针刺对应激性高血压前期大鼠肾脏基因表达的影响

目的 以应激性高血压前期大鼠为模型,运用基因芯片技术和生物信息学分析技术,研究针刺对其肾脏基因表达的影响.方法 将9周龄雄性Wistar大鼠,随机分为空白组、模型组、针刺组.模型组和针剌组运用噪声结合足底电击刺激的造摸方式,造模同时,针刺组针刺曲池穴、太冲穴进行干预,模型组和空白组每天只做与针刺组相同的抓取刺激.记录在造模前1天、第3、5、7、9、11天大鼠的血压变化,11d后取大鼠左肾.运用Gene Chip Rat Gene 2.0 ST芯片对应激性高血压前期模型大鼠肾组织进行基因表达谱的检测,分别找出空白组与模型组之间及模型组与针刺组之间的差异表达基因.运用GO数据库对各组间差异表达基因进行基因功能富集分析.结果 造模开始后,空白组血压基本稳定;第3天开始模型组血压开始上升,与正常组比较有统计学意义(P＜0.01),并出现行为改变.针刺干预第5天开始,针刺组血压低于模型组(P＜0.05).芯片分析显示:与空白组相比,模型组共筛选出的差异表达基因有46个上调,有48个下调;与模型组相比,针刺治疗后差异表达基因有11个上调,有45个下调;基因功能富集分析显示差异基因与生物调节,刺激反应,多细胞生物体过程,代谢过程,免疫系统进程,受体活性,调节酶,转运蛋白活性等功能有关.结论 针刺太冲、曲池穴对于应激性高血压前期大鼠具有一定的降压效应,并可能通过下调Cntn4,Spta1,Mir10,Fbxo15基因来调节血压并对其早期肾脏损害有一定的保护作用.     

不同经穴针刺对自发性高血压大鼠降压效应的观察

【目的】探讨不同经穴针刺对自发性高血压大鼠(SHR)的降压效应及累积效应。【方法】将105只SHR随机分为模型组、非穴组、内关组、太冲组、光明组、太溪组、蠡沟组,每组15只。各针刺组以毫针刺入相应穴位后,留针30 min,每日1次,共15次;模型组不予针刺。各组大鼠分别在针刺l、3、7、15 d时进行血压测量。【结果】非穴针刺无明显降压作用。针刺3、7、15 d时,太冲组、内关组、光明组SHR收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)下降幅度均显著大于模型组,差异有统计学意义(P0.05);针刺15 d时,太冲组SBP降幅显著优于内关组、蠡沟组、太溪组、光明组,差异有统计学意义(P0.05);太冲组DBP、MBP降幅显著高于太溪组、光明组(P0.05),与内关组、蠡沟组大鼠DBP比较差异无统计学意义(P0.05)。与治疗前比较,针刺1、3、7、15 d时,太冲组SBP、DBP、MBP显著下降,差异均有统计学意义(P0.05),其中针刺15 d时SBP降幅优于针刺1 d、3 d、7 d,DBP、MBP降幅优于针刺1、3 d,差异均有统计学意义(P0.05)。【结论】针刺太冲穴对SHR血压的调节作用优于针刺内关、太冲、光明、太溪、蠡沟等单穴和"非穴",且针刺降压作用具有一定的时间累积效应。     

针刺太冲穴对自发性高血压大鼠收缩压、血浆内皮素-1和血清NO的影响

目的 观察针刺太冲穴对自发性高血压大鼠(SHR)收缩压、血浆内皮素-1(ET-1)及血清NO含量的影响,以对其降压机制作初步探讨.方法 选用9周SHR 28只,随机分为模型组、太冲组、冲阳组和非经穴组(n=7),并以同体重正常血压SD大鼠(n=7)作为正常组.连续针刺治疗7 d后,测量收缩压,并于第7天测定血浆ET-1和血清NO的水平.结果 (1)各组大鼠针刺前和针刺第1天,模型组、太冲组、冲阳组以及非经穴组收缩压均与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01).到针刺第7天,太冲组和非经穴组大鼠收缩压与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01),与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01),而冲阳组与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05).此外,太冲组、模型组第7天的收缩压与第1天比较差异均有统计学意义(P＜0.01),冲阳组、非经穴组第7天的收缩压与第1天比较差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)模型组血浆ET-1和血清NO水平与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01),经针刺治疗7 d后,太冲组血浆ET-1和血清NO水平与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.01),与正常组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而冲阳组、非经穴组大鼠血浆ET-1水平与模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05),与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 针刺太冲穴能显著降低SHR收缩压,但未能使其收缩压恢复至正常水平,其降压机制可能与降低SHR血浆ET-1和升高血清NO的含量有关.     

