α-硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型干预的初步研究

目的 研究α-硫辛酸(α-LA)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型干预的有效性,探讨α-LA临床治疗多发性硬化的可能性.方法 Wistar大鼠30只,其中22只制作EAE模型,分为α-LA干预组(11只)及免疫组(11只),另8只为非免疫组.α-LA干预组大鼠于免疫当天开始每天1次腹腔注射α-LA(100 mg/kg),至实验28 d结束处死日止;免疫组及非免疫组大鼠每天腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液.对各组大鼠进行神经功能缺损评分、病理学及免疫组织化学检查.结果 α-LA干预组的EAE发病率为5/11,显著低于免疫组的9/11(P<0.01).α-LA干预组大鼠免疫后第14天及第16～28天的神经功能缺损评分显著低于免疫组(P值均<0.05).α-LA干预组大鼠脑组织切片脱髓鞘病灶数为(3.85±1.21)个,脊髓组织切片病灶数为(4.26±2.65)个,均显著少于免疫组的(9.09±5.61)和(14.45±5.10)个(P值均<0.05).免疫组织化学髓鞘碱性蛋白(MBP)染色也显示,α-LA干预组病理切片的髓鞘松散、脱失明显轻于免疫组.结论 α-LA能显著改善EAE大鼠的神经功能,干预EAE的发病.     

超大剂量甲泼尼龙治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的疗效分析

目的 研究超大剂量甲泼尼龙(MP)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用,探讨超大剂量MP能否提高疗效.方法 构建EAE大鼠模型,分为超大剂量组、小剂量组和模型对照组,分别予以尾静脉注射MP 100 mg/kg、25 mg/kg、等体积生理盐水;另取正常大鼠为正常对照组,给予等体积生理盐水注射.连续给药5 d,处死大鼠,采血检测血浆白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.取脑、脊髓组织行HE染色及髓鞘染色.对临床评分、炎性病灶计数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等进行综合评价.结果 超大剂量组和小剂量组大鼠经MP治疗前后临床评分差异均有统计学意义(P<0.05),组织炎性病灶数、髓鞘脱失评分及血浆IL-2、TNF-α含量均较模型对照组低.而超大剂量、小剂量组间在临床评分、炎性病灶数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等方面比较均无统计学差异.结论 两种剂量MP均能缓解EAE症状,改善病情,但临床疗效并不与剂量呈依赖性,在一定的有效剂量范围内,超大剂量MP并不能提高疗效.     

大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎CD4+/CD8+改变及细胞间黏附分子1表达的意义

目的探讨急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠外周血CD4 /CD8 和脑及脊髓ICAM-1的表达及意义。方法采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂注射诱发大鼠EAE模型,分别注射生理盐水/福氏佐剂、左旋咪唑作为对照,注射后16d时取材,采用Loyez氏髓鞘染色法和免疫组化法观察脑和脊髓髓鞘改变及ICAM-1表达,流式细胞仪检测外周血CD4 /CD8 改变,并与对照组比较。结果正常组、NS/CFA组和LMS对照组髓鞘结构未见异常;模型组髓鞘染色见髓鞘结构疏松、部分髓鞘脱失。EAE大鼠脑和脊髓中I-CAM-1主要表达于血管内皮细胞,其面密度为(5.08!0.39),显著高于对照组(P<0.05)。结论EAE大鼠存在外周血CD4 /CD8 比值及脑和脊髓ICAM-1表达异常,CD4 /CD8 比值增高和ICAM-1表达异常在EAE的发生过程中发挥重要作用。     

