Calpain-1在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌中的表达及意义

目的：了解缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠心肌细胞凋亡和Calpain-1表达的变化。方法：采用改良的Rice法构建新生大鼠HIBD模型,64只大鼠随机分为对照组和HIBD后2、12、24 h及2、3、5、7 d组。应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,并计数凋亡指数（AI）,RT-PCR法和Western blot法检测各组大鼠心肌中Calpain-1mRNA及蛋白活性的变化。结果：对照组偶见凋亡细胞,HIBD组凋亡细胞均明显增多（P〈0.01）,3 d达凋亡高峰（P〈0.001）,此后开始降低,7 d仍高于对照组（P〈0.001）。与对照组相比,Calpain-1mRNA于HIBD后12 h开始增高（P〈0.001）,2 d达到高峰,3～5 d表达量仍维持在较高水平（P〈0.001）;蛋白活性自HIBD后2 h增高（P〈0.05）,3 d达高峰（P〈0.001）后开始降低,7 d与对照组无统计学差异（P〉0.05）;Calpain-1 mRNA及蛋白活性均与AI呈直线正相关（r=0.786,P〈0.01;r=0.853,P〈0.01）。结论：缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌中Calpain-1表达增强,且与细胞凋亡有关。     

母爱剥夺对大鼠海马PP1Cγ表达与神经发育的影响

目的 探讨母爱剥夺(MD)对PP1Cγ的表达改变和神经发育的影响.方法 新生雄性仔鼠随机分为MD组(35只)和正常对照组(24只),MD组在出生后1～21 d每天接受3h的MD.通过早期神经行为实验观察神经发育情况,水迷宫实验观察学习记忆的影响,实时荧光定量PCR分析PP1Cγ的基因表达改变.结果 MD能改变大鼠体质量、上肢运动协调能力和大鼠痛觉敏感性[(26.23±2.81)g,(30.38±3.85)g;(19.37±11.89)s,(22.39±17.62)s;(4.36±1.76)s,(5.26±2.55)s;P＜0.05],对神经反射影响较小[(0.83±0.30)s,(0.83±0.34)s;(3.68±1.63)s,(5.61±3.01)s;(3.00±0.00),(3.00±0.00);P＞0.05],对学习记忆能力影响不明显(P＞0.05).在出生后第22天MD可致海马PP1Cγ表达下降[(2.19±0.62),(3.52±0.86);P＜0.05],在出生后60d大鼠PP1Cγ表达无明显改变[(1.73±0.78),(1.33±0.34);P＞0.05],而在出生后第90天海马PP1Cγ表达升高[(2.85±0.34),(1.34±0.93);P＜0.05].结论 MD可致大鼠早期神经行为和海马PP1Cγ的表达发生改变,但对学习记忆的影响却很小.同时PP1Cγ表达随生长发育时期的不同而改变.

Abstract：

Objective To investigate the effect of maternal deprivation (MD) on neurobehavior and PP1Cγgene expression in hippocampus. Methods Male pups were randomly divided into MD group(thirty-five)and control group(twenty-four). From PND 1 to PND 21 ,pups in the MD groups underwent daily maternal deprivation for 3 h ( Postnatal day). Neurobehavior was observed to investigate neurodevelopment, Morris water maze was used to measure spatial learning and memory,and Real-Time quantitative PCR was employed to analyze PP1Cγ gene expression. Results Several significant deficiencies were observed in bodyweight and grasping reflex while a great enhancement in hot-plate test in rat pups suffering from MD( (26.23 ± 2.81 )g vs. (30. 38 ± 3.85 )g;( 19.37 ± 11.89) s vs. (22.39 ± 17.62 ) s; (4.36 ± 1.76 ) s vs. ( 5.26 ± 2.55 ) s; P ＜ 0. 05 ), but deficiencies in neurological reflexes were subtle ( ( 0.83 ±- 0.30 ) s vs. ( 0. 83 ± 0. 34 ) s; ( 3.68 ± 1.63 ) s vs. ( 5.61 ± 3. 01 ) s;( 3.00 ± 0.00 ) vs. ( 3.00 ± 0. 00); P ＞ 0. 05 ). MD had a subtle influence on spatial learning and memory (P ＞0.05). Meanwhile,MD could lead to PP1Cγ expression down-regulation on PND 22 ( (2.19 ±0.62) vs. (3.52 ±0.86), P＜0. 05)which was in line with early neurobehavior results. No difference was found compared with MD group and control group on PND60 ( ( 1.73 ± 0. 78 ) vs. ( 1.33 ± 0. 34); P ＞ 0.05 ). However, there was the up-regulation of PP1Cγexpression on PND 90 ( (2.85 ± 0. 34) vs. ( 1.34 ± 0.93 ); P ＜ 0.05 ). Conclusion MD alters early neurobehavior and hippocampal PP1Cγgene expression in the Wistar rats,but has a subtle effect on learning and memory. At the same time,MD can make PP1Cγexpression in the hippocampus varying with the age.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的远期影响

