-1表达增加)。运动延缓AS形成中的动脉病变,可能与其降低主动脉的氧化应激水平(氧化应激标志HO-1降低)有关。这些改变均以主动脉弓表现明显。     

弱激光预照射联合有氧运动对增龄大鼠骨骼肌SIRTs/PGC-1α轴及IGF-1蛋白表达的影响

目的:探讨弱激光预照射联合有氧运动对增龄大鼠骨骼肌SIRTs/PGC-1α轴及IGF-1蛋白表达的影响,揭示弱激光预照射联合有氧运动对增龄性骨骼肌质量减少干预的可能机制。方法:32只18月龄雌性SD大鼠随机分为安静对照组(SC组,8只)、有氧运动组(AE组,8只)、弱激光组(LLLT组,8只)和弱激光预照射联合有氧运动组(LLLE组,8只)。SC组大鼠自由摄食;AE组大鼠在跑台上以15 km/h(60%～75%VO2max)进行中等强度低负荷量有氧运动,15 min/d,5 d/周,持续运动8周;LLLT组采用激光器照射大鼠双侧大腿前侧中间部分,每侧照射两个点,单点照射时间30 s,照射面积0.4 cm2,功率强度125 mW/cm2,1次/天,5 d/周,持续8周;LLLE组大鼠每次运动前进行弱激光预照射,弱激光预照射和有氧运动方案分别同上。第8周末实验结束48 h后宰杀并测定腓肠肌质量;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定腓肠肌去乙酰化酶SIRTs (SIRT1-7)、过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子-1α(PGC-1α)、线粒体转录因子A (TFAM)和核呼吸因子1 (NRF-1)等mRNA表达;蛋白免疫印迹法测定腓肠肌胰岛素类生长因子-1 (IGF-1)蛋白表达。结果:(1) LLLE组腓肠肌指数较AE组(P<0.05)和LLLT组(P<0.05)增加。(2) LLLE组SIRT1 mRNA表达水平较AE组(P<0.05)和LLLT组(P<0.05)升高,SIRT3 mRNA表达水平也高于AE组(P<0.01)和LLLT组(P<0.01)。(3) LLLE组PGC-1αmRNA表达水平较AE组(P<0.05)和LLLT组(P<0.01)升高。(4) LLLE组IGF-1蛋白表达水平高于AE组(P<0.05)和LLLT组(P<0.05)。结论:弱激光预照射联合有氧运动对改善增龄性骨骼肌质量减少的干预效果优于有氧运动和弱激光疗法,可能主要依赖于双重调控SIRT1/SIRT3-PGC-1α轴,提高增龄骨骼肌线粒体生物合成能力,同时激活IGF-1蛋白。