针刺太冲穴对自发性高血压大鼠小脑差异蛋白表达的影响

目的 探讨针刺太冲穴对自发性高血压(SHR)大鼠小脑差异蛋白表达的影响.方法 选用SHR大鼠55只,随机分为模型组、非穴组、曲泉组、太冲组、冲阳组5组,每组11只;另取Wistar大鼠8只,作为正常组.模型组和正常组只抓取不针刺,其余4组相应针刺曲泉穴、太冲穴、非穴和冲阳穴,1次/d,共7 d,记录实验前后各组小鼠的血压变化,后将小鼠处死取材,获得小脑组织,通过双向电泳和质谱检测观察蛋白表达结果.结果 治疗前后血压对比模型组的血压有显著升高(P<0.05),太冲组舒张压呈下降趋势,其他针刺组的收缩压和舒张压有略微升高,但均无统计学意义(P>0.05);双向电泳和质谱结果显示太冲穴组针刺后小脑区蛋白表达点上调明显多于曲泉组、冲阳组及非穴组.结论 针刺太冲穴后促使小脑组织蛋白表达发生差异性变化,其差异蛋白点功能包括促进代谢产物如过氧化物的消除、加快遗传信息转化、促进神经再生等,为神经-内分泌-免疫网络假说提供佐证.     

电针太冲、足三里对自发性高血压大鼠心肌纤维化的改善作用

目的 观察电针对于自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）收缩压及左心室血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）,细胞外信号调节激酶1/2（extracellular-regulated kinase 1/2,ERK1/2）,胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ含量的影响,探讨电针抑制高血压心肌纤维化的作用机制。方法 将36只SHR随机分为模型组、电针组、药物组,每组12只,另设12只Wistar大鼠作为空白组。模型组和空白组只进行抓取和固定刺激,电针组大鼠选取双侧太冲、足三里穴进行电针刺激,药物组服用氯沙坦钾。实验周期21 d。实验结束后测量大鼠尾动脉收缩压,Masson染色观察大鼠左心室病理改变,酶联免疫吸附法检测大鼠左心室AngⅡ含量,qPCR检测大鼠左心室ERK1/2、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ mRNA表达水平。结果 染色结果显示,电针组及空白组左心室心肌组织形态正常,模型组心肌组织间大量胶原纤维增生,药物组心肌组织间可见少量胶原纤维。与空白组比较,各时点模型组大鼠尾动脉收缩压均显著升高（P＜0.05);与模型组比较,治疗第14天、第21天电针组、药物组收缩压显著降低（P＜0.05）。与空白组比较,模型组大鼠左心室AngⅡ含量,ERK1/2、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ mRNA表达水平均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,电针组、药物组大鼠左心室AngⅡ含量,ERK1/2、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ mRNA表达水平均显著降低（P＜0.05）。结论 电针能够对AngⅡ、ERK信号通路产生影响,进而下调大鼠心肌胶原蛋白mRNA的表达,从而起到抑制高血压大鼠心肌纤维化的作用,这可能是针刺能够有效减缓高血压心脏损伤的机制之一。     

以基因芯片探究针刺泻法对应激性高血压前期大鼠肾脏基因表达的影响

目的：运用基因芯片技术检测针刺泻法对应激性高血压前期大鼠肾脏基因表达的影响并分析其内在机理。方法雄性 Wistar 大鼠27只,随机分为空白组、模型组、模型＋针刺泻法组,每组9只。造模方法：噪声结合足底电击刺激,周期为14 d。造模同时针刺泻法组取曲池穴、太冲穴进行干预,模型组和空白组每天做与针刺组相同的抓取刺激。在造模前1天、第3、5、7、9、11、13、15天测量大鼠的血压,并观察其生理学行为学改变。第15天量取血压后取材,用 Rat Gene 2.0 Array technology 进行基因芯片分析。结果造模期间空白组血压始终保持正常水平。模型组在造模第3天即突破了120 mmHg（P ＜0.01）,并在后来的第5、7、9、11、13、15天持续升高至较高水平（P ＜0.01）。造模过程中大鼠出现尖叫、咬架、小便变黄、毛质粗糙、眼睛充血等变化,且血压始终处于120~139 mmHg 范围内,说明造模成功。模型＋针刺泻法组的血压值在第5、7、9、11、13、15天均明显低于模型组。基因表达频谱结果显示：与模型组相比,模型＋针刺泻法组有106个基因表达升高,92个基因表达降低。其中高血压相关基因 CYP1A1、IGFBP-1的表达也发生相应变化。结论针刺太冲、曲池并施以泻法,可明显降低应激性高血压前期大鼠的血压,并影响其肾脏的基因表达。     

