鼻咽癌新鲜肿瘤组织DNA倍体性与预后的关系

背景与目的:因肿瘤有生物学异质性,部分肿瘤的预后和TNM分期并不符合;寻找有效的生物学预后指标作为临床分期的补充,可为今后鼻咽癌的个体化治疗提供一个新的依据.本研究探讨初治鼻咽癌患者新鲜肿瘤组织细胞的DNA倍体性与疗效、预后的关系.方法:1999年1月至2000年2月,53例初治鼻咽癌患者进入本研究,其中单纯放疗32例,另21例患者于放疗第4周接受了一个疗程的PF方案化疗.患者治疗前均活检取新鲜肿瘤组织,用流式细胞仪进行DNA倍体检测.结果:53例患者中,二倍体32例(60.4%),异倍体21例(39.6%).不同倍体组患者的年龄、性别、临床分期、N分期、化疗与否的差异无统计学意义(P=0.695、0.657、0.088、0.972和0.335).全组患者中位随访时间73个月(12～84个月).全组5年总生存率65.61%,其中二倍体组为80.92%,异倍体组为42.86%(P=0.002);5年无远处转移生存率二倍体组为84.26%,异倍体组为44.53%(P=0.003);5年无复发生存率二倍体组为92.59%,异倍体组为72.65%(P=0.118).单因素分析结果显示,临床分期是无复发生存率的影响因素,DNA倍体性、临床分期和T分期是总生存率和无远处转移生存率的影响因素.多因素分析结果显示,与总生存率相关的独立预后因素为DNA倍体性(P=0.020)和临床分期(P=0.007),与无转移生存率相关的预后因素亦为DNA倍体性(P=0.017)和临床分期(P=0.011).结论:采用流式细胞术检测新鲜组织细胞的DNA倍体性和临床分期一样可以预测鼻咽癌患者的预后;DNA异倍体患者比二倍体患者更容易出现远处转移而导致治疗失败.     

DNA 倍体类型与鼻咽癌放射敏感性及预后关系的研究

 目的 探讨DNA倍体类型与鼻咽癌放射敏感性及预后的关系。方法 应用流式细胞术(FCM)分析45例放疗前鼻咽癌细胞的DNA倍体，放疗结束六个月评定疗效。对患者进行定期随访，分析DNA倍体性与鼻咽癌放射敏感性及预后有无相关性。结果 DNA倍体性与鼻咽癌临床分期、近期疗效、放射敏感性及预后均有明显的相关性，但与性别、病理类型无关。早期肿瘤(Ⅰ+Ⅱ期)的DNA异倍体率为11．11％(2／18)远低于晚期(Ⅲ+Ⅳ期)者的40．74％(11／27)(P<0．05)，异倍体肿瘤较二倍体肿瘤对放疗更敏感(P<0．01)，且异倍体肿瘤的近期疗效明显好于二倍体肿瘤(P<0．05)，但异倍体肿瘤的预后较二倍体肿瘤差(P<0．01)。结论 DNA倍体类型可作为评估鼻咽癌放射敏感性和预后的一个独立指标。FCM的肿瘤细胞DNA倍体分析可能成为鼻咽癌选择放疗分割方案的客观指标。     

肝癌细胞染色体DNA倍体性模式研究进展

 国内外研究已表明，肝癌(HCC)发生中涉及细胞核的异常分裂，导致细胞DNA的倍体性改变飞现就近年来的有关染色体DNA倍体性的研究作一综述.     

