无细胞异种真皮与表皮细胞悬液复合移植的研究

目的　研究用无细胞异种真皮与表皮细胞悬液复合移植的效果及组织学变化。方法　将 4 2只裸鼠分为实验组及对照组 ,实验组于背部全层皮肤缺损创面移植无细胞异种真皮及人表皮细胞悬液 ,对照组单纯移植人表皮细胞悬液。于术后 2、3和 5周计算创面愈合率 ,术后 3、6和 12周计算创面收缩率 ,并取活检行组织学检测。结果　实验组创面愈合率高 ,分别为 79.1%± 4 .5 % ,89.6 %± 4 .4 % ,98.1%± 3.4 % ,收缩程度轻为 16 .3%± 5 .2 % ,2 5 .5 %±7.2 % ,32 .5 %± 7.1% ,外观平整 ,质地良好 ,胶原纤维排列整齐 ,基底细胞桥粒 -半桥粒结构及基底膜等结构重建明显 ,未见明显的急性排斥反应 ;对照组创面愈合率分别为 6 9.2 %± 4 .9% ,78.2 %± 7.6 % ,90 .6 %± 5 .0 % ,收缩率为2 0 .5 %± 6 .0 % ,31.3%± 6 .9% ,4 4 .6 %± 7.2 % ,与实验组相比 ,均有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,愈合后的表皮质地薄 ,易破溃 ,胶原纤维紊乱 ,表皮 -真皮连接结构重建不明显。结论　无细胞异种真皮与表皮细胞悬液复合移植修复创面 ,可改善创面愈合质量。     

人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植的实验研究

目的 观察人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植全层皮肤缺损创面后的效果,寻找一种新的创面覆盖物。方法 42只裸鼠作背部全层皮肤缺损创面,分别进行复合皮移植（复合皮组）和单纯表皮细胞膜片移植（对照组）,术后定期观察创面愈合情况并进行创面愈合率及创面收缩率的计算,同时留取创面组织进行组织学检查。结果 与对照组相比较,复合皮组的创面愈合及外观情况良好,两组创面愈合率及收缩率的差异有显性意义（P＜0．05）;组织学检测提示复合皮上皮分化充分,胶原增生有序,表皮－真皮连接结构重建明显,未见明显的急性期免疫排斥反应。结论 人表皮细胞与无细胞异种真皮复合移植能改善创面愈合质量,可作为一种新的皮肤代用品。     

含表皮细胞和成纤维细胞的复合皮构建及移植实验

目的 探讨成纤维细胞在构建复合皮中的作用，并观察复合皮对全层皮肤缺损创面的修复效果。方法 将表皮细胞与成纤维细胞种植于无细胞真皮替代物表面，于体外培养构建复合皮，观察种植成纤维细胞对表皮细胞与无细胞真皮替代物间粘附性的影响。然后将复合皮移植于裸鼠（16只）全层皮肤缺损创面，观察存活率及新生皮肤组织结构。结果 表皮细胞种植于无细胞真皮表面可形成复合皮，当种植少量成纤维细胞修饰无细胞真皮表皮面后，表皮细胞与真皮基质粘附紧密，在移植等操作过程中，表皮细胞膜片不易脱落。复合皮移植可封闭全层皮肤缺损创面，完全存活者最高达10只（62.5%)，新生皮肤基底膜结构完整，可见层粘连蛋白、Ⅳ型胶原形成。结论 以无细胞真皮替代物为载体的复合皮可修复全层皮肤缺损创面，种植成纤维细胞可增强表皮细胞的粘附性，有利于移植存活率的提高。     

人工真皮与自体表皮细胞复合移植的研究

目的 探索覆盖三度烧伤切痂创面的新方法。方法 酸溶解法提取鼠尾腱Ｉ型胶原，与６－硫酸软骨素混合，制成人工真皮。该人工真皮灭菌后，移植于兔背部全层皮肤缺损创面，外用辐照猪皮覆盖保护。移植后２周，去除表面的辐照猪皮，移植自体表皮细胞，外用辐照猪具保护。结果 制成的人工真皮为半透明薄膜，内部为有孔的网状结构。移植于兔全层皮肤缺损创面后２周，人工真皮已被血管化，复合移植后２￣４周，表皮细胞已分化增殖使创面     

