细胞生长因子与内皮细胞增殖在血管瘤中的研究进展

近年来一些研究发现细胞生长因子通过调控内皮细胞的增殖,在血管瘤的发生和发展中起非常重要的作用。本文对目前研究较多的几种细胞生长因子与血管瘤之间的相互关系进行了综述,为进一步研究血管瘤的发生、退化和治疗提供参考。     

细胞生长因子与内皮细胞增殖在血管瘤中的研究进展

近年来一些研究发现细胞生长因子通过调控内皮细胞的增殖。在血管瘤的发生和发展中起非常重要的作用。本文对目前研究较多的几种细胞生长因子与血管瘤之间的相互关系进行了综述。为进一步研究血管瘤的发生，退化和治疗提供参考。     

血管内皮细胞生长因子受体的生物学特性

血管内皮细胞生长因子(VEGF)是血管形成的中心调控因子,特异地作用于内皮细胞,并在内皮细胞表面有其特异性受体KDR/FLK_1和FLT_1,在特定条件下血管内皮细胞生长因子表达增强,并诱导其受体表达同步增强,在乙酰肝素硫酸蛋白多糖的介导下两者结合,最终产生效应,引起内皮细胞增殖,新生血管形成。本文从受体的结构特征,乙酰肝素硫酸蛋白多糖介导血管内皮细胞生长因子和受体结合,通过受体的信号传导和两者的表达调节进行了综述。     

口腔癌血管内皮细胞生长因子表达的初步观察

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与口腔癌癌灶微血管密度(MVD)改变的关系,及其在口腔癌发生发展中的作用。方法:对60例口腔癌的组织切片采用抗VEGF单抗和抗CD34单抗进行免疫组织化学染色,计取VEGF阳性细胞数和MVD。结果:有39例(65%)VEGF染色阳性,TNM分期Ⅰ～Ⅳ期VEGF阳性表达率无显著性差异,但各期阳性病例的阳性分级比较显示Ⅳ期的阳性分级要高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期(P<0.05);MVDⅠ、Ⅱ级的VEGF阳性率低于Ⅲ、Ⅳ级者,但无统计学差异,将MVD的不同分级中的VEGF的阳性分级做秩和检验,显示随着MVD分级的提高,其VEGF阳性级别也随之升高,MVDⅠ级与Ⅳ级的VEGF阳性表达程度差别显著(P<0.05)。结论:VEGF与口腔癌肿瘤血管生成密切相关,VEGF阳性分级可作为反映肿瘤进展的一项指标。     

平阳霉素抑制血管瘤血管内皮细胞增殖的体外实验

血管硬化剂的选择是决定血管瘤治疗预后的重要因素,平阳霉素是近年来被广泛采用,并取得满意疗效的理想药物之一［１,２］,但其作用机制尚缺乏详细深入的基础研究。本文通过观察平阳霉素对体外培养血管瘤内皮细胞增殖的影响作用,初步探讨其治疗机制。材料和方法１试剂...     

血管内皮细胞生长因子与骨折的关系

血管内皮细胞生长因子 (VEGF)是一种具有特异性促进血管内皮细胞生长和血管生成的诱导因子。骨折的修复涉及骨折位点存在的多种生长因子 ,VEGF表达贯穿于骨折愈合的全过程 ,被认为是早期骨折修复中最为重要的因素。VEGF是骨折修复过程中特定的骨痂组织生成和钙化所必需的。VEGF的含量也受到骨折断端的微环境及各种生长因子及分泌因子的调节。     

VEGF及受体在颌面部血管瘤和血管畸形中表达及意义

目的 检测细胞因子血管内皮生长因子(VEGF),血管内皮生长因子受体(VEGFR/KDR)及VEGF mRNA在颌面部血管瘤和血管畸形中的表达,探讨VEGF及其受体与血管瘤发病机制的关系。方法 采用二步EnVision免疫组织化学方法,分别检测27例血管瘤和15例血管畸形组织中VEGF和VEGF/KDR表达;同时采用原位杂交Gene Point法检测VEGF mRNA的表达。结果 VEGF和VEGFR/KDR在血管瘤中高表达,而在血管畸形组中低表达,两者有显著差异(P<0.01);VEGF和VEGF mRNA在血管瘤细胞及周围间质细胞明显表达,VEGFR/KDR主要表达于血管瘤中内皮细胞膜上。结论 VEGF可通过自分泌和旁分泌的形式影响血管瘤内皮细胞的增殖,可能与血管瘤发生、发展和退化有密切相关。     

