柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病胰岛素抵抗机制的探讨

[目的]探讨柴苓调肝颗粒治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制.[方法]将造模成功的63只雄性Wistar大鼠随机分成7组,每组9只,分别为模型组,饮食控制组,甘乐对照组,三七脂肝丸对照组,柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组,未造模的9只大鼠为正常对照组;检测各组的血糖、血胰岛素、肝脏SOCS-3mRNA和SREBP-1c mRNA表达.[结果]与正常对照组相比,模型组血糖、血胰岛素、肝组织S)CS-3mRNA、SREBP-1c mRNA表达显著上调;柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组SOCS-3mRNA、SREBP-1cmRNA表达较模型组下调,且血糖、血胰岛素水平下降;用药各组间比较,差异无统计学意义.SOC-3mRNA表达水平与胰岛素抵抗指数、SREBP-1c mRNA表达水平呈显著正相关.[结论]SO)C-3可能通过胰岛素抵抗及上调肝组织SREBP-1c mRNA表达参与NAFLD发病,柴苓调肝颗粒能抑制肝脏SO)C-3 mRNA及的SREBP-1c mRNA表达,对NAFLD有一定治疗作用.     

柴苓调肝颗粒剂治疗大鼠非酒精性脂肪性肝病的实验研究

[目的]探讨柴苓调肝颗粒剂治疗大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。[方法]采用高脂饲料的方法制备大鼠NAFLD模型,造模成功后,随机分为7组,柴苓调肝颗粒剂高、中、低剂量(高、中、低剂量)组,甘乐对照(甘乐)组、三七脂肝丸对照(三七脂肝丸)组、模型对照(模型)组和饮食控制组,另设正常对照(正常)组未予造模。各组分别给予相应的处理,4周后检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和瘦素(LP)以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、体重及肝重指数的变化。[结果]高剂量组各项指标与模型组和饮食控制组比较差异均有统计学意义(P0.05,0.01),与正常组比较(P0.05)。[结论]柴苓调肝颗粒剂可有效治疗实验性NAFLD。     

甘正复方对大鼠非酒精性脂肪肝模型细胞色素氧化酶P450 2E1、脂联素和肿瘤坏死因子α表达的影响

[目的]探讨细胞色素氧化酶P450 2E1(CYP2E1)、脂联素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病机制中的作用并观察甘正复方的疗效及作用途径。[方法]30只SD大鼠随机分为3组:正常组10只喂普通饲料;模型组10只和治疗组10只喂高脂饲料。治疗组高脂饮食12周后同时给予复方甘正10 ml/kg鼠重灌胃,至实验16周末处死所有大鼠,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,采用放射免疫法测定血清TNF-α和脂联素水平。肝组织标本石蜡切片,行苏木精-伊红染色,光镜下评估肝组织脂肪变性程度及炎症活动度。免疫组化和RT-PCR法检测肝组织CYP2E1蛋白和mRNA的表达。[结果]与正常组比较,模型组血清ALT、AST增加,治疗组较模型组血清ALT、AST下降(均P0.01);模型组血清TNF-α(3.40±0.18)μg/L,较正常组的(1.35±0.09)μg/L明显增高(P0.01),治疗组为(1.57±0.11)μg/L,显著低于模型组(P0.01)。模型组血清脂联素为(6.21±0.39)mg/L,较正常组的(12.14±0.83)mg/L明显降低(P0.01),治疗组为(9.33±0.45)mg/L,明显高于模型组(P0.01)。免疫组化法染色结果及PT-PCR法示模型组CYP2E1阳性表达增高,治疗组较模型组明显减少(P0.01),与正常组比较差异无统计学意义。[结论]甘正复方通过调控CYP2E1、脂联素和TNF-α的表达,参与NAFLD发病机制的多种途径,从而有效治疗大鼠NAFLD。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α的表达

