乙型肝炎病毒血清标志物GICA检测性能的比对分析

目的评估乙型肝炎病毒血清标志物（HBV—M）胶体金免疫层析法（GICA）的分析性能。方法收集雅培i1000免疫检测系统检测的HBV—M阳性标本653例、阴性标本103例和HBV—M标准品,以化学发光免疫测定法（CLIA）检测结果为标准,分别用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂和5种GICA试剂检测,统计分析检测结果。结果检测HBV—M敏感性：ELISA和GICA检测HBV—M的最低检测限分别为乙型肝炎表面抗原（HBsAg）0．5IU／mL和4～8IU／mL、乙型肝炎表面抗体（抗HBs）10mlU／mL和15～30mlU／mL、乙型肝炎e抗原（HBeAg）1NCU／mL和2～4NCU／mL、乙型肝炎e抗体（抗HBe）2NCU／mL和64～256NCU／mL、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）2IU／mL．和32—256IU／mL。检测标本HBV—M的符合率：ELISA分别为87．4％、99．0％、87．7％、96．6％、100．0％,GICA分别为69．6％～71．7％、69．0％～72．0％、70．5％～73．9％、42．2％～49．1％、50．0％～60．0％。检测HBV—M特异性：除GICA柃测抗HBs的特异性略差外,其余各HBV—M的检测特异性均是可接受。,结论GICA检测HBV—M低浓度的标本,漏检率很高,只能用于GICA检测线性范围里HBsAg的筛查,不能作为临床诊断乙型肝炎和疗效考核的依据。     

HBsAg和抗HCV EIA检测试剂质量监控的简易方法

一、材料①EIA抗-HCV和HBsAg检测试剂盒．②2NCU／ml抗-HCV或1ng／ml和1万ng／mlHBsAg参考血清（卫生部临床检验中心）．③抗-HCV和HBsAg阴性血清各10份（自留）．④伯乐450型酶标仪．二、方法1.将EIA抗-HCV或HBsAg检测试剂量室温平衡．2．用2NCU／ml抗-HCV或1ng／ml和1万ng／mlHBsAg参考血清，以及留取的抗-HCV或HBsAg阴性血清代替检测标本，按试剂说明进行操作．3．比色读取吸光度，计算阳性阈值（Cutoff，CO）．然后计算出各检测标本的S／CO比值（S为检测标本吸光度）．S／CO比值≥1．0者为阳性，反之，S／CO比…     

ELISA检测HBsAg室内质控血清的制备和应用

目的为了提高HBsAg检测质量，自制HBsAg室内质控血清，以降低假阳性、假阴性的出现率，相应提高检测的准确度。方法采用不同厂家的诊断试剂检测，将质控血清分装放在不同温度下保存后多次测定。结果自制的室内质控血清室温下测得0D：0．0567，SD：0．002594，S／CO：1．2；在4℃保存1周测得OD：0．05958，SD：0．002800，S／CO：1．2；在一20℃保存1个月测得OD：0．05978，SD：0．002945，S／CO：1．2，经统计处理三者之间无显著差异（P〉0．05）。结论自制HBsAg室内质控血清稳定，易保存，能反映常规检测精密度，该质控血清适宜作HBsAg室内质控使用。     

梅毒螺旋体IgG和IgM抗体国家一级血清标准物质的研制

目的 研制国内用于TP的IgG和IgM抗体检测的国家一级标准物质,以促进临床实验室TP抗体检测的室内质量控制、试剂方法评价,实验室能力验证及量值溯源等.方法 筛选2份TP抗体强阳性血浆,分别用阴性的血浆稀释至约1 IU/ml( 200851)和20 mlU/ml( 200852),分装,真空干燥后,研究制备物不同温度(- 70、37、-20、2～8℃,室温和反复冻融)和时间(3d,1、2、3、4周等)的长期稳定性和短期稳定性.然后,从分装后样本中抽取20份进行均匀性研究.并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫印迹、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和TP明胶凝集试验( TPPA)法,分别与国际标准物质(NIBSC编号:05/132和05/122)同时检测比对定值.最后进行不确定度分析.结果 制备物长期保存稳定性良好,37℃可稳定4周,室温可稳定8周,2～8℃可稳定16周,-20℃可稳定32周.比较2种制备物的1～20号样本和混合样本检测结果的组间方差和组内方差,制备物200851与200852的F值均小于F0.01(1.38)=7.35,其均匀性良好.ELISA、免疫印迹、TRUST和TPPA 4种检测方法的定值结果相同,经不确定度分析,200851和200852定值结果可分别表示为( 1.27±0.26) IU/ml和(19.4±4.4) mlU/ml.结论 制备物稳定性和均匀性结果均符合国家一级标准物质的要求.这2种制备物可分别作为国内不同方法检测TP的IgG和IgM抗体的血清标准物质.     

