黄芪总苷的抑瘤作用及其作用机制

目的　探讨黄芪总苷的抗肿瘤作用及其作用机制。方法　采用小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )两种小鼠移植瘤的动物模型 ,以瘤重抑制率作指标。体外采用人宫颈癌细胞株HeLa细胞 ,用MTT法测肿瘤细胞的生长 ,流式细胞术及TUNEL法检测细胞周期及细胞凋亡。结果　黄芪总苷显著抑制小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )的生长 ;体外可显著抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞周期阻滞于G0 /G1 期 ,并诱导其凋亡。结论　黄芪总苷对小鼠肝癌 (HepA)与肉瘤(S1 80 )具有抑瘤作用。对HeLa细胞的生长有直接抑制作用。其抗肿瘤作用可能与细胞周期阻滞于G0 /G1 期和诱导细胞凋亡有关     

苦参素对人前列腺癌PC-3细胞体外作用研究

目的探讨苦参素对人前列腺癌PC 3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制。方法采用MTT法检测PC 3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC 3细胞周期改变,免疫组化法检测PC 3细胞中Bcl 2和Bax的表达。结果随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC 3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05)。随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC 3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl 2表达下调,而Bax表达上调。结论苦参素能通过诱导人前列腺癌PC 3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl 2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖。     

苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡及其对Bcl-2、增殖细胞核抗原蛋白表达的影响

目的：研究苦参碱是否具有诱导RPMI8226细胞凋亡的生物学活性,探讨苦参碱对RPMI8226细胞Bcl-2及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平的影响及其作用的分子机制。方法：CCK-8法检测一定浓度的苦参碱对RPMI8226细胞的体外增殖抑制作用;AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;PI单染色法检测细胞周期改变;同时应用流式细胞术检测Bcl-2及PCNA蛋白表达的变化。结果：苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,呈量效关系;细胞周期分析,G0/G1期细胞相对增多、S期相对减少、G2/M期无明显变化。苦参碱处理组RPMI8226细胞中Bcl-2及PCNA蛋白的表达跟未加药组相比阳性表达率均降低。结论：苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显抑制作用,其作用主要通过诱导RPMI8226细胞产生细胞周期阻滞和凋亡,降低PCNA的表达。苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达下调对调控细胞凋亡有重要作用。     

β-榄香烯对肝癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察β-榄香烯对体外培养肝癌细胞增殖以及细胞周期的影响。方法肝癌7402细胞体外培养,β-榄香烯干预;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测β-榄香烯对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期。结果肝癌7402细胞经过β-榄香烯干预,其存活率明显降低,并呈剂量依赖性。细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,进入S期和G2期细胞明显减少,G1期细胞增多,细胞周期被阻滞于G1期。结论β-榄香烯可明显抑制肝癌细胞的增殖及细胞周期,阻滞细胞从G1期进入S期。     

氯胺酮对胚胎大鼠培养神经干细胞增殖和细胞周期的影响

目的　探讨氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞增殖、细胞周期的影响。方法　采用MTT法检测氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞具有生长抑制作用 ,并存在量效关系。流式细胞仪分析表明G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降。结论　氯胺酮对大鼠培养神经干细胞的增殖有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞有关。     

TNP-470对人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的　探讨TNP 4 70对体外培养的人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法　采用MTT法检测TNP 4 70对体外培养的Lovo细胞的生长抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡百分率。结果　TNP 4 70对Lovo细胞生长具有抑制作用 ,并存在量效和时间依赖性。流式细胞仪分析表明 :G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降 ,增值指数 (PI)下降 ,凋亡率上升 ,电镜下可见典型的细胞凋亡形态改变。结论　TNP 4 70对Lovo细胞的增殖具有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞和凋亡有关     

冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞系生长抑制作用

目的研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-PCR法检测survivin、p21mR-NA表达。结果冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的生长抑制作用,荧光显微镜和透射电镜下均见到典型的凋亡形态学改变,流式分析出现亚G1峰并显示G2/M期周期阻滞。RT-PCR分析结果显示p21mRNA表达增加而survivin mRNA表达减少。结论冬凌草甲素通过诱导凋亡和G2/M期周期阻滞来抑制人胰腺癌SW1990细胞生长,其分子机制可能与survivin和p21调节的信号途径有关。     

血管紧张素Ⅱ受体抑制剂对人卵巢癌细胞抑制作用的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(氯沙坦)对人卵巢癌HO89101细胞的体外生长的影响。方法采用体外实验的方法将不同浓度的Losartan作用于HO8910细胞后,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察氯沙坦对HO8910细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪分析氯沙坦对HO8910细胞增殖周期的影响。结果①不同浓度的氯沙坦对HO8910细胞有抑制其生长的作用(P<0.05),并呈现剂量依赖性关系;②细胞周期分析显示氯沙坦使HO8910 G0/G1期细胞明显增加,而S和G2/M期的细胞减少,说明细胞被阻滞在G0/G1期,细胞增殖被抑制。结论氯沙坦可以抑制HO8910细胞的体外增殖,细胞被阻滞在G0/G1期,诱导细胞进行程序性死亡。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

