泪液中溶菌酶与转化生长因子β2的检测方法在干眼诊断中的意义

目的 测定干眼患者和正常人泪液中溶菌酶和转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)的含量,为临床干眼的诊断提供更有价值的依据.方法 选择确诊为干眼症患者36例(72眼),其中非干燥综合征患者21例(42眼),干燥综合征患者15例(30眼).正常人26例(52眼)作为对照组.采用微量快速比浊法和双抗体夹心ABC-ELISA法,检测被选人群泪液中溶菌酶和TGF-β2的含量.应用SPSS 12.0统计软件进行统计处理(t检验),并对检测到的泪液中TGF-β2浓度与Schirmer Ⅰ试验值及泪膜破裂时间(tear breakup time,BUT)进行相关性分析.结果 应用微量快速比浊法检测到正常对照组、非干燥综合征组、干燥综合征组患者泪液中溶菌酶含量,分别为(12.274±1.313)±μg/ml和(8.294±1.235)μg/ml及(8.446±1.113)μg/ml,两组干眼症组与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).采用双抗体夹心ABC-ELISA法对以上人群泪液中转化生长因子β2含量进行检测,分别为(41.518±21.304)μg/ml、(14.123±12.095)Pg/ml和(4.022±8.668)pg.ml,非干燥综合征组及干燥综合征组泪液中TGF-β2浓度均明显低于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01).分别以测得的Schirmer Ⅰ(mm)试验值及BUT(s)值为横坐标(X),以检测到的泪液TGF-β2的浓度为纵坐标(Y),分析它们之间的相关性.干眼组泪液TGF-β2浓度与Schirmer Ⅰ试验值及BUT均呈正相关.结论 使用微量快速比浊法检验泪液中溶菌酶含量在临床诊断干眼症中有意义,并具有标本用量少、反应时间短、灵敏度高、适合低浓度酶液检测等特点.双抗体夹心ABC-ELISA法能够有效检测泪液中TGF-β2的表达.泪液中TGF-β2浓度与Schirmer Ⅰ试验值及BUT呈正相关,表明检测泪液中TGF-β2的含量对于辅助诊断干眼症是可行的.     

干眼患者和正常人泪液中胰岛素含量的测定及比较

目的测定干眼患者和正常人泪液中胰岛素的含量，明确它在泪液和眼表中的作用。方法放射免疫检测法测定非干燥综合征的干眼患者（NSS）17例、干燥综合征患者（SS）13例、正常人（对照组）28人泪液中胰岛素的含量，免疫组织化学法对来自眼库的人角膜和结膜组织的胰岛素进行检测。结果泪液中胰岛素的含量：正常对照组为（12．07±1．39）U／ml，NSS组为（9．36±0．83）U／ml，SS组为（2．54±0．63）U／ml；干眼患者泪液中胰岛素含量较正常人低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论正常人角膜及结膜均有胰岛素的表达。干眼患者泪液中胰岛素的缺乏为泪膜不稳定的机制之一，胰岛素可能有稳定泪膜和眼表的作用。     

干眼患者泪液和正常人眼角膜、结膜P物质的表达及意义

目的对干眼患者和正常人泪液中P物质进行测定,研究它在泪液和眼表中的作用。方法应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测非干燥综合征的干眼患者(NSS)17例、干燥综合征的干眼患者(SS)13例及正常人(对照组)28例泪液中P物质的质量浓度,并应用免疫组织化学染色对角膜和结膜组织进行P物质的检测。结果在不同组的所有个体样本中,均检测到P物质的表达,对照组质量浓度为(345.54±18.84)pg/mL,NSS组质量浓度为(260.46±15.87)pg/mL,SS组质量浓度为(173.16±20.58)pg/mL。应用免疫组织化学染色证实人结膜与角膜有P物质的表达。结论SS组和NSS组泪液中P物质的质量浓度均明显降低,和对照组相比差异有统计学意义,免疫组织化学染色证实人结膜与角膜均有P物质的表达。提示P物质对眼表可能发挥营养并具有稳定眼表的作用。     

泪液前列腺素E2水平与干眼严重程度的相关性

目的:探讨泪液中前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平与干眼严重程度的关系.方法:选取干眼患者60例,并接受眼表疾病指数(Ocular Surface Disease Index,OSDI)问卷调查及眼科检查,包括泪膜破裂时间(tear film breakup time,BUT)、角膜荧光素染...     

