维生素A棕榈酸酯阳离子脂质体原位凝胶的制备及其兔角膜滞留性考察

目的:以维生素A棕榈酸酯(VAP)为主药,制备阳离子脂质体原位凝胶,并对其兔角膜滞留性进行考察。方法:采用薄膜分散法制备VAP脂质体(VAPL),并用不同季铵化程度的NC-三甲基壳聚糖(TMC)包衣制备CAP阳离子脂质体(TMCVAPL),再以泊洛沙姆407为基质,制备VAP阳离子脂质体原位凝胶(TMC-VAPL-ISG)。采用荧光示踪法对其兔角膜的滞留时间进行考察。结果:透射电镜显示VAP脂质体粒径分布均匀,未包衣时平均粒径为(62.98±0.078)nm,Zeta电位为(-11.2±0.57)mV,平均包封率为(70.62±0.66)%(n=3);TMC包衣后,脂质体粒径明显增大(P<0.05),平均包封率为(69.49±0.79)%,随着TMC季铵化程度的增大,Zeta电位显著增大(P<0.05)。与未包衣和包衣的CAPL相比,TMC-CAPLISG兔角膜的滞留时间延长2倍,且随着TMC季铵化程度的提高,滞留效果逐渐增强(P<0.05)。结论:TMC-VAPL-ISG具有阳离子脂质体和原位凝胶的优势,能明显延长兔角膜滞留时间。     

眼用维生素A棕榈酸酯阳离子脂质体-原位凝胶的研制及体外释药研究

目的：以维生素A棕榈酸酯（VAP）为模型,制备眼用阳离子脂质体-原位凝胶系统,并对其体外释药行为进行考察。方法：采用薄膜分散法制备VAP脂质体,根据胶凝温度筛选泊洛沙姆407的最佳处方浓度,采用无膜溶出模型对该制剂的体外释放行为进行考察。结果：透射电镜显示VAP脂质体-原位凝胶（VAPL—ISG）粒径分布均匀,经N-三甲基壳聚糖（TMC）包衣后Zeta电位〉40mV,泊洛沙姆407的最佳浓度为25％,VAPL—ISG中药物释放和凝胶溶蚀均呈现良好的零级释放特征。结论：VAPL—ISG具有阳离子脂质体和原位凝胶的优势,延缓了药物释放,为下一步研究其延长角膜滞留时间打下基础。     

维生素A棕榈酸酯阳离子脂质体原位凝胶的制备及其兔角膜滞留性考察

摘 要 目的: 以维生素A棕榈酸酯(VAP)为主药,制备阳离子脂质体原位凝胶,并对其兔角膜滞留性进行考察。方法: 采用薄膜分散法制备VAP脂质体(VAPL),并用不同季铵化程度的N-三甲基壳聚糖(TMC)包衣制备VAP阳离子脂质体(TMC-VAPL),再以泊洛沙姆407为基质,制备VAP阳离子脂质体原位凝胶(TMC-VAPL-ISG)。采用荧光示踪法对其兔角膜的滞留时间进行考察。结果:透射电镜显示VAP脂质体粒径分布均匀,未包衣时平均粒径为(62.98±0.078) nm,Zeta电位为(－11.2±0.57) mV,平均包封率为(70.62±0.66)%(n=3);TMC包衣后,脂质体粒径明显增大(P<0.05),平均包封率为(69.49±0.79)%,随着TMC季铵化程度的增大,Zeta电位显著增大(P<0.05)。与未包衣和包衣的VAPL相比,TMC-VAPL-ISG兔角膜的滞留时间延长2倍,且随着TMC季铵化程度的提高,滞留效果逐渐增强(P<0.05)。结论:TMC-VAPL-ISG具有阳离子脂质体和原位凝胶的优势,能明显延长兔角膜滞留时间。     

水溶性壳聚糖包覆多西他赛纳米脂质体的制备及性能研究

目的:制备羧甲基壳聚糖包衣多西他赛纳米脂质体,并考察其体外释放度。方法:采用薄膜分散法制备多西他赛阳离子脂质体,并用不同浓度的羧甲基壳聚糖包覆阳离子脂质体;用超滤法测定其包封率;用激光电位粒径测定仪分别测定其Zeta电位和粒径大小,并用透射电镜观察其形态;用透析法考察其体外释药性质。结果:所制的羧甲基壳聚糖包覆的脂质体包封率达99.98%;Zeta电位为-12.8 mV,平均粒径为(150±17)nm。结论:本实验制备的羧甲基壳聚糖包衣多西他赛纳米脂质体具有高包封率,粒径大小均匀,体外能显著延缓药物释放的性质。     