形态学定量测定对预测鼻咽癌细胞放射敏感性的价值

目的　研究人鼻咽癌细胞形态、DNA含量及倍体与放射敏感性的异质性之间的关系 ,探讨预测肿瘤放射敏感性的可行方法。方法　应用 2种放射敏感性不同的鼻咽癌细胞系CNE 2Z亚克隆株F1、S1,通过细胞培养及裸鼠体内实验 ,用HE染色法、Feulgen染色法和图像分析仪 ,观察这 2株细胞及其裸鼠移植瘤的形态学参数、DNA含量及倍体分布。 结果　形态参数测定表明 ,F1细胞面积、细胞体积等参数小于S1(P <0 .0 1) ,核周长、核直径大于S1(P <0 .0 1) ,核质比大于S1(P <0 .0 1)。F1细胞及裸鼠移植瘤DNA含量、DI值、5C及 >5C比例均高于S1组 (P <0 .0 1)。结论　F1、S1放射敏感性的异质性与细胞分化程度、DNA含量及 >5C比例有关 ,采用计算机图像分析法定量分析 ,可以预测鼻咽癌细胞间的放射敏感性差异     

DNA链断裂检测技术预测肿瘤放射敏感性的现状

介绍应用ＤＮＡ链断裂检测技术预测肿瘤放射敏感性现有方法的优缺点，并展望其新进展。     

自发性细胞凋亡及bcl-2和bax基因与鼻咽癌放射敏感性关系的探讨

目的探讨自发性细胞凋亡及其相关基因bcl-2和bax与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法采用TdT酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(terminal oxynucleotidyl transferase medi-ated dUTP biotin nick end labeling,TUNEL)和免疫组化法,分别检测51例放疗前的鼻咽癌活检组织中自发性凋亡指数(spontaneous apoptotic index,SAI)和bcl-2、bax基因的表达。结果鼻咽癌活检组织均检测到细胞凋亡,SAI平均为31.19±33.83;SAI与bcl-2和bax表达均无明显相关性,但与bcl-2/bax比率呈负相关(P<0.05);SAI与鼻咽癌放射敏感性明显相关,完全消退组比残留组SAI高(P<0.05);bcl-2的表达与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(P<0.05),而bax的表达与鼻咽癌放射敏感性无关(P>0.05);bcl-2/bax的比率与鼻咽癌放射敏感性呈负相关(P<0.05)。结论SAI、bcl-2和bcl-2/bax的比率是反映鼻咽癌放射敏感性和预测鼻咽癌放疗效果的重要指标,而bax不能单独作为判断鼻咽癌放射敏感性的指标。     

DNA-PKcs 表达与鼻咽癌细胞株放射敏感性的关系

 目的 探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1（鼻咽高分化鳞癌细胞株）和CNE-2（鼻咽低分化鳞癌细胞株）中DNA依赖蛋白激酶（DNA-PK）的催化亚基DNA-PKCS基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法 通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂量的存活分数，并用线性二次模型拟合剂量存活曲线求出放射生物学参数α、β,SF2、MID值，以及四氮唑蓝比色分析法（MTT法）检测60Co-γ线4Gy照射后12h细胞的存活率，以评价两株细胞的放射敏感性。逆转录实时荧光定量PCR技术（RTrFQPCR）检测照射前、后不同时间及不同剂量CNE-1、CNE-2细胞mRNA水平DNA-PKCS基因的定量表达。结果CNE-1在各个剂量点的存活分数均比CNE-2高，MID值分别为2．78、1．61，SF2值分别为0．627、0．341；4Gy照射后12h的存活率分别为88．2％、72．3％；RT-FQPCR显示两株细胞中均有DNA-PKCS基因的表达，其相对表达量之比为7．54±2．71（t=4．17，P=0．014），表达差异有统计学意义，DNA-PKCS基因在CNE-2细胞中存在时间、剂量依赖关系。结论实验验证了CNB2比CNE-1对射线更敏感，DNA-PKCS基因的表达与鼻咽癌细胞的放射敏感性有关。     

