八肽胆囊收缩素对脂多糖攻击小鼠抗炎症细胞因子表达的影响

目的观察脂多糖（LPS）攻击小鼠白细胞介素-4（IL-4）、IL-10的动态变化规律，以及八肽胆囊收缩素（CCK-8）对其表达的影响。方法随机将小鼠分组，每组7只。腹腔注射LPS10mg／kg，于攻击后0、2、4、6和12h检测血清、肺组织IL-4和IL-6表达高峰的时间。对照组腹腔注射生理盐水0．2ml；LPS组腹腔注射LPS10mg／kg；LPS＋CCK-8组在注射LPS前30min腹腔注射CCK-8 60μg／kg；CCK-8组腹腔注射CCK-8 60μg／kg。用酶联免疫吸附法（ELISA）及逆转录-聚合酶链反应（PT—PCR）方法检测各组小鼠血清和肺组织中IL-4、IL-10的含量及其mRNA的表达情况。结果LPS攻击后2h血清及肺组织IL-4、IL-6均显著升高，血清IL-4、IL-6于4h和6h达高峰；肺组织IL-4、IL-6则均于6h达高峰。说明LPS攻击可使小鼠血清及肺组织中IL-4、IL-10的蛋白及mRNA表达均增加；预先注入CCK-8可使IL-4和IL-10的蛋白以及mRNA表达均进一步增加（P均〈O．01）；而单独注射CCK-8对血清、肺组织IL-4、IL-10的表达无明显影响。结论CCK-8可能通过进一步增加LPS攻击小鼠IL-4、IL-10的表达参与抗炎反应过程，从而减轻LPS引起的肺组织炎症反应。     

二十二碳六烯酸对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的预防保护作用

目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤的预防保护作用。方法雄性昆明种小鼠随机分成对照组、DHA组和模型组。适应性喂养1周后,DHA组动物每天经灌胃给予500mg/kgDHA,对照组和模型组给予等体积的玉米油,连续2周。第15天,模型组和DHA组动物经腹腔注射给予LPS10mg/kg诱导内毒素性急性肺损伤;给予LPS后,记录各组动物死亡情况,进行死亡率比较。20h后乌拉坦麻醉各组小鼠,取肺脏进行病理学检查;称量肺组织,计算肺脏/体重比值;BCA法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白质含量。结果给予LPS后的20h内,DHA组小鼠死亡率为10%,模型组死亡率为33.3%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）;模型组肺脏/体重比值明显升高,肺组织病理学观察可见肺泡间隔明显增厚,大量中性粒细胞浸润,BALF中总蛋白含量明显升高;与模型组相比,预给予DHA2周,可明显降低肺脏/体重比值,降低BALF中总蛋白含量,改善肺组织病理变化。结论DHA能够减轻小鼠内毒素性急性肺损伤。     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导肺动脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK－8）对脂多糖（LPS）诱导培养的肺动脉内皮细胞（BPAEC）凋亡的影响。方法：培养的BPAEC用LPS、CCK－8、CCK－8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后,继续培养24小时。用流式细胞术和核荧光染色方法检测细胞凋亡,用生物化学方法检测培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性和丙二醛（MDA）含量,用流式细胞术定量检测过氧亚硝基阴离子（ONOO^-)含量。结果：LPS可诱导BPAEC凋亡和坏死明显增多,培养上清中MDA含量增高;CCK－8抑制BPAEC凋亡和MDA含量的增高,此作用为CCK－8受体非特异性阻断剂丙谷胺翻转;CCK－8可抑制LPS诱导BPAEC生成ONOO^-增多;CCK－8和丙谷胺对LPS诱导的BPAEC坏死无明显影响。结论：CCK－8可抑制LPS诱导的BPAEC凋亡,此作用由其受体介导,并与CCK－8的抗氧化功能有关。     