兰索拉唑脂质体的制备及其药剂学性质考察

目的:研究兰索拉唑阳离子脂质体的制备方法并考察其药剂学性质。方法:采用正交设计筛选处方,乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体;超滤法测定其包封率;用透射电镜观察脂质体的外观形态,并用粒径分析仪和Zeta电位仪分别测定脂质体的粒径和Zeta电位;进一步考察脂质体的释放规律。结果:所得脂质体包封率约为(80±1.23)%;形态为粒径均匀的球形和类球形,粒径为(184±21)nm,Zeta电位为(36.1±5)mV;脂质体的体外释放符合一级方程;具有较好的稳定性。结论:优选得到的脂质体处方和制备工艺合理、稳定,其体外释放具有缓释特点。     

N-三甲基壳聚糖的季铵化程度对溴吡斯的明包衣脂质体体外性质的影响

目的考察N-三甲基壳聚糖(TMC)的季铵化程度(DQ)对TMC包衣溴吡斯的明脂质体(PB-L)体外性质的影响。方法逆向蒸发法制备PB-L,以DQ分别为20%、40%及60%的TMC(即TMC20、TMC40、TMC60)对其进行包覆。对其形态进行观察,测定其粒径、Zeta电位及包封率,并对其体外释药特性进行考察。结果 TMC包衣PB-L外观呈圆整球形,具有明显的包衣层;TMC包衣后,PB-L粒径增加,且随DQ的增大而增大;包衣后PB-L的Zeta电位由负转正,且随DQ的增大而增大;DQ对包封率无显著性影响,平均包封率为(61.73±1.27)%(n=3);与未包衣PB-L相比,TMC包衣PB-L缓释性更显著,且释药速度随DQ的增大而降低。结论 DQ对TMC包衣PB-L的体外性质具有显著的影响。     

N-三甲基壳聚糖包覆司帕沙星纳米脂质体原位凝胶的研制及体外释药研究

摘 要 目的：制备眼用N-三甲基壳聚糖（TMC）包覆的司帕沙星（SL）纳米脂质体原位凝胶（ISG）,并考察其体外释放度。方法: 采用pH梯度法制备SL脂质体,经高压均质至纳米级,用TMC包衣。以胶凝温度为指标,优选ISG基质泊洛沙姆407的最佳浓度,采用冷法制备TMC包覆SL纳米脂质体ISG。对TMC包覆SL纳米脂质体ISG中脂质体的形态、粒径、Zeta电位及包封率进行考察;以TMC包覆SL纳米脂质体为对照,采用无膜溶出模型考察其体外释药特性。结果: 泊洛沙姆407的最佳浓度为25%,在人工泪液中的胶凝温度为23.6 ℃,稀释后的胶凝温度为33.5 ℃。TMC包覆SL纳米脂质体ISG中脂质体形态圆整,平均粒径为（96.8±1.5）nm,Zeta电位为（46.2±1.4）mV,包封率为（76.6±2.4）%,与TMC包覆SL纳米脂质体相比无明显变化。TMC包覆SL纳米脂质体ISG药物释放和凝胶溶蚀均为符合零级动力学特征,且与TMC包覆SL纳米脂质体相比,缓释性更为显著。结论:TMC包覆SL纳米脂质体ISG胶凝温度理想,并可延缓药物释放。     

甘草酸二铵脂质体的制备及其性质的研究

目的:研究甘草酸二铵阳离子脂质体的制备方法和脂质体的性质。方法:采用均匀设计筛选最佳处方,逆相蒸发法制备甘草酸二铵脂质体;葡聚糖凝胶柱法测定其包封率;用透射电镜观察脂质体的外观形态,马尔文测定仪测定脂质体的粒径和Zeta电位;并用溶出度第3法考察了脂质体的释放规律。结果:制得脂质体的包封率约为(56±1．54)%(n=3);脂质体的形态为粒径均匀的球形或近球形,粒径为(183±9)nm(n=3),Zeta电位为(22．8±6)mV(n=3);脂质体的体外释药符合Higuchi方程;具有较好的稳定性。结论:采用逆相蒸发法,添加十八胺可制得具有较高包封率及稳定性的甘草酸二铵阳离子脂质体,制得脂质体的体外释放具有缓释特点。     

