EL一4细胞凋亡与细胞周期的辐射效应

采用流式细胞术（ＦＣＭ）研究了０．５、１、２、４ＧｙＸ射线照射后，小鼠淋巴瘤细胞ＥＬ一４的凋亡与细胞周期的剂量效应关系。结果表明：以上剂量照射后２４ｈ，Ｇ１期细胞呈剂量依赖性增加，出现明显的Ｇ１阻滞；而Ｓ期细胞则剂量依赖性减少；Ｇ２期出现明显的Ｇ２阻滞；细胞凋亡亦呈剂量依赖性增力。该结果提示：ＥＬ一４细胞经较高剂量ｘ射线照射后，出现明显的ＤＮＡ合成抑制和Ｇ２阻滞，致使ＥＬ一４细胞的有丝分裂延迟。统计分析表明：Ｇ１阻滞与细胞凋亡高度相关ｒ＝０．９１。     

50Hz磁场辐射对培养细胞DNA损伤修复影响的研究

用不同浓度甲基硝基亚硝酸胍（ＭＮＮＧ）诱发ＦＬ细胞的程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ），同时加５０Ｈｚ磁场辐射，以观察磁场对细胞ＤＮＡ损伤修复的影响。结果表明，磁场的作用与其强度有关，当磁场强度为１ｍＴ时，对细胞ＤＮＡ有直接损伤作用；０．３ｍＴ时有促进ＭＮＮＧ对ＤＮＡ的损伤作用，而５ｍＴ时则无明显作用，呈非线性的“振幅窗”效应现象。     

胰岛素样生长因子Ⅱ受体基因微小卫星不稳定性在肝细胞癌 …

目的：了解胰岛素样生长因子Ⅱ受体（ＩＧＦⅡＲ）微小卫星不稳定性（ＭＩ）在肝细胞癌的表现。方法：用ＱＩＡａｍｐ方法提取肝细胞癌ＤＮＡ,选择７对引物,经ＰＣＲ扩增,走ＤＮＡ序列胶电泳,测定其ＭＩ的阳性率及有无ＩＧＦⅡＲ基因的突变。结果：肝细胞癌ＭＩ阳性率４４．１％（１５／３４）,癌旁组织细胞ＭＩ阳性率２３．５％（８／３４）,二者之间有明显差异（ｐ〈０．０５）。ＩＧＦⅡＲ基因有丢失、插入、替换等突变。结     

舌鳞癌DNA倍体性和S期细胞比率与其预后关系

对７２例舌鳞癌根治术后病者作随访复查和用流式细胞仪对其石蜡包埋标本作ＤＮＡ含量测量。结果５年生存率为５６．９％，５年内死亡者和５年存活者异倍体率分别为６４．５％和４１．５％（Ｐ＞０．０５），而高Ｓ期细胞比率（ＳＰＦ）分别为９０．３％和４１．５％（Ｐ＜０．０１）。有颈淋巴转移者五年生存率（２８．６％）低于无颈淋巴转移者（６８．６％）（Ｐ＜０．０５）。两者异倍体率和高ＳＰＦ分别有显著差异和非常显著差异。高ＳＰＦ在临床期之间、Ｃ１和Ｇ２之间均有明显差异。提示ＤＮＡ倍体性与舌鳞癌５年生存率无关，而高ＳＰＦ则有密切关系。认为ＳＰＦ作为估测舌鳞癌的预后有较高的价值。     

内皮素—1及其抗体对肿瘤细胞Hela和PG增殖的影响

观察内皮素－１（ＥＴ－１）及其抗体对宫颈癌细胞Ｈｅｌａ和肺巨细胞癌ＰＧ细胞增殖的影响。结果表明ＥＴ－１可以促进ＰＧ和Ｈｅｌａ细胞的ＤＮＡ合成，ＥＴ－１合成，ＥＴ－１最低起效浓度对ＰＧ和Ｈｅｌａ分别为１０＾－１３和１０＾－１９ｍｏｌ／Ｌ。ＦＴ－１抗体可明显抑制Ｈｅｌａ细胞的增殖。而对ＰＧ影响不大。     

