胶体金法血清β-HCG检测结果对发光免疫分析仪检测程序选择的价值

目的 探讨胶体金法β-HCG检测结果 应用于微粒子全自动发光免疫分析仪检测程序选择中的价值.方法 分别用胶体金法试纸条和微粒子全自动发光免疫分析仪对血清标本进行β-HCG检测.结果 胶体金法检测阴性标本126例,定量检测结果 为(0.00~22.8) mIU/mL;弱阳性标本98例,97例定量检测结果 为(12.6~982.4) mIU/mL,1例为525 312 mIU/mL;阳性标本3例,定量检测结果 为(991.5~1 080.6) mIU/mL;强阳性标本51例,定量检测结果 为(1 120.8~182 826.7) mIU/mL.结论 98%的临床标本可根据胶体金法试纸条检测结果 选择微粒子全自动发光免疫分析仪常规或稀释检测程序.     

电化学发光免疫分析仪检测甲胎蛋白的性能验证

目的验证电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测甲胎蛋白(AFP)的基本分析性能,同时探讨适用于ECLIA检测系统分析性能的验证模式。方法参照相关的文件,分别用ECLIA检测AFP的精密度、准确度、临床可报告范围和参考区间。结果测定均值为11.90 IU/mL的样本,验证后批内精密度为0.28 IU/mL,总精密度为0.45 IU/mL;测定均值为237.23 IU/mL的样本,验证后批内精密度为2.85 IU/mL,总精密度为3.50 IU/mL,均与厂家声明一致;高、低浓度定植质控品检测结果与靶值的相对偏差均小于5%,5份室间质控品检测结果与靶值的相对偏倚为-0.41%~6.61%;分析测量范围为0.514~992.7 IU/mL(厂家线性范围0.5~1 000 IU/mL),临床可报告范围0.514~158 832 IU/mL;参考区间与厂家声明(0.0~5.8 IU/mL)一致。结论罗氏2010电化学发光免疫分析仪测定AFP的主要分析性能均与厂家声明一致;厂家提供的参考区间可以接收;验证方案和实验方法简便、可行。     

ACCess免疫分析仪快速检测血清β-人绒毛膜促性腺激素

目的寻找一种快速、准确、灵敏的人血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)测定方法.方法利用Access全自动微粒子化学发光免疫分析系统(Access发光仪)及其配套试剂测定β-hCG.结果Access发光仪常规测定β-hCG线性范围0～1 000 mIU/ml;批内CV=1.01%,批间CV=4.61%;平均回收率100.37%;与RIA的比较试验,y=1.037XRIA一3.044,r=0.992 9;88名非妊娠妇女参考值范围0～2.14mIU/ml.结论Access发光仪测定β-hCG快速、准确、灵敏,线性范围广,特别适合急诊检验.     

对《电化学发光免疫分析仪检测β-HCG的性能验证》一文的商榷

编辑同志: 贵刊2007年第8期刊登了杨景瑞等的<电化学发光免疫分析仪检测β-HCG的性能验证>~([1])一文,在阅读过程中,发现有些表述及实验方案欠妥,特提出与作者商榷.     

对《电化学发光免疫分析仪检测β-HCG的性能验证》一文的异议

编辑同志: 贵刊2007年第8期刊登的<电化学发光免疫分析仪检测β-HCG的性能验证>一文~([1]),笔者读后存在较多异议,在此阐述个人的观点,愿与同道商榷.     

电化学发光免疫分析仪检测TSH的性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析仪的系统性能。方法以促甲状腺激素(TSH)检测为例,参考美国临床实验室标准化协会(NCCLS)文件,制定了一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、干扰能力、参考范围等方面进行验证。结果批内不精密度(CV)1.44%～1.84%、批间CV2.01%～2.44%;正确度相对偏倚为4.60%～4.73%;分析灵敏度0.017μIU/mL;线性范围0.017～92.04μIU/mL;干扰:血红蛋白小于或等于24.00mg/mL、三酰甘油小于或等于4.2mg/mL、总胆红素小于或等于0.50mg/mL;参考范围0.27～4.21μIU/mL。结论 Roche Cobas e411精密度好、分析灵敏度高、线性范围宽、正确度高,其参考区间大致与厂家提供的一致;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过。     

罗氏电化学发光免疫分析仪检测系统的性能验证

目的验证罗氏电化学发光免疫分析仪检测系统的性能情况。方法依据国家临床实验室标准委员会(NCCLS)的各项文件对精密度、线性范围、最低检测限、参考范围及电化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法比对进行验证。结果罗氏电化学发光免疫分析仪(MODULRA E170)的批内精密度、批间精密度、正确度、分析测量范围、最低检测限、参考区间、仪器间比对以及方法学间比对均合格。结论罗氏电化学发光免疫分析仪(MODULRA E170)检测系统的性能验证合格,满足临床诊断与治疗的需要。     

