LC-MS/MS法同时测定人血浆中咪达唑仑和 1-羟基咪达唑仑的浓度

目的:建立同时测定人血浆样本中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑浓度的LC-MS/MS方法.方法:以d4-咪达唑仑为内标,血浆样本加入含内标的乙腈处理后进样分析.色谱柱为Kinetex C18(2.1mm×50 mm,2.6μm),流动相为乙腈-1 mmol· L-1甲酸铵溶液(含0.1％甲酸),梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,进样量为3.0 μL.质谱条件采用电喷雾正离子源,扫描方式为多重反应监测,用于定量分析的检测离子分别为m/z 325.9→291.0(咪达唑仑)、m/z 342.0→324.1(1-羟基咪达唑仑)、m/z 329.9→295.0(d4-咪达唑仑).结果:咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑分别在0.300～200 ng· mL-1和0.150～100 ng·mL-1线性关系良好,定量下限分别为0.300 ng· mL-1和0.150ng·mL-1,批内和批间精密度均小于15％,准确度在-4.7％～9.9％,基质效应为95.5％～101.4％,提取回收率为100.6％～102.4％.血浆样本室温放置12h、3次冻融循环及-40℃冰冻12个月稳定性良好,待测溶液进样器放置24h稳定.结论:本研究建立的分析方法灵敏、准确,样本前处理简便、快捷,可用于人血浆样本中咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑浓度的测定.     

微透析与LC-MS~n联用测定脑组织中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其脑内药代特征的研究

目的建立灵敏、快速、准确的LC-MSn方法测定咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其在大鼠脑内的药代动力学过程。方法 SD大鼠股静脉注射CYP3A探针药物咪达唑仑(剂量5 mg·kg-1)。采用微透析技术,在2μl·min-1流速下收集脑微透析液样品2.4 h,收集时间间隔为8 min。以LC-MSn法在线检测微透析样品。选用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相为2 mmol·L-1乙酸铵水溶液和乙腈,梯度方式洗脱。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),咪达唑仑m/z:326.1/291.1;1'-羟基咪达唑仑m/z:342.1/324.1;内标地西泮m/z:285.1/154.0。结果咪达唑仑和1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为0.78¹00和0.195100和0.195¹2.5μg·L-1,最低定量下限0.2μg·L-1,批内、批间RSD均<7%,RE值在-1.3412.5μg·L-1,最低定量下限0.2μg·L-1,批内、批间RSD均<7%,RE值在-1.34^-8%范围内。结论此检测方法快速、灵敏,可用于脑微透析液中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的含量测定,结合微透析技术有助于深入进行脑代谢的相关研究。     

机械通气患儿血浆中咪达唑仑及其代谢产物的测定

目的 建立测定人血浆中咪达唑仑及其代谢产物浓度的固相萃取和HPLC方法.方法 采用HPLC法分别测定29例ICU机械通气患儿给药24 h后血浆中咪达唑仑及其代谢产物浓度.色谱条件为：ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6×250 mm,5 μm）;流动相为7.56 mmol/L硫酸铵溶液-乙腈,梯度洗脱,柱温25 ℃,流速1.0 ml/mmin,紫外检测波长254 nm.结果 4-羟基咪达唑仑、1＇-羟基咪达唑仑和咪达唑仑的保留时间分别为8.14、9.09和11.18 min.咪达唑仑及其羟基代谢产物的相对回收率98.88%～100.01%,RSD＜4%.29例患者血浆中咪达唑仑、1＇-羟基咪达唑仑和4-羟基咪达唑仑的平均浓度为0.68,0.28和0.08mg/L.结论 该方法适用于咪达唑仑及其代谢产物血药浓度的常规监测.     

氟康唑联用咪达唑仑血药浓度测定方法及相互作用

目的:建立可同时进行氟康唑和咪达唑仑生物样品前处理的方法,应用RP-HPLC法分别测定氟康唑、咪达唑仑、1-羟基咪达唑仑的血药浓度;同时考察氟康唑与咪达唑仑联用对咪达唑仑血药浓度的影响.方法:1 mL血清样品加入内标后以5 mL乙酸乙酯提取,有机相用氮气吹干,以100 μL甲醇溶解,分别在不同的色谱条件下以20 μL进样测定.结果:氟康唑、咪达唑仑、1-羟基咪达唑仑及内标能够在同一条件下被提取.氟康唑在0.5～20 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.997 0,n=6),咪达唑仑在0.03 ～ 7.29 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 5,n=16),1-羟基咪达唑仑在0.09 ～ 7.29 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 3,n=5).联用氟康唑和咪达唑仑组较单用咪达唑仑组中咪达唑仑血药浓度明显增高.结论:该法灵敏、准确、简单、快速,可用于同时测定氟康唑、咪达唑仑及其代谢产物的血药浓度.联用氟康唑和咪达唑仑与单用咪达唑仑比较,咪达唑仑血药浓度明显增高.     