TGF-β_1在肾癌中的表达及与细胞凋亡和凋亡抑制基因bcl-2的关系

目的：阐明ＴＧＦ－β１在肾癌中的作用及机理。方法：应用免疫组化结合微波抗原修复和流式细胞技术，对５２例肾癌及１４例癌旁正常组织的凋亡率及ＴＧＦ－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ）、ｂｃｌ－２的表达进行了定性、定量的测定，并就它们的相关性进行了分析。结果：ＴＧＦ－β１在正常肾组织和肾癌组织的阳性率分别为２１．１４％，５３．８４％；阳性蛋白细胞率分别为（１８．０７±６．５２）％，（４０．８４±１８．６７）％。ＴＧＦ－β１、ｂｃｌ－２在肾癌组织的阳性率和相对蛋白含量高于正常肾组织（Ｐ＜０．０５）。ＴＧＦ－β１的表达与临床分期，病理分级无关（Ｐ＞０．０５），凋亡率随ＴＧＦ－β１的表达有增高的趋势，与ｂｃｌ－２的表达无明显相关（Ｐ＞０．０５）。结论：ＴＧＦ－β１促进肾癌细胞的凋亡，可能是肾癌发生、发展的负调因子。但其调节细胞凋亡的机理与ｂｃｌ－２的表达无关     

VP—16诱导HL—60细胞凋亡的研究

探讨ｔｏｐｏⅡ抑制剂的抗瘤机制。方法：选择人急性早幼粒细胞白血病细胞株ＨＬ－６０为实验模型，以ＶＰ－１６为诱导剂，用形态学观察、ＤＮＡ电泳及流式细胞术（ＦＣＭ）等方法人凋亡情况进行了研究。结果：经ＶＰ－１７处理的ＨＬ－６０细胞呈典型凋亡形态学改变，出现梯状ＤＮＡ条带（ＤＮＡ ｌａｄｄｅｒ），ＦＣＭ ＤＮＡ直方图上Ｇ０／Ｇ１峰前是明显的亚二倍体凋亡峰。表明经ＶＰ－１６处理的ＨＬ－６０细胞的确发生了凋     

Intratumoral DNA ploid heterogeneity and its clincal-pathological significance in esophageal squamous cell carcinoma

目的为了研究食管鳞状细胞癌ＤＮＡ倍体异质性及其临床病理学意义，采用多点取材和流式细胞技术对８０例食管鳞状细胞癌标本的ＤＮＡ倍体进行了研究。方法每个标本从３个不同部位取材，８０例标本共取２４０个流式检测样品。采用ＦＡＣＳ－４２０型流式细胞仪（ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＣｏ．ＳａｎＪｏｓｅ，ＣＡ）进行分析。校定仪器ＣＶ值为３％～５％。每个样品测量１０，０００～２０，０００个细胞。根据ＤＮＡ指数（ＤＮＡｉｎｄｅｘ，ＤＩ）确定倍体类型，ＤＩ＝１±０．１时为２倍体（２Ｃ）；０．９＜ＤＩ＞１．１时为异倍体（ａｎｅｕ ｐｌｏｉｄｙ，ＡＮ）。当一个标本的３个检测样品的Ｇ０／Ｇ１峰相互不同或３个峰的ＤＩ值相差大于２ＣＤＩ值的１０％时，该肿瘤被称为倍体异质性肿瘤（ｐｌｏｉｄｈｅｔｅｒｏｇｅｎｏｕｓｔｕｍｏｒ，ＰＨＴ），如果一个标本的３个样品的ＤＮＡ倍体类型相互一致，则称为非倍体异质性肿瘤（ｎｏｎ－ＰＨＴ，Ｎ－ＰＨＴ）。结果ＤＮＡ指数范围为０．７７～１．７４，ＤＮＡＡＮ检出率为８８．８％（７１／８０）。共检出ＰＨＴ３８例（４７．５％，３８／８０）。倍体异质性与肿瘤的侵润、转移和患者的预后有关，与肿瘤的大小及组织学分级无关。结?     

辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对受照人肝癌细胞DNA双链断裂与修复的影响

目的：探讨辐射增敏剂ＡＫ２１２３和辐射防护剂ＷＲ２７２１对肝癌细胞ＤＮＡ损伤与修复的影响．方法：用脉冲交变电泳法（ＰＦＧＥ）和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定上述两药物对受照人肝癌细胞ＤＮＡ双链断裂（ｄｓｂ）与修复及ＤＮＡ合成的影响．结果：在０～８０Ｇｙ剂量范围内，随着照射剂量增加，肝癌细胞ＤＮＡ残留率逐渐降低（１００％～５７．０％），ＤＮＡｄｓｂ量亦逐渐增多，照前给ＡＫ２１２３或ＷＲ２７２１，均能显著地降低ＤＮＡ残留率，使ＤＮＡｄｓｂ量增多，加重ＤＮＡ损伤（Ｐ＜０．０５）；２０Ｇｙ受照细胞保温０～１２０ｍｉｎ，在６０ｍｉｎ时ＤＮＡｄｓｂ开始被修复（Ｐ＜０．０５），而ＡＫ２１２３组为１２０ｍｉｎ（Ｐ＜０．０５），ＷＲ２７２１在３０ｍｉｎ后有修复的趋势；ＡＫ２１２３在６２．５～５００μｇ／ｍｌ内其参入率显著升高（Ｐ＜０．０５），呈促进ＤＮＡ合成作用，ＷＲ２７２１则随药物浓度增加其参入率降低（Ｐ＜０．０５），抑制ＤＮＡ合成．结论：ＡＫ２１２３和ＷＲ２７２１显著加重受照肝癌细胞的辐射损伤，促进ＤＮＡｄｓｂ量增加，抑制其修复过程．     

黑色素细胞培养上清液对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学 …

目的 观察正常的黑色素细胞（ＭＣ）对增生性瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦｉｂ）的生物学效应。方法 收集ＭＣ的上清液按不同的浓度加入培养的ＨＳＦｉｂ中,ＭＴＴ法测定细胞的增殖率,＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测定细胞ＤＮＡ合成率。结果 加入ＭＣ上清液的ＨＳＦｉｂ,培养４８ｈ后,较正常对照组,实验组细胞增殖明显（Ｐ〈０．０５（,ＤＮＡ合成率各实验组（ＭＣ１组外）与对照组相差显著（Ｐ〈０．０１）,但高浓度组（７５％）的合     

顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡的形态学观察

顺钱在孵巢肿瘤化疗中疗效肯定,为进一步探讨其作用机制,本实验采用ＡＯ１０／１７细胞为标本,通过光镜、电镜观察顺铂作用后细胞的形态改变,流式细胞仪（ＦＣＭ）分析其ＤＮＡ含量及二苯胺法测定其ＤＮＡ降解。结果发现２０ｕｍｏｌ／Ｌ顺铂作用后２４～３６ｈ,发生细胞凋亡,其细胞形态学改变包括体积缩小;核染色质浓缩,并沿核膜周围聚集,最后形成有膜包绕的凋亡小体,并被邻近细胞吞噬;还有一些细胞胞浆中出现空泡。２０ｕｍｏｌ／Ｌ顺铂作用后１２ｈ,ＦＣＭ显示Ｇ１峰前出现凋亡峰,其ＤＮＡ含量为Ｇ１期细胞的３０％～７０％…     

基因重组碱性成纤维细胞生长因子对急性坏死性胰腺炎犬肠道细菌移位的影响

目的探讨基因重组碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）犬肠道细菌移位的影响。方法杂种犬２３只,分对照组（ｎ＝７）、ＡＮＰ组（ｎ＝８）和ｂＦＧＦ组（ｎ＝８）。ｂＦＧＦ组犬复制ＡＮＰ模型后,每日静脉注射ｂＦＧＦ（５μｇ／ｋｇ）。结果ｂＦＧＦ治疗后,ＡＮＰ犬肠粘膜损伤明显减轻,脏器细菌培养阳性率下降５０％,细菌移位数量减少９３．３％－９６．７％,肠粘膜蛋白质、ＤＮＡ含量显著增加（Ｐ＜０．０５）,丙二醛含量明显减少（Ｐ＜０．０５）。结论ｂＦＧＦ可显著减少ＡＮＰ时肠道细菌移位,其机制可能是通过增加肠粘膜蛋白质合成,促进肠粘膜损伤修复。     

毫米波辐射后小鼠肝H_（22）腹水型癌细胞AgNOR的形态定量研究

以毫米波治疗仪照射腹腔已接种Ｈ２２肝癌细胞小鼠腹部，２０ｍｉｎ／ｄ，连续１５ｄ。发现毫米波辐射组（ＧⅡ，６．９０±０．２８）、环磷酰胺组（ＧⅢ，６．５４±０．６９）和毫米波照射加环磷酰胺组（ＧⅣ，５．７３±０．２２）小鼠的癌细胞核仁组织区均有不同程度的嗜银蛋白颗粒减少和癌细胞坏死，其数量明显低于对照组（ＧⅠ，９．８５±０．７４）。Ｆｅｕｌｇｅｎ染色的标本经ＬｅｉｔｚＭＰＶ－３显微分光光度计测定分析ＤＮＡ，也发现６Ⅱ组（５８．７１±３．１２）、ＧⅢ组（５２．３５±５．９３）和ＧⅣ组（３４．８５±１．１７）的癌细胞ＤＮＡ显著低于ＧⅠ组（７３．８７±４．９６）。结果表明，毫米波辐射可能降低Ｈ２２腹水型癌细胞ｒＤＮＡ转录活动和蛋白合成。     