目的:探讨高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝细胞核因子4α(HNF-4α)mRNA的表达及在NAFLD发病机制中的作用.方法:24只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(各12只),通过高脂饮食建立NAFLD大鼠模型,并在造模第8、12周末分批处死大鼠,同期设正常饮食组作为对照组.检测大鼠血清甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙氨酸转氨酶(ALT)及内毒素(ET)等指标,测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(IRI);采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝脏HNF-4α mRNA的表达;取肝标本做HE染色,观察其病理变化.结果:模型组大鼠肝脏HNF-4α mRNA表达量于第8周时开始降低,与同期对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);同时血清TNF-α、IRI及ET与同期对照组相比明显升高(P<0.05),HNF-4α与TNF-α、IRI、ALT、TG及ET均呈负相关(P<0.05).结论:胰岛素抵抗(IR)可能是NAFLD发生、发展的基础,NAFLD大鼠肝脏HNF-4α可能通过一定机制参与了IR及炎症反应,进而影响了NAFLD的发生、发展.     

高脂饲料结合慢性应激致大鼠非酒精性脂肪肝的药物治疗

目的观察α-硫辛酸(LA)和赛庚啶(CYP)分别对高脂饲料结合慢性应激致大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的治疗效果。方法32只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、LA组、CYP组各8只。对照组给予普通饲料,其他3组给予自制高脂饲料并辅以慢性刺激。8 w后LA组、CYP组给予相应药物治疗,给药4 w后进行相关指标检测。结果与模型组比较,LA及CYP可明显改善脂质紊乱、降低血液及肝组织游离脂肪酸(FFA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量及肝组织TNF-αmRNA表达水平。但两者对该模型的治疗效果也存在差异,CYP可明显抑制HPA轴过度激活,对肝组织病理改善更明显;LA的抗氧化应激效果优于CYP。结论LA或CYP对NAFLD模型的治疗作用各有特点,但均有一定的治疗效果,进一步验证了氧化应激和HPA过度激活在NAFLD中的作用。     

调肝泻火汤防治大鼠胰岛素抵抗的实验研究

目的 :观察调肝泻火汤对胰岛素抵抗 (IR)大鼠肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)等相关指标的影响 ,探讨该方预防 IR的作用机制。方法 :将动物随机分为模型组、中药组和正常组 ,以高脂饮食复制 IR大鼠模型 ,中药组予高脂饮食的同时予中药灌胃 ,正常组给予基础饲料喂养 ,共观察 8周 ,评价模型及该方对 IR的影响。结果 :调肝泻火汤升高胰岛素敏感性指数 ,改善糖耐量 ,降低空腹血胰岛素、TNF-α水平 (与模型组比较 P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :调肝泻火汤能有效预防高脂饮食所致大鼠 IR,其机制可能是通过受体后环节 ,调控 TNF-α而起作用     

HIF-1α对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织的影响*

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中的作用。方法 将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂饮食模型组和蛋氨酸-胆碱缺乏饮食(MCD)模型组,每组10只,建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型,分别取肝组织行组织病理学检查,采用缺氧探针检测肝组织缺氧程度,采用Real-time PCR法检测肝组织HIF-1α mRNA水平,采用Western blot法检测肝组织HIF-1α蛋白表达。另取小鼠肝星状细胞JS-1细胞,分为对照组、腺病毒载体组和HIF-1α ShRNA腺病毒载体感染组,采用MTT法检测细胞活性,采用Real-time PCR法检测细胞1型胶原(COL1)和3型胶原(COL3)、TNF-α、IL-1β和TGF-β1 mRNA水平。结果 缺氧探针染色显示高脂饮食模型组和MCD模型组小鼠肝组织染色阳性率分别为85%和78%,显著高于对照组的7%(P<0.05);高脂饮食模型组和MCD模型组小鼠肝组织HIF-1α mRNA水平分别为对照组小鼠的2.1倍和1.6倍(P<0.05),HIF-1α蛋白表达水平也相应地增强;HIF-1α ShRNA腺病毒载体感染细胞活力仅为对照组的37%(P<0.05),细胞COL1、COL3、TNF-α、IL-1β、TGF-β1 mRNA水平也显著降低(P<0.05)。结论 HIF-1α能够促进小鼠NAFLD进展,抑制HIF-1α表达可能能延缓NAFLD进展,值得进一步研究。     