脂多糖性肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8的变化及低剂量环磷酰胺的干预作用

目的：观察低剂量环磷酰胺对脂多糖性肺损伤模型大鼠血白细胞介素1β和白细胞介素8的影响，并与地塞米松进行阳性对照。 方法：实验于2003—03／12在遵义医学院外科动物实验室、中心实验、病理实验室进行。取160只SD大鼠随机分为4组（n=40）：环磷酰胺组、模型组、地塞米松组和生理盐水组。除生理盐水组外，其他3组大鼠采用腹腔注射内毒素脂多糖5mg／kg制作肺损伤模型。注射脂多糖后，环磷酰胺组立即腹腔注射1mL环磷酰胺（4mg／kg）；地塞米松组腹腔注射1mL地塞米松（5mg／kg）；模型组腹腔注射1mL生理盐水。生理盐水组腹腔注射生理盐水2mL。各组于模型制作后第1，4，6，8小时分别取lO只采血，以ELISA法测血清中自细胞介素1β和白细胞介素8水平，且于第6小时留取肺组织进行肺组织的病理学光镜检查。 结果：160只大鼠全部进入结果分析。①肺组织的病理学变化：模型组大鼠肺泡腔见大量出血及炎性细胞浸润，支气管上皮剥脱、水肿等，环磷酰胺组和地塞米松组也可见炎细胞浸润、肺萎陷现象，与模型组比较，明显减轻（P〈0．05）。②白细胞介素1β水平：模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组，6h达到峰值（P〈0．05）；环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组（P〈0．05），但两组间差异不显著（P〉0．05）。③白细胞介素8水平：模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组，8h达到峰值（P〈0．05）；环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组（P〈0．05），但两组间差异不显著（P〉0．05）。 结论：低剂量环磷酰胺与地塞米松一样具有明显的抗炎作用，能降低肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8水平，减轻其肺组织损害。     

丙戊酸钠对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 研究丙戊酸钠(valproic acid,VPA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠急性肺损伤的影响.方法 实验地点在武汉协和医院中心实验室,通过股静脉注射LPS复制大鼠急性肺损伤模型,观察光镜下肺组织病理学改变、血清炎性因子和肺部炎性反应判定模型是否成功.依据干预药物的不同确定实验分组:股静脉给予5mL/kg生理盐水为对照组(NS组),股静脉给予LPS 10 mg/kg为模型组(LPS组),模型成功后股静脉给予VPA 300mg/kg治疗为治疗组(LPS+VPA组).注射LPS或NS后6 h处死动物,血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)、肺泡气-动脉血氧分压差(A-aDO2)、乳酸(Lac),检测肺组织干湿重比(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,肺泡灌洗液(BALF)中白蛋白质量浓度,用ELISA法检测6 h血清中TNF-α和IL-1β的含量,HE染色光镜下观察肺组织病理学变化.计量资料以均数±标准差(-x±s)表示,应用SPSS 13.0统计软件行单因素方差分析.结果 LPS组PaO2(mmHg)(81.50±3.24)较NS组(106.40±4.50)降低,A-aDO2(mmHg),Lac[(19.70±2.21),(3.63±0.22)]较NS组[(6.30±1.70),(1.21±0.19)]升高,W/D,MPO活性(μ/g),BALF中白蛋白质量浓度(pg/mL)分别为[(6.52±0.30),(7.25±0.49),(2.940±0.047)]较NS组[(4.38±0.17),(1.76±0.31),(0.099±0.077)]升高,血清中TNF-α和IL-1β的质量浓度(pg/ml)分别为(3325±284),(1950±222)较NS组(90±12),(50±11)显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),LPS组肺组织出现病理学改变;与LPS组比较,LPS+VPA组上述指标除PaO2(mmHg)(94.50±4.38)上升外,其余指标均降至[(13.50±4.77),(2.13±1.02),(5.33±0.12),(4.38±0.42),(1.260±0.039),(2410±320),(1220±162)],差异具有统计学意义(P＜0.05),LPS+VPA组肺组织病理学改变明显减轻.结论 丙戊酸钠对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤有一定保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of valproic acid (VPA) on acute lung injury induced by Lipopolysaccharide in rats. Method The rat model of acute lung injury was made by intravenous injection of lipopolysaccharide (LPS). The pathological changes of lung were observed under light microscope and inflammatory cytokines in serum detected by using ELISA to judge whether the model was successfully done or not. All rats were divided into three groups as per the different intervention agents employed. Rats in control group were treated with intravenous injection of NS in dose of 5 ml/kg, rats in LPS group were exposed to LPS with dosage of 10 mg/kg and model rats in LPS + VPA group were treated with VPA in dose of 300 mg/kg. The rats were sacrificed 6 h after LPS or NS administration. The blood PaO2 ,A-aDO2 and blood lactic acid (Lac) were measured, the lungs were removed for observing the histopathological changes and determination of wet/dry lung weight (W/D) ratio and myeloperoxidase (MPO) activity as well as albumin concentration in broncho-alveolar lavage fluid (BALF) . Seurm was collected to determine the concentrations of tumor necrosis factor-a (TNF-α) and interleukin-1β( IL-1 β) by using LISA 6 h later. All data were presented in ((x)±s). One-way ANOVA was used for comparing differences between groups. Results Compared with acute lung injury group, the blood PaO2 (94. 50 ± 4.38 ) in rats of LPS + VPA group was higher, whereas A-aDO2 ( 13.50 ± 4.77 ) and blood lac( 2.13 ± 1. 02 ) in LPS + VPA group were lower. VPA significantly lowered W/D (5.33 ±0. 12) ratio and MPO activity (4.38 ±0. 42) in the lung. Albumin concentration ( 1. 260 ± 0. 039 ) in BALF, and the levels of TN F-α( 2 410 ±320 )and IL-1β( 1 220 ± 162 )in serum were lower in LPS + VPA group. The histological changes of lung injury were lessened by VPA. Conclusions Valproic acid has protective effects against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats.     