大鼠球结膜滤过泡模型中转化生长因子β1及转化生长因子β2动态表达的实验研究

目的建立大鼠球结膜滤过泡模型,观察滤过泡形成及瘢痕化过程中结膜及结膜下组织转化生长因子β1（TGF—β1）及转化生长因子β2（TGF-β2）的动态表达情况,探讨TGF-β1及TGF-β2在滤过泡瘢痕化中的作用。方法选用健康成年雄性sD大鼠64只,随机选取8只作为正常对照组,其余56只大鼠作为实验组。右眼成功建立球结膜滤过泡模型。将实验组平均随机分为7组,每组8只,术后观察滤过泡的形成情况,监测眼压波动情况;并于术后各时间点分别处死,分别采用免疫荧光组织化学及Western印迹法检测术区TGF—β1及TGF—β2的表达部位及动态表达量的变化。结果①所观察术眼在术后第1天均能形成不同程度隆起明显的滤过泡。滤过泡生存时间为7-22d,平均13d。②所观察术眼在术后眼压均明显下降,后缓慢上升。平均于术后7d时回归术前基线水平,保持至观察期结束。③免疫荧光组织化学结果显示在滤过泡结膜组织上皮层、固有层均可见到TGF-β1及TGF-β2强阳性表达。④Western印迹法结果显示TGF-β1在术后1d开始明显增高,持续增高至术后5、7d达峰值,随后逐渐降低至术后28d,但仍高于对照组,差异具有统计学意义（F=431．918,P〈0．01）。TGF-β2在术后1d开始明显增高,持续增高至术后7d达峰值,随后逐渐降低至术后28d,但仍高于对照组,差异具有统计学意义（F=674．323,P〈0．01）。结论前房引流管植入术可成功建立大鼠球结膜滤过泡模型。TGF-β1及TGF-β2参与了球结膜滤过泡的形成及瘢痕化进程。     

碱性成纤维细胞生长因子与转化生长因子β在近视眼巩膜中作用的研究进展

近视是世界最常见眼病之一,其发病机制尚不完全清楚。有研究发现,细胞生长因子与近视的发生发展密切相关,其中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与转化生长因子β（TGF-β）作为关键的信号分子可以通过调控巩膜细胞外基质的合成与降解参与近视眼巩膜重塑,但具体转导途径和机制还不十分清楚。现就bFGF和TGF—β在近视眼巩膜中的表达及其调控巩膜重塑的可能机制进行综述。     

泪液渗透压与干眼严重程度的关联性研究

背景 干眼的发病率逐渐增加,但目前尚无统一的诊断标准.近年的研究提示,泪液渗透压增高可导致眼表不适症状,2007年国际干眼工作小组(DEWS)将泪液渗透压作为伴随症状写入干眼定义中,因此研究泪液渗透压与干眼的关系有重要的临床意义. 目的 依据DEWS干眼严重程度分级标准,分析泪液渗透压与干眼严重程度的相关性.方法 采用描述性研究方法,收集在河南省眼科研究所经传统诊断方法诊断为干眼的患眼54例54眼,询问患者的眼部症状,裂隙灯显微镜下观察眼前节表现,同时行Schirmer试验Ⅰ(SⅠt)、泪膜破裂时间(BUT)试验、泪膜影像学检查、角膜荧光素染色以及泪液渗透压试验,参照和结合DEWS的标准对干眼表现进行评分,将干眼症状评分与泪液渗透压进行相关分析. 结果 男性发病与女性发病的比例为1:2.泪液渗透压与SⅠt、BUT均呈明显负相关(r=-0.456、-0.699,P＜0.01),与泪膜影像学检查值、角膜荧光素染色评分、结膜充血评分、干眼严重程度评分均呈显著正相关(r=0.545、0.686、0.691、0.803,P＜0.01),与年龄、性别相关(β1=141.138,P=0.000;β2=1.845,P=0.049). 结论 泪液渗透压检测可客观地反映干眼的严重程度,结合临床症状和体征可作为干眼严重程度分级的标准.     

