采用痰厚涂片法检查抗酸菌的体会

过去作抗酸菌的涂片检查,认为涂片不宜过厚,否则染料会遮盖标本影响检出率。实际上过去采用萋尼氏薄涂片取痰液标本太少,检出率不够高。采用厚涂片法,取痰液标本比薄片量多3～5倍,大约0.1毫升,从而提高了检出率。据北京市结核病防治所报道,330份痰标本同时采用厚涂片、浮游集菌、培养三种方法进行比较,检出率分别是21.9％、11.6％、21.3％,以厚涂片的检出率为最高。我们曾选择肺结核患者痰标本300份,每份标本用萋尼氏抗酸染色(即薄涂片法)和厚涂片抗酸染色两种方法,每种方法作两张痰片,结果是萋尼氏法检出率为27％,而厚涂片检出率为42％,厚涂片法明显高于薄涂片。     

痰培养标本贮存时间探讨

痰培养标本贮存时间对结核菌分离检出的影响,彭祝宪等曾有报道,冰箱贮存3、10、16天培养阳性率均为64.2％,与当天培阳率67.8％无显著差异。究竟痰标本能贮存多长时间而检出率不受影响,本文以门诊肺结核病人的50份痰培养标本,根据不同贮存时间与当日接种的检出结果做一比较,现报告如下:     

抗酸杆菌液基薄层涂片方法的临床应用研究

目的评价结核分枝杆菌液基薄层涂片法对不同类型标本的染色检查效能。方法对200份住院1周内结核病患者的标本同时进行液基薄层方法与直接涂片法镜检抗酸杆菌,其中包括148份晨痰标本,52份体液标本,比较2种方法的阳性检出率。结果排除16份重复标本,9份未进行分枝杆菌培养的标本,纳入的123份痰标本中,液基薄层法阳性率33.33%,直接涂片法阳性率24.39%,差异有统计学意义(P=0.012);培养阳性病例的痰标本中,液基薄层法阳性率58.82%,直接涂片法阳性率44.12%,差异有统计学意义(P=0.018)。52份体液标本中,液基薄层法阳性率13.46%,直接涂片阳性率1.96%,差异有统计学意义(P=0.041);培养阳性病例的16份体液标本中,液基薄层法阳性比例为7/16,直接涂片法阳性比例为1/16,差异有统计学意义(P=0.040)。结论基于液基薄层方法的抗酸杆菌涂片阳性率高于直接涂片法,对于体液标本阳性率提高显著,有利于临床上快速诊断,但对于痰标本的应用须综合考虑检验时长和检验费用。     

ZnSO4浮聚抗酸菌的实验观察

可疑结核病人标本涂片检查抗酸杆菌 ,仍是确诊结核病最为快速、简便和可靠的检查手段 ,其缺点检出率较低。本文取可疑结核病人痰、胸水和支气管肺泡灌洗液 (BAL )三样标本进行直接涂片、离心沉淀和 Zn SO4浮聚法实验比较 ,结果如下 :1　材料和方法1.1　标本来源　取我院门诊、住院可疑结核病人痰标本 16 0例 (份 ) ,胸水 12 5例 ,BAL 6 9例。1.2　方法　 1标本直接涂片法 ,取合格标本直接厚涂片 ,染色镜检抗酸杆菌。2离心沉淀法　取华氏管一支加痰标本 1～ 2 ml加 4% Na OH溶液 2倍于痰标本 ,经彻底消化后 40 0 0转 /分 ,2 0分钟离心。…     

比较3种采样方法在下呼吸道感染病原学诊断的价值

目的通过比较常规法留痰、改良式留痰及支气管肺泡灌洗(BAL)三种方法送检的标本合格率及病原菌检出率,探索它们在临床中的应用价值。方法收集下呼吸道感染住院病人送检的痰及支气管镜肺泡灌洗液标本,按采样途径的不同分为三组:对照组(A组):常规方法留痰,在入院后第二天早晨应用抗生素前,清水漱口后咳去第一口痰,然后用力咳出深部痰于无菌器皿中送检;改良留痰组(B组):采用西吡氯铵含片及含漱复方氯己定液后再留取痰标本;支气管肺泡灌洗液组(C组):经纤维支气管镜行支气管肺泡灌洗收集的标本培养。比较3种方法送检标本的合格率及病原菌检出率。结果 5年期间共有4,920份标本纳入本研究,其中A组3,338份、B组250份、C组1,332份。A组、B组及C组三种方法痰涂片的合格率分别为41.0%、70.4%和99.5%,B组及C组痰涂片的合格率均高于A组(P0.001),B组痰涂片的合格率也低于C组(P0.001);三组合格痰标本的病原菌检出率分别为30.1%、40.1%及87.2%,C组的病原菌检出率明显高于A组或B组(P0.001),而且B组病原菌的检出率也高于A组(P=0.004)。结论常规咳痰标本的合格率及病原菌检出率较低,西吡氯铵含片含服和复方氯己定含漱液具有提高痰标本合格率和病原菌检出率的作用,而支气管肺泡灌洗较常规法留痰、改良式留痰法明显提高下呼吸道感染标本的合格率和病原菌检出率,临床可结合实际应用。     