针刺太冲穴对自发性高血压大鼠收缩压、血浆ET-1和血清NO的影响

摘要： 目的:观察针刺太冲穴对自发性高血压大鼠（SHR）收缩压、血浆内皮素（ET-1）及血清NO含量的影响,以对其降压机制作初步探讨。方法：选用9周龄SHR28只,随机分为模型组、针刺太冲、针刺冲阳和针刺非经穴组（均n=7）,并以同体重正常血压SD大鼠（n=7）作为正常组。经过连续针刺治疗7天后,测量收缩压,并测定血浆ET-1和血清NO的水平。结果：（1）模型组血压显著高于正常组（P＜0.01）。经针刺治疗7天后,针刺太冲组大鼠收缩压显著低于模型组[(140.81±4.47)mmHg vs (166.58±9.05)mmHg,P＜0.01],但仍高于正常组[(140.81±4.47)mmHg vs (99.17±9.24)mmHg,P＜0.01]。（2）针刺太冲组大鼠针刺第7天收缩压显著低于第1天[(140.81±4.47)mmHg vs (154. 56±10.59)mmHg,P＜0.01]。（3）针刺太冲能显著降低SHR血浆ET-1水平[(93.19±4.39) pg/mL vs (105.82±6.82)pg/mL,P＜0.05]和升高血清NO的水平[(45.01±8.1)umol/L vs (28.28±4.86)umol/L,P＜0.01]。结论 针刺太冲穴能降低SHR收缩压,但未能使其收缩压恢复至正常水平,其降压机制可能与降低SHR血浆ET-1和升高血清NO的含量有关。     

当归对原发性高血压大鼠脑组织基因表达谱的影响

目的探讨当归对原发性高血压大鼠(SHR)大鼠脑组织基因表达谱的影响。方法将SHR分为当归组、模型对照组,并将同周龄的Wistar大鼠作为正常对照组。测定用药前后不同模型组尾动脉收缩压,分组给药4周后,取大鼠脑组织,提取RNA送博淼生物科技(北京)有限公司进行表达谱的测定。结果当归可降低SHR的血压水平。当归组与模型组比较,当归组的变化基因有326个,其中184个基因表达上调,142个基因表达下调:信号值变化幅度2倍以上的差异表达基因85个,上调的基因53个,下调的基因32个,在85个差异表达基因中,已知生物学过程的基因有38个(上调23个,下调15个),主要与信号传导途径的基因相关,另外也与代谢、转录及蛋白质结合等基因相关。结论当归具有一定的降压作用,并对SHR脑组织基因表达谱产生影响,可能主要通过信号传导途径发挥作用。     

利用RNA-Seq技术筛选脑血流自动调节相关基因

目的利用RNA-Seq技术筛选并分析与脑血流自动调节相关的基因。方法健康雄性SD大鼠随机分为高血压模型组(14只)和假手术组(6只),高血压模型组大鼠进行双侧肾动脉夹闭,假手术组行开腹手术,不夹闭肾动脉。术后8周将大鼠麻醉,以10～15 mm Hg为一级降低血压,同步记录股动脉血压、颈动脉血流量以及大脑中动脉血流速度,绘制自动调节曲线,并计算脑血流自动调节下限(lower limit of autoregulation,LLCA)。其后取大鼠脑组织进行转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq),比较两组基因表达差异。根据LLCA升高程度将模型组分为两个亚组,高LLCA亚组与低LLCA亚组,高LLCA与假手术组筛选差异表达基因。结果完整采集数据模型组6只,假手术组3只。模型组收缩压、平均动脉压以及LLCA均显著高于假手术组(P0.05)。模型组中高LLCA亚组与低LLCA亚组收缩压、平均动脉均无明显差异,但高LLCA组的LLCA值高于低LLCA组,差异具有统计学意义(P0.05)。模型组与假手术组相比有45条基因差异表达,其中上调基因30条,下调基因15条,高LLCA亚组与假手术组比较有478条基因差异表达,其中上调基因289条,下调基因189条。两两比较的交集差异基因共有38条,功能主要涉及趋化作用、平滑肌细胞分化、肌管细胞发育、整联蛋白介导的信号通路等。结论高血压大鼠与正常大鼠共有45条基因差异表达,其中高LLCA的高血压大鼠有478条基因表达发生变化。     