沉默CDKN1A基因对鼻咽癌放射抗拒性CNE-2R细胞放射敏感性的影响

目的：探讨CDKN1A基因的表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法构建慢病毒表达载体LV-CDKN1A-RNAi并转染鼻咽癌放射抗拒性CNE-2R细胞,设转染LV-CDKN1A-RNAi慢病毒的CNE-2R细胞为实验组,转染阴性对照慢病毒的CNE-2R细胞为阴性对照组,未转染的CNE-2R细胞为空白对照组。用CCK-8法、细胞克隆形成实验及流式细胞术分别检测各组细胞增殖、放射敏感性及细胞周期的变化。结果成功构建了CDKN1A基因沉默的CNE-2R细胞,CCK-8法检测显示实验组CNE-2R细胞在照射6 Gy后生长受到抑制,且随时间延长其抑制作用更为明显。细胞克隆形成实验显示实验组CNE-2R细胞放射敏感性增强（放射增敏比为SER=1.24）。流式细胞术检测显示实验组与对照组细胞相比, G0/G1期和G2/M期细胞分布在X射线照射6 Gy前后明显改变（P约0.05）。结论 CDKN1A基因沉默能增强鼻咽癌放射抗拒性CNE-2R细胞的放射敏感性,CDKN1A基因的表达可能与鼻咽癌放射敏感性相关,有望成为鼻咽癌治疗的新靶点。     

ZNF488对鼻咽癌细胞放疗敏感性的影响

摘 要：［目的］ 探究沉默ZNF488后鼻咽癌细胞的放射敏感性变化。［方法］ 基于GEPIA和UALCAN数据平台,检索ZNF488在头颈鳞状细胞癌中的数据信息。在鼻咽癌细胞系中沉默ZNF488,采用qRT-PCR 和 Western blot 检测 ZNF488 siRNA转染效率。在剂量梯度的电离辐射处理下,进行克隆形成和CCK-8检测,评估电离辐射对鼻咽癌细胞增殖能力和存活率的影响。［结果］ 基于生信数据平台,检测到ZNF488在头颈部鳞癌中高表达,与预后较差相关,且与MAP3K14、NFKB2存在相关性（P均<0.05）。在细胞表型试验中,通过qRT-PCR检测鼻咽癌细胞系中ZNF488 siRNA（mRNA）表达量,从中选择两株表达水平相对较高的SUNE-1和CNE-1。随后评估转染效率,在转染siRNA的实验组,ZNF488表达量明显低于对照组。降低ZNF488表达水平后接受0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy剂量梯度的电离辐射,克隆形成和CCK-8检测结果显示,与对照组相比,实验组的细胞增殖和存活分数显著下降（P均<0.05）。［结论］ 沉默ZNF488后鼻咽癌细胞的增殖能力和存活分数下降,放射敏感性增加,ZNF488可能与放疗敏感性相关。     

PCNA和p53蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性关系的研究

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA )和p5 3蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法　应用免疫组化法 ,检测 5 1例放疗前鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达情况。 结果　 5 1例鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达阳性者分别有 5 0例( 98.0 % )和 46例 ( 90 .2 % ) ,高表达者分别有 16例 ( 3 1.4% )和 2 2例 ( 4 3 .1% ) ;鼻咽癌组织中PCNA表达与 p5 3蛋白表达显著相关(P <0 .0 1) ;PCNA和 p5 3蛋白阳性表达水平越高 ,则鼻咽癌对放射治疗越敏感 ,放疗后鼻咽局部癌肿完全消退率越高 (P <0 .0 5 ) ;PCNA和 p5 3蛋白同时高表达者比单一指标高表达者 ,对放射敏感性更高 (P <0 .0 5 )。 结论　PCNA和 p5 3蛋白是反映鼻咽癌放射敏感性和预测其放疗疗效的重要指标     