肺结核患者痰抗酸杆菌检出阳性率的影响因素

目的探讨肺结核患者痰涂片抗酸杆菌阳性检出率的影响因素。方法 79803份痰标本、3750份纤支镜灌洗液标本分别采用直接涂片镜检法和液基集菌法检出的阳性率进行分析。结果采用液基集菌法涂片后痰液的抗酸杆菌阳性检出率提高2.94%,纤支镜灌洗液的抗酸杆菌阳性检出率提高8.22%。同样方法获取的标本使用液基集菌法对纤支镜灌洗液涂片中抗酸杆菌阳性检出率的提高明显大于痰标本。结论痰涂片阳性检出率的提高,除与标本检测方法有关外,合格的痰液标本是提高抗酸杆菌阳性检出率的重要影响因素。     

对脓血样痰标本第二次查痰提高涂阳肺结核病人发现的研究

目的评价肺结核病人痰标本首次检查3个痰全部为阴性者而痰标本性状为脓样、血样痰、重新留取标本进行第二次检测,以提高痰菌检出的阳性率。方法采用直接厚涂片萋-尼氏法抗酸染色显微镜检对2422例肺结核病人痰标本中的脓血样痰进行第二次检测。结果2007年肺结核及可疑症状者查痰人数为1177,初次痰检阳性人数阳性检出率为11.4%,年度阳性检出率为12.4%,由于第二次查痰阳性率提高了1%。而2008年查痰人数为1245,初次痰检阳性人数阳性检出率为12.3%,年度阳性检出率13.3%,阳性率也提高了1%。结论首次检查3个痰全部为阴性的脓血样标本、进行第二次查痰,进一步提高涂阳肺结核病人的发现,达到控制肺结核传染源目的。     

2010年南充市肺结核病患者痰涂片镜检结果分析

目的分析南充市2010年肺结核登记病例痰涂片情况,为保证痰检质量提供借鉴。方法按中国结核病防治规划《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》进行痰涂片镜检。结果 2010年南充市初诊肺结核患者6 439人,其中检出涂阳患者2 382人,涂阳检出率为37%,不同性质的痰标本中干酪痰检出率最高为62.9%。不同留样时间痰标本中晨痰检出率最高为35.6%。结论不同性质、不同留样时间的痰标本阳性检出率不同,应指导患者留取正确的痰标本,提高阳性检出率。     

2946份痰标本抗酸杆菌检查结果与咳痰时间的关系

目的　探讨痰标本的咳痰时间对抗酸杆菌检查结果的影响。方法 采用痰直接厚涂片萋-尼氏抗酸染色显微镜(物镜100×)检查,统计不同咳痰时间的痰标本阳性检出率和全部阳性痰标本按咳痰时间的分布。结果 2946份痰标本中,清晨痰、夜间痰、即时痰阳性检出率有显著性差异。462份阳性痰标本中,按清晨痰、夜间痰、即时痰统计分布有非常显著意义。结论 咳痰时间对痰标本抗酸杆菌检出有很大影响,要强调清晨痰的送检。     

中国区县级结核病防治机构结核分枝杆菌涂片和培养结果多中心比对分析研究

目的 分析我国区县级结核病防治机构（简称“结防机构”）就诊患者痰涂片和培养结果之间的关系。方法 选取全国耐药性基线调查期间通过分层整群抽样方法随机抽取的18个区县级结防机构,自2007年4-12月连续纳入的1230例初治和复治涂阳患者痰标本,共计3550份,采取“三涂两培”的方法（即3份痰标本均为阳性,选取阳性级别高的2份痰标本进行培养;3份痰标本2份阳性,选取2份阳性痰标本进行培养;3份痰标本1份阳性,选取阳性标本和1份质量好的阴性标本进行培养）,完成涂片和培养试验,计算患者即时痰、夜间痰和晨痰不同痰标本的涂片阳性率和培养阳性率,分析涂片和培养结果的相关关系。 结果 结核病患者即时痰、夜间痰和晨痰涂片阳性率分别为78.8%（917/1164）、87.0%（1070/1230）和90.0%（1040/1156）,即时痰、夜间痰和晨痰培养阳性率分别为96.9%（504/520）、97.1%（881/907）和97.8%（709/725）,对2147份痰标本涂片结果阳性级别和培养结果阳性级别进行趋势χ²检验,发现两者存在一定的线性趋势相关关系 (χ²=206.2,P<0.01)。 结论 涂片结果在一定程度上可为培养结果提供依据,涂片阳性级别越高,培养阳性级别也越高。     

