蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂的初步观察

目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集形成细长的染色质丝;中期:形成大小约1μm的棒状染色体,且全部排列在细胞核中央,或分散在核内;后期:姐妹染色单体分开,向细胞核两极移动,核膜拉长;末期:核膜中间向内缢束呈葫芦状,细胞核缢裂成两个子核,随即进行胞质分裂。结论蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂与典型真核细胞相似,但分裂期核膜始终存在,为半开放式分裂。     

蓝氏贾第鞭毛虫染色体核型初步观察

目的初步观察蓝氏贾第鞭毛虫细胞分裂过程中典型凝集染色体的形成及其数目。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。在结束培养前4h弃去旧培养基,加入事先预热的含有秋水仙素(终浓度为0.2μg/ml)的新鲜培养液。低渗处理55min,用甲醇∶冰醋酸(体积比=3∶1)固定液固定。收集细胞、滴片、Giemsa染液染色,光学显微镜观察结果。结果获得了较好的染色体分裂相。贾第虫染色体的数目多数为2n=8条。50个细胞分裂相中,有35个为8条染色体,10个为9条染色体,5个为10条染色体。染色体微小呈小杆状,有时成对,形态相同。结论蓝氏贾第鞭毛虫在分裂过程中形成典型的凝集染色体,染色体数目为2n=10条。     

蓝氏贾第鞭毛虫滋养体染色体扫描电镜观察

目的电镜观察蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体数目及形态。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。制备分散度较好的染色体玻片标本,对玻片标本进行扫描电镜常规处理,扫描电镜观察。结果在扫描电镜下观察到了蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体,染色体数目为2n=10条,1号染色体为亚中央着丝粒染色体,2号、3号、4号、5号为端着丝粒染色体。结论通过电镜观察认为蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体核型公式为2n=10=2sm+8t。     

蓝氏贾第鞭毛虫特异性细胞骨架蛋白——贾第素研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫具有由微管、微丝和骨架蛋白构成的高度发达的细胞骨架系统.近年来,贾第虫的细胞骨架与其致病力的密切关系已经得到证实.在参与细胞骨架构成的众多蛋白质中,特异性细胞骨架蛋白——贾第素是其中重要的成分之一.对贾第素的研究不仅可为贾第虫细胞骨架的研究增添新的知识和研究资料,还可为贾第虫病的致病机制及抗贾第虫药物靶点的选择提供实验依据.     

双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫的损伤

目的 探讨双氢青蒿素（DHA）对蓝氏贾第鞭毛虫的损伤作用。 方法 用含不同浓度DHA的TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。分别在光镜和电镜下观察药物作用后虫体的形态结构变化。 结果 随着药物作用时间延长和浓度的增加，虫体死亡率增高。在同一时间内随着药物浓度的增高，虫体死亡率升高(P<0.01)。DHA浓度为100 μg/ml, 作用12 h，虫体死亡率为46.6%，浓度增至200 μg/ml时, 虫体死亡率为100%；同一药物浓度随着作用时间延长, 虫体死亡率也升高（P<0.05），当浓度为100 μg/ml,作用12 h，虫体死亡率为46.6%，作用24 h死亡率增至100%。药物作用后24、48和72 h光镜下观察结果显示，虫体变形、肿胀、出现空泡、失去正常的瓢形运动能力；鞭毛摆动迟缓或停止运动。电镜下观察，见虫体变形、肿胀、细胞膜崩解、脱落，表面出现胞质突起；细胞质内核糖体溶解，出现空泡；吸器失去凹状结构，隆起变成大泡；核染色质稀疏，核周间隙变宽，并出现异形核。 结论 DHA对蓝氏贾第鞭毛虫的质膜及细胞骨架有较强的损伤作用。     

抗蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的制备和特性研究

用体外培养的四川株蓝氏贾第鞭毛虫滋养休免疫BAIB/c小鼠,以免疫脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,共获得3个分泌抗蓝氏贾第鞭毛虫单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这些McAb经鉴定均属lgG_1亚类。选取活性最强的1E_2株McAb对不同贾第虫株进行抗原定位的测定,由IFA显示,该McAb与四川株和山东株滋养休的后1/3表面呈现荧光反应,但与澳大利亚株滋养体表面不显荧光,表明国内株与国外澳大利亚株滋养体表膜抗原存在株间差异。     

蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白

蓝氏贾第鞭毛虫是一种重要的肠道致病性原虫,其致病力与细胞骨架密切相关。贾第虫具有高度发达的细胞骨架系统,包括8根鞭毛、1个腹吸盘、中体和funis等,主要由微管蛋白、肌动蛋白、动力蛋白、贾第素及其相关蛋白组成。该文就贾第虫细胞骨架及相关蛋白的结构和功能作一综述。     

蓝氏贾第鞭毛虫基因表达调控的研究进展

蓝氏贾第鞭毛虫是一种重要的致病性寄生虫,人体感染后主要引起腹泻和营养不良等症状。作为一种源真核生物,其基因表达调控机制可能与其他真核生物有较大的区别。本文从蓝氏贾第虫鞭毛虫启动子、转录因子、转录后调节、翻译起始和表观遗传学等方面,对贾第虫基因表达调控的研究进展进行综述。     