番茄红素对EC-9706细胞增殖及细胞周期的影响

目的：研究番茄红素对人食管癌细胞EC-9706的增殖及细胞周期的影响。方法：MTT法检测番茄红素对EC-9706增殖的抑制作用,采用流式细胞仪检测同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期和凋亡的变化。结果：番茄红素能够明显抑制EC-9706细胞的生长,呈现时间和剂量依赖性;且诱导细胞凋亡;并阻滞细胞周期于S期。结论：番茄红素可抑制EC-9706细胞的增殖,其机制可能为诱导细胞凋亡和改变细胞周期。     

Effect of Juglone in qinglongyi on cell cycle status and apoptosis in A-549 cells

Objective To explore the inhibition of juglone in Qinglongyi on A-549 cells in vitro.Methods MTT assay was used.Laser confocal scanning microscope was used to observe apoptotic morphology.Changes of cell cycle are studied by flow cytometry analysis.Results MTT assay showed that juglone had a marked growth inhibition in A-549 cells and the IC50 is respectively 3.4×10-5 mol·L-1,1.8×10-5 mol·L-1 and 2.6×10-6 mol·L-1 after treatment for 24,48 and 72 h by juglone.Through Laser confocal scanning microscope,we can see that juglone can induce the apoptosis.Cell cycle changes are analyzed by flow cytometry with cells at G1 phase significantly less than those of control and cells at G2 phase significantly more than those of control.Conclusions It suggests that juglone could apoptosis of A-549 cells with the cell cycle arrest on G2 phase in distinct dose-dependent manner.     

胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞增殖和膜流动性的影响

目的:研究胡桃醌诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞,采用荧光偏振技术离体动态地检测30 min内胡桃醌对BEL-7402细胞各向异性r、荧光偏振度P和微粘度η的影响,分析细胞膜流动性的改变。结果:各浓度的胡桃醌均可抑制人肝癌BEL-7402细胞的生长,诱导其凋亡,IC50为13.78μM。不同浓度胡桃醌均可引起BEL-7402细胞膜的r、P和η值显著性降低(P<0.05),尤其在前1 min内r、P、η值下降迅速,1min后各指标下降的趋势渐渐平缓。结论:胡桃醌能显著增加BEL-7402细胞的膜流动性,促进其本身进入细胞内部,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用。方法：以Res（10、20、40μg／mL）作用人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSo和培养液作用为对照组。采用MTT法检测Res对人胃癌SGC7901细胞的生长抑制情况．荧光染色法观察细胞形态变化。琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片断化。结果：Res对SGC7901细胞生长有明显抑制作用,且随着剂量的增高（10～40μg／mL）而增高,最大抑制率达（53．39±5．32）％;荧光染色结果发现Res48h凋亡细胞增多,镜下可见较为典型的凋亡形态学变化：细胞变小,核皱缩,荧光强度增强．呈囊月或环状．核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的“梯状”条带,而对照组未出现梯状务带。结论;Res能押制人胃癌SGC7901细胞的生长并诱导其凋亡。     

热休克蛋白70单抗诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨HSP70单抗对人胰腺癌细胞株BXPC-3的生长抑制作用和凋亡的诱导作用及可能的作用机制。方法MTT法检测HSP70单抗对人胰腺癌细胞株BXPC-3增殖的影响,流式细胞仪检测HSP70单抗诱导凋亡作用。结果MTT法检测24h,48h不同浓度HSP70单抗作用后实验组与对照组吸光度（A）值比较差异有统计学意义（P〈0.05）,48h的抑制率高于24h的抑制率。流式细胞仪分析显示HSP70单抗作用48h后细胞发生凋亡,且随单抗浓度的增加细胞凋亡率增高。结论HSP70单抗可以抑制BXPC-3细胞的增殖并且可以诱导其凋亡。     

Juglone,from Juglans mandshruica Maxim,inhibits growth and induces apoptosis in human leukemia cell HL-60 through a reactive oxygen species-dependent mechanism

Juglone, a major chemical constituent of Juglans mandshruica Maxim, is a promising anticancer agent that has shown a strong activity against cancer cells in vitro. Our previous study showed that juglone inhibited the proliferation of HL-60 cells with an IC50 value ～8 μM. To further explore the proapoptotic mechanism of juglone, we investigated the role of the reactive oxygen species (ROS) in the apoptosis induced by juglone in HL-60 cells. The generation of ROS was about 2 to 8-fold as compared to control cell after treatment with juglone (2, 4 and 8 μM) for 24 h. The glutathione (GSH) depletion was consistent with ROS generation after treatment with juglone. Reversal of apoptosis in antioxidants (NAC and catalase) pretreated cells indicated the involvement of ROS in juglone-induced apoptosis. The cleavage of PARP and procaspase-3 and -9, loss of mitochondrial membrane potential (△Ψm), and release of cytochrome c (Cyt c) and Smac induced by juglone were significantly blocked by NAC. NAC also prevented the inhibition the phosphorylation of Akt and mTOR proteins by juglone. Collectively, these results indicated that ROS played a significant role in the apoptosis induced by juglone in human leukemia cell HL-60.     