兰索拉唑脂质体的制备及性质考察

目的研究兰索拉唑阳离子脂质体的制备方法并考察其体外释放行为及稳定性等。方法采用正交设计筛选处方;采用乙醇注入法制备兰索拉唑脂质体;采用超滤法测定其包封率;采用透射电镜观察脂质体的外观形态;采用粒径分析仪和Zeta电位仪分别测定脂质体的粒径和Zeta电位;采用透析法考察脂质体的释放规律。结果制得的脂质体包封率约为(80±1.23)%(n=3);脂质体的形态为粒径均匀的球形和类球形;粒径为(184±21)nm(n=3),Zeta电位为(36.1±5)mV(n=3);脂质体的体外释放符合一级方程,具有较好的稳定性。结论优选得到的脂质体处方和制备工艺合理,制剂性质稳定,其体外释放具有缓释特点。     

盐酸倍他洛尔阳离子脂质体原位凝胶的离体角膜滞留性研究

目的:考察盐酸倍他洛尔阳离子脂质体原位凝胶(BHCL-ISG)的离体角膜滞留性及生物相容性.方法:采用逆向蒸发法制备盐酸倍他洛尔脂质体(BHL),用季铵化程度为60％的N-三甲基壳聚糖(TMC60)对其包衣,得到阳离子脂质体(BHCL),再以泊洛沙姆407和188为温敏性原位凝胶(ISG)基质,用冷法制备BHCL-ISG.采用悬挂泡和束缚泡法对BHCL-ISG离体角膜接触角及表面解吸附动力学进行考察,并采用Draize评分法评价其兔角膜的刺激性.结果:BHCL-ISG外形圆整,粒径均匀,呈正电性.与BHL及BHL-ISG相比,BHCL-ISG与角膜的接触角较大,但角膜表面滞留时间明显延长(P＜0.05),同时未显示角膜刺激性.结论:BHCL-ISG可延长角膜滞留时间,并具有良好的生物相容性.     

TMC60包衣的INS阳离子纳米脂质体-原位凝胶眼球滞留性及刺激性研究

目的选用胰岛素（INS）为主药,制备N-三甲基壳聚糖（TMC）包衣INS阳离子纳米脂质体-原位凝胶（ISG）,并对其在家兔角膜滞留性及眼刺激性进行研究。方法采用逆向蒸发法制备TMC60包衣INS纳米脂质体（INSL）,并与等体积25％的泊洛沙姆溶液混匀制成眼用阳离子纳米脂质体．原位凝胶（TMC60-INSL-ISG）;采用悬挂泡技术和束缚泡技术进行离体眼球表面接触角及解吸附动力学研究;以Draize评分法评价其对兔角膜的刺激性。结果INSL-ISG粒径分布均匀,TMC60包衣后荷正电性;TMC60-INSL—ISG对家兔角膜无刺激性,与各参比制剂相比,TMC60-INSL-ISG在角膜表面接触角明显降低,解吸时间明显延长。结论TMC60-INSL—ISG兼具阳离子纳米脂质体及原位凝胶的优势,可明显延长角膜滞留时间,且不会对眼部造成刺激性,值得进一步研究。     

N-三甲基壳聚糖包衣脂质体生物安全性评价

目的:评价N-三甲基壳聚糖(TMC60)包衣脂质体的生物安全性,为其作为肿瘤靶向制剂的载体奠定实验基础.方法:分别采用静脉注射及腹腔注射,对TMC60包衣脂质体的小鼠急性毒性进行了考察,获得LD50;同时对其注射刺激性、过敏性及溶血性进行了评价.结果:TMC60包衣脂质体小鼠静脉注射及腹腔注射的LD50和95%置信限(95%CI)分别为224.1(95%CI:178.8～302.6)mg·kg-1和342.3(95%CI:269.7～534.2)mg·kg-1,同时在实验剂量时,无注射刺激性、过敏性及溶血性.结论:TMC60包衣脂质体的生物安全性较高,值得进一步研究.     