高效液相色谱法同时测定人血浆1'-羟基咪达唑仑与咪达唑仑含量

目的建立同时检测1’-羟基咪达唑仑和咪达唑仑血药浓度的高效液相色谱法。方法采用Zirchrom 反相柱(Kromasil C18， 250 mm×4.6 mm，5 μm)；柱温：40 ℃；流动相：醋酸铵水溶液-甲醇(35∶65，V/V)；流速：1.5 mL·min^-1，样品经碱化提取分离后，流动相溶解，在220 nm波长处检测，内标：地西泮溶液。结果1’-羟基咪达唑仑和咪达唑仑分别在0.005 ～0.100和0.01 ～0.20 μg·mL^-1范围内线性关系良好，最低检测浓度分别为0.002和0.003 μg·mL^-1。萃取回收率均＞95%，日内和日间RSD均＜5%。结论该方法专一性强、灵敏度高、简单可靠，可用于研究体内CYP3A4酶的活性。     

固相萃取-高效液相色谱法同时测定人血浆中地西泮、咪达唑仑及其代谢产物的浓度和临床应用

目的: 建立同时测定人血浆中地西泮、奥沙西泮、咪达唑仑和1'-羟基咪哒唑仑浓度的固相萃取-高效液相测定方法,并将其应用于临床中地西泮、咪达唑仑及其代谢产物血药浓度的测定。方法: 以卡马西平为内标,血浆样品经Cleanert C₁₈固相萃取柱净化处理。色谱柱为WondaSil C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水=55:45,柱温:30℃,流速:1.2 mL·min^-1,检测波长:308 nm,进样量:30 μL。结果: 地西泮、奥沙西泮、咪达唑仑和1'-羟基咪哒唑仑标准曲线范围分别为0.5~20,0.2~10,0.5~40,0.5~20 mg·L^-1,最低定量限分别为0.5,0.2,0.5,0.5 mg·L^-1,方法回收率分别为88.32%~93.77%,86.14%~91.80%,87.55%~92.53%,88.69%~92.30%,日内、日间精密度均小于7%。结论: 该方法简便快速,灵敏准确,测定结果可靠,适用于地西泮、咪达唑仑及其代谢产物血药浓度的检测。     

HPLC法测定人体内咪达唑仑血药浓度

目的建立人体血浆中同时测定咪达唑仑HPLC测定法。方法采用HPLC法,色谱柱为Hypersil ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(60:40)(含0.1%二乙胺,0.05%磷酸溶液),流速为1.0ml/min,柱温为室温,检测波长225nm。结果咪达唑仑在0.25~4μg/ml内呈良好的线性关系(r=0.9997),咪达唑仑最低检测浓度为50ng/ml,回收率96.81%~100.98%,萃取回收率87.69%~92.99%。日内、日间RSD(n=3)均小于5.89%。结论本方法简便、准确,可靠,可用于人体血浆中测定咪达唑仑的浓度。     

高效液相色谱法测定血浆中咪达唑仑浓度

目的 :建立测定血浆中咪达唑仑浓度的反相高效液相色谱法。方法 :以地西泮为内标 ,采用C18柱及保护柱 ;流动相为甲醇 -水 (6 0∶4 0 ,V/V) ,含乙腈 1%、二乙胺 0 1%、磷酸 0 0 5 % ;流速为 0 6mL·min-1;提取液为乙醚 ;采用紫外检测 ,检测波长为 2 2 5nm。结果 :咪达唑仑与内标分离良好 ,保留时间分别为 (11 2 1± 0 5 8)min和 (9 4 1± 0 39)min ;咪达唑仑在 0 1～ 2 0 μg·mL-1范围内线性良好 ,回归方程为Y =9× 10 -4X - 9 17× 10 -2 ,r=0 9998;日内及日间变异均 <6 % ;最低检测浓度 0 0 5 μg·mL-1。结论 :本方法适用于咪达唑仑的药动学和药效学研究     

