甄氏外瓶霉的PCR－RFLP分型研究

目的 对不同来源的甄氏外瓶霉进行分析，为建立更为合理的分型方法提供依据。方法 以ＩＴＳ３和ＩＴＳ４为引物，对１７株甄氏外瓶霉的核糖体ＤＮＡ转录间隔区（ＩＴＳⅡ）进行扩增，４种内切酶（ＨｉｎＦ、ＭｓｐＩ、ＢｓｕＲＩ和ＲｓａＩ）酶切。结果 ＩＴＳⅡ扩增片段约为３３０ｂｐ，１７个菌株可分为Ⅵ型，３朱变种发属于不同的型，ＢＭＵ００１９５带型独特，有可能为新变种或新种；种群关系与来源显示出一定的相关性。结论     

聚合酶链反应技术在解脲支原体尿道炎中的应用

聚合酶链反应技术在解脲支原体尿道炎中的应用戴勇，曾真深圳市人民医院（邮政编码５１８０２０）根据解脲支原体（Ｕｕ）尿素酶基因序列，设计出的聚合酶链反应（ＰＣＲ）引物，检测尿道中解脲支原体，以期了解它在尿道炎中发病情况。对象与方法一、对象检查１０７４例患...     

聚合酶链反应检测生殖支原体的研究

具有致病性的生殖支原体（Ｍｇ）生长缓慢，不易培养，而血清学诊断与肺炎支原体又有交叉反应，这给Ｍｇ的临床诊断带来困难。为了进一步解决Ｍｇ的临床检测问题，本研究采用Ｍｇ粘附因子基因序列合成一对引物ＭｇＰａ１和ＭｇＰａ３，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测Ｍｇ。结果表明，对Ｍｇ能产生特异性扩增，片段大小为２８１ｂｐ，而对肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、沙眼衣原体及淋球菌等则不能扩增出任何片段。作者认为，ＰＣＲ为一种高度特异和敏感性的方法，它为Ｍｇ的临床检测提供了重要的手段。我们还对引物浓度、退火温度及模板量对ＰＣＲ扩增结果的影响进行了初步探讨。     

解脲支原体耐药性与血清型关系的研究

用代谢抑制试验法对２０６株解脲支原体（Ｕｕ）同时进行血清分型和药敏试验。结果显示对红霉素耐药的Ｕｕ血清优势型别为２型，对四环素耐药的Ｕｕ血清优势型别为２型和９型，而对两种抗生素同时耐药的Ｕｕ血清优势型别为２型。可见，Ｕｕ耐药性与血清型之间存在联系，２型和９型Ｕｕ菌株的耐药率明显高于其他血清型别。     

普通人群解脲支原体和人型支原体感染的流行病学调查

普通人群解脲支原体和人型支原体感染的流行病学调查徐德兴，王露霞，周颖，杨健广州军区广州总医院检验科（邮政编码５１００１０）我们对６８０例无性乱史的普通人群进行解脲支原体（Ｕｕ）和人型支原体（Ｍｈ）培养检测，现将结果报告如下。材料与方法一、检测对象为我...     

蛋白表达在支原体研究中的应用

目的探讨蛋白表达技术在支原体研究中的作用。方法以解脲脲原体（ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍＵＵ）为例，根据所研究ＵＵ的目的ＤＮＡ片段设计一对特异性引物，经ＰＣＲ扩增得到目的ＤＮＡ，克隆后运用表达质粒载体ｐＧＥＸ ２Ｔ在ＩＰＴＧ诱导下成功诱导了蛋白的表达，并用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测其抗原活性。结果所表达的蛋白具有很好的抗原活性。结论蛋白表达应用于支原体研究中，为研究支原体的致病性与种类或型别的关系提供了重要的手段。实验中我们体会到：（１）在设计引物时，要注意避开ＵＧＡ，可用ＵＧＧ代替。（２）ＩＰＴＧ的浓度从０．１ｍｍｏｌ／Ｌ～１ｍｍｏｌ／Ｌ均有报道，我们实验证实两种浓度在诱导蛋白表达中无差别，因而推荐使用０．１ｍｍｏｌ／Ｌ。（３）蛋白诱导的时间以４～４．５ｈ为最佳。     