针刺对强迫游泳应激抑郁模型大鼠海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、c-Jun 表达的影响

目的探讨针刺对海马神经元凋亡的干预作用及是否涉及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal Kinase,JNK)信号通路,以揭示针刺的相关抗抑郁机制。方法将36只SD大鼠随机分成空白组、空白阻断剂组、模型组、模型阻断剂组、针刺组、针刺阻断剂组,阻断剂为JNK通路阻断剂SP600125,每组6只,采用强迫游泳应激结合孤养方法造模,针刺干预选取百会、印堂穴,每次20min,每天1次,治疗2 d。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠海马JNK信号通路的底物c-Jun蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测大鼠海马凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)基因表达水平。结果与空白组比较,Caspase-3基因表达、c-Jun蛋白表达,空白阻断剂组无显著差异(P0.05),模型组显著升高(P0.01);与模型组比较,模型阻断剂组、针刺组、针刺阻断剂组Caspase-3基因表达均显著降低(P0.01),模型阻断剂组、针刺组、针刺阻断剂组c-Jun的蛋白表达显著降低(P0.05、P0.05、P0.01)。结论针刺干预治疗可能通过抑制大鼠海马JNK信号通路活性,降低c-Jun的蛋白水平,减少促凋亡蛋白Caspase-3基因表达,从而抑制海马神经元凋亡,这可能是针刺抗抑郁作用所涉及到的分子机制之一。     

Effect of acupuncture at Renying (ST 9) on gene expression profile of hypothalamus in spontaneously hypertensive rats

OBJECTIVE

To investigate changes in gene expression profiles in the hypothalamus related to the effects of acupuncture at the Renying (ST 9) acupoint in spontaneously hypertensive (SH) rats.

利用基因芯片筛选动脉钙化大鼠差异表达基因

目的：利用基因芯片技术筛选正常大鼠和动脉钙化大鼠腹主动脉组织中差异表达基因及检测转化生长因子－β（TGF－β）、基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达量,以探讨动脉钙化发病的可能机制。方法通过皮下注射大剂量维生素D3建立大鼠动脉钙化模型,采用Von Kossa染色观察动脉钙化程度,基因芯片技术筛选两组大鼠差异表达基因及检测TGF－β、MMP－2和MMP－9的表达量。结果与对照组相比,模型组差异表达的基因有710条,其中上调基因344条,下调基因366条。模型组TGF －β1、TGF－β3和MMP－2的表达均明显上调,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而TGF－β2和MMP－9的表达则无明显差异（P＞0.05）。结论动脉钙化的形成是多基因共同作用的结果,其中TGF－β、MMP－2和MMP－9对动脉钙化的发生发展起着至关重要的作用,其机制还有待进一步研究。     

五子衍宗丸提高大鼠睾丸支持细胞抵抗热应激能力的基因表达谱分析

目的采用全基因组表达谱芯片数据分析五子衍宗丸提高大鼠睾丸支持细胞抵抗热应激能力的作用机制。方法将原代培养的睾丸支持细胞分为五子衍宗丸组、正常组和模型组,分别给予五子衍宗丸溶液和等体积的PBS,培养24 h后,五子衍宗丸组和模型组给予43℃水浴15 min,正常组给予37℃水浴15 min处理。分别提取3组细胞总RNA,通过基因芯片技术进行数据分析。结果在支持细胞全基因组表达谱中,五子衍宗丸组与模型组比较共有1 203个差异表达基因,其中下调基因有697个,上调基因506个;正常组与模型组比较共有473个差异表达基因,其中上调基因168个,下调基因305个;与模型组相比,五子衍宗丸组和正常组共同下调的基因中RGD1305298、Trpt1、Dll3、Abi3和Ppp1r12b共5个基因表达差异明显,共同上调的基因中Dusp7表达差异明显,这些差异表达基因涉及到细胞周期、细胞凋亡、细胞代谢、细胞黏附等分子功能及Notch信号通路、细胞骨架调节、MAPK信号通路和紧密连接等通路。结论五子衍宗丸可能是通过维持支持细胞间紧密连接,抑制支持细胞凋亡,促进支持细胞分化成熟来提高睾丸支持细胞热应激的能力。     