【目的】探讨早期和延迟高压氧（HBO）治疗对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠的远期影响。【方法】7日龄大鼠37只随机分为对照组（n=10，假手术处理）、HIBD组（n=9）、EHBO组（n=9，HIBD模型后0．5～1h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续2次）和LHBO组（n=9，HIBD模型后48～72h开始2个绝对大气压HBO治疗，稳压30min／次，间隔24h，连续5次），以大鼠远期的学习记忆功能（Morris水迷宫实验）和海马形态组织学（海马锥体细胞层结构和CAl区存活神经元数）来判断干预效果。【结果】HIBD组大鼠的学习记忆功能严重不良伴海马结构严重受损，与对照组相比，水迷宫实验中平均逃逸潜伏期延长（56．35S与23．07S，P〈0．05）、搜索时间和搜索路程缩短（分别为29．29S与51．21S，548cm与989cm．均P〈0．05）、海马存活神经元减少（100个／mm与183个／mm，P〈0．05）；早期HBO治疗明显减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍（潜伏期：39．17s与56．35s；搜索时间：36．84s与29．29s；搜索路程：686cm与548cm，P〈0．05），并使海马存活神经元增多（131个／mm与100个／mm，P〈0．05），延迟HBO治疗不能减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍（潜伏期：56．25s与56．35。；搜索时间：30．11s与29．29s；搜索路程：572cm与548cm，P〉0．05），海马存活神经元无增多（95个／mm与100个／mm，P〉0．05）；大鼠在水迷宫实验中的逃逸潜伏期与海马锥体细胞层存活神经元数呈直线负相关（r=-0．819，P〈0．01）。【结论】早期HBO治疗可减轻HIBD程度，并可改善HIBD所引起的远期学习记忆功能缺陷，延迟HBO治疗对HIBD无效。     

母爱剥夺诱导的抑郁大鼠海马miR-16的表达

目的:研究母爱剥夺是否诱发成年大鼠抑郁样行为表现,miR-16是否参与母爱剥夺诱发抑郁的病理过程。方法:在SD大鼠出生后第1天按窝随机分为母爱剥夺组(n=17)和正常对照组(n=17)。母爱剥夺组大鼠在出生后第1至14天每天接受6 h的母爱剥夺应激,正常对照组大鼠不接受任何实验处理。在大鼠13周龄时采用强迫游泳和糖水偏爱实验评定大鼠的抑郁水平;采用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠海马miR-16的表达水平。结果:在强迫游泳实验中,母爱剥夺组大鼠的被动漂浮时间显著长于对照组大鼠,糖水偏爱率显著低于对照组(P<0.05);与对照组比较,母爱剥夺组大鼠海马内miR-16的表达水平显著增加(P<0.05),miR-16表达水平与抑郁样行为水平显著相关(P<0.05)。结论:母爱剥夺能使大鼠成年后表现出抑郁样行为,海马内miR-16表达水平升高,miR-16可能参与母爱剥夺诱发大鼠抑郁样行为的病理过程。     

缺氧缺血性脑损伤的治疗进展

围产期窒息所致缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是新生儿死亡和残疾的主要原因。HIBD的发病机制复杂，治疗方法各不相同，现就HIBD的治疗进展作一综述。     

缺氧诱导因子1α 在宫内缺氧缺血性脑损伤的胎鼠脑组织中的表达

 目的探讨宫内缺氧缺血性脑损伤后不同复氧时间胎鼠脑组织中缺氧诱导因子1α（HIF-1α）蛋白的表达规律。方法孕19 d Wistar大鼠36 只,随机分为对照组和8 个实验组,每组4 只。实验组建立宫内缺氧缺血性脑损伤动物模型后,分别于子宫恢复血供后0、0.5、2、4、8、12、24 及48 h 取胎鼠脑组织;对照组只暴露双侧子宫15 min 后,取胎鼠脑组织,应用免疫组织化学方法检测HIF鄄1琢蛋白的表达。结果实验组缺氧诱导因子1琢蛋白表达在术后8 h 明显升高,12 h 达到高峰,24 h 后明显下降。结论HIF鄄1琢在宫内缺氧缺血性脑损伤的胎鼠脑组织中的表达随着复氧时间的延长呈现先升高后降低的趋势。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型的制作