八肽胆囊收缩素致急性胰腺炎体外模型的建立及其研究

目的 用CCK-8建立体外急性胰腺炎模型,并在模型中观察胰腺腺泡细胞淀粉酶、胰蛋白酶活性及F-actin的分布变化. 方法用胶原酶分离的胰腺腺泡细胞体外培养,设不同浓度的CCK-8组(10~(-12)～10~(-8) mol/L)和对照组, CCK-8刺激30 min后,用淀粉酶、胰蛋白酶试剂盒检测腺泡细胞淀粉酶、胰蛋白酶活性,用激光共聚焦显微镜观察细胞内F-actin分布的变化.结果 CK-8诱导的淀粉酶分泌率呈双峰曲线,低浓度CCK-8组(10~(-12)～10~(-10) mol/L),淀粉酶分泌率呈剂量依赖,高浓度CCK-8组(10~(-9) mol/L、10~(-8) mol/L),淀粉酶分泌被抑制;10~(-10) mol/L CCK-8时,细胞内胰蛋白酶活性明显升高(P<0.05),10~(-9) mol/L后升高更为急剧;CCK-8刺激浓度达10~(-9) mol/L后,细胞内F-actin出现重新分布,近细胞顶部区域/细胞基底部侧面的比值与对照组比较,出现显著改变(P<0.05). 结论成功建立了体外AP模型,CCK-8刺激可使胰腺腺泡细胞内F-actin分布从顶部向胞浆部、基底部变化,抑制了细胞消化酶分泌,并与腺泡细胞内胰蛋白酶的过早激活相关.     

槲皮素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响及其机制

[目的]探讨槲皮素(quercetin,QUE)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的影响及其机制.[方法]将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(每组15只):正常对照组(CON组)、QUE单独处理组(QUE组)、LPS模型组(LPS组)和QUE治疗组(LPS+Q...     