发光免疫法检测β-HCG胶体金早早孕试纸初筛弱阳性血清的分析

目的胶体金早早孕试验初筛后弱阳性结果的标本与发光免疫法检测结果不相符的情况进行分析调查。方法胶体金早早孕试验对941例标本初筛后,用发光免疫法对其中7例不相符的胶体金弱阳性标本进行追踪调查。结果胶体金早早孕和化学发光免疫方法之间存在一定的方法学差异。7例胶体金弱阳性血清经发光免疫法检测存在过高或正常的结果。结论对于临床检验工作中,应有针对性地选用合理的试剂盒和方法 ,结合临床诊断疾病。     

电化学发光免疫分析法检测血清雌二醇的性能验证

目的 评估电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清雌二醇(E2)的性能.方法 应用相关标准评价ECLIA检测E2的正确度、精密度、分析测量范围、临床可报告范围、功能灵敏度及生物参考区间.结果 5个批号质控品实测值与靶值的相对偏移均在可接受范围内(≤±25％),正确度验证通过.低水平质控品批内和批间变异系数(CV)分别...     

A rapid quantitative capillary tube enzyme immunoassay for human chorionic gonadotropin in urine

A quantitative capillary tube enzyme immunoassay (CTEIA) method for the determination of human urinary chorionic gonadotropin (hCG) has been developed. The method utilizes an antibody-coated capillary tube through which the test fluid is passed and a urease-labelled second antibody in an immunometric format. Any hCG in the test solution is ‘captured’ by the immobilized antibody which is hybridoma derived and specific for the β-subunit of hCG. The second hCG-specific antibody, conjugated to the enzyme urease, is used to detect the captured hCG on the internal surface of the capillary tube. The amount of urease bound to the surface is determined by the introduction of a substrate solution containing urea and the pH indicator bromothymol blue. The rate of colour change, from yellow to blue, caused by the release of ammonia from urea by urease, is determined in a spectrophotometer using a cell holder adapted to accommodate capillary tubes. The initial rate of absorbance change is directly proportional to the concentration of hCG in the sample in the range 0–100 mIU/ml. The test can detect concentrations of hCG as low as 10 mIU/ml in a total elapsed time of 5 min.     

重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定

目的 构建人绒毛膜促性腺激素（HCGB）原核表达载体PG5-HCGβ，使HCGβ在大肠杆菌中获得高效表达。建立一条简单、快速、高效的纯化复性路线，获得具有生物活性的高纯度rHCGβ。方法以本室克隆的PCRII／HCGB为模板，构建PG5-HCGβ，转化大肠杆菌BL21表达HCGβ。表达蛋白顺次用凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化。结果酶切及序列结果显示，PG5-HCGβ构建正确，HCGβ表达约占菌体总蛋白的20％。经过凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化，获得rHCGβ纯度达95％以上。复性的rHCGβ具有促进小鼠子宫生长的生物学活性。结论构建的PG5-HCGβ表达载体在大肠杆菌中获得高效表达，纯化复性的rHCGβ蛋白具有较高的生物学活性，为今后的rHCGβ生产打下了良好的基础。     

电化学发光免疫法和化学发光微粒免疫分析法在HBsAg检验中的价值比较

目的比较电化学发光免疫法(CI)和化学发光微粒免疫分析法(CMIA)在乙肝表面抗原(HBsAg)检验中的价值。方法纳入我院收治的乙型肝炎疑似病例396例,分别使用CMIA、CI法进行HBsAg水平的测定。以CMIA为金标准,分析CI对HBsAg的诊断灵敏度、特异度和符合率。计算CMIA、CI检测HBsAg的检测批次内和批次间精密度。使用Bland-Altman偏差分析对CI、CMIA的诊断一致性进行分析。结果以CMIA为检测金标准,CI检测的诊断灵敏度为95.03%(287/302),诊断特异度为97.87%(92/94),诊断符合率为95.71%(379/396)。CI、CMIA对HBsAg检测的批次内变异系数和批次间变异系数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CI和CMIA对HBsAg诊断的组内相关系数为0.896,CI、CMIA在对HBsAg的诊断中,一致性较好。经Bland-Altman偏差分析得,两种检测方法的偏倚程度置信区间为(-6.36~23.24),CI、CMIA在0~23 IU/mL的区域内具有良好的一致性,随着机体HBsAg水平的增加,偏差逐渐上升,2.02%(8/396)的点位于偏倚程度95%置信区间以外。结论与CMIA相比,CI在对HBsAg的检验中具有良好的诊断灵敏度、符合率以及精密度。此外,CMIA、CI对HBsAg的诊断一致性良好,然而在高水平HBsAg的检测中仍然存在一定偏差。     