OBJECTIVE: To duplicate a model of hypoxic-ischemic brain damage (HIBD) in the neonatal rat to create unilateral cerebral damage. METHODS: Healthy 7-day-old Sprague-Dawley (SD) rats were used as research subjects and randomly divided into 3 groups: the control group (n = 18), the sham operated group (n = 8), and the HIBD group (n = 19). The HIBD model was produced according to the traditional Rice model and the brains were collected when the rats were 14 days old. The weight, left/right brain weight ratio, behavioral ability, and neuropathologic changes were studied in each group. RESULTS: 1. The weight in the HIBD group increased obviously slowly and was lower than that in the control group and sham operated group (P < 0.01). 2. The abnormity of behavioral ability was found in the HIBD group, including turnover unability (63.16%), spontaneously turn left round (89.47%), convulsion (47.37%), and so on. 3. The left/right brain weight ratio was significantly lower in the HIBD group than in the other two groups (P < 0.01). 4. The pathologic features in the HIBD group were as follows: atrophy of left brain (84.21%), softening of left brain (31.58%), liquefaction of left brain (52.63%), and cavum brain (15.79%). HE staining showed the neuron damage and the proliferation of neuroglial cells in the HIBD group. There was no obvious abnormity found in the control group and the sham operated group. CONCLUSION: The model of HIBD is successful and worthy of spreading, with its cheap price, easy duplication, and higher successful rate. The reasonable ambient temperature should be kept in 36-37 degrees C.     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠IL-16的表达及意义

目的观察缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠白细胞介素-16（IL-16）表达的变化。方法建立新生大鼠缺氧缺血（HI）模型,实验分为假手术组、HIBD组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测假手术组手术后和HIBD组缺氧缺血后3h、12h、24h、3d、7d、14d、28d脑组织匀浆中IL-16的水平。结果IL-16在HIBD组3h开始上升,24h达高峰,3d开始下降,28d基本恢复正常。与假手术组相比,HIBD组的IL-16水平在缺氧缺血后3h、12h、24h、3d、7d、14d均明显升高（P〈0．01）,而28d无明显差异（P〉0．05）。结论HIBD新生大鼠IL-16蛋白表达的增加出现早、持续时间长,表明IL-16参与HIBD的发病过程。     

新生儿缺血缺氧性脑病免疫功能研究

目的：检测３８例缺血缺氧性脑病患儿周血免疫球蛋白、Ｃ３、Ｔ淋巴细胞亚群,ＩＬ－２及ＳＩＬ－２Ｒ。方法：血清免疫球蛋白、补体Ｃ３、Ｔ淋巴细胞亚群ＳＩＬ－２Ｒ以及ＩＬ－２活性分别采用单向免疫扩散法,ＡＰＡＡＰ、ＭＴＴ比色法以及ＥＬＩＳＡ法。结果：与对照组比较,血清ＩｇＭ及补体Ｃ３、ＣＤ３、ＣＤ４以及ＣＤ４／ＣＤ８和ＩＬ－２明显降低（Ｐ〈０．０１）。而ＳＩＬ－２Ｒ值明显升高（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ６细胞无     

超声诊断新生儿缺血缺氧性脑病的价值

目的探讨超声检查在新生儿缺血缺氧性脑病诊断的可行性。方法回顾性分析64例应用二维超声诊断为新生儿缺血缺氧性脑病的临床及影像资料。结果64例患者均不同程度显示脑结构模糊不清、脑实质内回声增强区或囊腔形成等声像表现。结论在神经系统影像诊断方面,由于超声成像无副作用、价格经济、方便灵活,患儿避免X线损害,也不需要频繁地保持镇静状态,所以在儿科神经系统影像诊断方面有其独特的作用。     

超声诊断新生儿缺血缺氧性脑病的价值

目的探讨超声检查在新生儿缺血缺氧性脑病诊断的可行性。方法回顾性分析64例应用二维超声诊断为新生儿缺血缺氧性脑病的临床及影像资料。结果64例患者均不同程度显示脑结构模糊不清、脑实质内回声增强区或囊腔形成等声像表现。结论在神经系统影像诊断方面,由于超声成像无副作用、价格经济、方便灵活,患儿避免X线损害,也不需要频繁地保持镇静状态,所以在儿科神经系统影像诊断方面有其独特的作用。     

新生儿缺氧缺血性脑病的磁共振成像研究进展

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是新生儿期发病率较高又可导致死亡或致残的严重疾病。由于磁共振成像有极好的对比分辨率,并且无创、无X线辐射的危害,因此是HIE最适合的影像学检查方法。近年来随着磁共振成像技术的飞速发展,特别是磁共振成像的功能成像如扩散加权成像、灌注成像、扩散张量成像、磁共振波谱成像等新技术的出现为更加深入地研究HIE的病理基础提供了可能,为早期准确诊断及评估预后提供了一种可靠的手段和方法。现将磁共振成像新技术对新生儿HIE的临床应用价值及研究进展予以综述。     