八肽胆囊收缩素对游离脂肪酸损伤的胰岛β细胞的保护作用

目的：观察八肽胆囊收缩素对高浓度游离脂肪酸损伤的小鼠胰岛β细胞（NIT—1细胞）的保护作用，并观察同时应用胆囊收缩素受体非特异性拮抗剂丙谷胺对此作用的影响。 方法：实验于2004-03／12在河北省人民医院中心实验室进行。将体外培养良好的NIT—1细胞分为对照组、游离脂肪酸组（加入0．25mmol／L软脂酸）、八肽胆囊收缩素组（加入游离脂肪酸同时加入10pmol／L八肽胆囊收缩素）、丙谷胺组（八肽胆囊收缩素组同时加丙谷胺，终浓度32mg／L）。37℃、体积分数为0．05的CO2条件下分别培养48h和72h，放免法测定培养液上清中胰岛素水平；MTT法检测NIT—1细胞增殖情况；流式细胞术方法测定细胞凋亡率；免疫组化法观察bcl-2的表达。 结果：①培养上清中胰岛素水平：游离脂肪酸组48h和72h明显少于对照组（P〈0．01）；八肽胆囊收缩素组显著高于游离脂肪酸处理组（P〈0．01）；丙谷胺组与游离脂肪酸组无显著差异。②细胞增殖反应：游离脂肪酸组48h和72h明显低于对照组（P〈0．01）．八肽胆囊收缩素组则显著高于游离脂肪酸组（P〈0．01），丙谷胺组与游离脂肪酸组结果相仿。③细胞凋亡率：游离脂肪酸组48h和72h明显高于对照组（P〈0．01），八肽胆囊收缩素组则显著低于游离脂肪酸组（P〈0．01），丙谷胺组与游离脂肪酸组结果相仿。④bcl-2阳性表达水平：游离脂肪酸处理不同时间后其表达明显减少；八肽胆囊收缩素处理后表达增加，丙谷胺组较八肽胆囊收缩素组表达略少。 结论：①游离脂肪酸可导致胰岛β细胞明显损伤，表现在胰岛素分泌的减少、细胞增殖能力的降低、细胞凋亡率增加以及bcl-2基因表达减少。②八肽胆囊收缩素对游离脂肪酸损伤的胰岛β细胞具有明显的保护作用。③非特异性胆囊收缩素受体拮抗剂可以在一定程度上逆转八肽胆囊收缩素的保护作用；提示其保护作用可能是通过与胆囊收缩素受体结合实现的。     

脂多糖诱导帕金森病模型中炎症因子的机制

目的:探讨脂多糖诱导帕金森病大鼠模型过程中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶等细胞毒性因子的作用。方法:实验于2003-07/2004-07在中山大学附属第一医院神经科实验室进行,取35只雄性SD大鼠随机分为4组:7,14,30d组,每组10只,对照组5只。对照组不做任何处理,3个不同时间点组立体定位注射脂多糖(20μg,质量浓度5g/L)入大鼠黑质。于注射后不同时间点观察大鼠行为学改变,并采用免疫组织化学及原位杂交等方法动态观察酪氨酸羟化酶神经元、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶等的表达。结果:29只动物进入结果分析。①行为学改变:脂多糖术后7d仅表现为轻度的旋转,每30min旋转(85±13)r,至14d时旋转次数增多,每30min旋转(121±17)r,30d时达高峰,每30min旋转(295±21)r。②7,14,30d组术侧黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数量较正常组明显下降(P<0.001),30d组下降达高峰;正常组仅有少量或无肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶的表达,术后7d各阳性神经元表达较正常组显著增多(P<0.05),术后14d表达至高峰,术后30d较14d明显下降但仍高于正常对照组,其中诱导型一氧化氮合酶阳性神经元表达于术后30d仍维持较高水平。③各组均检测到酪氨酸羟化酶mRNA表达,7,14,30d组表达     