Two-center clinical evaluation of a new automated fluorometric immunoassay for the quantitative analysis of total betaeta-human chorionic gonadotropin

OBJECTIVES: This study evaluated the quantitative total betahCG assay on the Stratus CS point-of-care instrument at two medical centers. DESIGN AND METHODS: Analytical sensitivity, linearity, within-run and total imprecision, interferences, dilution recovery, method comparison (Dimension RxL), comparison of matched heparinized whole blood and plasma samples, and determination of the normal reference interval were studied. RESULTS: Analytical sensitivity was <0.5 IU/L. The assay's linear range was 0 to 1250 IU/L; the clinical reportable range was up to 50,000 IU/L. Within-run imprecision (CV) at both low (<20 IU/L) and elevated (760 IU/L) betahCG concentrations were <4%. Total imprecision for three QC levels and two pools were <4%. Method comparison showed Stratus CS betahCG = 0.98 +/- 0.01* Dimension RxL hCG -0.11 +/- 2.69 (n = 136; r = 0.996; Sy/x = 27.7). Matched heparinized whole blood/plasma sample-comparison showed: whole blood = 1.05*Plasma + 0.37 +/- 1.29 (n = 41; r = 1.000; Sy/x = 7.57). Mean dilution recovery was 99% (range: 95% to 103%). None of the 52 drugs tested, lipemia, icterus, hemolysis, LH, FSH, TSH, hGH or prolactin represented a significant interference with the assay. Reference intervals were <0.5 IU/L for males (n = 123) and <3.0 IU/L for nonpregnant females (n = 120). CONCLUSIONS: The Stratus CS betahCG test offers the advantage of quantitative measurement of total betahCG in whole blood at the point of care and is suitable for clinical use.     

β-人绒毛膜促性腺激素光激化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种检测人血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）浓度的光激化学发光免疫分析方法。方法采用2株针对不同抗原表位的抗β-HCG抗体,其中一株抗体用来包被发光微粒,另一株抗体标记生物素,以双抗体夹心法检测人血清中的β-HCG浓度,并与Beckman-Coulter公司试剂（化学发光法）进行比较。结果发光微粒浓度为100μg/mL、生物素标记抗体浓度为7μg/mL时,检测范围为0~1 000 mIU/mL,灵敏度为0.16 mIU/mL,平均回收率为100.3%,批内变异系数（CV）为0.80%~3.99%,批间CV为2.25%,与TSH、FSH和LH的交叉反应率低,稳定性较好,与化学发光法的符合率好（r=0.99）。结论光激化学发光免疫分析方法测定β-HCG具有较高灵敏度、精密度和准确性,与化学发光法的符合率较好,适用于临床测定。     

重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定

目的构建人绒毛膜促性腺激素(HCGβ)原核表达载体PG5-HCGβ,使HCGβ在大肠杆菌中获得高效表达.建立一条简单、快速、高效的纯化复性路线,获得具有生物活性的高纯度rHCG β.方法以本室克隆的PCRII/HCGβ为模板,构建PG5-HCG β,转化大肠杆菌BL21表达HCG β.表达蛋白顺次用凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化.结果酶切及序列结果显示,PG5-HCGβ构建正确,HCG β表达约占菌体总蛋白的20%.经过凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化,获得rHCG β纯度达95%以上.复性的rHCG β具有促进小鼠子宫生长的生物学活性.结论构建的PG5-HCG β表达载体在大肠杆菌中获得高效表达,纯化复性的rHCGβ蛋白具有较高的生物学活性,为今后的rHCGβ生产打下了良好的基础.     

化学发光免疫测定技术在甲状腺肿瘤中的检验价值

目的：研究分析化学发光免疫测定技术在甲状腺肿瘤中的检验价值。方法：选取浙江省人民医院毕节医院检验科在2022年8月-2024年2月期间收治的110例疑似甲状腺肿瘤患者按照随机数字表法分为观察组（n=55,采取化学发光免疫检验）和对照组（n=55,采取放射免疫分析检验）,将病理诊断结果作为金标准。对比两组的诊断结果。结果：将病理检查结果作为金标准,阳性、阴性观察组分别检出29例、22例,对照组分别检出22例、17例,观察组的敏感度、特异度、准确度均要高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组的实验室指标做比较,观察组的A-TPO、Tg、TSH、FT3、A-TG、FT4指标水平均要高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：在甲状腺肿瘤的检验中,采用化学发光法免疫测定技术有着良好的应用优势。