青蒿琥酯对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的神经保护作用及细胞自噬的影响

目的探讨青蒿琥酯对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠神经保护作用及细胞自噬影响。方法选择48只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、青蒿琥酯低剂量组、高剂量组共4组,每组12只。采用MOG35-55多肽制备EAE模型,青蒿琥酯低剂量组、高剂量组分别予以青蒿琥酯(10 mg/(kg·d),50 mg/(kg·d))腹腔注射,连续10 d,观察小鼠发病情况。脑组织行luxol fast blue(LFB)染色观察脱髓鞘情况,采用Western blot法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ的表达。结果空白组小鼠均未发病,模型组、青蒿琥酯各剂量组发病小鼠出现不同程度的尾部下垂、行走不稳、后肢无力等。青蒿琥酯各剂量组较模型组相比,发病潜伏期、高峰期延迟、神经功能评分减低,高剂量组较低剂量组作用明显(P0.05),低剂量组和高剂量组发病高峰期比较无统计学意义(P0.05)。②LFB染色见模型组脑组织髓鞘排列疏松、紊乱、低染,青蒿琥酯各剂量组髓鞘染色情况好转。③Western blot检测模型组与空白组相比,LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ条带光密度值及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均增加(P0.01);青蒿琥酯各剂量组较模型组相比,LC3I、LC3Ⅱ条带光密度值及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均减小(P0.01),高剂量组较低剂量组作用明显(P0.05)。结论青蒿琥酯对EAE小鼠具有神经保护作用,减轻脑组织脱髓鞘情况,且作用机制可能与通过下调LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ减轻细胞自噬有关。     

银杏提取物对自身免疫性脑脊髓炎小鼠脱髓鞘免疫炎性病变的影响

目的探讨银杏提取物(GBE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脱髓鞘免疫炎症病变的影响。方法将小鼠分为EAE模型组(腹腔注射生理盐水)和GBE组[腹腔注射GBE 70 mg/(kg.d)],应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(MOG33-55)配以完全弗氏佐剂(CFA)免疫小鼠,诱发EAE模型。通过神经功能评分、免疫组化染色以及酶联免疫吸附实验(ELISA),观察GBE对EAE小鼠的影响。结果 GBE组小鼠发病潜伏期[(12.5±0.64)d]较EAE组[(10.7±0.47)d]显著延长(P<0.05),并且GBE组发病高峰期(CFA免疫后第21天)神经功能评分较EAE组显著降低(P<0.05)。海马伞矢状切片免疫组化染色结果证实GBE组CD4+T淋巴细胞较EAE组明显减少,仅可见CD4+T淋巴细胞散在分布。ELISA检测结果显示发病高峰期GBE组TNF-α含量较EAE组明显降低(P<0.05)。结论 GBE可能通过抑制CD4+T淋巴细胞激活、减少炎症介质释放,从而保护延缓EAE小鼠脱髓鞘病变进程。     

大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的建立大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型.方法采用豚鼠脊髓和福氏完全佐剂混合乳剂一次性注入Wistar大鼠双足垫和尾部,同时腹腔注射左旋咪唑诱导大鼠发生EAE.观察发病情况;HE染色观察病理变化;Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变.结果空白对照组大鼠均未出现症状,HE染色大脑白质及脊髓无炎性细胞浸润;Loyez氏染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为87.5%,HE染色见大脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润;Loyez氏染色见部分脱髓鞘改变.结论用豚鼠脊髓髓鞘蛋白和福氏完全佐剂混合乳剂同时辅以左旋咪唑成功地诱导Wistar大鼠发生急性EAE.     

火把花根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑IL-2和IFN-γ mRNA的影响

目的:探讨火把花根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)Wistar大鼠的治疗作用及IL-2和IFN-γmRNA的影响。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE;治疗组在模型组基础上予以火把花根片(300 mg.kg-1,BID)治疗,观察症状并评分;HE染色和Loyez氏髓鞘染色,观察病理和髓鞘改变;RT-PCR法测定脑组织的IL-2和IFN-γ的mRNA表达水平。结果:治疗组未出现EAE症状,脑组织IL-2和IFN-γ的mRNA表达水平分别为0.345±0.032、0.353±0.023,与模型组比较P<0.01;脑和脊髓小血管周围炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论:火把花根片对EAE有治疗作用,其机制与抑制了脑组织IL-2和IFR-γ的mRNA表达有关。     