转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜损伤愈合的影响

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜针刺损伤愈合的影响。方法：雄性wistar大鼠20只，均取右眼制造角膜针刺创伤模型后随机分成实验组和对照组，实验组用转化生长因子β2(TGF-β2)点眼，对照组用生理盐水点眼，每日6次、至创面愈合止。计算剩余损伤面积、行组织学检查及透射电镜观察。结果：术后两组创面愈合面积比较实验组均快于对照组，且差异显著，组织学检查及电镜观察均显示两组差异。结论：TGF-β2有促进角膜损伤愈合的作用，其可能的机制为TGF-β2是胶原溶酶的主要抑制剂，可抑制基质中胶原酶的合成，降低胶原分解，促进胶原的分泌。     

转化生长因子β与视网膜病变

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是一类具有多种生物学功能的多肽生长因子,能调节多种细胞的生长、分化和移行,参与细胞外基质成分的合成和免疫调节,它不仅是正常眼内组织代谢及功能的基本因素,在许多眼内病理过程中它也起着重要作用。文章就TGF-β的结构、功能以及它与视网膜疾病关系作一简要综述。     

泪液缺乏性干眼治疗转归的定量检测

目的：应用角膜共焦显微镜、结膜印迹细胞学在泪液缺乏性干眼治疗前后定量测定病变角膜上皮细胞、结膜细胞,以期进一步准确评价干眼的治疗效果及预后。 方法：选择临床确诊为泪液缺乏性干眼症患者21例41眼,根据患者病史、症状、角结膜体征及相关检查确诊为泪液缺乏性干眼。应用聚乙二醇滴眼液及卡波姆凝胶联合治疗所有干眼患者,治疗前后依据结膜印迹细胞检查对干眼患者结膜细胞的鳞状化生及杯状细胞数量的多少进行分级,并对治疗前后印迹细胞分级进行统计学比较。应用海德堡激光共聚焦显微镜观察干眼治疗前后角膜上皮下神经纤维的形态学改变,定量评价同级结膜细胞干燥程度下治疗前后角膜上皮细胞密度的变化。 结果：印迹细胞检查:治疗前≤Ⅱ级6眼,Ⅲ级25眼,≥Ⅳ级10眼;治疗6mo后≤Ⅱ级19眼(46.3%),Ⅲ级17眼(41.5%),≥Ⅳ级5眼（12.2%）。治疗前后不同级别印迹细胞患者比例显著改变(P＜0.05）。共焦显微镜下细胞形态学改变：治疗前明显的角膜上皮细胞坏死脱落区,细胞密度下降,角膜上皮下神经纤维出现分支杂乱、异常走行,未见上皮下神经纤维5眼。治疗6mo后区域性细胞密度增加,所有患者均可见上皮下神经纤维,少数病例仍可见分支杂乱、异常走行。共焦显微镜显示在同级结膜印迹细胞程度下,角膜上皮细胞密度治疗前后进行比较,统计学上具有显著性差异（P<0.05）。治疗后细胞密度明显增加。 结论：应用角膜激光共焦显微镜和结膜印迹细胞定量观察泪液缺乏性干眼的治疗转归,从而确定以上两种方法在干眼治疗评价中具有重要价值。     

兔转化生长因子-β2基因的克隆及其表达的检测

目的　克隆兔转化生长因子 β2 (TGF β2 )基因 ,并获得其在兔重要脏器及角膜中的表达。方法　利用不同物种的相似序列设计相关引物 ,制备兔肝组织的RNA并逆转录 ,RT PCR技术获得TGF β2 基因蛋白编码区序列后克隆 ,RT PCR半定量及荧光定量PCR检测TGF β2 在兔重要脏器及角膜中的表达。结果　成功地克隆了兔TGF β2 的蛋白编码区序列 ,测序证实和人、大鼠及小鼠具有高度的同源性 ,含有TGF β2 的保守结构域 ,TGF β2 基因在兔心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肾上腺和角膜组织中均有不同程度表达。结论　利用同源序列克隆进化上保守的基因是简捷快速的方法。获得兔TGF β2 的基因有助于进一步研究其在机体重要脏器纤维化、肿瘤以及角膜疾病中的作用     

