参麦注射液对人成骨肉瘤多药耐药细胞株R-OS-732逆转作用

目的选用人成骨内瘤多药耐药细胞株R-OS-732为对象来观察参麦注射液逆转多药耐药（MDR）的作用。方法用MTY法检测常用化疗药物对R-OS-732的毒性。结果经MTY法发现参麦注射液能增加R-OS-732对阿霉素的敏感性，使阿霉素半数抑制浓度（IC50）由12．4ms／L，降至7．21mg／L，部分逆转了R-OS-732对阿霉素耐药性，逆转倍数为1．72倍。同时，参麦注射液可提高R-OS-732细胞内化疗药物的浓度，增加化疗药的毒性作用。结论参麦注射液能逆转人成骨内瘤多药耐药细胞株R-OS-732，其机制可能与胞内阿霉素浓度有关。     

多药耐药逆转剂抗白血病细胞多药耐药性的作用

白血病细胞对化疗药物产生多药耐药性是联合化疗失败的最重要原因之一.虽然大量研究表明白血病耐药的机制很多,包括细胞膜药物泵分子的诱导、细胞浆内药物代谢酶活性或代谢途径的改变、白血病细胞凋亡机制的改变等,但P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在白血病细胞膜上的表达仍是目前研究发现最主要的耐药机制.     

薏苡仁注射液对肺腺癌细胞多药耐药性逆转作用的机制研究

目的 观察薏苡仁注射液(康莱特)对人肺腺癌细胞A549多药耐药性(MDR)逆转作用,并对其机制进行探讨.方法 体外培养人肺腺癌细胞系A549并以不同剂量康莱特进行处理,磺酰罗丹明(sulphorhodamine B,SRB)染色法检测药物对各组细胞的抑制率;反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测多药耐药因子多药耐药基因1(MDR1)、生存素(Survivin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA在各组中表达情况;蛋白质印迹(Western blot)法检测P-糖蛋白(P-gp)、Survivin、Bcl-2、Bax蛋白水平表达,将各组结果进行比较.结果 4组肺腺癌细胞A549的抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.05).其中,与空白对照组比较,康莱特低、中、高剂组抑制率降低,差异均有统计学意义(P<0.05).康莱特中、高剂组抑制率比较,差异亦有统计学意义(P<0.05).康莱特低、中、高剂组MDR1、P-gp、Survivin、Bcl-2表达降低,Bax表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 康莱特可抑制肺腺癌细胞生长,该药具有明显的逆转肺腺癌多药耐药性的作用,该作用是通过调节多药耐药因子的表达而实现的.     

索拉非尼逆转肝癌细胞多药耐药的实验研究

目的 探讨索拉非尼体外对人肝癌细胞(BEL-7402/FU)多药耐药性的逆转作用及可能机制.方法 以MTT比色法测定索拉非尼对肝癌细胞的剂量效应曲线,并以流式细胞仪检测索拉非尼对肝癌细胞内罗丹明123 (Rho123)浓度的影响,根据上述实验结果选取合适的索拉非尼实验剂量.以MTT法测定索拉非尼对抗癌药物细胞毒性的影响,用流式细胞仪检测细胞膜转运蛋白(P-gp)的表达,RT-PCR法检测mdr1基因的表达.结果 索拉非尼浓度在4μmol/L时逆转效率较高且毒副作用较小,4 μmol/L的索拉非尼能部分逆转BEL-7402/FU细胞的耐药性,对ADM、5-FU、GEM、DDP的逆转倍数分别为2.98、7.16、1.99、10.08倍,并可部分下调BEL-7402/FU细胞P-gp的表达,使mdrl基因表达与对照组相比下降了27.3%.结论 索拉非尼具有体外逆转人肝癌细胞多药耐药性的作用,可能与下调mdr1基因表达、增加细胞内化疗药物的蓄积有关.     