山茱萸总甙对实验性变态性脑脊髓炎大鼠外周一氧化氮的影响

[目的]初步观察山茱萸总甙(TGCO)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠及外周血清一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响。[方法]将Wistar大鼠分为3组:Control组、EAE组和TGCO组,采用动物行为学、常规HE和Luxol Fast Blue(LFB)染色观察动物的发病情况与中枢神经系统(CNS)的病理变化,硝酸还原酶法观察血清NO的变化。[结果]EAE组7只大鼠出现典型的EAE行为学改变、CNS炎性细胞浸润和髓鞘脱失,而TGCO组只有3只大鼠出现EAE行为学改变,评分最高为2分,潜伏期延长,CNS内炎性细胞浸润和髓鞘明显减轻。Control组未见上述变化。EAE组大鼠总血清NO值明显升高,与对照组比较有显著性差异(P0.001);TGCO组大鼠血清NO值(109.83±68.03),与EAE组比较有统计学差异(P0.05)。[结论]TGCO对EAE大鼠有抑制作用,可能与抑制血清NO合成有关。     

自身免疫性脑脊髓炎大鼠CD4+CD25+T细胞、CD86分子的变化及意义

目的:探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠CD4 CD25 T细胞、CD86分子的变化及意义。方法:模型组用豚鼠脊髓和完全弗式佐剂混匀乳剂诱发大鼠EAE,观察两组的发病情况;HE染色和髓鞘染色观察病理改变;流式细胞仪检测外周血CD4 CD25 T细胞、CD86分子。结果:模型组大脑、脑干、脊髓炎性细胞浸润明显,髓鞘改变明显;模型组CD4 T细胞、CD86分子显著增多,CD4 CD25 T细胞显著减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的CD86分子阳性率增高,与EAE的发病相关,CD4 CD25 T细胞对其有一定的保护作用。     

腺病毒介导的NgR特异性RNA干扰对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经行为学的影响

目的 观察NgR特异性RNA干扰的重组腺病毒(Ad-shRNA-NgR)转染实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)大鼠脑组织后,EAE大鼠脑内NgR表达及神经行为学的情况.方法 Wistar大鼠108只,采用随机数字表法分为正常对照组(n=27)、空白对照组(n=27)、阴性对照组(n=27)、特异性RNAi组(n=27).造模后第7天,通过侧脑室对阴性对照组及特异性RNAi组分别注射Ad-shRNA-HK、Ad-shRNA-NgR,空白对照组以等量的PBS代替.注射后第7、14天,RT-PCR、免疫荧光染色观察脑组织中NgR的表达并行Koh神经功能评分.结果 特异性RNAi组大鼠脑组织中NgR mRNA的表达及NgR免疫荧光染色的IOD值:注射后第7天,较空白及阴性对照组均明显下降(P<0.01);注射后第14天,较该组注射后第7天时增高(P<0.05),但仍低于空白及阴性对照组(P<0.05).特异性RNAi组EAE的发病潜伏期延长(P<0.05),Koh神经功能评分降低(P<0.05),体质量无明显减轻.结论 腺病毒介导的NgR特异性RNAi可明显下调EAE大鼠脑组织中NgR的表达,改善EAE大鼠的神经行为.     

孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织糖原合成酶激酶-3β的影响

目的探讨孕酮对缺氧缺血性脑损伤新生鼠皮层和海马糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)水平的影响。方法40只7日龄新生Wistar大鼠随机分成假手术组、缺氧缺血组、孕酮4 mg组、孕酮8 mg组和孕酮16 mg组。假手术组腹腔注射溶剂芝麻油,缺氧缺血组于缺氧前30 min腹腔注射溶剂芝麻油,孕酮组于缺氧前30 min腹腔注射相应剂量的孕酮溶液,建立缺氧缺血脑损伤动物模型。24 h后动物全部处死,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织中GSK-3β的含量。结果缺氧缺血组新生鼠皮层和海马组织中GSK-3β水平明显高于假手术组(P<0.01),孕酮4 mg、8 mg、16 mg组皮层和海马组织中GSK-3β水平均明显低于缺氧缺血组(P<0.05)。结论缺氧缺血可升高新生鼠皮层和海马GSK-3β水平,孕酮通过降低新生鼠缺氧缺血时皮层和海马组织中GSK-3β水平发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。     

Effects of Acupuncture on Progesterone and Prolactin in Rats of Embryo Implantation Dysfunction