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型肝组织肿瘤坏死因子-α表达影响

目的探讨二甲双胍对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的治疗作用和机制。方法36只雄性Wistar大鼠分为正常对照组(8只),喂养基础饲料,NASH组(28只),通过喂饲高脂饲料建立NASH大鼠模型,12w末处死NASH组4只,病理证实造模成功后,进一步将NASH组随机分为二甲双胍组、饮食治疗组和模型对照组(每组各8只)。二甲双胍组给予二甲双胍156mg·kg-1·d-1,饮食治疗组和模型对照组均给予等容积生理盐水灌胃,除模型对照组外,其余各组均转以基础饲料喂养,继续饲养12w后,空腹处死所有动物。分别检测各组大鼠肝功能、血糖、血脂、胰岛素和TNF-α水平,肝组织病理切片检查炎症坏死程度,RT-PCR检测组织TNF-αmRNA的表达。结果模型对照组大鼠肝组织表现为不同程度的脂肪变性、炎症坏死和纤维化,肝功能、血脂及胰岛素抵抗指数等各项指标均较正常组显著增高。二甲双胍能显著降低肝组织中TNF-αmRNA表达,明显改善肝组织脂肪变性、炎症坏死程度及各项血清学指标,饮食治疗组TNF-αmRNA的表达亦降低,肝组织学一定程度改善,但各项血清学指标仍持续增高。结论TNF-α表达增强参与了NASH的发生发展,应用二甲双胍可以抑制肝脏TNF-α基因的表达,调节肝脏脂肪代谢和改善肝组织炎症坏死。     

动态观察非酒精性脂肪肝大鼠肝脏抵抗素的表达

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏抵抗素mRNA的动态表达,探讨抵抗素在大鼠NAFLD发病中的作用。方法雄性Wistar大鼠48只随机分为正常对照组(C组)和模型组(M组),C组给予普通饲料,M组给予高脂饮食喂养,分别于9,13,17周末处死各组大鼠。测定大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),以及肝组织TG,测定空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。应用半定量RT-PCR检测各组大鼠肝脏组织抵抗素mRNA的表达;HE染色观察肝脏组织病理变化并计算炎症活动度计分。结果第9,13,17周末M组大鼠抵抗素mRNA相对表达量显著高于C组(P<0.01),且随造模时间延长表达量显著增加(P<0.01)。M组大鼠血清FFA、TG、TC、TNF-α及肝组织TG较同期C组均显著升高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.01)。相关分析显示,M组大鼠各时点肝脏抵抗素mRNA相对表达量与血清TNF-α水平均呈正相关(r=0.787,0.888,0.873,P<0.05,P<0.01,P<0.01);在第9,13周末与肝脏炎症活动度计分呈正相关(r=0.861,0.892,P<0.01);而与ISI在第9周末呈负相关(r=-0.843,P<0.01)。结论高脂饮食NAFLD模型大鼠肝脏抵抗素基因表达随造模时间的延长而增加,抵抗素可以通过胰岛素抵抗及对炎症因子的调控参与NAFLD的发生发展。     

高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠血清脂肪甘油三酯脂酶的活性变化

目的探讨在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展的过程中脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)mRNA的表达及血清ATGL酶活性、TNF-α水平的变化。方法 28只雄性SD大鼠随机分为对照组13只和NAFLD模型组15只。模型组饲以高脂饲料,对照组给予普通维持饲料。于喂养16周末处死所有动物,提取肝组织,计算肝指数,RT-PCR法半定量测定肝脏ATGL mRNA表达,观察肝脏病理变化;检测大鼠血清TG、TC、空腹血糖(FBG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、ATGL、TNF-α等指标。结果模型组大鼠血清TG、TC、FBG、ALT、AST、TNF-α等较对照组显著升高(P均<0.05),肝脏ATGL mRNA表达和血清ATGL酶水平显著降低(P均<0.01),且肝脏出现严重的脂肪变性伴大量炎性细胞浸润。血清ATGL与TNF-α呈高度负相关(r=-0.983,P<0.01)。结论 ATGL可能在NAFLD的发生发展中发挥重要作用,并与TNF-α密切相关。     