Cyclin D1及PCNA与鼻咽癌放射敏感性相关性研究

[目的]探讨鼻咽癌的细胞周期素(cyclin)D1和增殖细胞核抗原(PCNA)表达与放射敏感性的关系。[方法]65例初治行放疗的鼻咽癌患者,免疫组化测定治疗前活检标本的cyclinD1和PC鄄NA表达,并与放射敏感性(放疗后的近期疗效)进行单因素和多因素的分析研究。[结果]cyclinD1阳性表达率为60%,PCNA表达率为52.3%。放射敏感者(CR)40例(61.5%),放射低敏者(PR和MR)25例(38.5%)。cyclinD1阳性表达和PCNA高表达的CR率分别为74.4%和82.4%,明显高于阴性表达及低表达者(CR率分别为42.3%和38.7%)(P<0.01)。各期中cyclinD1阳性与阴性表达及PCNA高与低表达者疗效为CR的差异有显著性(P<0.01)。Logistic多因素回归分析显示明显影响放疗效果的因素依次为:PCNA,临床分期,原发肿瘤大小,病人年龄和性别。[结论]cyclinD1阳性表达及PCNA高表达的鼻咽癌放射敏感性高,在作为预测放疗敏感性的指标上,PCNA可能较cyclinD1更有意义,为个体化的治疗方案增添了重要参考价值的生物学指标。     

DNA依赖蛋白激酶与细胞放射敏感性

DNA依赖蛋白激酶复合物(DNA-PK)是一种DNA活化的核丝氨酸或苏氨酸蛋白激酶,在DNA修复、维持染色体端粒结构、V(D)J重组等方面发挥重要作用;并可通过磷     

CD166对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响

目的 探讨CD166对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响.方法 采用流式细胞术检测鼻咽癌CNE-2细胞膜CD166阳性表达率,免疫磁珠分选技术获得CNE-2-CD166(+)、CNE-2-CD166(-)细胞亚群,克隆形成实验验证其放射敏感性,CCK-8法及流式细胞术检测10 Gy剂量照射前后的细胞增殖率及细胞凋亡率.结果 CNE-2细胞膜CD166阳性表达率为(24.27±5.31)％,分选后CNE-2-CD166(+)细胞CD166阳性表达率为96.5％,CNE-2-CD166(-)细胞为0.6％.克隆形成实验结果显示,CNE-2-CD166(-)细胞相对CNE-2-CD166(+)细胞的放射增敏比(sensitization enhancement ratio,SER)为1.24.10Gy照射后24 h、48 h和72 h,CNE-2-CD166(+)细胞的存活分数分别为(76.66±3.36)％、(62.44± 1.66)％和(55.21±3.39)％,CNE-2-CD166(-)细胞为(60.34±5.13)％、(41.11±3.00)％和(35.28±4.36)％,同时段内两组细胞的存活分数比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).10 Gy照射前,CNE-2-CD 166(+)细胞和CNE-2-CD166(-)细胞凋亡率分别为(5.87±1.14)％和(6.67±1.68)％,差异无统计学意义(P＞0.05);10 Gy照射后48 h,CNE-2-CD166(+)细胞凋亡率为(19.37±2.54)％,显著低于CNE-2-CD166(-)细胞的(28.90±4.04)％,差异有统计学意义(P=0.026).结论 CD166表达阳性的鼻咽癌CNE-2细胞对放射更具抗拒性,可能与减少细胞受照射后的凋亡率降低有关.     

线粒体DNA影响细胞的放射敏感性

目的 了解细胞接受辐射后,线粒体DNA（mdDNA）对细胞放射敏感性的影响。方法 利用缺乏mtDNA的细胞株（ρ^0细胞）、携带变异mtDNA的细胞株（syn^-细胞）和携带正常mtDNA的细胞株（ρ^0细胞）进行体外实验研究。3种细胞株经不同剂量伽玛射线照射后,采用集落形成实验和流式细胞术等方法,获得3种细胞株的存活曲线（应用LQ模型）,并分析其细胞周期的变化和比较各种细胞之间凋亡的差异。结果 3种细胞株的存活曲线表明,ρ^0细胞株比其它2种细胞株显示对射线有较强的抵抗（F=10.45,P=0.022)。2、5和8Gy照射之后,ρ^0细胞株的细胞凋亡明显少于其它2种细胞株（F=14.29,P=0.0007;F=4.80,P=0.0293;F=4.98,P=0.0154）。3种细胞株被照射后细胞周期的变化不明显。结论 mtDNA可能是影响细胞放射敏感性的一个重要因素。     