季铵化程度对N-三甲基壳聚糖包衣溴吡斯的明脂质体兔体内药动学的影响研究

目的：研究N-三甲基壳聚糖（TMC）的季铵化程度（QD）对TMC包衣溴吡斯的明（PB）脂质体（PBL）在兔体内药动学的影响。方法：采用逆向蒸发法制备PBL,以QD分别为20%、40%及60%的TMC（TMC20、TMC40及TMC60）对PBL进行包衣。30只日本大耳白兔随机分成5组,采用自身交叉对照实验,分别单剂量口服TMC20、TMC40及TMC60包衣PBL、未包衣PBL及市售PB普通片,HPLC法测定血浆中PB的浓度,用DAS 2.1.1软件计算药动学参数和各种TMC包衣PBL及未包衣PBL的相对生物利用度。结果：TMC20、TMC40及TMC60包衣PBL、未包衣PBL及市售PB普通片在兔体内的药动学特征均符合二室模型,主要药动学参数：C_（max）分别为（15.23±0.12）,（15.20±0.22）,（15.13±0.24）,（15.43±0.51）和（17.60±0.48）mg·L~（-1）;t_（max）分别为（4.16±0.10）,（4.28±0.17）,（4.52±0.24）,（4.05±0.15）和（2.33±0.28）h;AUC_（0-x）分别为（233.42±3.88）,（239.78±3.68）,（252.93±5.01）,（222.64±4.24）和（196.55±2.98）mg·h·L~（-1）。与市售PB片相比,TMC20、TMC40及TMC60包衣PBL、未包衣PBL的相对生物利用度分别为118.76%,121.99%,128.68%,113.27%。经方差分析、双单侧t检验和非参数检验,与市售普通片相比,TMC40、TMC60包衣PBL生物利用度显著提高（P〈0.05）,而TMC20包衣PBL及未包衣PBL则无明显变化（P〉0.05）。结论：TMC包衣PBL可显著提高药物兔体内生物利用度,QD对其有显著性影响,随着QD的增大,TMC包衣PBL生物利用度逐渐增大。     

N-三甲基壳聚糖对双氯芬酸钠经皮渗透作用的研究

目的:考察N-三甲基壳聚糖(N-trimethyl chitosan,TMC)作为透皮吸收促进剂的作用。方法:用壳聚糖及碘甲烷为主要原料,合成季铵化程度为60%的TMC,即TMC60,通过1H-NMR确定其季铵化程度。以2%氮酮为阳性对照,以双氯芬酸钠为模型药物,以离体小鼠皮肤为屏障,采用预处理法考察2%TMC60对双氯芬酸钠透过离体皮肤的促渗作用。结果:经~1H- NMR确定合成得到的TMC60季铵化程度为67.2%。体外透皮实验中,累积透过量及稳态透皮速率大小顺序均为:TMC60组>氮酮组>空白组,TMC60的促进作用强度大于同浓度的氮酮(P<0.05)。结论:TMC对双氯芬酸钠具有较好的经皮促渗透作用。     

N-三甲基壳聚糖对雌二醇凝胶透皮促进作用的体外研究

目的:研究季铵化程度为60%的N-三甲基壳聚糖对雌二醇凝胶体外透皮吸收的影响。方法:合成季铵化程度为60%的N-三甲基壳聚糖(TMC60),通过1H-NMR确定其季铵化程度。设立含2%TMC60的雌二醇凝胶为TMC60组,含2%氮酮的雌二醇凝胶为阳性组,无促渗剂的雌二醇凝胶为阴性组。通过体外透皮扩散试验得到各组累积透过量(Q),并求出稳态透皮速率(J)。结果:合成得到的TMC60季铵化程度为67.2%。TMC60组的Q和J显著大于阴性组(P<0.05),但与阳性组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:2%TMC60与2%氮酮的促渗效果相似,值得进一步研发。     

司帕沙星耳用原位凝胶的制备及质量评价

目的：制备司帕沙星（SF）温敏性耳用原位凝胶（ISG）,对其体外性质进行考察,为研发SF新制剂奠定基础。方法：以泊洛沙＂~407与188（质量比为3：4）为基质,用冷法制备SF-ISG。对其体外胶凝温度、胶凝强度及生物黏附性等主要物理性质进行考察,并对其质量控制进行了初步探索。结果：本品具有耳用ISG要求的合适的胶凝温度,胶凝强度理想,生物黏附性较强。主要质量评价指标简单易行,并符合相关规定。结论：SF温敏性耳用ISG制备简单,性质理想,值得进一步研发。     

N-三甲基壳聚糖包衣阿霉素脂质体与普通脂质体的抗肿瘤活性比较

目的:比较N-三甲基壳聚糖(TMC)包衣的盐酸阿霉素(ADM)脂质体与普通ADM脂质体的抗肿瘤活性。方法:采用硫酸铵梯度法制备ADM脂质体,以不同取代度的TMC进行包衣,采用动物移植性肿瘤实验法,用小鼠H22肝癌细胞接种于小鼠右侧腋下皮下形成实体瘤,考察TMC包衣ADM脂质体和普通脂质体给药后对实体瘤的瘤重抑制率。结果:TMC60、TMC40、TMC20包衣ADM脂质体对小鼠H22肝癌移植瘤的抑瘤率分别为64.3%,57.0%和54.8%,显著高于ADM脂质体组和游离ADM组(36.4%、42.7%)(P<0.05)。结论:TMC包衣ADM脂质体具有较好的抗肿瘤活性。     