成纤维细胞-无细胞真皮替代物的生物学活性及移植实验

目的 研究含成纤维细胞的无细胞真皮替代物的生物学活性及真皮支架作用。方法 将成纤维细胞种植于无细胞真皮表面培养,形成活性真皮替代物。采用ELISA法和RIA法测定培养上清中IL－6、IL－8、TGF－β1及细胞外基质层粘连蛋白、透明质酸的分泌。并将真皮替代物植入BALB／c-nu小鼠（裸鼠）全层皮肤缺损创面,观察血管化速度、创面收缩率。结果 成纤维细胞种植于无细胞真皮表面生长良好,可形成单层细胞膜片,并分泌多种细胞因子和细胞外基质成份。活性真皮替代物植入创面后,与单纯无细胞真皮移植相比,血管化速度加快,收缩率减小。结论 无细胞真皮上种植成纤维细胞后具有较强的生物学活性,可作为较好的真皮替代物。     

无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察

目的：为改善植皮区外观和功能，并同时减轻供皮区瘢痕增生。方法：应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于２例切削痂后的烧伤创面。结果未发现对复合移植物的排异反应。创面愈合后，大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显，自体小皮片的轮廓基本消失，均反应了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合移植区基底清晰，连续且完整等。与对照部位相比，复合移植区瘢痕增生减轻，未见明显挛缩，皮肤弹     

无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察

目的:为改善植皮区外观和功能,并同时减轻供皮区瘢痕增生.方法:应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于2例切削痂后的烧伤创面.结果:未发现对复合移植物的排异反应.创面愈合后,大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显,自体小皮片的轮廓基本消失,均反应了愈合过程的特殊性.光镜和电镜观察发现复合移植区基底膜清晰、连续且完整等.与对照部位相比,复合移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好.结论:至少到目前为止的观察期(3～4个月)内,较薄的刃厚自体皮与无细胞真皮基质复合移植后外观和功能等同或优于单纯刃厚自体皮移植.     

无细胞真皮基质与自体皮复合移植愈合过程的观察

目的 :为改善植皮区外观和功能 ,并同时减轻供皮区瘢痕增生。方法 :应用自制的无细胞真皮基质与薄的刃厚自体皮复合移植应用于 2例切削痂后的烧伤创面。结果 :未发现对复合移植物的排异反应。创面愈合后 ,大体观察发现移植网状自体皮的网状形式已变得不明显 ,自体小皮片的轮廓基本消失 ,均反应了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合移植区基底膜清晰、连续且完整等。与对照部位相比 ,复合移植区瘢痕增生减轻 ,未见明显挛缩 ,皮肤弹性较好。结论 :至少到目前为止的观察期 (3～ 4个月 )内 ,较薄的刃厚自体皮与无细胞真皮基质复合移植后外观和功能等同或优于单纯刃厚自体皮移植     

无细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用

目的：改善烧伤创面移植皮片愈合后皮肤的外形和功能,并减轻供皮区瘢痕增生。方法：应用自制的无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植于4例切（或削）痂后的烧伤创面。结果：未发现对复合移植皮片的排异反应。创面愈合后,大体观察发现移植自体网状皮片及自体小皮片的轮廓界面变得不明显或基本消失,自体大张皮片与真皮基质复合移植区出现较厚而特殊的脱屑,均反映了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合皮片移植区棘细胞间桥粒清晰,基底膜连续而完整等。与对照部位相比,复合皮片移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好。结论：在3－4个月的观察期内,自体刃厚皮片与无细胞真皮基质复合移植后,功能和形态等同或优于单纯自体刃厚皮片移植。     

表皮细胞、成纤维细胞和几丁质-胶原蛋白复合人工皮的体外构建

目的 探讨几丁质—胶原蛋白膜作为表皮细胞、成纤维细胞培养支架的可能性，体外构建包含双层细胞的复合皮。方法 取健康成人环切包皮，分离成纤维细胞、表皮细胞，分别制成单细胞悬液，将几丁质-胶原蛋白膜(有孔面向上)平铺于60mm培养皿中，首先接种成纤维细胞，培养2d后，将含10％小牛血清的DMEM更换成完全型DMEM，翻转膜，使光滑面朝上，再种植表皮细胞，每日换液。定期观察细胞与材料的粘附、细胞贴壁及其生长增殖情况。结果 几丁质—胶原蛋白膜对成纤维细胞、表皮细胞无明显毒性作用，成纤维细胞培养1d后，细胞贴附于材料支架，细胞胞体较大，呈典型的梭形。加入表皮细胞复合培养2d示表皮细胞贴壁生长，并分化、增殖。复合皮构建2周，网格支架及孔内均有大量细胞生长，膜表面细胞融合成片，表皮细胞分化形成复层。结论 几丁质—胶原蛋白膜对细胞无毒性，有利于培养细胞的粘附、生长。在体外可以构建成功类似生理性皮肤的人工皮肤。     