当归挥发油对自发性高血压大鼠心肌组织中微小RNA差异表达谱的影响

目的：探讨当归挥发油对自发性高血压大鼠（SHRs）心肌组织中微小RNA（miRNA）表达谱的影响,阐明当归挥发油发挥作用的可能机制。方法：将SHRs分为模型组、卡托普利组和当归组,取同周龄的正常Wistar大鼠作为对照组,采用无创套尾法测定大鼠尾动脉收缩压,给药4周后,采用Affymetrix miRNA 4.0 芯片测定心肌组织中miRNA表达谱,采用京东基因与基因组百科全书（KEGG）富集法分析差异表达的miRNA靶基因。结果：给药前模型组大鼠收缩压明显高于对照组（P < 0.05）,连续服药1~4周后,卡托普利组和当归组大鼠收缩压明显低于模型组（P < 0.05）。与模型组比较,当归组大鼠差异表达的miRNA29个,其中表达上调的miRNA13个（Ratio>2.0,P < 0.05）,表达下调的miRNA16个（Ratio<0.5,P < 0.05）。KEGG富集分析,miR-19a、 let-7i和miR-181c与胰岛素信号通路有关联（P < 0.05）,let-7i 、miR-181a和miR-455与血管内皮生长因子（VEGF）信号通路调控有关联（P < 0.05）,miR-122、miR-181a、miR-200b、miR-181c、let-7i和miR-19a与细胞凋亡有关联（P < 0.05）。结论：当归挥发油可降低SHRs血压 ,对SHRs心肌组织中miRNA表达谱产生影响,可能通过调节胰岛素信号通路及VEGF信号通路相关miRNA发挥血压调节作用。     

电针治疗周围神经损伤后损伤局部差异表达基因分析

[目的] 通过分析电针治疗周围神经损伤后损伤局部差异表达基因,进一步阐明电针治疗周围神经损伤机制。[方法] 选取大鼠坐骨神经横断伤模型为研究对象,随机分为空白组、模型组、电针模型组,于电针6 d后取损伤处坐骨神经,通过高通量技术筛选差异基因,对差异基因进行GO功能分析、KEGG通路分析。[结果] 模型组与空白组相比,上调差异基因3 001个,下调差异基因1 169个。电针模型组与模型组相比,表达上调差异基因24个,下调差异基因80个,结合GO分析结果和KEGG富集分析结果,筛选出了可能与电针治疗周围神经损伤相关的8个通路：白细胞跨内皮迁移通路、γ-氨基丁酸能突触通路、胆碱能突触通路、5-羟色胺突触通路、钙信号通路、紧密连接通路、黏着斑通路、肌动蛋白细胞骨架的调控通路。[结论] 电针可能是通过改变细胞电位平衡、神经元轴突再生骨架结构的重建以及白细胞的迁移而改变周围神经损伤后修复与再生的微环境,从而促进了受损神经的再生。     

针刺手法对自发性高血压大鼠胸主动脉BKCa离子通道细胞电生理的调控研究

[目的] 观察针刺手法对自发性高血压大鼠钙激活钾（BKCa）通道电生理特性的影响。[方法] 24只16周龄自发性高血压大鼠随机分为模型组、针刺手法组和无手法组,每组8只,8只相同周龄的WKY大鼠作为正常对照组。针刺手法组针刺人迎穴,施用小幅度、120次/min的捻转手法1 min,无手法组进针后不施用手法,留针15 min。采用无创鼠尾测压仪测量血压,利用膜内面向外单细胞膜片钳技术检测BKCa通道的电流、开放时间及开放概率。[结果] 模型组、针刺手法组、无手法组的收缩压和舒张压均明显高于正常对照组（P<0.05）,针刺手法组在治疗1、2、3、4周血压值显著低于模型组（P<0.05）,无手法组仅在治疗1周时收缩压和舒张压均低于模型组（P<0.05）;模型组开放概率和开放时间明显低于正常对照组（P<0.05）,针刺手法组的开放概率高于模型组（P<0.05）;无手法组与模型组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。[结论] 120次/min的捻转手法作用于人迎穴可影响BKCa通道的电生理特性,其降压作用可能与提高BKCa通道的开放活动有关。     