Par-4 downregulation confers cisplatin resistance in pancreatic cancer cells via PI3K/Akt pathway-dependent EMT

Cisplatin (CDDP) efficiency in pancreatic cancer therapy is limited due to development of drug resistance. However, the comprehensive mechanisms remain largely unclear. In this study, we first established a CDDP-resistant pancreatic cancer cell line-BXPC-3/CDDP from its parental cell line-BXPC-3. The results showed that CDDP resistance in BXPC-3/CDDP cells correlates with changes in cellular EMT phenotypes. Prostate apoptosis response-4 (Par-4) expression at both mRNA and protein levels were reduced in CDDP-resistant BXPC-3/CDDP cells compared with that in BXPC-3 cells. Ectopic expression of Par-4 reversed EMT and CDDP resistance in BXPC-3/CDDP cells. In BXPC-3 cells, knockdown of Par-4 expression induces EMT and CDDP insensitivity, however, these effects were blocked by inhibition of PI3K/Akt pathway using LY294002. Furthermore, Par-4 knockdown could significantly stimulate PI3K/Akt signaling in BXPC-3 cells. In vivo studies, xenograft BXPC-3 tumors were sensitive to CDDP treatment. Treatment with CDDP alone had little effect on the growth of Par-4 siRNA-transfected BXPC-3 tumors in nude mice and the survival rate compared with control. Inhibition of PI3K/Akt pathway using LY294002 reversed CDDP resistance in Par-4 siRNA-transfected BXPC-3 tumors. In conclusion, these results indicate that Par-4 downregulation confers CDDP resistance via PI3K/Akt pathway-dependent EMT in BXPC-3 cells. Therefore, Par-4 may be a potential target for overcoming CDDP resistance in pancreatic cancer.     

胡桃醌叶酸修饰自微乳的体内外靶向性研究

目的:研究胡桃醌叶酸修饰自微乳在动物体内外的靶向性。方法:(1)采用含体积分数为10%的胎牛血清RPMI-1640培养液,将人胃癌细胞SGC-7901接种到细胞培养瓶中,置于条件为温度37℃,5%CO₂浓度培养箱中进行培养。每3天传代一次,取其对数期细胞进行体外各项试验指标的测定。(2)取小鼠分别灌胃各组制剂,分别在给药后0.25,1,4 h将小鼠断头处死,解剖取出心、肝、脾、肺、肾组织和肿瘤组织,采用高效液相色谱法测定各时间点、各器官的药物浓度。结果:(1)结果表明FA-PEG修饰自微乳对胃癌细胞SGC-7901具有明显的体外靶向特征。(2)胡桃醌叶酸修饰自微乳在肿瘤内的药物分布明显高于胡桃醌溶液组和普通自微乳组,在肝内的蓄积量明显低于普通自微乳组,且肿瘤靶向效果最好。结论:胡桃醌叶酸修饰自微乳具有明显的体内外靶向性。     

仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1增殖的抑制作用研究

目的 研究仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1增殖的抑制作用。方法 SRB法检测不同浓度仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3（仙鹤草水提液浓度：0.15,0.3,0.6,1.2,2.4,4.8 mg·mL^-1）和PANC-1（仙鹤草水提液浓度：0.125,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0 mg·mL^-1）分别作用24,48,72 h后的增殖抑制率;流式细胞仪检测0.5,1,2 mg·mL^-1仙鹤草水提液对胰腺癌细胞BXPC-3周期分布的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测1,2,4,8 mg·mL^-1仙鹤草水提液对BXPC-3细胞凋亡的影响。结果 仙鹤草水提液可显著抑制BXPC-3和PANC-1细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性;仙鹤草水提液可显著增加BXPC-3细胞停滞在G1期的百分率,促进BXPC-3细胞的早期凋亡和晚期凋亡。结论 仙鹤草水提液可通过或部分通过诱导胰腺癌细胞BXPC-3和PANC-1的凋亡,抑制胰腺癌细胞的增殖,发挥抗胰腺癌作用。     

地塞米松对卵巢癌SKOV-3细胞的影响

目的研究地塞米松对体外培养条件下的卵巢癌细胞SKOV-3细胞增殖的影响及诱导其凋亡的情况。方法取对数生长期的SKOV-3细胞（细胞数为5×10^4／mL）分别接种于不同细胞培养板上,试验组每孔加入200μL不同浓度的地塞米松,空白对照组加入等体积PRMI-1640培养液孵育,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测吸光度（A490值）并计算SKOV-3细胞增殖抑制率;PI染色细胞后上流式细胞仪检测各个时间点的细胞凋亡率。结果MTT法检测结果显示,SKOV-3细胞增殖抑制率随着地塞米松浓度和作用时间的增加均明显增大,以40μmol／L浓度的试验组培养48h的抑制率最高,达（45．25±3．12）％。流式细胞仪检测显示。地塞米松处理后可引起G0／G1期细胞明显增加（P〈0．05）,且SKOV-3细胞凋亡率随着地塞米松浓度增加有升高趋势。结论地塞米松能诱导卵巢癌SKOV-3细胞凋亡。