普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉、六堡茶对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞CYP2E1表达的影响

背景:CYP2E1是一种可被乙醇诱导的细胞色素P450酶。在非酒精性脂肪性肝病发病机制的"二次打击"学说中,CYP2E1介导的脂质过氧化发挥重要作用。目的:从改善氧化应激的角度探讨普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉和六堡茶对非酒精性脂肪肝(NAFL)模型大鼠的辅助保护作用。方法:120只Wistar大鼠分为正常对照组、高脂模型组、降脂药物组以及低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg)普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉、六堡茶组。以高脂饮食诱导NAFL模型,实验组予相应品种、剂量的茶汤灌胃35 d。处死大鼠,测定肝组织抗氧化指标,real time PCR检测肝细胞CYP2E1 mRNA表达,同时观察肝脏组织学表现。结果:适宜剂量的普洱茶(熟茶)茶粉和六堡茶能显著降低高脂模型大鼠的肝组织MDA含量,增高SOD、GSH-Px活性,抑制肝细胞CYP2E1 mRNA表达(P均<0.05)。高剂量六堡茶组肝脏组织学表现为轻度脂肪肝,高剂量普洱茶(熟茶)茶粉组和黑茶茶粉组表现为中度脂肪肝。结论:普洱茶(熟茶)茶粉和六堡茶对NAFL大鼠模型的肝脏抗氧化指标、CYP2E1基因表达和组织学表现具有积极作用,表明两者对NAFLD可发挥辅助保护作用,六堡茶的作用更为明显。     

阿卡波糖、二甲双胍及吡格列酮对糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织肿瘤坏死因子α及细胞色素P4502E1的影响

目的 观察二甲双胍、吡格列酮及阿卡波糖对糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝脏中TNF-α、细胞色素P4502E1 （CYP2E1）的影响. 方法 高糖高脂饮食8周＋腹腔注射小剂量STZ（15 mg/kg）建立糖尿病NAFLD模型.造模成功后将大鼠随机分为4组：NALFD组（NF,10只,高糖高脂饲料）;二甲双胍干预组[DM,10只,高糖高脂饲料＋二甲双胍500mg/（kg· d）];吡格列酮干预组[DP,10只,高糖高脂饲料＋吡格列酮15 mg/（kg·d）];阿卡波糖干预组[DA,10只,高糖高脂饲料＋阿卡波糖100mg/（kg·d）].干预4周后应用Real-time PCR和免疫组织化学法检测肝组织中TNF-α、CYP2E1 mRNA及蛋白表达. 结果 与NF组比较,DM、DP及DA组的TNF-α及CYP2E1 mRNA表达均明显降低（P＜0.05）,DM、DP组间差异无统计学意义（P＞0.05）;DA组降低程度小于DM、DP组（P＜0.05）.同时,TNF-α及CYP2E1蛋白表达呈现相同趋势TNF-α：NF（51.86±3.78）％,DM（20.78±2.51）％,DP（19.34±3.17）％,DA（41.37±2.98）％,P＜0.05; CYP2E1：NF（33.87±4.15）％,DM（16.78±2.54）％,DP（15.69±1.79）％,DA（22.67±4.02）％,P＜0.05]. 结论 二甲双胍、吡格列酮及阿卡波糖均可减少大鼠肝脏TNF-α、CYP2E1的表达,其中二甲双胍、吡格列酮作用相似,阿卡波糖作用较弱.     

越鞠丸对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏PPARα表达的影响

目的 观察越鞠丸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)表达的影响.方法 采用喂饲高脂饲料的方法复制NAFLD大鼠模型,实验分组为正常对照组、模型组、东宝肝泰对照组和越鞠丸高、低剂量组.提取肝脏总RNA,运用半定量RT-PCR方法观察各组大鼠肝脏PPARα mRNA的表达情况,同时测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆TC、TG的含量,并做病理切片.结果 模型组大鼠PPARα mRNA的含量明显降低,血脂和肝脏脂质含量明显升高,肝脏呈明显脂肪变性,经药物治疗后,各治疗组大鼠肝脏PPARα mRNA表达明显增强,血脂和肝脏脂质含量显著降低,肝脂变程度明显减轻.结论 越鞠丸能增强NAFLD大鼠肝脏PPARα mRNA的表达,可能是其治疗NAFLD的分子机制之一.     