解脲支原体中tetM基因的检测及临床应用评价

近年来对解脲支原体(Ｕｕ)的耐药性研究表明,ｔｅｔＭ基因是介导Ｕｕ对四环素耐药的唯一基因[1]。能否用检测ｔｅｔＭ基因来反映Ｕｕ对四环素或四环素类其它抗生素的耐药性尚不清楚。本研究应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)方法检测ｔｅｔＭ基因,并将其结果与微量肉汤稀释法检测药物敏感性及临床疗效进行综合分析,以图明确ｔｅｔＭ基因在Ｕｕ耐药性中的作用。一、材料与方法(一)材料:1.实验菌株:2株Ｕｕ标准菌株(血清型8ＴｃＳ和血清型9ＴｃＲ,由加拿大Ａｌｂａｔａ大学Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ教授赠送),1株金黄色葡萄球菌标准菌株(由中山医科大学微生…     

解脲支原体第一群MB抗原基因5′端基因片段的克隆表达及抗原性研究

解脲支原体(Ｕｕ)在人类疾病感染中的特征仍有争议,已知感染人类的Ｕｕ具有种的特异性,用血清学的方法将其分为2个生物群及14个血清型,其中1、3、6、14为第1群,其余的10型为第2群[13]。Ｔｅｎｇ等[4]的研究认为Ｕｕ的群特异性和多样性被编码在ＭＢ(ｍｕｌｔｉｐｌｅｂａｎｄｅｄ)抗原基因中,本研究用第1群的Ｕｕ3、14标准株对ＭＢ抗原5′端含群特异性抗原决定簇部分进行了ＰＣＲ扩增,并对其表达的蛋白片段进行了抗原性检测。一、材料与方法1Ｕｕ3、14型标准株、Ｕｕ3、6、8、14型标准抗血清由首都儿科研究所提供;ｐＧＥＸ2Ｔ、感受态大肠杆…     

斑点免疫金渗滤试验快速检测解脲支原体

解脲支原体(Ｕｕ)不仅是非淋菌性尿道炎主要的病原体之一,而且与自发流产、低体重儿、不育以及人类其它泌尿生殖道疾病有密切的关系[1]。检测Ｕｕ的方法,大多数实验室采用培养法。我们用斑点免疫金渗滤试验(ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ,ＤＩＧＦＡ)检测Ｕｕ,并和培养法进行了比较。一、材料和方法(一)材料:1.Ｕｕ114型国际标准株:由加拿大Ａｌｂｅｒｔａ大学医学院微生物教研室Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ教授赠送。2.其它支原体种及来源:人型支原体1株ＰＧ21,肺炎支原体1株ＦＨ,口腔支原体1株Ｃｈ19299,发酵支原体1…     

聚合酶链反应检测解脲支原体

我们根据已知的解脲支原体尿素酶基因序列，设计了一对聚合酶链反应引物，该组引物对解脲支原体１４个血清型均能扩增出２８６ｂｐ片段，但对实验所用的其它支原体或细菌不能扩增出任何片段，该２８３ｂｐ片段能被限制性内切酶ＨｉｎｃⅡ降解为１５１，１３２ｂｐ两条片段，使用３５个ＰＣＲ循环，可检测出１０＾－１４ｇ的模板ＮＤＡ，约相当于２０个解脲支原体。通过梯度稀释试验证明４０个ＰＣＲ循环时，ＰＣＲ的敏感性与培养法的     