口腔癌血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的初步观察

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与口腔癌癌灶微血管密度改变的关系及其在口腔癌发生发展中的作用。方法:化学研究选择抗VEGF单克隆抗体及抗CD34单克隆抗体为第一抗体,对60例口腔癌组织切片标本行免疫组织化学研究。VEGF及CD34的免疫组化方法采用S-P组化染色法。结果:在60例口腔癌中Ñ、Ò、Ó、Ô期 VEGF阳性表达率无显著性差异。颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组的VEGF表达,经统计学分析有显著性差异。Ô期病例的微血管密度(IMVD)与Ñ、Ò期病例有显著性差异。随着IMVD的提高,其VEGF阳性级别也随之升高,IMVDÑ级与IMVDÔ级的VEGF阳性表达程度有显著性差异(P<0105)。结论:口腔癌中血管内皮细胞生长因子的改变是导致口腔癌癌灶内微血管密度改变的原因之一。     

血管内皮生长因子与血管生成及血管瘤增殖的研究进展

血管瘤是以微血管内皮细胞旺盛增殖和血管生成为主要特征的良性肿瘤,未经控制的血管生成是血管瘤增殖的主要原因。血管内皮生长因子(VEGF)通过与受体结合而选择性作用于血管内皮细胞(ECs),产生促进ECs增殖、迁移、基质降解和血管通透性增高等一系列生物学作用,最终刺激血管生成,从而在血管瘤增殖中起到重要作用。     

平阳霉素瘤内注射对婴幼儿血管瘤血清中血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨平阳霉素瘤内注射对婴幼儿增殖期血管瘤血清中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响及意义。方法：选取增殖期血管瘤婴幼儿23例,分别于平阳霉素瘤内注射治疗前及治疗后3、7、14d时采集瘤内血,应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测瘤内血清中VEGF的含量。结果：平阳霉素瘤内注射治疗后3d和7d时,瘤内血清中VEGF表达水平较治疗前明显降低（P〈0．05）;治疗后14d时,瘤内血清中VEGF表达水平与治疗前相比,其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：平阳霉素瘤内注射治疗婴幼儿增殖期血管瘤,能明显降低瘤内血清中VEGF表达水平,但具有时效性,仅依此来评估婴幼儿血管瘤生长增殖速度及平阳霉素的治疗效果有待商榷。     

婴幼儿血管瘤细胞系XPTS-1和动物模型的建立

目的 建立婴幼儿血管瘤源性血管内皮细胞系(hemangioma-derived endothelial cell line,HemEC)及其动物模型.方法 采用组织块法进行HemEC体外培养,制作HemEC生长曲线,免疫组化法行Ⅷ因子相关抗原鉴定,流式细胞仪鉴定HemEC的血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor2,VEGFR-2)的表达,分析HemEC染色体核型,采用异体移植的方法将HemEC接种于裸鼠皮下,观察肿瘤的生长情况,进行组织病理学检查.结果 培养的细胞生长活跃,传到第16代时细胞增殖增快,自发永生化,共传代培养70代以上,体外培养时间1年,冻存、复苏多次,细胞仍生长良好,具有HemEC的形态学特征,细胞群体倍增时间约为22 h,Ⅷ因子和VEGFR-2均阳性表达,HemEC的染色体表现为非正常的二倍体特征,染色体数介于二倍体和三倍体之间,将其命名为XPTS-1.该婴幼儿血管瘤动物模型的组织病理学特征与婴幼儿血管瘤的组织病理学特征基本一致.结论 本研究建立的HemEC自发转化、永生化,其形态学特征和生物学特性符合HemEC的特性,既具有一般转化细胞系的饱和密度生长、接触性抑制、停泊依赖性生长等特性,又具有致瘤性等特性,符合婴幼儿血管瘤组织病理学特性,该模型的组织病理学特征与婴幼儿血管瘤的组织病理学特征基本一致.