新生儿缺氧缺血性脑病早期诊断的研究现状

新生儿缺氧缺血性脑病的早期干预关键是早期诊断,本文从临床依据、影像和实验室检查、脑血氧监测的应用及早产儿诊断标准等方面对新生儿缺氧缺血性脑病的早期诊断进行了综述。     

230例新生儿缺氧缺血性脑病10年回顾性调查及围产因素分析

目的分析围产因素对新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)发病的影响。方法对230例HIE惠儿性别、胎龄、出生体重、临床表现、母亲孕期病史及分娩情况进行回顾性分析：结果导致HIE发生的产前异常因素以不良分娩史(25．81％)、妊娠高血压综合征(23、66％)、胆汁淤积症(17．20％)、双胎(10．75％)、前置胎盘(7．53％)为主。产时异常因素以羊水污染(25．36％)，胎膜早破(16．75％)，胎心改变(15．79％)，脐带异常(14．35％)，第二产程延长(13．88％)为主。同时HIE的发生与分娩方式、早产、低出生体重、Apgar评分相关。结论增强孕妇自我保健意识，加强围生期保健，提高基层医疗机构产科质量，根据不同产妇和胎儿的具体情况，采取适当的个体化干预措施，对预防和减少新生儿HIE的发生，降低围产儿死亡率和致残率具有重要意义。     

新生儿缺氧缺血性脑病59例临床分析

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)临床分度和CT分度的不同,及对预后的影响。方法对59例有围产期窒息史新生儿的诊断、临床资料、CT影像和预后,进行回顾性分析。结果当CT分度和临床分度均为重度时,有2例死亡,其余存活者均有不同程度后遗症,发生率为100%;在CT为重度而临床分度为中度时,后遗症的发生率为66.7%;而在CT为中度临床为重度组,后遗症发生率为33.3%;CT分度和临床都为中度时,后遗症发生率为20%。上述数据说明,HIE的病情和预后与CT的分度密切相关。结论 CT分度对病情的判断及预后的评估有重要的价值,在临床分度与CT分度不符时,对患儿病情的判断和预后的评估应以CT诊断和分度为主。     

缺氧缺血性脑病患儿脑脊液中IL-18的检测及意义

目的研究HIE患儿脑脊液中IL-18的变化及其临床意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法，对42例足月缺氧缺血性脑病患儿脑脊液中IL-18进行检测，其中轻度HIE23例，中重度HIE19例。同时检测38例正常足月新生儿脑脊液中IL-18的水平。结果缺氧缺血性脑病患儿脑脊液中IL-18的水平比正常新生儿脑脊液中IL-18的水平显著增高。结论脑脊液中IL-18的水平可能参与缺氧缺血性脑病的发病过程，为IL-18BP治疗HIE提供理论基础。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清肌钙蛋白I的水平检测及其临床意义

目的研究新生儿缺氧缺血性脑病血清心肌肌钙蛋白I的水平变化与临床意义。方法50例HIE患儿（轻度14例，中度30例，重度6例），分别于住院第1天和第10天取静脉血和50例正常足月新生儿脐血用于检测cTnI水平。结果HIE患儿住院第1天时血清中cTnI含量明显高于对照组的脐血（P〈0．01）；轻度HIE组cTnI含量与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）；中、重度HIE患儿与轻度患儿及对照组比较血清cTnI含量有显著性差异（P〈0．05）；HIE患儿越重，血清cTnI含量则越高；中、重度组HIE于住院治疗后10d时均比住院1d时显著下降（P〈0．05）。结论HIE组患儿血清cTnI明显高于对照组，说明HIE患儿存在心肌损伤，其对治疗和预后的判断有着重要的指导意义。     

心肌酶谱在新生儿缺氧缺血性脑病时的变化及临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)时血浆心肌酶谱的变化及临床意义。方法将54例HIE患儿分轻、中、重度组与41例正常新生儿脐血对照,分别采用连续监测法和免疫比浊法测定血浆中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的活性,并进行统计分析。结果HIE时血浆AST、LDH、CK、α-HBDH活性随着病情的加重而相应升高,尤以CK、CK-MB升高明显,与临床分度呈正相关。重度组较正常对照组明显升高,差异有显著性(P<0.01);中度组除CK-MB外,其余酶活性较正常对照组明显升高,差异有显著性(P<0.01);轻度组与正常对照组比较差异均无显著性。结论心肌酶谱的检测可作为HIE临床分度的指标之一。监测患儿心肌酶谱的变化,能较好地协助临床早期诊断HIE时有无心肌损伤及损伤程度,对判断病情、估计预后具有重要的临床意义。