反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法采用Hypersil-C18反相色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,水（pH=7.3,内含三乙胺0.15%,磷酸0.05%）-乙腈（46∶54）为流动相;流速为1.0mL.min-1;柱温为30℃;样品经碱化提取分离后用流动相溶解;采用紫外检测,检测波长为223nm。结果本方法测定咪达唑仑血药浓度在50～2000ng.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,咪达唑仑的保留时间为9.60min,其低、中、高（200、500、2000ng.mL-1）浓度的提取回收率分别为92.11%、90.25%、93.27%,方法回收率分别为96.81%、101.97%、101.58%,日内、日间RSD均〈5.0%。咪达唑仑血浆样品预处理室温放置10h及咪达唑仑标准贮备液于4℃下15d稳定。结论本法简单,准确,快速,稳定,灵敏度高,可满足咪达唑仑血药浓度的检测及临床药代动力学研究要求。     

HPLC法测定大鼠血浆中咪达唑仑的含量及其在药物相互作用研究中的应用

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量,并应用于佐米曲坦对大鼠肝细胞中 CYP3A 的诱导作用的研究。方法:采用色谱柱为 Diamonsil~(TM)(钻石)C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)(58:42),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为220 nm。咪达唑仑(10 mg·kg~(-1))作为经典 CYP3A 探针底物对3组不同诱导后的大鼠(佐米曲坦样品组、地塞米松阳性对照组或空白对照组)静注给药,测定咪达唑仑的清除率等参数来研究CYP3A 活性的变化。结果:咪达唑仑在0.3～375 μmol·L~(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9997,n=5),检测限为0.0018 μmol·L~(-1),平均回收率为97.9%。经佐米曲坦诱导的雄性大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)与雄性空白大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)比,显著降低,清除率增加,与地塞米松组中咪达唑仑的动力学参数相近;而经佐米曲坦诱导的雌性大鼠的动力学参数与空白雌性组比没有明显的变化。结论:本文建立的大鼠血浆中咪达唑仑测定方法稳定、准确、简便,能使咪达唑仑作为探针药物很好地运用于佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 诱导作用研究中。另外佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 具有性别差异的诱导作用。     

HPLC法测定人血浆中咪达唑仑的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法:色谱柱为WatersC18,流动相为甲醇-乙腈-水(40∶15∶45),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为220nm,内标为地西泮。结果:咪达唑仑血药浓度在19.91～796ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为15ng.mL-1;方法回收率在80.50%～89.09%之间,相对回收率在95.62%～108.28%之间,日内、日间RSD均<10.78%。结论:本方法灵敏度高、特异性好、精密度和准确度良好,可满足临床咪达唑仑血药浓度监测和临床药动学研究的需要。     

HPLC法测定人血浆中咪达唑仑的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法:以安定为内标,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18,流动相为0.02mol·L-1NaH2PO4水溶液(pH7.6,内含0.02%三乙胺)-乙腈(52∶48),流速为1.0mL.min-1,检测波长为223nm,灵敏度为0.001AUFS,进样量为50μL,柱温为40℃。结果:咪达唑仑血浆浓度在10~1 600ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 1),最低检测限为1ng·mL-1;日内、日间RSD≤7.25%。结论:本方法简便、灵敏、准确、快速,检测范围广,可用于咪达唑仑的血药浓度监测及临床药动学研究。     

马来酸咪达唑仑片在汉族健康人体内的药动学研究

目的:研究马来酸咪达唑仑片在汉族健康人体内的药动学。方法:10名汉族健康受试者口服马来酸咪达唑仑片15mg后,用高效液相色谱法测定咪达唑仑血药浓度,用DAS2.0药动学软件拟合药动学参数。结果:受试者单剂量口服马来酸咪达唑仑片后的主要药动学参数分别为Cma(x103.11±26.37)ng·mL-1、tma(x1.52±0.75)h、t1/(22.96±0.77)h、Vz/F(170.08±50.97)L、CL/F(41.05±12.33)L·h-1、AUC0～1(2368.80±103.37)ng·h·mL-1、AUC0～∞(397.29±124.06)ng·h·mL-1。部分受试者的药-时曲线存在双峰现象。结论:咪达唑仑片的药动学参数个体差异较大,临床应用时应注意个体化给药。     