脱细胞异体真皮与自体表皮复合移植修复创面

目的　研究应用脱细胞异体真皮与自体表皮复合移植修复创面的临床效果。　方法　 2 0 0 0年 7月～2 0 0 2年 8月 ,应用脱细胞异体真皮与自体表皮构成的复合皮对 34例头颈、躯干及四肢等部位的创面进行修复 ,创面最小5 cm× 10 cm,最大 12 cm× 19cm,其中陈旧性肉芽创面 2例 ,巨大色素痣切除创面 4例 ,皮肤广泛毛细血管瘤切除后创面 6例 ,瘢痕切除后创面 2 2例。观察移植皮片的成活率及愈后皮片色泽、功能情况。　结果　临床应用 34例 ,术后移植复合皮全部成活 ,30例获 3个月～ 2年随访 ,移植皮片颜色与周围正常肤色接近 ,皮片柔软 ,瘢痕增生不明显 ,功能改善显著。　结论　脱细胞异体真皮与自体表皮复合移植较单纯自体表皮移植后 ,皮片质量及关节部位功能上均有明显改善 ,尤其适合于四肢创面修复。     

异种(猪)脱细胞真皮与自体表皮复合移植研究

目的 为深度烧伤、瘢痕切除控制瘢痕增生与组织凹陷等寻求良好、廉价的覆盖与充填材料。方法 健康的白色小猪,活杀后剥其皮肤,用固定剂对异种（猪）皮肤细胞外基质固定交联,盐水法去除表皮,保留基底膜,用酶化学剂去除异种（猎）皮肤细胞,使其失去抗原性,保留完整的基底膜和细胞外基质的形态,制成网状异种（猪）脱细胞真皮支架。结果 对２３例病人进行异种（猪）脱细胞真皮支架移植７ｄ左右,再植自体刃厚大张皮的二步法复     

不同种属脱细胞真皮与自体皮复合移植的比较性研究

目的　观察不同种属脱细胞真皮基质 (acellulardermalmatrix,ADM)与自体皮复合移植的效果 ,为异种ADM的临床应用提供理论依据。　方法　本地产白色小猪 6头 ,分为异种 (人 )ADM +自体刃厚皮组 (A组 )、同种异体 (猪 )ADM +自体刃厚皮组 (B组 )、单纯自体刃厚皮组 (C组 )及单纯自体中厚皮组 (D组 )。观察术后 2、4、8、12、2 4周内移植物存活率 ,以及移植皮片收缩程度、移植区组织学变化等情况。　结果　A、B组移植后皮片外观光滑、有弹性 ;两组均获得了满意的皮片成活率 ,并可迅速诱导成纤维细胞、血管内皮细胞等宿主修复细胞的长入 ;两组移植皮片收缩面积有大于C、D组的趋势 (P <0.0 5);术后 2 4周移植区组织与单纯中厚皮移植组织结构一致。　结论　在观察期内(复合移植后 2 4周 ) ,与自体皮复合移植时 ,同、异种ADM具有相近的生物学作用 ,异种来源的ADM可能具有更广阔的应用前景     