转化生长因子β1及其I型受体在实验性脉络膜新生血管中的表达与意义

目的探讨激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管（CNV）形成过程中转化生长因子β1（TGF-β1）及其I型受体（TβRI）表达变化趋势及其作用。设计实验性研究。研究对象5组30只雄性BN大鼠。方法BN大鼠单眼视网膜氪激光光凝，诱导CNV形成。分别在光凝后3天，1、2、3、4周摘除眼球，应用免疫组织化学及原位杂交技术检测CNV形成过程中Ⅷ因子相关抗原（FVIIR：Ag）、TGF．β1、T13RI和TGF-β1mRNA的表达及变化。主要指标FⅧR：Ag、TGF-β1、TGF-βmRNA和TβRI。结果：FⅧR：Ag免疫组织化学结果显示，光凝后l周开始形成CNV，3-4周达到高峰。正常BN大鼠TGF-β1、TβRI在视网膜神经节细胞、内核层部分细胞、视网膜色素上皮层表达；TGF-β1mRNA在视网膜神经节细胞、视网膜色素上皮层表达。视网膜光凝后3天～4周，损伤区内FⅧR：Ag阳性染色密度逐渐增加（P〈0．05）；TGF-β1、TGF-β1mRNA和TβRI阳性染色密度逐渐下降（P〈0．05）；三者与FⅧR：Ag阳性染色密度负相关（r=0．87、-0．87、-0．80，P〈0．05）；TGF-β1和TβRI阳性染色密度正相关（r=O．84，P〈O．05）。结论光凝区内TGF-β1合成、分泌不足可能是CNV形成和增殖的主要原因之一；TGF-β1在受体水平表现出调节作用，存在由TβRI介导的生物学效应。TβRI表达低下，信号转导减弱，可能也是CNV形成和增殖的一个重要因素。（眼科，2006，15：262—266．）     

FOXO3和IL-2在干眼患者结膜上皮细胞及泪液中表达及意义

目的:探究叉头框蛋白O3(FOXO3)、白细胞介素-2(IL-2)在干眼(DE)患者结膜上皮细胞及泪液中的表达及意义。方法:前瞻性研究。选择2019-03/2021-03收治的DE患者106例,另选同期85位健康体检者为对照。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测样本中IL-2水平;分析DE患者治疗前后的泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SⅠt)、角膜荧光素染色(CFS)等眼表临床指标变化;Pearson相关性分析DE患者结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平的相关性以及二者与临床指标的关系。结果:与对照组相比,DE组患者结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平均明显降低,IL-2水平均明显升高(均P<0.01)。与治疗前相比,DE患者治疗后结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平明显上调,IL-2水平明显下调(均P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平均呈显著负相关(r=-0.531、-0.469,均P<0.01)。DE患者治疗后BUT、S...     

泪液趋化因子CCL19及CCL21在干眼诊断中的临床应用研究

目的 探索趋化因子配体19(CCL19)和趋化因子配体21(CCL21)在干眼患者泪液中的表达情况和临床相关性,评估其在干眼中是否具有诊断价值。方法 干眼的诊断基于《中国干眼专家共识：检查和诊断(2020年)》。将2022年4—11月在贵州医科大学附属医院眼科干眼门诊就诊的36例女性干眼患者(36眼)设为观察组,将同期36例健康女性(36眼)设为对照组。所有受检者均在每日上午同一时段,由同一医师采用眼表疾病指数评分法(OSDI)进行干眼临床症状评估,采用角膜荧光素染色(FL)评分、泪膜破裂时间(BUT)和泪液分泌试验(SⅠt)进行干眼临床体征检测。同时,采用液相芯片检测技术(Luminex)检测受检者泪液中CCL19及CCL21的表达水平,通过统计学方法分析其与干眼临床症状及体征的相关性。结果 观察组泪液中CCL19及CCL21表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。泪液中CCL19及CCL21表达与OSDI、FL呈正相关,与BUT、SⅠt呈负相关。CCL19诊断干眼的灵敏度为0.97,特异度为0.92;CCL21诊断干眼的灵敏度为0.94,特异度为0.92。...     

人工泪液与重组人表皮生长因子衍生物眼液对翼状胬肉术后干眼疗效观察

目的 探讨人工泪液联合重组表皮生长因子衍生物滴眼液治疗翼状胬肉术后干眼的疗效.方法 选择翼状胬肉术后有干眼症状的患者82例(96只眼),随机分为治疗组和对照组两组,每组41例(48只眼),治疗组给予人工泪液(泪然)和重组表皮生长因子衍生物(金因舒)治疗,对照组单用人工泪液,裂隙灯下观察,记录用药前及用药后2周、4周泪膜破裂时间(BUT),泪液分泌实验(schimer-1),角膜荧光素染色(FL)以及干眼症状的改善程度.结果 治疗前,治疗组与对照组Schirmer-1、BUT、FL差异无统计学意义(P>0.05);用药后2周、4周,治疗组schimer-1、BUT、FL以及临床症状的改善与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 人工泪液联合重组表皮生长因子衍生物滴眼液治疗翼状胬肉术后干眼疗效优于单用人工泪液,效果显著.     