青岛地区中小学生泌尿生殖道解脲脲原体及人型支原体分子流行病学调查

目的 探讨解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）在健康中小学生泌尿生殖道中的定植情况,以及Uu的分群分型状况。方法 培养法对青岛地区957名中小学生的尿沉渣进行Uu和Mh培养,培养阳性者用PCR确证,并对Uu阳性标本进一步分群分型。结果 Uu阳性46例,占4.81%,生物一群占69.57%,生物二群30.43%。小学生Uu阳性12例,占2.97%,生物一群9例（75.00%）,生物二群3例（25.00%）。初中生Uu阳性8例,占3.08%：生物一群5例（62.50%）,生物二群3例（37.50%）。高中生Uu阳性26例,占8.87%：生物一群18例（69.23%）,生物二群8例（30.77%）。Mh阳性9例（0.94%）,其中小学生Mh阳性1例,初中生Mh阳性1例,高中生Mh阳性7例。3个组Uu阳性率女生均高于男生（P < 0.05）。 结论 Uu和Mh在中小学生泌尿生殖道中存在无症状的携带状态。尽管各年龄组检出的Uu均以生物一群为主,但生物二群也占有不小的比例,提示Uu可能是健康中小学生人群正常定植菌,且女性携带率高于男性。     

苍柏湿毒清对小鼠阴道解脲支原体定植干预研究

目的：旨在比较苍柏湿毒清干预前、干预后小鼠Uu阴道炎造模成功率。方法：A1组先予中药干预,其后Uu阴道炎造模;B1组先予生理盐水干预,其后Uu阴道炎造模;A2组造模成功后予中药干预;B2组造模成功后给予生理盐水干预,C组既不进行造模,亦不进行中药干预,清洁级饲料喂养。计算各组小鼠Uu的定植成功率并行统计分析。结果：A1组、A2组造模成功率均低于B1组、B2组,据统计学分析P〈0.05,说明组间比较有显著差异。结论：苍柏湿毒清干预前、后均能降低解脲支原体造模成功率,是针对解脲支原体感染的有效药物。     

170株解脲脲原体生物群构成比与临床症状相关性的初步探讨

目的:初步探讨解脲脲原体生物群构成比与临床症状的相关性.方法:收集并登记性病门诊就诊人群的Uu临床标本,以多条带抗原(multiple-banded antigen, MB-Ag)基因为靶位,设计分群引物,进行分群检测.结果:170株Uu中,parvo生物群占64.71%(110/170),T960生物群占34.12%(58/170),两群都检测到的比例为1.17%(2/170).不同临床症状女性患者中parvo及T960生物群所占比率差异有统计学意义(P<0.05).结论:parvo生物群可能是Uu中的优势菌群,T960生物群可能更容易引起临床相关症状或体征.     

支原体感染与类风湿关节炎发病相关性研究

目的：明确支原体感染与类风湿关节炎发病的相关性。方法：选取2017年1~12月我院诊治的类风湿关节炎患者作为研究对象，采集尿道拭子（57例）、咽拭子（120例）、关节液（43例）、宫颈拭子(20例)标本，用PCR方法检测解脲脲原体（Uu）、关节炎支原体（Mar）、人型支原体（Mh）及发酵支原体（Mf）。结果：共收集患者120例，咽拭子Uu阳性率22.5%、Mh阳性率14.2%、Mar阳性率0.8%、Mf阳性率0.8%；尿道拭子Uu阳性率31.6%、Mh阳性率21.1%、Mar阳性率3.5%、Mf阳性率0.0%；关节液的Uu阳性率11.6%、Mh阳性率4.7%、Mar阳性率2.3%、Mf阳性率0.0%；宫颈拭子Uu阳性率45%、Mh阳性率10%、Mar阳性率5%、Mf阳性率0.0%。Uu阳性类风湿关节炎患者与阴性者比较，骨密度降低、关节疾病活动度评分（DAS）3.2~5.1、DAS＞5.1有统计学差异(P＜0.05)。结论：Uu与类风湿关节炎的严重程度可能具有相关性。     

解脲支原体对子宫颈致病性的临床分析

为了研究女性子宫颈解脲支原体感染与临床致病性的关系，对97例仅有解脲支原体宫颈感染的女性患者，观察有无宫颈炎表现。结果显示，在引起子宫颈炎症的因素中，解脲支原体可能是一个重要的因素，在临床上可能有一定的致病性，但也可能存在非致病性解脲支原体宫颈感染。同时显示，多个性伴的患者解脲支原体感染较单一伴者更常伴有子宫颈炎症。     