脂多糖诱导帕金森病模型中炎症因子的机制

目的：探讨脂多糖诱导帕金森病大鼠模型过程中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶等细胞毒性因子的作用。方法：实验于2003-07／2004-07在中山大学附属第一医院神经科实验室进行,取35只雄性SD大鼠随机分为4组：7，14，30d组，每组10只，对照组5只。对照组不做任何处理，3个不同时间点组立体定位注射脂多糖(20μg，质量浓度5g／L)入大鼠黑质。于注射后不同时间点观察大鼠行为学改变，并采用免疫组织化学及原位杂交等方法动态观察酪氨酸羟化酶神经元、肿瘤坏死因子a、白细胞介素1B、诱导型一氧化氮合酶等的表达。结果：29只动物进入结果分析。①行为学改变：脂多糖术后7d仅表现为轻度的旋转，每30min旋转(85&;#177;13)r，至14d时旋转次数增多，每30min旋转(121&;#177;17)r，30d时达高峰，每30min旋转(295&;#177;21)r。②7，14，30d组术侧黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数量较正常组明显下降(P&;lt;0．001)，30d组下降达高峰；正常组仅有少量或无肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶的表达，术后7d各阳性神经元表达较正常组显著增多(P&;lt;0．05)，术后14d表达至高峰，术后30d较14d明显下降但仍高于正常对照组，其中诱导型一氧化氮合酶阳性神经元表达于术后30d仍维持较高水平。③各组均检测到酪氨酸羟化酶mRNA表达，7，14，30d组表达数量较正常组明显下降(P&;lt;0．01)，30d组其表达下降达高峰(P&;lt;0．001)。正常组有少量肿瘤坏死因子d、白细胞介素1B、诱导型一氧化氮合酶mRNA表达，术后7d表达明显增加，术后14d达高峰，术后30d组肿瘤坏死因子d、白细胞介素1BmRNA表达明显降低，诱导型一氧化氮合酶mRNA表达仍维持较高水平。结论：脂多糖可诱导肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、诱导型一氧化氮合酶等细胞毒性因子的释放，其表达高峰期明显早于多巴胺能神经元显著减少期，提示这些细胞毒性因子在多巴胺能神经元变性过程中起协调作用，加重神经元的损害，促进帕金森病的发展，提示抑制免疫和炎症过程可能有效阻断或减轻这种恶性循环的病理过程。     

大蒜素对脂多糖致急性肺损伤小鼠防治作用的实验研究

目的探讨大蒜素对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠的防治作用。方法复制LPS致ALI小鼠模型。实验动物随机分为生理盐水对照组，ALI组，大蒜素预防组，大蒜素治疗组，大蒜素组。测定各组2、6h肺湿重／干重比值（W／D）。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组2、6h血清和肺组织匀浆上清中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）及白细胞介素-1β（IL—1β）浓度。观察各组肺组织病理改变。结果ALI组，2h肺W／D较对照组无明显变化，6h肺W／D显著高于对照组（P〈0．05）。而大蒜素预防组可使肺W／D显著降低（P〈0．05），但在大蒜素治疗组肺W／D无明显改善。大蒜素组较生理盐水对照组无明显变化。肺组织病理显示，在ALI组12h时可见肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润，大蒜素预防组可明显改善肺组织病理变化，大蒜素治疗组无明显变化。ALI组，2h血清及肺组织中TNF—α及IL—1β含量均明显升高（P〈0．01），6h有所降低，但仍高于对照组（P〈0．01）；大蒜素预防组可明显降低血清及肺组织中TNF—α及IL—1β的含量，但大蒜素治疗组无明显效果。结论预先给予大蒜素可明显减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织炎症反应及肺水肿程度，对血清及肺组织中TNF—α及IL—1β的生成具有抑制作用。     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤发病中的作用及治疗干预研究