N-三甲基壳聚糖包衣的盐酸阿霉素脂质体的制备

研制N-三甲基壳聚糖（TMC）包衣的盐酸阿霉素（ADM）脂质体。方法：采用硫酸铵梯度法制备ADM脂质体,以包封率为指标,筛选盐酸阿霉素脂质体最佳处方;合成不同季铵化程度的TMC,并对最佳ADM脂质体进行包衣。结果：未包衣ADM脂质体平均粒径为（378．6±5．2）nm,Zeta电位为（-62．08±2．5）mv,平均包封率为（62．27±1．75）％（n=3）。TMC包衣后,脂质体粒径增大,并随着TMC季铵化程度的增大,Zeta电位显著增大（p＜0．05）;TMC20、TMC40、TMC60包衣脂质体体外释药曲线符合Higuchi方程,分别为：Q=7．6315＋3．7863t1／2（r=0．9292）,Q=6．9647＋3．5709t1／2（r=0．9318）,Q=7．3451＋2．7665t1/2（r=0．9357）。结论：TMC包衣ADM脂质体的制备工艺可行,其表面带有较高正电性,为下一步研究其血管靶向性打下基础。     

去氢骆驼蓬碱脂质体冻干剂粉的制备工艺优选

目的:制备含有不同冻干保护剂的N-三甲基壳聚糖(TMC)包衣去氢骆驼蓬碱脂质体(TMC-HM-LP)的冻干粉,并筛选其最佳制备工艺。方法:用"薄膜分散-pH梯度法"制备去氢骆驼蓬碱脂质体,并采用孵育包衣法、低温高速离心法和结合高效液相色谱(HPLC)定量方法测定其包衣脂质体的包封率;以其冻干粉的外观在冻干前和复溶后脂质体的粒径、包封率作为对比指标,优选出最佳的冻干工艺以及冻干保护剂的种类及比例。结果:以葡萄糖-乳糖-甘露醇(2:1:0.5)作为冻干保护剂,通过"分步预冻"的方法和-80℃冷冻干燥技术得到的TMC-HM-LP外观良好,冻干前后粒径和包封率变化较小。结论:采用冷冻干燥技术并结合冻干保护剂的优选,可显著提高包衣脂质体的稳定性。     

Physicochemical and Immunological Characterization of N,N,N-Trimethyl Chitosan-Coated Whole Inactivated Influenza Virus Vaccine for Intranasal Administration

Purpose  The purpose of this study was the development and physicochemical and immunological characterization of intranasal (i.n.) vaccine formulations of whole inactivated influenza virus (WIV) coated with N,N,N-trimethyl chitosan (TMC). Methods  Synthesized TMCs with a degree of quarternization of 15% (TMC15) or 37% (TMC37) were tested in vitro for their ability to decrease the transepithelial resistance (TEER) of an epithelial cell monolayer. TMC15- and TMC37-coated WIV (TMC15-WIV and TMC37-WIV) were characterized by zeta potential measurements, dynamic light scattering, electron microscopy and gel permeation chromatography. Mice were vaccinated i.n. with selected vaccine formulations and immunogenicity was determined by measuring serum hemagglutination inhibition (HI) and serum IgG, IgG1 and IgG2a/c titers. Also a pulse-chase study with TMCs in solution administered i.n. 2 h prior to WIV was performed. Protective efficacy of vaccination was determined by an aerosol virus challenge. Results  TMC37 induced a reversible decrease in TEER, suggesting the opening of tight junctions, whereas TMC15 did not affect TEER. Simple mixing of (negatively charged) WIV with TMC15 or TMC37 resulted in positively charged particles with TMCs being partially bound. Intranasal immunization with TMC37-WIV or TMC15-WIV induced stronger HI, IgG, IgG1 and IgG2a/c titers than WIV alone. TMC37-WIV induced the highest immune responses. Both TMC15-WIV and TMC37-WIV provided protection against challenge, whereas WIV alone was not protective. Intranasal administration of TMC prior to WIV did not result in significant immune responses, indicating that the immunostimulatory effect of TMC is primarily based on improved i.n. delivery of WIV. Conclusions  Coating of WIV with TMC is a simple procedure to improve the delivery and immunogenicity of i.n. administered WIV and may enable effective i.n. vaccination against influenza.