解脲支原体造模问题探讨

目的:采用阴道注入菌液的方法观察雌性大、小鼠阴道解脲支原体定植的成功率.方法:每周给大、小鼠分别皮下注射雌二醇一次,在第二次注射雌二醇后分别给予阴道注入解脲支原体菌液,在第四周和第五周取其阴道分泌物进行支原体鉴定实验,计算大、小鼠各自的定植成功率并行统计分析.结果:小鼠的定植成功率明显高于大鼠,据统计学分析P＜0.05,说明大、小鼠两组间比较有显著差异.结论:若采用阴道注入菌液的方法,小鼠比大鼠更容易造模成功.     

解脲脲原体泌尿生殖道感染动物模型的研究进展

解脲脲原体可导致盆腔炎、不良妊娠结局、非淋球菌性尿道炎、附睾炎等多种疾病.解脲脲原体有2个生物群14个血清型,但目前各种血清型之间致病性差异尚未明确.国内外使用小鼠、黑猩猩、羊等多种动物建立了宫内感染及下生殖道的感染模型,发现各型别感染后可导致IL-1、IL-6等多种炎症因子水平升高,子宫内膜及睾丸组织等均出现了不同程度的炎症浸润和变性等,不同部位感染率、感染时间均有不同.     

大蒜素对解脲脲原体的体外抗菌作用

目的检测解脲脲原体对大蒜素及临床常用的5种抗生素的敏感性,为临床合理用药提供实验依据.方法采用微量肉汤稀释法检测了大蒜素及临床常用的5种抗生素对197株Uu的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的作用.结果大蒜素对Uu有较强的抑杀作用,MIC50和MIC90分别为2.0mg/L和4.0mg/L.结论天然药物大蒜素对Uu有较强的体外抑杀作用.     

健康足月分娩新生儿泌尿生殖道解脲脲原体的流行病学研究

目的:确定解脲脲原体(UU)在健康足月分娩新生儿泌尿生殖道中的检出率与分群分型。方法:UU液体培养法初筛健康足月分娩248例新生儿外阴分泌物,阳性标本用PCR法及酶切法进行分群分型。结果:248例标本中,UU阳性率为10.48%,经阴道分娩组与剖宫产组阳性率差异有统计学意义(P<0.01);男婴与女婴阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。26例阳性标本中,生物一群18例(69.23%),生物二群6例(23.08%),混合群2例(7.69%)。生物一群中1型4例,6型10例,3/14型2例,混合型2例。结论:本研究中健康新生儿泌尿生殖道中UU以生物一群为主,主要为1型和6型。     

解脲脲原体对红霉素耐药机制的初步研究

目的 探讨解脲脲原体对红霉素的耐药机制。方法 对73株从泌尿生殖道分离的解脲脲原体进行体外药物敏感试验筛选耐药菌株,并设立临床敏感菌株组以及标准菌株对照组,用PCR测序法检测23SrRNA的V区热点突变以及特异性引物PCR检测甲基化酶（ermA、ermB、ermC）、主动外排泵（mefA/E、msrA/B、mreA）等可转移耐药基因。结果 73株临床菌株中,耐药菌株35株（47.95%）,耐药菌株MIC范围为8 ~ 32 mg/L。在耐药菌株组发现ermB耐药基因（19株,占54.29%）和msrA/B耐药基因（9株,占25.71%）的阳性扩增,其中有2株（占5.71%）同时存在ermB基因和msrA/B基因阳性扩增,ermB基因和msrA/B基因的阳性扩增比率差异有统计学意义（P < 0.05）。临床敏感菌株组及标准菌株组均未发现23SrRNA的V区点突变及可转移耐药基因的阳性扩增。结论 ermB甲基化酶基因和msrA/B外派泵基因可能是导致解脲脲原体对红霉素耐药原因之一。