青海省人体蓝氏贾第鞭毛虫流行病学调查分析

本文应用分导整群随机抽样法在全省选定３２个调查点，对１６０７９人蓝氏贾第鞭毛虫流行病学调查结果进行了分析，结果表明，我省人群贾第虫流行特征为：（１）人群感染率高，平均为４．６３％。（２）男性高于女性，（３）少数民族感染率高；（４）以牧民的感染为重，（５）小于１５岁的少年儿童感染率高，并有随年龄增长感染率逐渐的趋势。     

PRELIMINARY STUDIES ON THE EFFECTS OF A CHINESE HERB-RADIX SOPHORAE FLA VESCENTIS ON TROPHOZOITES OF GIARDIA LAMBLIA IN VITRO

Objective To investigate the effect and mechanism of radix Sophorae flavescentis on the trophozoites of Giardia lamblia in vitro. Methods Trophozoites of G. lamblia were exposed to aqueous extracts of radix S. flavescentis and then the detachment from the tube wall, the death rate and the morphological changes under light and transmission electron microscope of trophozoites were studied. Results After exposure to 1.6% aqueous extracts of radix S, flarescentis for 6, 8 and 24 h, the detachment rates were 47. 4%, 70. 9% and 80. 2%, and the death rates were 24. 5%,36.1% and 54.2%, respectively. The radix S, flavescentis-treated trophozoites shrinked and became roundish. The rewere also changes in ultrastructure, such as depletion of the contents of cytoplasm, separation of adhesive disk from the cell body and appearance of pit in cell membrane of some treated trophozoites, Conclusion Radix S, flavescentis can kill trophozoites of G, lamblia and lead them to detach from the tube wall in vitro. The induced morphological changes may be partially responsible for the effects of radix S, flavescentis on giardiasis.     

单克隆抗体抗贾第虫作用的研究

应用体外纯培养的贾第虫滋养体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠和常规杂交瘤细胞技术，制备特异的抗贾第虫单克隆抗体（１Ｅ２，１Ｇ５），以其与贾第虫滋养体相互作用，均发现具有明显的抗贾第虫效果，生长抑制率分别为３５％和６３．４％；将此单抗加入正常培养液中，其含量与抑制率呈现明显的剂量反应关系，相关系数分别为０．９７６４和０．８９８７；单抗经滋养体吸收后，对贾第虫的生长抑制作用消失；经补体灭活前后的豚鼠血清对单抗的抑制作用无影响。     

贾第虫纯培养的建立

从腹泻患儿新鲜粪便内,浓集、纯化贾第虫包囊。用生理盐水制成悬液,感染长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)乳鼠。接种后第8d将受染鼠处死。用无菌术从上段小肠分离滋养体,接种于改良TYI-S-33培养基内,于37℃培养。培养后第14d,生长旺盛的虫体在培养管壁内面形成密集的细胞单层。生长高峰期和倍增时间分别在培养后的第120和15±2h。各批虫体经液氮冷冻复苏后,虫体复活率为53～80％。复苏虫体生长良好。本纯培养已维持9月余,传代100多次。     

蓝氏贾第虫分离株tim基因序列分析比较研究

为了探讨来源于不同地理位置贾第虫分离株之间的遗传学关系,采用 ｔｉｍ 基因扩增、限制性酶切和 Ｄ Ｎ Ａ 序列分析方法对来自我国（ Ｃ１、 Ｃ２、、 Ｃ Ｈ２、 Ｃ Ｈ３）、柬埔寨（ Ｃ Ａ Ｍ ）、澳大利亚（ Ａ１、 Ａ２）和美国（ Ｂ Ｐ、 Ｃ Ｄ Ｃ）共９ 株蓝氏贾第虫的基因型进行了分析比较。结果表明, Ａ１、 Ａ２ 和 Ｃ Ａ Ｍ 属第１ 型（ Ｗ Ｂ）; Ｃ Ｈ２ 和 Ｃ Ｈ３ 属第２ 型（ Ｊ Ｈ）; Ｃ１、 Ｃ２、 Ｂ Ｐ和 Ｃ Ｄ Ｃ属第３ 型（ Ｇ Ｓ）。本实验结果提示,虫株间遗传学关系并非由地理位置的远近所决定。来源于同一地理位置的虫株其遗传学特性可有很大的差异。相反,来源于地理位置相隔很远的虫株其遗传学特性却可极为相近。贾第虫分离株基因型的确定可为本虫分子系统进化和分子流行病学研究提供重要资料。     