提高无细胞异体真皮基质复合移植的成活率

目的提高无细胞异体真皮基质(Allo-ADM)复合移植的成活率.方法将36块经胰蛋白酶和戊二醛等处理的网状Allo-ADM与超薄断层自体皮片(Auto-OTS)一次性重叠移植于21例烧伤患者的Ⅲ度切痂创面和整形患者的切疤创面上,以邻近Auto-OTS和断层中厚自体皮片(Auto-TTS)移植物为对照,观察Allo-ADM的厚度和术后首次换药时间对复合皮CS成活率(%)和皮片质量的影响.结果CS组总体成活率较Auto-OTS组和Auto-TTS组低(P＜0.05),其中薄的(0.2～0.3mm)Allo-ADM组比较厚的(0.3～0.4mm)Allo-ADM组成活率高(P＜0.01),延期(12～17d)换药组成活率明显高于按期(5～7d)换药组(P＜0.01),薄的Allo-ADM组和延期换药组均与对照组无显著性差异;随访1～4年,CS组未见排异反应和瘢痕增生,外观色质和弹性近似正常皮肤而优于Auto-TTS组;组织学上,2周时双层CS与创基之间可见Allo-ADM网孔内血管蒂状结构,与对照组相比,52周时CS组真皮层胶原排列有序,有较少的淋巴细胞散在分布.结论Allo-ADM与Auto-OTS一次性重叠移植,提高了超薄自体皮片的移植效果,适合在烧伤和整形患者中推广应用;条件允许时,适当增加ADM的厚度和网孔密度以及延长首次换药时间将有助于提高CS的成活率和质量.     

表皮细胞膜片与猪去细胞真皮基质复合的移植

目的观察鼠表皮细胞膜片与猪去细胞真皮基质复合移植修复全层皮肤缺损的可行性和效果。方法以SD乳鼠的第3代表皮细胞制备细胞膜片,高渗盐水/氢氧化钠法制备猪去细胞真皮基质。36只SD大鼠全层皮肤缺损创面,分别行去细胞真皮基质与表皮细胞膜片复合移植和单纯表皮细胞膜片移植。结果两组创面术后均未见对移植物的急性期免疫排斥反应,第2、4、6周复合植皮组移植物成活率分别为(77.05±4.69)%、(83.12±5.13)%、(90.66±4.87)%,与细胞膜片移植组差异无统计学意义(P>0.05),但移植物收缩率显著减低,分别为(9.84±2.33)%、(18.97±3.40)%、(25.92±3.11)%(P<0.05)。复合植皮组上皮化良好,胶原纤维排列有序,基底膜结构完整。结论复合移植适用于修复全层皮肤缺损,能改善创面愈合质量。     

异种脱细胞真皮与自体表皮复合移植病人的护理

对83例异种(猪)脱细胞真皮与自体表皮复合移植病人临床护理进行总结.提出术前准备和心理护理、复合移植后植皮区体位护理和创面护理、预防感染、加强营养以及复合移植成活后皮肤护理是其主要内容.     

不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的研究

目的：探讨不同性状激光微孔脱细胞真皮构建活性基质的可行性。方法：将激光微孔猪脱细胞真皮分成两组即干燥组和湿润组，每组36片。将成纤维细胞悬液分别滴加在两组真皮表面，培养不同时间点后，每组分别随机留取6个孔的培养液，采用双抗体夹心ELISA法测定上清液中人TGF-β1、bFGF含量。结果：随着培养时间的延长，TGF-p。和bFGF分泌量逐渐增多，第8天达到稳定水平，第10、12天与第8天的含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）；各时间点干燥组各因子的含量均高于湿润组（P〈0．05）。结论：激光微孔猪脱细胞真皮可用为支架构建活性基质，其冷冻干燥后更有利于成纤维细胞的粘附与增殖。     

无细胞真皮基质的制备及应用

无细胞真皮基质是指异体或异种皮经一系列处理后 ,保留原有胶原纤维成分及基本组织结构的一种永久性真皮替代物。其制作方法有胰酶消化法 ,Dispase- Triton X- 10 0法 ,高渗盐溶液 - SDS法 ,平衡盐浸泡法等。与其他真皮基质相比 ,其具有来源广泛、低免疫原性、生物亲和性高、有利于黑色素细胞增生等特点。其既可用于创面修复 ,又可用作软组织的替代物。广泛应用于烧伤、整形、口腔、神经外科、眼科、耳鼻喉科等学科领域     

无细胞真皮基质的制备及应用

无细胞真皮基质是指异体或异种皮经一系列处理后，保留原有胶原纤维成分及基本组织结构的一种永久性真皮替代物，其制作方法有互酶消化法，Dispase-TritonX-100法，高渗盐溶液-SDS法，平衡盐浸泡法等，与其他真皮基质相比，其具有来源广泛，低免疫原性，生物亲和性高，有利于黑色素细胞增生等特点，其既可用于创面修复，又可用作软组织的替代物，广泛应用于烧伤，整形，口腔，神经外科，眼科，耳鼻喉科等学科领域。