放射敏感性与放射增敏

近年来,肿瘤的放射治疗取得了较好的成绩,这主要得益于临床放射生物学的发展。但是,如何克服放射抵抗性尚无理想途径。目前,“４Ｒ”仍是综合分析的理论基础,且已融入了许多新的内容。本文试图综合放射生物学领域的最新成果,就放射敏感性相关因素作一总结。１乏氧细胞与放射敏感性 多数实体瘤中均存在一定比例的乏氧细胞,它们对低ＬＥＴ辐射相当抗拒,是放射治疗失败的重要原因之一。肿瘤乏氧本身是受多种因素影响的,包括肿瘤所在部位、宿主情况、肿瘤血管形态异常等。随着认识的逐步深入,试图解决的途径也越来越多。早期曾以高压…     

肿瘤细胞DNA甲基化状态与放射敏感性研究进展

DNA甲基化是基因表达调控的重要方式之一,参与了肿瘤的发生、发展,与肿瘤细胞放射敏感性密切相关。肿瘤细胞DNA异常甲基化改变可以为肿瘤的早期诊断提供分子标志,同时在放疗疗效评价、放射增敏、预后评估、病情监控等方面发挥作用。本文主要针对肿瘤细胞DNA甲基化与放射敏感性的关系及其在放疗中的潜在应用价值进行综述,为进一步探索肿瘤细胞放射耐受的表观遗传学机制提供理论基础。     

DNA甲基化与鼻咽癌

癌基因和抑癌基因表达失常是鼻咽癌发病的关键。鼻咽癌与细胞凋亡和细胞周期调控基因、细胞黏附分子编码基因、应激反应基因、DNA错配修复基因、维甲酸信号通路相关基因、Wnt信号通路相关基因以及RIZ1基因、DLC1基因、H19和COX-2基因等基因异常甲基化相关。     

DSB修复蛋白ATM DNA-PKcs与肿瘤放射敏感性关系的研究进展

放射线主要通过导致细胞DNA双链断裂(DSB)而起到杀死肿瘤细胞的作用,但细胞都有不同程度的DSB修复能力,研究证实DSB 修复水平与细胞放射敏感性关系密切.在人类细胞内有2 种DSB 修复途径:一种是以DNA 依赖蛋白激酶(DNA-PK)复合物为主的非同源末端连接(NHEJ)修复,另一种是以毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白(ATM)为主的同源重组(HR)修复.在人体内,NHEJ修复是最主要的修复途径,DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)是DNA-PK复合物的主要功能单位.DNA-PKcs的激酶活性是NHEJ修复所必须的,其在DSB修复中起核心作用.近年来的研究显示ATM、DNA-PKcs蛋白表达水平与肿瘤放射敏感性有关.该综述将有关ATM、DNA-PKcs的功能、在肿瘤组织中的表达及与肿瘤放射敏感性关系的研究进行简要回顾.     

放射敏感性与放射增敏研究进展

近几年来,对肿瘤的放射治疗取得了较好的效果,这主要得益于临床放射生物学的发展。但是,如何克服放射抵抗性尚无理想途径。目前,“4R”仍是综合分析的理论基础,但已融入了许多新的内容。作者是试图综合放射生物学领域     

鼻咽癌细胞DNA和PCNA测定与临床预后关系的探讨

鼻咽癌细胞ＤＮＡ和ＰＣＮＡ测定与临床预后关系的探讨陈茂怀，郑瑞明，吴贤英，梅品超广东省汕头大学医学院病理教研室（汕头市５１５０３１）对鼻咽角化型鳞癌、梭形细胞癌、低分化的非角化型鳞癌和泡状核细胞癌的ＤＮＡ含量及其细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）阳性细胞进行...