贾第虫表面变异抗原基因的克隆与序列测定

目的 :对比分析编码 90 k Da的表面变异蛋白 ( VSP)基因与已发表的其它 VSP基因。方法 :应用聚合酶链反应 ( PCR)技术、PCR产物的克隆技术和插入基因片段的序列测定。结果 :从贾第虫 0 2 - 4 A1基因组中将编码 90 k Da的表面变异蛋白几乎全长的基因调出 ,经序列分析 ,此基因长度为 2 0 19bp,编码 654个氨基酸 ,具有一个开放阅读框架。推导出的氨基酸序列的半脱氨酸含量丰富 ( 11.8mol% ) ,而且多数的半脱氨酸以 CXXC基序重复出现 2 6次。苏氨酸含量为 11.3mol% ,甘氨酸为 10 .9mol% ,丙氨酸为 10 .1mol%。序列分析发现有 2个天冬酰氨连接的糖基位点。结论 :象其他 VSPs一样 ,CRISP90具有一个高度保守疏水性 C末端。经同源性比较发现 ,与 CRP72有 56%的同源性。这一结果对研究贾第虫株的表面变异抗原基因的表达具有一定的意义。     

苦参合剂对隐孢子虫病儿童免疫功能的影响

目的　观察苦参合剂对隐孢子虫病儿童免疫功能的影响。方法　用ABC法和3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞亚群及淋巴细胞转化率,用单向琼脂扩散法检测免疫球蛋白,对隐孢子虫病儿童苦参合剂治疗前后的免疫功能进行测定。结果　患儿Tcell、Th值降低,淋巴细胞转化受抑,IgG升高。苦参合剂治疗后,临床腹泻症状消失,排虫转阴。Tcell、Th淋巴细胞转化值显著升高。结论　苦参合剂对隐孢子虫的感染有较好的驱虫与增强患儿细胞免疫力的作用。     

基于磷酸丙糖异构酶基因序列的蓝氏贾第鞭毛虫分子系统发育的研究

[目的 ]探讨蓝氏贾第鞭毛虫种内系统发育及遗传多样性。 [方法 ]对不同来源虫株的磷酸丙糖异构酶(tim)基因进行 PCR扩增、序列测定后 ,用简约法和 NJ法构建分子系统树进行系统学分析。 [结果 ]在所测序列中共有 12 4个位点存在变异 (2 3% ) ,且大多数为发生在第三密码子的同义突变 ,两种构树方法所得两树的分枝结构相似 ,均将受试的 16株蓝氏贾第鞭毛虫分为明显的两组。 [结论 ]tim基因可作为研究蓝氏贾第鞭毛虫群体遗传结构一个有效的遗传标记     

犬贾第虫包囊排出规律的研究

目的：对自然感染贾第虫的比格犬进行粪检调查,结果表明犬贾第虫包囊排出呈间歇性,其间歇期为7－8天,排囊后12－14天达到排囊高峰期,峰期持续2－3天,排囊持续时间为25－27天。用2只幼犬进行免疫的抑制接种犬贾第虫,接种后第7天出现排包囊,排囊后6－7天达到排囊高峰期,高峰期持续4－5天。受染动物出现腹泻,体重减轻。     

苦参合剂对隐孢子虫感染大鼠细胞免疫功能的影响

目的　探讨苦参合剂对隐孢子虫（ＣＰＳ）感染大鼠细胞免疫功能的影响。方法　建立大鼠ＣＰＳ感染模型,实验第１～１７ 天给动物口饲苦参合剂。结果　３ｍ ｌ／（ｋｇ·ｄ）苦参合剂组的ＣＤ３＋ 和ＣＤ４＋ 细胞百分率以及白细胞总数与淋巴细胞计数均明显高于非治疗组（Ｐ＜ ０．０１）且与健康对照组无差异（Ｐ＞ ０．０５）,１５ｍ ｌ／（ｋｇ·ｄ）苦参合剂组无上述效果。非治疗组的ＣＤ３＋和ＣＤ４＋ 百分率和白细胞数及淋巴细胞数均明显低于单纯地塞米松组（Ｐ＜ ０．０１）。结论　３ｍ ｌ／（ｋｇ·ｄ）苦参合剂能增强大鼠的细胞免疫功能,而１５ｍ ｌ／（ｋｇ·ｄ）苦参合剂无上述作用;隐孢子虫感染可降低宿主的免疫功能     

丙硫咪唑治疗贾第虫感染疗效观察

将307例贾第虫感染者分成4个组:即丙硫咪唑10mg/kg/d·3组98例,丙硫咪唑20mg/kg/d·3组105例,甲硝唑20rag/kg/d·3组59例和暂缓治疗组45例。前三组治后1周的近期包囊阴转率分别为91.8％、93.3％和94.9％,三组间比较差异不显著(P均>0.05);治后4周的远期包囊阴转率分别为85.7％、94.3％和96.6％,除B与C组差异不显著外(p>0.05),其余组间差异均显著(P均<0.05)。暂缓治疗组间隔1和4周复查包囊自然阴转率分别仅为4.4％和11.1％。分别与前三组比较差异均极显著(P均<0.01)。结果说明,丙硫咪唑治疗人体贾第虫感染有良好效果,尤以20mg/kg/d·3的疗效为佳。副作用轻微短暂。