104 582份不同性状痰标本抗酸杆菌检出结果分析

目的比较疑似肺结核患者不同性状痰标本抗酸杆菌的检出率,提高对肺结核的诊断水平。方法对广西梧州地区各县（区）级结核病实验室104 582份疑似肺结核患者不同性状的痰标本检验结果进行分析。结果干酪痰涂片阳性检出率为37．9％;血痰涂片阳性检出率为48．9％;黏液痰涂片阳性检出率为8．3％;唾液涂片阳性检出率为2．6％。结论保证实验室的工作质量和痰标本的质量能提高实验室痰涂片阳性检出率,及早发现肺结核传染性病人。     

不同温度下应用荧光染色法检测抗酸杆菌的研究

荧光染色法检测抗酸杆菌是结核病实验室诊断的重要方法之一，我们对此进行了改进。本研究应用双盲法比较３７℃和室温下荧光染色法对抗酸杆菌检出率的影响，选取１１７例住院结核病人痰标本涂片染色镜检并培养，结果发现３７℃染色时涂片阳性率为６２．４％，而室温染阳性率分别为３９．３％，３７℃染色明显提高了是性检出率，实验同时发现培养阳性率仅为１６．２％，明显低于涂片镜检，特别是３７℃染色镜检的阳性率，涂（＋）培（     

肺结核患者痰标本质量对抗酸杆菌的影响及护理对策

目的探讨肺结核患者痰标本抗酸杆菌涂片检查的影响因素。方法对1034例患者的3102份痰标本做回顾性分析。结果3102份痰标本中抗酸杆菌阳性570份,阳性率18.4%。脓样痰、血痰两者性状对痰涂片阳性率较高。结论保证痰标本质量,提高抗酸杆菌阳性检出率的重要措施。     

护理干预对痰涂片结核杆菌检出率的影响

痰涂片结核杆菌检查是结核病诊断最经济、快速、有效的方法。痰涂片结核杆菌阳性检出率受痰检技术及痰标本的质量的影响。本文就护理干预对痰涂片结核杆菌检出率的影响进行总结如下。     

恒温扩增荧光检测技术在基层结核病实验室的应用价值

目的 探讨在基层结核病实验室采用恒温扩增荧光检测技术检测可疑肺结核患者痰标本诊断结核病的价值。 方法 搜集河南省4个项目点县级结核病实验室2014—2015年期间可疑肺结核患者的痰标本4242例,分别进行痰涂片、痰培养和恒温扩增荧光检测技术检测,比较恒温扩增荧光检测技术和传统痰涂片、痰培养方法的敏感度、特异度等。计数资料采用χ ²检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 纳入的4242例患者中,痰涂片检出阳性者351例,阳性检出率为8.21%(351/4276);痰培养检出阳性者576例,阳性检出率为13.47%(576/4276);恒温扩增荧光检测技术检出阳性者733例,阳性检出率为17.14%(733/4276)。3种检测技术的阳性检出率比较,差异有统计学意义(χ ²=153.412,P<0.001)。以痰培养试验结果为标准,恒温扩增荧光检测技术的敏感度和特异度分别为86.81%(500/576)、93.64%(3433/3666);阳性预测值为68.21%(500/733),阴性预测值为97.83%(3433/3509),与痰培养有较高的一致性(Kappa值为0.722)。痰涂片检测的敏感度为57.29%(330/576),特异度为99.43%(3645/3666),阳性预测值为94.02%(330/351),阴性预测值为93.68%(3645/3891);Kappa值为0.679。痰涂片与恒温扩增荧光检测技术检测痰标本的敏感度比较,差异有统计学意义(χ ²=153.336,P<0.001)。 结论 恒温扩增荧光检测技术检测的敏感度和特异度均明显高于传统的痰涂片,且其具有检测快速、操作简便等优势,便于在我国基层结核病实验室中推广应用。     