大鼠视网膜中转化生长因子β1和β2基因表达的定量检测

目的：定量检测转化生长因子-β1（Transfimning growth factorβ1，TGF-β1）和转化生长因子-β2（TGF-β2）在大鼠正常视网膜中的表达水平，探讨TGF-β1和TGF-β2在视网膜中表达的差异及其意义。方法：分离取出大鼠正常视网膜，抽提RNA并逆转录，实时荧光定量PCR技术分析TGF-β1和TGF-β2的mRNA含量。 结果：大鼠视网膜RNA保持宅好未被降解，能够用于表达水平分析。大鼠视网膜中TGF-β2相对于β-actin的基因表达水平为0．0378±0．009，TGF-β1为0．0008±0．0003．前者明显高干后者，统计学上差异有显著性（t=12．37，P〈0．001），说明在视网膜中TGF-β的表达以TGF-β2为主，TGF-β2和TGF-β1的比值由55．00±26．61。 结论：实时荧光定量PCR技术能够针对性地精确分析极少量组织细胞的基因表达。TGF-β在视网模中以TGF-β2表达为主，提示可能是TGF-β2在视网膜病变中起主导怍用。     

转化生长因子-β在视网膜母细胞瘤中的表达

转化生长因子-β(TGF-β)作为细胞生长的负调控因子,参与了许多肿瘤的发生、进展和转移[1].由于国内外对TGF-β在视网膜母细胞瘤(RB)发病机制上所起作用的研究较少.因此,我们用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)检测了TGF-β在RB中的表达,探讨其与RB病理分期、组织分型、视神经浸润深度的关系.现将结果报道如下.     

转化生长因子β1及其Ⅰ型受体在实验性脉络膜新生血管中的表达与意义

目的探讨激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管(CNV)形成过程中转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅰ型受体(TβRⅠ)表达变化趋势及其作用。设计实验性研究。研究对象5组30只雄性BN大鼠。方法BN大鼠单眼视网膜氪激光光凝,诱导CNV形成。分别在光凝后3天,1、2、3、4周摘除眼球,应用免疫组织化学及原位杂交技术检测CNV形成过程中Ⅷ因子相关抗原(FⅧR:Ag)、TGF-β1、TβRⅠ和TGF-β1mRNA的表达及变化。主要指标FⅧR:Ag、TGF-β1、TGF-β1mRNA和TβRⅠ。结果FⅧR:Ag免疫组织化学结果显示,光凝后1周开始形成CNV,3～4周达到高峰。正常BN大鼠TGF-β1、TβRⅠ在视网膜神经节细胞、内核层部分细胞、视网膜色素上皮层表达;TGF-β1mRNA在视网膜神经节细胞、视网膜色素上皮层表达。视网膜光凝后3天～4周,损伤区内FⅧR:Ag阳性染色密度逐渐增加(P<0.05);TGF-β1、TGF-β1mRNA和TβRⅠ阳性染色密度逐渐下降(P<0.05);三者与FⅧR:Ag阳性染色密度负相关(r=-0.87、-0.87、-0.80,P<0.05);TGF-β1和TβRⅠ阳性染色密度正相关(r=0.84,P<0.05)。结论光凝区内TGF-β1合成、分泌不足可能是CNV形成和增殖的主要原因之一;TGF-β1在受体水平表现出调节作用,存在由TβRⅠ介导的生物学效应。TβRⅠ表达低下,信号转导减弱,可能也是CNV形成和增殖的一个重要因素。     

糖尿病患者眼前房液血管内皮生长因子与转化生长因子β2的变化

目的:验证糖尿病患者眼前房液中转化生长因子β2(TGF-β2)变化的临床意义,研究TGF-β2在新生血管形成过程中的作用和作用机制及其与血管内皮生长因子(VEGF)之间的关系。方法:收集糖尿病不伴有眼底改变与患有糖尿病视网膜病变白内障患者的前房液标本,并以无糖尿病白内障患者的前房液标本作为对照,用ELISA方法测定了前房液中TGF-β2和VEGF的含量。结果:和对照相比较糖尿病患者眼前房液中VEGF的含量均显著增加,并且随着糖尿病视网膜病变的进展而增高;而糖尿病无眼底改变患者前房液中TGF-β2含量与正常相比无明显变化,单纯型糖尿病视网膜病变患者的TGF-β2含量下降,伴有增生型的视网膜病变患者TGF-β2含量升高。结论:TGF-β2在DR形成过程中有重要作用,在DR后期TGF-β2和VEGF具有协同作用。