异搏定对白血病K562细胞耐药性的逆转作用

目的 :研究异搏定对 P-糖蛋白 (Pgp)介导的人类白血病 K 5 6 2细胞多药耐药作用。方法 :用台盼蓝拒染法检测药物敏感性及异搏定对细胞耐药性的影响 ,用免疫组织化学法检测 Pgp的表达 ,用流式细胞仪检测细胞内柔红霉素 (DNR)积聚。结果 :DNR诱导的耐药细胞 K5 6 2 / D对 DNR、长春新碱 (VCR)、高三尖杉脂碱 (HHT)、鬼臼乙叉甙 (VP16 )、米托恩醌 (MIT)交叉耐药。 DNR诱导了 K5 6 2 / D细胞的 Pgp过度表达。异搏定使 K 5 6 2 / D细胞内药物积聚增加 ,明显地逆转了 K5 6 2 / D细胞对 DNR、VCR、MIT、HHT、VP- 16的耐药性 ,而对敏感细胞 K5 6 2 / S的耐药性无影响。结论 :DNR诱导了 K5 6 2 / D细胞的 Pgp过度表达 ,异搏定通过抑制 Pgp功能逆转了 Pgp介导的K5 6 2 / D细胞的多药耐药性     

癌细胞多药抗药性研究进展

抗药性是癌症化疗成功的主要障碍之一,随着化疗的广泛应用,癌细胞的抗药问题逐渐引起了人们的重视。癌细胞抗药类型较多.最常见的是多药抗药(Multidrug Resistance,MDR),即癌细胞一旦对一种药物产生抗性,对其它结构和作用机制不同的药物亦产生交叉抗药性。近年来,随着分子生物学和基因工程的发展,有关癌细胞MDR的研究取得了重大进展,本文就此作一简述。     

多药抗药性逆转剂研究进展

多药抗药性逆转剂研究进展ＴＨＥＴＲＥＮＤＳＩＮＳＴＵＤＩＮＧＯＦＲＥＶＥＲＡＬＡＧＥＮＴＳＡＧＡＩＮＳＴＭＵＬＴＩＤＲＵＧＲＥＳＩＳＴＡＮＣＥ张予综述（河南省医学科学研究所郑州４５００５２）多药抗药性（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）...     

六神丸逆转白血病细胞多药耐药作用及相关机制研究

[目的]探讨六神丸逆转白血病细胞多药耐药作用及相关机制。[方法]对急性白血病患者随机分组后,两组病例均继续常规化疗。治疗组予六神丸,90粒/d,分3次服。观察1个月。治疗前后取患者骨髓,吸取单个核细胞,采用免疫荧光法定量测量P-糖蛋白(P170),计算P170蛋白细胞百分比率;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对患者的拓扑酶Ⅱα(TopoⅡα)、拓扑酶Ⅱβ(TopoⅡβ)基因进行mRNA水平的检测。[结果]治疗前后组内比较,治疗组P170蛋白表达有所下降,对照组有所上升,但均无显著差异(P>0.01);但两组治疗后组间比较,P170阳性表达例数、阳性表达率以及表达指数,治疗组均明显低于对照组,两者有显著性差异(P<0.01)。TopoⅡβ在治疗前后进行组内比较,治疗组有所上升,对照组有所下降,但均无显著差异(P>0.01);两组治疗后进行组间比较,治疗组明显高于对照组,两者有显著性差异(P<0.01)。TopoⅡα在组间和组内比较均无明显差异。[结论]六神丸可以通过降低P170的表达、提高TopoⅡβ的表达来逆转白血病细胞多药耐药。     

中药逆转白血病细胞多药耐药的研究进展

白血病多药耐药是导致化疗失败的主要原因,其机制主要与膜转运蛋白、酶转移系统及抗凋亡通路激活和抗凋亡基因表达等有关。由于西药逆转剂有很强的毒副作用,因此,从中药复方中寻找高效、低毒、多靶点的多药耐药逆转剂已成为当今的一个热点。本文对近年来有关中药逆转白血病细胞多药耐药方面的研究做一综述。     

苦参碱逆转人白血病K562/ADM细胞对阿霉素耐药性的研究

[目的] 探讨苦参碱对人白血病K562／ADM细胞对阿霉素耐药性的逆转作用。[方法] MTT法测定苦参碱的细胞毒性及其对K562／ADM细胞药敏性的影响,荧光分光光度法检测细胞内药物浓度的改变,流式细胞术检测耐药细胞凋亡百分率的变化。[结果] 苦参碱的非细胞毒性剂量为50μg／mL,低细胞毒性剂量为125μg／mL。50μg／mL苦参碱可增加K562／ADM细胞内阿霉素(ADM)浓度和K562／ADM细胞凋亡百分率,使K562／ADM细胞的IC50由原来的35．2μg／mL降低至15．8μg／mL,其逆转倍数为2．2倍。[结论] 苦参碱可部分逆转人白血病K562／ADM细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制与增加细胞内药物积累有关。     

紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药研究

目的:研究中药紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR)机理.方法:应用MTT法检测紫龙金的细胞杀伤作用,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因mRNA水平表达.结果:BIU-87/ADM细胞生存率为(98.00±1.48)％,加入紫龙金后(浓度分别...     