液基夹层杯技术检测抗酸杆菌应用性研究

目的评价液基夹层杯技术检测抗酸杆菌的应用价值。方法收集1 190例肺结核可疑症状者的642份晨痰标本和1 140份即时痰标本,每份痰标本均采用液基夹层杯技术、直接涂片查找抗酸杆菌技术和罗氏结核分枝杆菌培养技术进行检测,比较直涂法、液基法与培养法对痰标本的阳性检出率,并在以培养法为金标准的前提下考察液基法、直涂法的灵敏度和特异度,同时评价晨痰和即时痰、1次痰和2次痰对肺结核涂阳病人发现的差异。结果液基法、直涂法和培养法对642份晨痰标本的阳性检出率分别为23.5%、12.7%和26.6%,对1 140份即时痰的阳性检出率分别为18.1%、9.6%和23.3%。以培养法作为金标准,液基法的灵敏度和特异度分别为68.9%和95.8%,并与直涂法相对应的指标差异有统计学意义(P0.05)。液基法检测表明:642份晨痰阳性检出率显著高于1 140份即时痰阳性检出率(P0.05)。结论液基法能够提高痰标本的灵敏度,特异度较高,操作标准化,且所需设备简单,便于基层开展,是一种可能具有推广价值的检测方法。     

Bact／Alert3D系统与常用检测方法的比较

目的评价Bact／Alert3D系统与常用检测方法优略的比较。方法收集2006年5月～2007年4月期间确诊肺结核病人痰标本305份,每份标本同时做抗酸杆菌涂片（直接涂片、萋一尼氏染色）、分枝杆菌分离培养和Bact／Alert3D系统培养,对结果进行分析,总结3种方法对确诊肺结核患者的阳性检出率。结果305份确诊肺结核病人痰标本中,抗酸杆菌涂片、分枝杆菌分离培养、Bact／Alert3D系统培养的阳性检出率分别为24．3％、29．2％、42．9％。结论Bact／Alert3D系统以其较高的检出率、较快的检出时间,更有助于提高传染性肺结核的发现率。     

2010—2014年新疆焉耆县肺结核病疑似患者痰涂片检查结果分析

目的分析新疆焉耆县疑似肺结核病患者痰标本阳性检出率低的原因。方法采用国家《痰涂片阴性活动性肺结核的诊断治疗与管理》中的抗酸染色法,对2010—2014年10月焉耆县肺结核病疑似患者和随访患者进行痰涂片镜检。结果共采集检查各种痰标本4 880份,阳性755份,阳性率15.5%;检查咳血痰标本54份,阳性率最高55.6%;检查唾液痰标本2 014份,阳性率最低0.6%,不同性状的痰标本阳性检出率差异有统计学意义(χ2=839.3,P0.05);不同年份痰标本阳性检出率差异有统计学意义(χ2=71.12,P0.05)。结论提高肺结核病患者检出率的关键在于留取痰标本的质量、工作人员痰检操作的质量、痰检人员的规范操作以及规范检测能力的达标。     

环介导等温扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用评估

目的 进行环介导等温扩增法（LAMP法）快速检测结核分枝杆菌的临床验证与应用,评估该方法在结核病临床诊断中的效能。方法 选取广东6地市专业结核病防治机构（简称“结防机构”）的肺部不同疾病及健康人员的痰标本2129份,分别采用直接涂片法、罗氏固体培养法及LAMP法检测痰标本中结核分枝杆菌;另广州、汕头两市337例结核病患者的痰标本浓缩处理后进行实时荧光定量（qPCR）及LAMP两种方法检测。 结果 2129例痰标本中,直接涂片法、罗氏固体培养法和LAMP法的阳性检出率分别为13.2%（282/2129）、21.7%（463/2129）和20.3%(432/2129);同罗氏培养法相比,LAMP法灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值分别为89.1%(432/485)、95.5%(1570/1644)、85.4%(432/506)和96.7%(1570/1623);337例浓缩处理后的痰标本qPCR阳性率为35.0% (118/337),LAMP阳性率为35.9% (121/337);LAMP法同直接涂片法检测、罗氏固体培养法和qPCR法比较,检测结果实际一致率分别为87.9%（Kappa值＝0.612）、96.1%（Kappa值＝0.89）和91.4%（Kappa值＝0.812）。 结论 LAMP法用于痰标本中结核分枝杆菌检测,其效能同罗氏培养法及qPCR法相当,同直接涂片法相比,LAMP法能够大幅提高阳性检出率,具有很好的临床应用和推广前景。     

曼氏血吸虫感染的酶联免疫吸附试验:滤纸干血滴的耐久性

本文采用酶联免疫吸附试验(ELISA)研究曼氏血吸虫病人干滴血滤纸的保存期限。血样取自一名低排卵量(590个/ml)的患者和一名高排卵量(1260个/ml)的患者(Bell法检出)。按Bruce-Chwatt等1973年的方法制备成干滴血滤纸,室温干燥过夜后用5种方法保存:(1)30℃室温,60～80%相对湿度(RH);(2)30℃矽胶干燥器;(3)22℃,60～85%RH;(4)4℃冰箱;(5)-20℃冰箱。血清反应于8周内,每周测定一次,然后于第16周再测定一次。以过氧化物酶标记的抗人IgG结合物和邻苯二胺底物进行ELISA试