乙型肝炎感染者不同血清标志物HBV DNA的表达及意义

目的探讨血清HBV DNA水平与HBV标志物（HBVM）表现模式的相关性。方法血清HBV DNA定量榆测采用PCR ELISA法，HBVM采用ELISA法。结果在HBVM阳性的430例血清中，有232例HBVDNA阳性，占54，0％。血清HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者HBVDNA阳性率占94．8％，≥106copies／ml占65．9％；HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者HBV DNA阳性占29．4％，≥106copies／ml占17，5％。结论血清HBVM阳性患者中约54．0％的血清HBV DNA阳性，且HBeAg阳性患者中HBV DNA含量及阳性率明显高于抗-HBe阳性者；在抗-HBs、抗-HBc阳性或HBsAg阴性者血清内也有HBVDNA阳性者。     

EIA定量检测甲状腺球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体在临床中的应用

目的 探讨酶免疫法定量检测血清抗甲状腺球蛋白抗体（TG—Ab）和抗甲状腺微粒体抗体（TM—Ab）在临床应用价值。方法 采用酶免疫法（EtA）定量检测血清TG—Ab和TM—Ab．并对检测条件、干扰因素、精密度和准确度进行试验探讨。结果 EIA定量测定血清TG—Ab和TM—Ab分别在880IU／ml和665IU／ml以下线性良好．TG—Ab批内和批间CV分别为3．2％和7．1％，TM—Ab批内和批间CV分别为3．9％和7．6％。测得平均回收率为TG—Ab：92．4％、TM—Ab：101．2％．血清标本4℃存放一周内．对测定结果无影响。胆红素、血红蛋白在0．5g／L对测定无干扰．Hb浓度〉0．5g／L对TM-Ab产生正干扰．结论 EIA定量检测能较准确检测血清甲状腺自身抗体水平，操作简便．结果准确．符台临床常规使用要求．对自身免疫性甲状腺疾病的诊断、疗效观察及预后具有临床应用价值。     

VIDAS定量检测D-二聚体的性能评价

目的了解并评价VIDAS定量检测D-二聚体的主要性能特点。方法依据NCCLS文件标准，对法国生物梅里埃公司全自动免疫分析系统（VIDAS）的D-二聚体检测性能进行评价。结果高值质控物（Control 1）、低值质控物（Control 2）及混合血浆的批内精密度CV分别为3．11％，3．43％和6．17％；批间精密度吖分别为4．35％，4．10％和7．48％；总重复性为8．2％，回收率为102％，准确度为97％。此次评估线性范围为45～4641．50ng／ml，仪器在此范围内线性良好（r=0．999）；血红蛋白（0．3mmol／L），三酰甘油（2mmol／L），胆红素（125μmol／l），类风湿因子（200IU／ml）对检测结果的影响度均小于厂家给定的批内变异率（10％）；20例健康人血浆标本进行D-二聚体正常参考值验证，均符合原试剂说明书提供的参考值。结论VIDAS定量检测D-二聚体的准确度、精密度、线性均较好，无携带污染率，检测简便易行，自动化程度高，尤其适合紧急情况下的个别检测。     

血清胆汁酸LC-MS/MS测定及在老年人血清检测中的应用

目的：建立稳定、有效的血清中所有胆汁酸的液相色谱-串联质谱（LC-MS／MS）测定方法，分析老年人血清胆汁酸谱的特征。方法：建立血清胆汁酸LC-MS／MS定量检测方法，并对方法的灵敏度、精密度、回收率、线性范围等性能指标进行评价；利用该检测方法对10例老年人和15例儿童的空腹血清中所有胆汁酸进行定量检测，分析老年组血清胆汁酸组成特征。结果：该检测体系中，血清中15种胆汁酸和内标在10分钟内完成定量检测，最低检测极限为2～4ng／ml，浓度在3．9～3000ng／ml范围内线性良好，相对回收率为91．95～108．25％，偏移系数为1．71％～10．83％，日内变异度为0．68％～7．05％，日间变异度为2．04％～11．05％；与儿童组相比，老年组血清中胆汁酸总量、疏水性胆汁酸的含量百分较高。结论：所建立的胆汁酸LC-MS／MS检测方法稳定可靠，能满足临床定量检测要求；老年人体内血清胆汁酸谱可能促进胆石症的发生。     

丙型肝炎病毒核酸检测的国家标准物质的研制

目的研制国内用于丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)扩增检测的血清标准物质。方法用HCVRNA阴性血浆将阳性血浆稀释至含量约300000拷贝数/ml,然后进行真空冷冻干燥。检测方法采用实时荧光定量聚合酶链反应方法和罗氏公司的PCR内标定量方法。制备标准品含量通过与国际标准(世界卫生组织属下的国家生物标准研究所标准物质编号:96/790)比对获得。结果该标准物质定值为:(1·29±0·24)×105IU/ml。其稳定性实验表明室温20~25℃(相对湿度20%~50%)14d、37℃(相对湿度60%~80%)7d均稳定。长期监测结果表明:2~8℃6个月及-20℃保存两年的含量均无明显变化。均一性检测结果:瓶间不精密度为3·53%。结论该制备物可以作为用于核酸扩增检测的丙型肝炎病毒核酸国家标准物质。     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和ELISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg；用ELISA一步法和二步法检测经ECLIA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标木：①HBsAg光放射强度(COI)在1～20，20例；②HBsAg COI在21～4000，160例；③HBsAg COI大于4000，6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例。结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml，二步法灵敏度为0．2g／ml，ECLIA灵敏度为0．05ng／ml。存190例临床标本中，ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％，ECLIA阳性检出率为97．4％。结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低，HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钩状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高，受HOOK效应影响较小，HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。