维拉帕米逆转肿瘤多药耐药性的研究进展

肿瘤细胞对化疗药物产生的多药耐药(MDR)已成为当前影响肿瘤化学治疗疗效的主要障碍,寻找低毒有效的MDR逆转剂是提高化疗疗效的关键。MDR产生机制复杂,由mdrl基因编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein P-gp)的过表达是产生MDR的主要原因。维拉帕米是应用最早的MDR逆转剂之一，但其毒副作用大大限制了临床应用。从维拉帕米分离出的光学异构体R-型维拉帕米，在逆转肿瘤MDR时，更加高效安全，具有良好的临床应用前景。     

Reversal of multidrug resistance and inhibition of phosphorylation of AKT in human ovarian cancer cell line by wild-type PTEN gene

Summary The reversing effect of wild-type PTEN gene on resistance of C13K cells to cisplatin and its inhibitory effect on the phosphorylation of protein kinase B (AKT) were studied. The expression of PTEN mRNA and protein in OV2008 cells and C13K cells were semi-quantitatively detected by using RT-PCR and Western blotting. Recombinant eukaryotic expression plasmid containing human wild-type PTEN gene was transfected into C13K cells by lipofectamine2000. The expression of PTEN mRNA was monitored by RT-PCR and the expression of PTEN, Akt, p-Akt protein were analyzed by Western blotting in PTEN-transfected and non-transfected C13K cells. Proliferation and chemosensitivity of cells to DDP were measured by MTT, and cell apoptosis was detected by flow cytometry after treatment with cisplatin. The expression of PTEN mRNA and protein in OV2008 cells were significantly higher than those in C13K cells. After transfection with PTEN gene for 48 h, the expression of PTEN mRNA and protein in C13K cells were 2.04 ± 0.10, 0.94 ± 0.04 respectively and the expression of p-Akt protein (0.94 ± 0.07) was lower than those in control groups (1.68 ± 0.14, 1.66 ± 0.10) (P < 0.05). The IC₅₀ of DDP to C13K cells transfected with PTEN (7.2 ± 0.3 μmol/L) was obviously lower than those of empty-vector transfected cells and non-transfected cells (12.7 ± 0.4 μmol/l, 13.0 ± 0.3 μmol/L) (P<0.05). The apopototis ratio of wild-type PTEN-transfected, empty vector transfected and non-transfected C13K cells were (41.65 ± 0.87)%, (18.61 ± 0.70)% and (15.28 ± 0.80)% respectively, and the difference was statistically significant (P<0.05). PTEN gene plays an important role in ovarian cancer multidrug resistance. Transfection of PTEN could increase the expression of PTEN and restore drug sensitivity to cisplatin in human ovarian cancer cell line C13K with multidrug-resistance by decreasing the expression of p-Akt. This project was supported by a grant from the National Natural Sciences Foundation of China (No. 30571950) and National Key Basic Research Program Foundation (NO.2002CB513107).     

Reversal of Multidrug Resistance and Inhibition of Phosphorylation of AKT in Human Ovarian Cancer Cell Line by Wild-type PTEN Gene

The reversing effect of wild-type PTEN gene on resistance of C13K cells to cisplatin and its inhibitory effect on the phosphorylation of protein kinase B (AKT) were studied. The expression of PTEN mRNA and protein in OV2008 cells and C13K cells were semi-quantitatively detected by using RT-PCR and Western blotting. Recombinant eukaryotic expression plasmid containing human wild-type PTEN gene was transfected into C13K cells by lipofectamine2000. The expression of PTEN mRNA was monitored by RT-PCR and the expression of PTEN, Akt, p-Akt protein were ana- lyzed by Western blotting in PTEN-transfected and non-transfected C13K cells. Proliferation and chemosensitivity of cells to DDP were measured by MTT, and cell apoptosis was detected by flow cytometry after treatment with cisplatin. The expression of PTEN mRNA and protein in OV2008 cells were significantly higher than those in C13K cells. After transfection with PTEN gene for 48 h, the expression of PTEN mRNA and protein in C13K cells were 2.04±0.10, 0.94±0.04 respectively and the expression of p-Akt protein ( 0.94±0.07) was lower than those in control groups (1.68±0.14, 1.66±0.10) (P< 0.05). The IC50 of DDP to C13K cells transfected with PTEN (7.2±0.3 μmol/L) was obviously lower than those of empty-vector transfected cells and non-transfected cells (12.7±0.4 μmol/l, 13.0±0.3 μmol/L) (P<0.05). The apopototis ratio of wild-type PTEN-transfected, empty vector transfected and non-transfected C13K cells were (41.65±0.87)%, (18.61±0.70)% and (15.28 ±0.80)% respectively, and the difference was statistically significant (P<0.05). PTEN gene plays an important role in ovarian cancer multidrug resistance. Transfection of PTEN could increase the ex- pression of PTEN and restore drug sensitivity to cisplatin in human ovarian cancer cell line C13K with multidrug-resistance by decreasing the expression of p-Akt.     