目的　探讨核因子 (NF) -κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤 (ALI)小鼠发病中的作用以及地塞米松 (Dex)的干预作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠ALI模型 ,随机分为LPS组、LPS +Dex组 ,LPS注射后 0、1、3、6、12h测定肺湿重 干重比值 (W D)、肺组织NF -κB活性、肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF)α及白细胞介素 (IL) - 10浓度 ,检测mRNA表达 ,并观察肺组织光镜、电镜病理改变。结果　LPS注射后 ,W D明显增高 ,3h开始明显升高 ,6h达到高峰 ( 4 82± 0 10 ) ,显著高于注射前 ( 3 6 7± 1 0 4,P <0 0 5 ) ;肺组织核蛋白NF -κB活性 1h开始明显升高 ,6h达到峰值 ( 40 5 7± 6 2 4) ,显著高于注射前( 44 8± 30 9,P <0 0 5 ) ;肺组织匀浆TNF -α和IL - 10浓度分别在注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 ( 197 1± 5 2 4)pg mL和 ( 16 4 9± 39 7)pg mL ,显著高于注射前。地塞米松明显抑制NF -κB活化 ,肺组织匀浆中TNF -α、IL - 10及其mRNA表达明显下降。肺组织病理显示LPS可导致肺泡出血、水肿 ,大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性 ,地塞米松可明显改善肺损伤。结论　LPS导致肺组织NF -κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与ALI发生 ,地塞米松通过抑制炎症反     

硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤炎性细胞因子的影响

目的 观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)炎性细胞因子的影响,探讨其对肺脏的作用机制.方法 雄性SD 大鼠共48只,随机分为六组,每组8只:空白对照组、LPS 组、LPS+NaHS 低剂量组、LPS+NaHS 中剂量组、LPS+NaHS 高剂量组及LPS+PPG 组.所有大鼠均检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10浓度的变化,取肺组织检测肺组织中IL-1β、IL-10、黏附分子-1(ICAM-1)mRNA基因表达变化及肺组织NF-κB p65活性变化.结果 与空白对照组比较,LPS组大鼠血清中IL-1β和IL-10浓度,肺组织中IL-1β、IL-10和ICAM-1 mRNA基因表达和NF-κB p65活性均明显升高(P<0.01).与LPS组比较,LPS+NaHS低、中、高剂量组血清中IL-1β浓度、肺组织中IL-1βmRNA基因表达和NF-κB p65活性均明显降低;LPS+NaHS中、高剂量组血清中IL-10浓度和IL-10 mRNA基因表达明显升高,ICAM-1 mRNA基因表达明显降低(P<0.05或P<0.01).与LPS组比较,LPS+PPG组血清中IL-1β浓度、肺组织中IL-1β和ICAM-1 mRNA基因表达及NF-κB p65活性均明显升高,血清中IL- 10浓度和肺组织中IL-10 mRNA基因表达明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 H2S对内毒素诱导的ALI大鼠有保护性作用,其作用机制可能与H2S调节炎性细胞因子的生成有关.     

内毒素肺损伤小鼠肺内清道夫受体A表达的变化

目的 观察内毒素肺损伤发病中小鼠肺组织及肺泡巨噬细胞(AM)清道夫受体A(SR-A)表达的变化.方法 腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)复制小鼠急性肺损伤模型,实验分为LPS致伤后0.5、1、2、4和8 h组及对照组,用小鼠AM株J774A.1细胞作体外实验,分为LPS作用后0.5、1、2、4和8 h组及无血清培养液对照组.用免疫组化及流式细胞仪观察分析小鼠肺组织及AM、J774A.1细胞的SR-A表达及分布.结果 LPS各组小鼠动脉血氧分压(PaO2)均明显低于对照组,且肺湿/干重(W/D)比值明显高于对照组(P均＜0.01).对照组小鼠肺组织除支气管上皮细胞、淋巴细胞无SR-A表达外,AM、肺血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、肺泡上皮细胞、中性粒细胞胞膜及胞质均有SR-A表达.LPS致伤后0.5 h即可观察到肺组织SR-A免疫组化染色弱于对照组,并且随着致伤时间延长,染色逐渐变浅,表明内毒素肺损伤发病中肺内SR-A表达减少.用J774A.1细胞作体外实验也发现类似结果,以4 h和8 h组降低最为显著.流式细胞仪检测AM及J774A.1细胞的SR-A表达与免疫组化染色结果相符,且细胞膜SR-A下降较细胞总SR-A显著.结论 内毒素肺损伤小鼠肺组织及AM的SR-A表达减少,其表达变化可能与内毒素作用有关.     