Objective:To investigate the effect of acupuncture on progesterone(P4) and prolactin(PRL) in rats of embryo implantation dysfunction(EID).Methods:On the first day of pregnancy,72 female Wistar rats were randomly allocated into the normal group,the EID model group,the acupuncture group and the P4 group(18 in each group).The normal group was injected sesame oil,while the other three groups were given mifepristone to establish the EID model.The acupuncture group and the P4 group were given treatment of acupuncture and P4 injection,respectively.The serum of P4 and PRL were detected by radioimmunoassay,and the mRNA and protein expressions of P4 receptor(PR) and PRL receptor(PRLR) were detected using real-time polymerase chain reaction and immunohistochemical method,respectively.Results:Compared with the normal group,the serum levels of P4 and PRL as well as the mRNA and protein expression levels of PR and PRLR in the EID model group were significantly lowered(P<0.01 or P<0.05).The above indices in the acupuncture group and the P4 group were significantly elevated compared with the EID model group(P<0.01 or P<0.05).Conclusion:Acupuncture can promote embryo implantation effectively,which might be related to the effects of acupuncture on upregulating the P4 and PRL levels in serum and the PR and PRLR expression levels in rats.     

米非司酮对晚孕引产大白鼠脑组织超微结构的影响

目的　探讨米非司酮引产对母鼠脑组织超微结构的影响。方法　将 10只孕鼠随机分为实验组和对照组 ,每组各 5只。孕 2 0d给予实验组母鼠灌服米非司酮 (11.5± 1)mg加麻油 1ml引产 ,对照组灌服麻油 1ml。产后取母鼠右侧大脑顶叶皮质组织进行电镜观察。结果　与对照组相比实验组母鼠脑组织可见 :①神经细胞肿胀 ,膜性细胞器减少 ;②神经毡局部有破坏 ,髓鞘暗板分离 ;③突触连接减少 ,间质水肿 ;④神经胶质细胞肿胀 ,毛细血管上皮内线粒体肿胀 ,外膜胶质屏障增宽。结论　米非司酮可造成母鼠脑组织缺血缺氧性损害。     

Histological study on norethynodrel treated rat ovary

In an attempt to disclose the antiovulatory mechanism of norethynodrel, a progestational compound having slight estrogenic action, a histological study of treated rat ovaries was made. 4 test animals were injected daily for 14 days with 1 mg of norethynodrel in .3 ml sesame oil. All were killed 24 hr after the last injection. Ovaries of treated rats showed follicular degeneration (cystic atresia), interstitial cell degeneration, and cellular hypertrophy of lutein cells. Immature follicles did not show remarkable changes. Findings suggest that norethynodrel may cause hypersecretion of luteotrophic hormone (LTH) and hyposecretion of follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) from the hypophysis. Also noted was that secretion of 20-alpha-OH-P decreased greatly with norethynodrel, but the progesterone level showed no change, suggesting that ovarian interstitial cells may synthesize 20-alpha-OH-P from sterol precursors not involving progesterone. The antiovulatory mechanism may depend on direct or indirect interference with the biosynthesis of 20-alpha-OH-P.     

针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜CCR2的影响

目的观察针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜趋化因子受体CCR2表达的影响。方法将72只孕鼠随机分为正常组（N ）、胚胎着床障碍组（M ）、针刺治疗组（A ）和黄体酮治疗组（W ）,每组随机再分为第6天组（D6）、第8天组（D8）、第10天组（D10）。其中M 组、A 组和W 组大鼠妊娠第1天给予米非司酮麻油溶液造模,N 组仅给予等量麻油溶液。同时,A 组固定并每天针刺三阴交、后三里,N 组和M 组仅固定,W 组肌肉注射黄体酮,直至处死。用免疫组织化学法、Western blot 和 Real-time PCR等方法测定着床点子宫内膜 CCR2的表达。结果与 N 组相比,M 组大鼠子宫内膜 CCR2蛋白和mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与 M 组相比,A 组和 W 组大鼠子宫内膜CCR2蛋白和 mRNA 的表达则明显增高（P＜0.05）。结论针刺能上调胚胎着床障碍大鼠母胎界面CCR2的表达,从而促进胚胎的着床和胎盘的形成。     