VP-16诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）ＶＰ－１６能够明显抑制ＰＣ－３细胞ＤＮＡ的合成。提示ＶＰ－１６可诱导前列腺肿瘤细胞凋亡。     

新生牛肝细胞生长因子的活性研究──Ⅰ．新生牛肝细胞生长因子对原代细胞DNA合成的作用

以原代培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞等为靶细胞，研究了不同纯化阶段的新生牛肝细胞生长因子（ｃＨＧＦ）对靶细胞ＤＮＡ合成活性的影响。结果表明，ｃＨＧＦ对体外培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞的ＤＮＡ合成有明显的促进作用，对大鼠肾细胞、人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１的ＤＮＡ合成亦有一定的促进作用，对Ｓ_（１８０）小鼠腹水癌细胞的ＤＮＡ合成无促进作用。纯品ｃＨＧＦ对人胎肝细胞的最小作用剂量为５ｎｇ／ｍｌ。提示ＨＧＦ是一种较强的肝细胞有丝分裂原。     

吸烟对肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：观察吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞凋亡的变化。方法：对吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞进行染色观察及流式细胞仪ＤＮＡ分析。结果：吸烟者肺泡巨噬细胞生存时间延长,吸烟组存活率为（７６．３±１２．５）％,不吸烟组为（５５．４±１１．６）％,两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。荧光染色吸烟组凋亡细胞百分率为（３８．６±１１．５）％,不吸烟组凋亡细胞百分率为（５９．４±１２．１）％。流式细胞仪观察凋亡细胞百分率吸烟组为（１１．５±１０．４）％,不吸烟组为（２９．１±８．６）％。吸烟组巨噬细胞凋亡较不吸烟者明显减少。结论：烟雾中某些成分可能通过抑制巨噬细胞凋亡,在肺气肿的发病中起重要作用。     

Ⅰ,Ⅱ期乳腺癌切除范围及VEGF,nm23—H1表达的初步探讨

目的：初步探讨Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌切除范围及ＶＥＧＦ、ｎｍ２３－Ｈ１在乳腺癌及癌旁组织中的表达。方法：应用免疫组化方法对３２例乳腺癌及癌旁组织中ＶＥＧＦ和ｎｍ２３－Ｈ１表达进行测定并同时测定乳腺癌组织的浸润距离。结果：３２例乳腺癌肿瘤组织ＶＥＧＦ的过表达率为２０／３２（６２．５％）,ｎｍ２３－Ｈ１的低表达率为１４／３２（４３．８％）?而在距肿瘤２ｃｍ的癌旁组织中,６例癌变组织ＶＥＧＦ的过表达率为３／６,     

几种生长因子在人表皮细胞无血清培养中的作用

采用无血清培养系统，以３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定表皮生长因子（ＥＧＦ）、牛垂体提取物（ＢＰＥ）和乙醇胺（Ｅｔｈａ）对人表皮细胞ＤＮＡ合成的影响。结果显示，ＥＧＦ和ＢＰＥ在本实验所建立的无血清培养基中对培养表皮细胞ＤＮＡ合成有明显的促进作用（Ｐ＜０．０１）；Ｅｔｈａ对培养表皮细胞ＤＮＡ合成也有促进作用（Ｐ＜０．０５），ＥＧＦ和Ｅｔｈａ在本培养体系中具有协同作用（Ｐ＜０．０５）。讨论了生长因子的作用机理及在烧伤创面的应用前景     

VP—16诱导前列腺癌细胞PC—3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电流和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）Ｖ     

碱性成纤维细胞生长因子抗局灶性脑缺血/再灌注引发神经细胞凋亡作用的实验研究

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）抗局灶性脑缺血／再灌注引发神经元凋亡作用。方法 采用线栓法制备大脑中动脉缺血／再灌注模型。术后首次即刻分别腹腔注射ｂＦＧＦ和生理盐水，以后每天一次，连用７天。ＴＵＮＥＬ法原位检测缺血后第１、２、３、５、７天脑石蜡切片含ＤＮＡ碎片的凋亡细胞。结果 正常组、假手术组、缺血组对侧半球每张切片有０～８个凋亡细胞，缺血／再灌注后缺血区凋亡细胞明显增多，缺血４８ｈ达