Abstract：

Objective To establish an immortalized human infancy hemangioma-derived endothelial cell line (HemEC) and animal model of human infancy hemangioma. Methods Hemangioma-derived endothelial cells from specimen of human infancy hemangioma were cultured in vitro and monocloed, and then its growth curve was made, karyomorphism of chromosome analyzed, morphologic characteristics observe,factor Ⅷ related antigen identified by immunohistochemical method. Vascular endothelial growth factor receptor 2(VEGFR-2) was detected by flow cytometry. HemEC were inoculated subcutaneously in athymicmouse to establish animal model of infancy hemangioma. The animal model was observed closely and its pathological characteristic was also studied. Results The cultural cells grew active, and immortalized spontaneously when they were subcultured on sixteenth generation. This cell line was cultivated for more than 70 times within one year and in good condition after freezing and resuscitating once and again, and had the morphologic character of HemEC. The cell population doubling time was 22 h. Factor Ⅷ and VEGFR-2 were expressed positively. Karyo type analysis of the cell line showed abnormal diploid with the modal chromosomal number varying between diploid and triploid. The cell line was then named XPTS-1. The animal model of infancy hemangioma was successfully established and its character of histopathology was similar with that of infancy hemangioma. Conclusions The cell line of HemEC was successfully established and immortalized spontaneously, and had the morphologic and biological character of HemEC. The animal model of infancy hemangioma was successfully established and showed the character of histopathology similar with that of infancy hemangioma.     

人正常牙髓和炎症牙髓中P物质和血管内皮生长因子的表达

目的:研究P物质(SP)和血管内皮生长因子(VEGF)在人正常、外伤初期、炎症早期、炎症晚期牙髓中的表达和相关性,探讨两者对牙髓微循环的调节作用。方法:选取因正畸或阻生需拔除的健康牙10颗作为正常组,选取同年龄阶段因外伤需要根管治疗的患牙29颗,分为外伤初期组、早期炎症组、晚期炎症组。采用免疫组织化学方法对各组中SP、VEGF进行组织学定位和定量检测。采用SSPS13.0软件包对各组数据进行单因素方差分析和相关分析。结果:与正常组相比,SP在其他各组中表达显著降低(P<0.05);VEGF在早期炎症组中表达较其他各组强(P<0.05),而在晚期炎症组则明显减弱(P<0.05);SP和VEGF在各组中的表达呈负相关(r=-0.378,P<0.05)。结论:SP可能通过VEGF途径引起牙髓微循环的病理改变,两者共同参与牙髓神经源性炎症的发生。     

乳铁蛋白抑制舌癌细胞血管内皮生长因子表达的研究

目的探讨乳铁蛋白(lactoferrin)对舌癌细胞株Tca8113细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达调控的情况。方法采用四甲基氮唑蓝实验(MTT)、RT-PCR法检测乳铁蛋白对Tca8113细胞的增殖作用及VEGFmRNA表达改变的情况。结果乳铁蛋白显著抑制Tca8113细胞的增殖,呈剂量依赖性,乳铁蛋白对Tca8113细胞VEGF的RT-PCR产物试验组(2和3)与对照组之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论乳铁蛋白对Tca8113细胞的增殖有抑制作用,可以降低细胞中VEGFmRNA的表达水平,为乳铁蛋白用于肿瘤的预防及治疗提供实验基础。     

rhVEGF对大鼠成骨细胞增殖及功能的影响

目的:研究rhVEGF对成骨细胞增殖和分化能力的影响。方法:采用细胞培养技术,应用光镜、MTT法及PNPP偶氮法,分别从细胞形态、细胞增殖及分化等特性,分析不同浓度的rhVEGF对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。结果:rhVEGF能促进成骨细胞的增殖和分化,其中,在加入3.125ng/ml浓度的rhVEGF并于第3天时,成骨细胞增殖最显著;而12.5ng/ml组对碱性磷酸酶活性的影响最明显。结论:一定剂量的rhVEGF可明显促进成骨细胞的增殖和分化。     

人血管内皮生长因子基因的克隆及在人成肌细胞中的表达

目的：克隆人血管内皮生长因子基因VEGF165片段，构建pCDNA3/VEGF165真核表达载体，观察其在人成肌细胞中的表达。方法：采用逆录聚合酶链式反应（RT－PCR）技术，从人肝癌细胞株SMMC－7721中扩增出血管内皮生长因子VEGF165基因片段，通过DNA重组技术将该基因片段重组于pCDNA3真核表达载体上，构建成pCDNA3/VEGF165重组质粒，分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定，应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入体外培养的人成肌细胞内，并用免疫组化法观察其表达。结果：经酶切电泳分析和DNA测序证实，本实验克隆的基因片段为人VEGF165cDNA，重组质粒pCDNA3/VEGF165转染人成肌细胞后，VEGF表达明显增高。结论：本实验成功地克隆了VEGF165基因，为进一步研究用肌肉细胞内转染VEGF基因的方法来恢复或增强放疗后组织的血管生成能力奠定了基础。     