反相高效液相色谱法同时测定 3 种抗癫痫药物的血药浓 度简

目的建立同时测定咪达唑仑（MID）、硝西泮（NZP）、地西泮（DZP）3种药物血药浓度的反相高效液相色谱法。方法血浆样品以乙酸乙酯＋石油醚提取,色谱柱为SymmetryshieldRP柱（250mm×4．6mm,5．0μm）,流动相为甲醇一磷酸盐缓冲液（55：45,v／v,pH2．15）,流速为0．9mL／min,检测波长为230nm,柱温为26℃,进样量为20μL。结果MID,NZP,DZP质量浓度均在20—4000ng／mL范围内与峰面积呈良好线性关系（r≥0．9996,n=5）;最低检测浓度（S／N=3）,NZP,DZP为10ng／mL,MID为20ng／mL;回收率均在98．2％～103．9％之间,日内及日间RSD均〈5％。结论该法能够同时测定3种药物的血药浓度,且简便、准确,适用于临床血药浓度监测。     

HPLC法测定芬太尼透皮贴剂中芬太尼含量

目的：采用高效液相色谱法测定芬太尼透皮贴剂中芬太尼含量。方法：采用内标法,用甲醇混合液90min超声提取样品。色谱柱为Shim—pack CLC—ODS C18（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇溶液（取甲醇400ml,乙腈200ml,及冰醋酸0．6ml,混匀）-0．2％无水硫酸钠的醋酸胺（1—100）（7：3）并用冰醋酸调节pH（6．5±0．1）为流动相,流速1ml·min^-1,柱温25℃,检测波长为230nm。结果：芬太尼浓度在2．5～50μg·ml^-1。范围内线性关系良好（r=0．9999）,最低检测限0．1ng·ml^-1,样品24h稳定,平均回收率为100．9％,RSD为1．27％。结论：本方法简便快速,结果准确,重现性好,适用于芬太尼透皮贴中芬太尼含量的测定。     

HPLC测定人血浆中咪达唑仑含量

目的：建立血浆中咪达唑仑浓度的高效液相色谱-紫外检测方法。方法：采用inertsilODS色谱柱;流动相为甲醇-水（62：38）,水相含磷酸0.16%,二乙胺0.25%;流速为1mL.min-1。采用紫外检测,检测波长为225nm。结果：咪达唑仑保留时间分别为12.86min、19.15min,咪达唑仑在0.4～12.8μg.mL-1范围内线性关系良好,回归方程为：Y=15448X＋313.47,r=0.9993;日内及日间变异均〈5%。结论：用高效液相色谱-紫外法检测咪达唑仑的血药浓度,方法简便、稳定,可满足临床研究的需要。     

HPLC法测定血浆中别嘌呤醇及氧别嘌醇的浓度

目的：建立人血浆中别嘌呤醇及其代谢产物氧别嘌醇的高效液相色谱测定方法。方法：色谱柱为Hypersil BDS C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为50mmol·L^-1KH2PO4（pH4．63）-甲醇（97：3）,流速１ml·min^-1,柱温30℃,紫外检测波长254nm。以阿昔洛韦为内标,血浆样品用高氯酸沉淀蛋白后分析。结果：别嘌呤醇在0．02～5μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9992）,提取回收率为76．4％～81．4％,方法回收率为98．7％～112．7％;氧别嘌醇在0．02—8μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9996）,提取回收率为76．3％～80．2％,方法回收率为97．2％～100．2％。结论：本法操作简便、灵敏、准确。     

RP—HPLC法测定马来酸咪达唑仑片的含量及有关物质

目的：建立RP—HPLC法,测定马来酸咪达唑仑片含量及有关物质。方法：采用C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,甲醇-醋酸盐缓冲液（0．1mol·L^-1冰醋酸,加0．1mol·L^-1氢氧化钠溶液调pH至3．5）（60：40）为流动相,流速为1．0mL·min^-1,检测波长为220nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果：咪达唑仑与已知杂质分离度大于3．0,马来酸咪达唑仑在0．01—1．00g·L^-1范围内线性关系良好（r=0．9999）,总平均回收率为99．49％（n=9）。结论：该法简便、灵敏,结果准确、可靠,可用于马来酸咪达唑仑片含量测定及有关物质检查。     

HPLC法测定千草脑脉通片中（＋）-松脂素单葡萄糖苷的含量

目的：建立高效液相色谱法测定千草脑脉通片中（＋）-松脂素单葡萄糖苷含量。方法：采用HederaODS-2 C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相乙腈-水（20：80）,流速1．0ml·min^-1,检测波长230nm。结果：（＋）-松脂素单葡萄糖苷在18．49～184．91μg·ml^-1浓度范围内,呈良好的线性关系（r=0．9995）;平均回收率为98．9％,RSD为1．1％（n=6）。结论：该方法简便、快速,可用于千草脑脉通片中（＋）-松脂素单葡萄糖苷的含量测定。