转基因法建立膀胱癌多药耐药细胞株

目的:建立高效、稳定的人膀胱癌多药耐药性细胞模型。方法:采用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1( )/bcl-2,通过脂质体将人bcl-2基因转染膀胱癌细胞BIU-87,RT-PCR检测基因转录水平,应用MTT比色法进行耐药性检验。结果:酶切鉴定和基因测序证明真核表达载体pcDNA3.1( )/bcl-2构建成功;RT-PCR分析表明,转染bcl-2基因的BIU-87/bcl-2细胞的bcl-2基因表达水平较BIU-87细胞和转染空载体的BIU-87/neo细胞显著提高;与BIU-87细胞和BIU-87/neo细胞相比,BIU-87/bcl-2细胞具有较高的耐药性。结论:基因转染法是建立人膀胱癌多药耐药细胞模型的理想方法。     

多药耐药细胞系HL-60/Mx的建立

目的 探讨建立多药耐药（MDR）白血病细胞系的简便方法。方法 HL－60细胞反复暴露于浓度递增的米托蒽醌（Mx）培养液中，暴露间期维持低浓度培养；MTT法检测耐药性改变，并对其P糖蛋白（P－170）、多药耐药相关蛋白（MRP）表达进行免疫组化检测。结果 ①HL－60／Mx细胞系对多种化疗药物产生耐药。②MRP阳性表达率增高。结论 本方法为建立耐药HL－60细胞系的有效方法。     

RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药

目的 筛选高效dsRNA/mdr1,以备研究RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药之用.方法 首先根据siRNA设计原则,以多药耐药基因(mdr1)为靶基因,设计并选择4～5条siRNA/mdr1,经BLAST后体外转录法合成dsRNA/mdr1,用Oligofectamine试剂分别转染HepG2/mdr1,然后从mRNA、蛋白(P-gp)表达水平和细胞功能变化评价HepG2/mdr1耐药性被逆转的程度,比较各个dsRNA/mdr1的逆转效率,筛选出有效的siRNA/mdr1.结果 成功合成5条dsRNA/mdr1(其中1条为阴性对照),dsRNA/mdr1-4 mRNA表达(18.73±1.33)%、蛋白表达变化(79.1±1.6)%～(16.8±0.4)%与其他各组细胞比较,有显著性差异;细胞内柔红霉素(DNR)累积量也较其他组明显增加(平均荧光强度79.58,阳性率84.25%,P＜0.05).结论 体外转录法结合脂质体转染适用于筛选高效siRNA,肯定了siRNA干扰序列能够有效阻抑mdr1基因编码蛋白p170的功能.     

白血病多药耐药逆转研究现状

化学治疗是白血病重要的治疗手段之一。近年来新的化疗药物不断涌现 ,化疗方案不断更新 ,然而白血病总的完全缓解率和长期生存率仍然低下 ,就其原因 ,主要是白血病细胞对化疗药物的多药耐药 (MDR)。作者就逆转白血病MDR方法的最新进展作一综述。     

HL-60/ADM细胞系耐药性检测

目的　检测 HL- 6 0 / ADM细胞化疗药物敏感性及 MRP表达。方法　以 HL- 6 0 / ADM细胞为实验对象 ,对化疗敏感的 HL - 6 0细胞为对照 ,MTT法检测药物敏感性 ,免疫细胞化学法检测 MRP蛋白的表达 ,PT- PCR法检测MRP m RNA表达。结果　两种细胞生长周期基本一致 ;HL - 6 0 / ADM细胞对 ADM、MTZ、VCR、H四种化疗药物 IC50 显著高于 HL- 6 0细胞 (P<0 .0 1) ,RF均在 2 0倍以上 ;HL- 6 0 / ADM表达 MRP m RNA,细胞膜表面 MRP阳性。结论　 HL-6 0 / ADM细胞系适合体外 MDR研究。