血管内皮生长因子小干扰RNA抑制人舌鳞状细胞癌细胞移植瘤生长及血管生成的实验

目的 观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达对人舌癌Tca8113细胞移植瘤的治疗作用.方法 构建Tea8113细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,A组、B组为实验组,C组:以空载体注射为治疗对照组,D组:未治疗为空白对照组,每组5只.脂质体法将两对VEGF siRNA真核表达载体(PU-VEGF-siRNAl、PU-VEGF-siRNA2)作瘤体内及瘤周注射,1次/3 d,共10次后处死裸鼠;测量瘤体积及瘤重;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blotting和免疫组化法分别检测瘤组织VEGF-mRNA及VEGF蛋白表达,并检测瘤内微血管密度;流式细胞仪检测肿瘤细胞悬液的细胞周期比例,Tunel法检测组织细胞凋亡.结果 B组瘤体积(0.402±0.158)cm3、瘤重量(2.12±0.58)g,均低于C、D组,细胞G1期比例为(40.26±1.42)%,较C、D组增加,B组瘤组织VEGF mRNA(0.752±0.048)和蛋白表达(1.12±0.15),组织切片VEGF阳性细胞表达率(12.56±1.30)%、平均灰度值(164.2±15.42)及微血管密度(3.50±1.58)个,均低于C、D组(P<0.05),凋亡细胞增加(P<0.01).结论 siRNA能在体内抑制舌癌VEGF表达,减少肿瘤血管生成,延缓肿瘤生长.不同的干扰片段体内作用效果存在差异.     

bFGF对体外培养人牙囊细胞VEGF表达的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外培养人牙囊细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：选取生长状态良好的人牙囊细胞,与10ng／mlbFGF孵育不同时间后,采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）及酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测人牙囊细胞VEGFmRNA表达及上清液中VEGF蛋白分泌变化。结果：bFGF作用1、3、6、12h后人牙囊细胞VEGFmRNA表达均较0h组显著增强（p〈0．01）,其中bFGF作用6h后VEGFmRNA表达最强;细胞培养上清液中VEGF蛋白分泌量随时间延长逐渐增加,但bFGF处理组VEGF蛋白分泌量高于对照组（p〈0．01）。结论：bFGF能够促进体外培养人牙囊细胞VEGF的表达。     

消痔灵局部注射治疗血管瘤后VEGF的变化及意义

目的:寻找一种客观指标来反映血管瘤患者经消痔灵局部注射后的临床效果,探讨血管内皮生长因子(VEGF)与血管瘤发病机制的关系。方法: 用免疫酶标技术分别检测 10例正常人, 10例血管瘤患者治疗前、经消痔灵局部注射 1周后及 8例 1个月后外周血血清中VEGF的浓度。结果: 10例血管瘤患者血清中VEGF浓度明显高于正常人组(P<0. 01);经消痔灵局部注射 1周后血清中VEGF浓度与血管瘤患者组无明显区别(P>0. 01); 8例血管瘤患者经消痔灵局部注射 1月后外周血血清中VEGF浓度与正常人组无明显差别(P>0. 01).结论:VEGF可以作为一种客观依据来反映局部注射消痔灵法的临床治疗效果及预后;血管瘤患者局部注射治疗消痔灵方法临床效果确切。     

Expression of vascular endothelial growth factor in human dysfunctional temporomandibular joint discs

A high density of blood vessels is found in specimens of temporomandibular joint (TMJ) disc at any stage of internal derangement of the joint, but the factors responsible for angiogenesis in the disc have not been described. The purpose here was to investigate, in human TMJ discs, the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), a multifunctional cytokine that contributes to angiogenesis. Specimens, free of significant morphological alterations and with varying degrees of disc tissue degeneration/regeneration, were studied by immunohistochemistry for VEGF in order to correlate immunohistochemical with histopathological findings. In normal discs and discs with minor pathological changes, fibroblast-like cells, fibrochondrocytes and chondrocyte-like cells were either not or only weakly immunostained by VEGF antibody. In disc specimens from internal derangement of the TMJ with significant tissue degeneration/regeneration, VEGF was consistently expressed. In these specimens, immunoreaction products for VEGF were observed both in the disc and in the endothelial cells of newly formed vessels. This VEGF immunolocalization is consistent with the stimulation of angiogenesis and the morphogenesis and differentiation of chondrocytes. Therefore VEGF expression by disc chondrocyte-like cells might reflect the action of the cytokine as an inducer of angiogenesis and as an autocrine signal for cells of the chondrogenic lineage.