细胞色素P450 2E1在脂肪性肝炎大鼠肝组织的表达及作用

目的探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)在脂肪性肝炎大鼠肝组织内的表达和作用。方法通过高脂饮食和逐渐增加酒精灌胃量持续16周建立Wister大鼠脂肪性肝炎动物模型,造模结束时检测模型组和正常组动物血脂、游离脂肪酸(FFA)和肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量;免疫组化标记检测肝组织CYP2E1表达;RT-PCR法检测CYP2E1 mRNA的水平。结果实验结束时,模型组大鼠血脂和血清FFA较正常组显著增高(P<0.01);肝组织MDA较正常组显著增高(P<0.01),而SOD和GSH较正常组明显减低(P<0.01);肝组织内CYP2E1及其基因表达较正常组显著升高(P<0.01),并与肝组织内MDA、脂肪变程度、炎症计分呈明显正相关(r值分别为0.652,0.913和0.943,P值均<0.05),与SOD、GSH呈显著负相关(r值分别为-0.916,-0.766,P<0.01)。结论脂肪性肝炎大鼠肝脏内CYP2E1呈诱导表达状态,后者可能通过增强氧应激,降低抗氧化能力,加重脂质过氧化等过程参与了脂肪性肝炎的形成。     

罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病的预防及机制研究

目的观察罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的预防作用,并探讨其可能作用机理。方法32只雄性SD大鼠分为4组:正常对照组、NAFLD对照组、罗格列酮干预组、二甲双胍干预组。以高脂饲料饲养诱发脂肪肝大鼠模型。12周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、肝脂质含量、肝组织病理学等,并检测血肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肝组织TNF-α、肉毒碱软脂酰转移酶Ⅰ(CPT-Ⅰ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达等指标。结果与NAFLD对照组比较,罗格列酮干预组及二甲双胍干预组的血TG(0.55±0.08,0.71±0.15 vs 0.85±0.15)mmol/L、ALT(49.1±7.4,56.0±33.6 vs 110.6±44.2)U/L及肝组织TG含量(33.7±8.2,37.2±7.8 vs 54.8±7.6)mg/g均显著下降(P均<0.05),其肝脂肪变性及炎症程度亦显著减轻,其血清TNF-α(187.5±20.3,211.9±26.6 vs 324.2±34.2)pg/ml及肝组织TNF-α(0.35±0.12,0.49±0.18 vs 0.85±0.20)、FAS mRNA表达水平(0.34±0.13,0.45±0.15 vs 0.68±0.19)亦显著下降(P均<0.05)。结论罗格列酮和二甲双胍,可对高脂饲料饲养诱发的大鼠NAFLD产生保护作用;其保护作用与减少TNF-α和FAS表达有关。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α基因表达变化及意义

目的研究NAFLD大鼠肝X受体α(LXRα)基因表达变化及意义。方法建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠模型后,采用RT-RCR和Western blot法动态观察NAFLD大鼠肝组织中LXRα表达变化。结果4周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.33±0.03)mmol/L,对照组为(0.24±0.03)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05),随喂养时间延长逐渐升高,12周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.61±0.06)mmol/L,对照组为(0.25±0.01)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。血清ALT和AST含量在8周时模型组分别为75.8 U/L和138.9 U/L,对照组分别为54.8 U/L和81.4 U/L,差异有统计学意义(P<0.01),12周时模型组分别为102.3 U/L和179.1 U/L,对照组分别为54.3 U/L和79.2 U/L,差异有统计学意义(P<0.01)。2周时模型组大鼠肝组织中LXRα基因表达相对含量为0.62,对照组为0.33,差异有统计学意义(P<0.01),随着高脂饮食喂养时间的延长表达进一步增强,12周时模型组大鼠高达1.31,对照组为0.34,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组大鼠肝组织中LXRα蛋白表达与基因表达趋势相同,与脂肪肝进展程度一致。结论LXRα基因表达变化与NAFLD的形成密切相关。     