氢气饱和生理盐水对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤的早期保护作用

目的:探讨氢气饱和生理盐水对内毒素(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的早期保护作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、氢气饱和生理盐水对照组(H2组)、内毒素损伤组(LPS组)、氢气饱和生理盐水治疗组(LPS+H2组),1或2 h后检测肺湿干重比、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)m RNA表达量。结果 :与正常对照组相比,LPS组的湿干重比显著增加(P<0.01),TNF-αm RNA表达量持续增加(P<0.01),IL-10 m RNA表达量在2 h时才增加(P<0.05)。与LPS组同一时间相比,LPS+H2组湿干重比降低(P<0.05),TNF-αm RNA表达量先降低(P<0.01),后差异无显著性(P>0.05),IL-10 m RNA表达量差异均无显著性(P>0.05)。结论:LPS诱导的ALI早期,腹腔注射氢气饱和生理盐水能够抑制促炎因子的早期表达,从而减轻内毒素诱导的小鼠急性肺损伤。     

吸入一氧化氮对急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应的影响

目的 :探讨吸入一氧化氮 (NO)对内毒素〔即脂多糖 (L PS)〕诱导的急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应的影响。方法 :利用腹腔内注射 L PS诱导小鼠急性肺损伤模型 ,按随机数字表法将动物分为 L PS组和 L PS 吸入 NO2 0× 10 - 6组。 L PS注射前 (0时 ,即正常对照 )及注射后 1、3、6和 12小时处死小鼠 (n=6 ) ,分别测定肺组织湿重 /干重 (W/D)比值 ,同时用迁移率改变电泳法 (EMSA)检测核因子κB(NFκB)的活性 ,用酶联免疫吸附法 (EL ISA )检测肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素 10 (IL 10 )的浓度 ,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测 TNFα m RNA及 IL 10 m RNA的表达 ,并观察肺组织病理改变。结果 :L PS注射后 3、6、12小时 ,W/D分别为 4 .80± 0 .31、4 .82± 0 .10和 4 .6 3± 0 .18,明显高于正常对照 (3.6 7± 1.0 4 ,P均 <0 .0 5 )。吸入 2 0× 10 - 6 NO后 3和 12小时 ,W/D分别为 4 .0 4± 0 .77和 4 .2 4± 0 .75 ,显著低于 L PS组 (P均 <0 .0 5 )。吸入 NO2 0× 10 - 6 6小时后 ,小鼠肺组织核蛋白 NFκB活性为 2 5 0 .6± 5 1.5 ,明显低于 L PS组 (40 5 .7± 6 2 .4 ,P<0 .0 5 )。与 L PS组比较 ,吸入 NO后 3～ 12小时 ,肺组织匀浆中 TNFα和 IL 10浓度均明显降低。吸入 NO后 6小时 ,肺组织匀浆中 TNFα     

静脉注射内毒素致大鼠急性肺损伤模型的病理生理学指标评价

目的 观察静脉注射内毒素所致大鼠急性肺损伤（ALI）模型的病理生理学指标，全面评价该模型。方法 将33只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组，对照组于静脉注射生理盐水后2h处死动物，实验组静脉注射革兰阴性菌脂多糖后分别于2、4和6h后处死，比较各组死亡率、呼吸频率、肺脏病理、血气指标、肺顺应性、右肺湿重／体重比值、血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果实验组6h动脉血氧分压（PaO）跌至69．18mmHg（1mmHg=0．133kPa）；肉眼肺脏可见明显淤血、出血点和水肿；光镜下肺泡正常结构消失，间质水肿增宽，大量炎性细胞浸润，毛细血管明显扩张、充血，白细胞附壁；肺顺应性跌至正常值的47％，右肺湿重／体重比值相当于正常值的137％；血清、BALF中TNF-α水平急剧升高。结论以肺部特征性病理改变和PaO2下降大于30％（与基线值相比）作为判定大鼠ALI模型是否成功的主要指标；以肺顺应性、湿重／体重比值作为辅助指标，可能更适合于大鼠ALI模型。