内皮抑素对小鼠脉络膜新生血管抑制作用的信号通路分析

目的探讨内皮抑素对C57BL/6J小鼠脉络膜新生血管抑制作用的基因表达及作用机制。方法应用532 nm固体激光机,制造C57BL/6J小鼠脉络膜新生血管模型,分为空白组、对照组和实验组。其中空白组不做任何处理,对照组玻璃体腔内注射生理盐水2μL;实验组玻璃体腔内注射内皮抑素2μL(0.01 mg)。将对照组和实验组小鼠组织选取4个样本进行杂交及基因芯片检测。比较实验组和对照组基因表达的差异,选取其中表达差异大于1.5倍且P≤0.05的基因。结果免疫组织化学染色可见实验组新生血管表达明显低于对照组。实验组与对照组相比上调的基因有116个,下调的基因有106个。通过KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)数据库对上述差异基因经行分析后发现,实验组与对照组相比下调处于前10位的通道有:细胞骨架激动蛋白的校准、白细胞穿越内皮细胞层、金黄色葡萄球菌感染、Fc epsilon RI信号通路、Fc gamma R信号调理吞噬作用、Toll样受体信号通路、2型糖尿病、子宫内膜癌、吞噬体、非小细胞肺癌;处于上调前几位的通道有:细胞外基质受体相互作用、叶酸的一碳单位、肥厚性心肌病、扩张型心肌病、组氨酸新陈代谢、黏着斑、心肌细胞收缩。结论由通道功能分析可以推测,内皮抑素可能通过抑制内皮细胞的活性及移行并协同抑制免疫系统,进而抑制新生血管的生成。     

人口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞过表达WWOX基因的基因表达谱分析及WWOX基因的抑癌作用机制

目的：分析人口腔鳞状细胞癌（OSCC） Tca8113细胞过表达包含WW域的氧化还原酶（WWOX）基因的基因表达谱变化,探讨WWOX基因的抑癌作用机制。方法：Tca8113细胞分为WWOX基因过表达组和对照组。采用携带WWOX基因的pGV287-LV-WWOX慢病毒颗粒和携带空载体的pGV287-LV慢病毒颗粒分别感染2组Tca8113细胞。采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting法检测2组Tca8113细胞中WWOXmRNA和蛋白表达情况。采用基因芯片技术筛选差异表达基因并进行生物学分析。采用定量PCR法检测丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的差异表达基因的mRNA相对表达水平。结果：慢病毒感染后,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOXmRNA相对表达水平较对照组明显升高（P<0.05）,WWOX基因过表达组Tca8113细胞中WWOX蛋白表达水平升高。基因芯片筛选出差异倍数（FC）1.5倍以上的基因共347个,其中表达上调171个,表达下调176个。生物信息学分析显示这些基因分布于癌症、p53信号、MAPK信号和白细胞介素2（IL-2）等多条信号传导通路。WWOX基因过表达组MAPK信号通路中的丝裂原活化蛋白激酶2（MAP2K）、孤核受体4A1（NR4A1）、双特异性磷酸酶5（DUSP5）和双特异性磷酸酶6（DUSP6） mRNA相对表达水平较对照组明显升高（P<0.05）,而成纤维生长因子受体2（FGFR2） mRNA相对表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。结论：WWOX基因过表达导致Tca8113细胞的基因表达谱发生变化,WWOX基因的抑癌作用机制与调节MAPK信号途径的多个基因表达有关联。     

基于生物信息学的脑胶质瘤预后风险长链非编码RNA筛选

目的：应用生物信息学方法筛选脑胶质瘤的预后风险长链非编码RNA（lncRNA）。方法：从开放的癌症基因图谱（TCGA）和基因型组织表达（GTEx）数据平台下载脑胶质瘤样本转录水平数据,采用R语言比较分析脑胶质瘤和正常脑胶质样本差异表达基因,使用Cox分析构建风险模型,通过DAVID基因功能和KEGG通路数据库对差异表达基因进行功能注释和通路富集分析。利用qPCR评价HOXA-AS2的表达量与脑胶质瘤的临床组织特征之间的关系。结果：通过比较分析脑胶质瘤样本和正常脑组织样本基因组表达数据,获得差异表达的lncRNA 424个（211个上调,213个下调）,mRNA 3 827个（1 618个上调,2 209个下调）。构建了包含9个lncRNA的风险模型,参与介导的信号转导通路主要集中于免疫缺陷病毒感染,神经信号转导等相关通路。qPCR方法验证HOXA-AS2在脑胶质瘤中高表达。结论：筛选出HOXA-AS2可能是脑胶质瘤的预后风险lncRNA,为后续脑胶质瘤的机制研究提供参考依据。