蛋黄油为主复方制剂治疗大鼠放射性直肠炎

目的观察以蛋黄油为主的复方制剂灌肠治疗SD大鼠放射性直肠炎的疗效。方法 24只SD大鼠随机分为4组：未放疗＋NS灌肠组（1组）;放疗＋生理盐水灌肠组（2组）;放疗＋蛋黄油灌肠组（3组）;放疗＋复方制剂灌肠组（4组）。除l组外所有大鼠盆腔均接受16.5gy剂量的放疗。大鼠自放疗开始后每天药物灌肠1次,10d后处死大鼠。以游标卡尺检测直肠直径,直肠标本进行苏木精-伊江染色病理检查,并行肿瘤坏死因子-αmRNA的RT-PCR检测。结果放疗后大鼠的直肠直径均有增加。蛋黄油及蛋黄油为主的复方制剂并没有减少大鼠直肠直径增加的程度。放疗后大鼠的直肠腺体均有减少,蛋黄油及复方制剂可以减少腺体的丢失,但是复方制剂和蛋黄油相比差异无统计学意义。放疗后大鼠直肠TNF-α的表达均有增加。药物处理组可以下调局部TNF-α的表达,其中复方制剂组可以更显著的减少TNF-α的表达,有统计学意义。结论蛋黄油及蛋黄油为主的复方制剂对大鼠放射性直肠炎表现出一定的疗效,其中复方制剂相比蛋黄油显示出更加优秀的疗效。     

大型食品冷库灭鼠方法探讨

本文总结了大型食品冷库这一特殊场合灭鼠的技术措施。用香油拌半熟花生米碎粒、稻谷、大米进行诱饵选择试验,鼠类摄食香油拌半熟花生米粒显著高于稻谷、大米。在不停产清库的条件下,连续投入2.34％鼠甘伏花生米毒饵3天,同时做好防制等,平均灭鼠率达96.17％。     

黑芝麻油对大白耳兔血脂的调节作用

目的:了解黑芝麻油对动脉粥样硬化模型兔血脂的影响。方法:将24只大白耳兔随机分成基础饲料组和高脂饲料组和黑芝麻油组,每组8只,各组饲喂不同饲料20周后,取静脉血测定总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯。结果:比较3个组的总胆固醇值和低密度脂蛋白胆固醇值,高脂饲料组与基础饲料组比较显著增高(P<0.01),黑芝麻油组与高脂饲料组比较显著下降(P<0.01)。结论:黑芝麻油具有较明显的降血脂作用,其降脂作用主要表现在降低低密度脂蛋白胆固醇进而降低总胆固醇。     

针刺对克罗米芬治疗的多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜容受性的影响

目的 观察针刺对促排卵治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨其作用机制.方法 对24日龄雌性SD大鼠皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)的麻油溶液制作多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,对照组(Con)同期皮下注射麻油.PCOS大鼠随机分为模型组(M)、克罗米芬组(C)、克罗米芬+针刺组(C+A),其中M组不作任何处理,其它各组均于80日龄起进行干预5 d.治疗结束后,各组部分大鼠断头处死,留取子宫和子宫内膜标本.以RT-PCR法检测各组大鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、同源盒基因A10(HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)mRNA表达,Western blot法检测ER、PR、HOXA10、LIF及整合素αvβ3(Integrin αvβ3)蛋白的表达.各组其余大鼠与雄鼠交配,于妊娠第8天处死,观察大鼠胚泡着床情况.结果 与C组相比,C+A组大鼠子宫内膜发育更好,上述子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达水平也更接近对照组(P<0.05).结论 针刺能显著改善克罗米芬促排卵治疗导致的子宫内膜容受性不良状态,可能通过调节子宫内膜容受性的标志分子蛋白及mRNA表达而实现.     

乳块消软胶囊对实验性乳腺增生大鼠的影响

目的：研究乳块消软胶囊对实验性乳腺增生大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法：60只大鼠随机分为乳块消软胶囊低、中、高剂量组,他莫昔芬组,模型组和正常组;采用肌注苯甲酸雌二醇联合黄体酮的方法复制乳腺增生大鼠模型,造模同时给予药物治疗,测定乳房直径和乳头高度、脏器系数、血清性激素水平。结果：乳块消软胶囊能明显减小大鼠乳房直径、乳头高度,明显降低血清雌二醇（E2）、催乳素（PRL）水平,提高孕酮（P）水平,增大胸腺系数、减小子宫系数。结论：乳块消软胶囊对大鼠乳腺增生病有良好的防治作用。