T辅助细胞亚群在大鼠非酒精性脂肪性肝病模型中的变化

目的:探讨T辅助细胞亚群Th1/Th2和Treg在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制中的意义.方法:SD大鼠正常喂养1 wk后,随机分为正常组(n=20)和高脂饮食组(n=20).正常组大鼠以普通饲料喂养,高脂饮食组以高脂饲料喂养.实验第8、16周分批处死大鼠.观察肝组织的病理改变.荧光定量PCR方法检测肝脏TNF-α、IFN-γ、IL-4和Foxp3的基因表达.结果:高脂饮食8 wk大鼠肝细胞脂肪变明显,无明显炎症改变,IFN-γ、IL-4在肝脏的基因表达与正常组比较无明显变化,TNF-α稍升高,但无统计学意义,Foxp3 mRNA的表达比正常组明显降低(ct值:26.12±0.69 VS 24.22±0.62,P<0.05).高脂饮食16 wk大鼠脂肪肝明显,炎症明显,IFN-γ和TNF-α基因表达均显著升高(ct值:24.52±0.87 vs 29.94±1.44,24.31±1.13vs28.88±1.95,均P<0.05),IL-4与正常组相比较无明显变化,Foxp3基因表达较正常组和高脂饮食8 wk时均显著降低(ct值:32.57±1.54 vs 24.29±1.08,26.12±0.69,P<0.05).结论:高脂饮食大鼠肝脏Foxp3和Treg表达减少可能是高脂饮食NAFLD发生发展的重要因素.IFN-γ和TNF-α的联合作用加重了肝脏的炎症损伤.     

去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪肝大鼠肝组织的表达

目的:研究去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织的表达情况.方法:应用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型HE染色观察肝脏病理形态学变化,Western blot和Real-time Q-PCR检测α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白和m RNA的表达.结果:HE染色显示:大鼠NAFLD模型成功建立,随着造模时间延长肝脏脂肪变程度逐渐加重.Western blot检测结果显示,造模2-12 wk大鼠肝组织α-肾上腺素能受体(α-adrenergic receptor,α-AR)、β_1-AR、β_2-AR蛋白表达量均明显升高(P0.05).Real-time Q-PCR结果证实,随着NAFLD病的发展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR mR NA表达均逐渐上调(P0.01).结论:高脂饮食法成功建立大鼠NAFLD模型,随着肝病进展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白及m RNA含量明显增加.     

丹参对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达的影响

[目的]研究肝组织NF-κB、TNF-α在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用,并探讨丹参注射液对NASH大鼠的保护机制。[方法]采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,每日予丹参注射液5ml/kg进行干预治疗,免疫组织化学法检测大鼠肝组织TNF-α表达。电泳迁移率改变分析检测大鼠肝组织NF-κB活性,观察丹参对NASH大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达的影响。[结果]与正常组相比,模型组大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达明显升高,丹参治疗后大鼠肝组织NF-κB、TNF-α较模型组明显降低。[结论]肝组织NF-κB、TNF-α表达增强与NASH的发生密切相关,丹参注射液能抑制NASH大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达,达到治疗NASH的目的。     

高脂饮食对实验性大鼠非酒精性脂肪肝UCP2表达的影响

目的:通过高脂饮食制作非酒精性脂肪肝(NAFLD)动物模型;观察高脂饮食对实验性大鼠NAFLD解偶联蛋白2(UCP2)的影响。方法:通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝病模型。观察肝脏病理改变并检测肝脏UCP2表达情况。结果:与正常对照组相比,高脂饮食大鼠肝脏UCP2表达显著上升,肝组织广泛脂肪变性,形成单纯性脂肪肝。继续给予高脂饮食使肝脏UCP2表达水平进一步增加,肝脏发生进一步病理改变而形成脂肪性肝炎。结论:高脂饮食成功地复制了NAFLD动物模型;NAFLD时肝脏UCP2表达上调,可能是机体的一种适应性反应;但是UCP2过度表达,可能诱导或加剧肝脏病理改变。