结合胆红素酶法测定的一种新方法

目的 建立一种特异性更高的酶法血清结合胆红素(CB)测定的新方法。方法 在pH5．5、有氟化钠(NaF)和N—乙酰半肮氨酸(NAC)的存在下，胆红素氧化酶(BOD)选择性氧化CB，引起450nm吸光度下降，计算CB的浓度。结果 批内精密度，n＝20，-↑x＝17．65μmol／L，s＝1．15，CV＝6．52％和-↑x＝301．49μmol/L，s＝1．01，CV＝0．33％；批间精密度，n＝20，-↑x＝31．50μmol／L，s＝3．12，CV＝9．90％和-↑x＝184．12μmol/L，s＝5．01，CV＝2．72％；线性范围至少可达320μmol／L；选择性抑制物的最适浓度，NaF2．5mmol/L，NAC2．5mmol/L；与重氮法的相关性，Y(酶法)＝0．839X(重氮法)—7．965，r＝0．9690。结论 该研究建立的反应条件，能有效地抑制BOD对游离胆红素的“非特异性”氧化，提高CB测定的准确性。     

逆向双缩脲-亚铜螯合反应检测蛋白质的方法学研究

探讨了逆向双缩脲─亚铜螯合反应检测蛋白质的方法，并对其实验条件作了研究。实验结果表明；方法的敏感性（摩尔吸光因数＝1．4×106cm2／mol）较经典的双缩脲法（摩尔吸光因数＝9.5×105cm2／mol）敏感。其蛋白回收率为93％～101％；与双缩脲法比较，相关系数0．997；Y＝0．98x－0．004．x＝1.33g／L，＝1.31g／L；批内CV值1．1％．批间CV值1．3％。该法能以超微量法在全自动生化分析仪上进行，37℃条件下反应仅需6分钟，操作简便．结果可靠。     

液体单试剂检测血氨方法的建立

目的配制液体单试剂，建立酶两点动力法测定血浆中血氨含量。方法在荷兰威图科学公司DPU-41型半自动生化仪和美国贝克曼公司CX5-CE型全自动生化仪上研究酶两点动力法，建立实验参数。结果试剂含量：三乙醇胺缓冲液（pH7．4）0．25mol／L，α-酮戊二酸15mmol／L，还原型辅酶0．3mmol／L，谷氨酸脱氢酶大于160U／L。该法最低检出限为1．9μmol／L，线性范围达321μmol／L（r=0．9961），批内CV=2．2％，批间CV=4．4％，平均回收率=99．3％，胆红素〈175．8μmol／L，血红蛋白〈3．4g／L，对测定结果无显著影响。结论本法灵敏度高，线性、精密度好，结果准确，胆红素、血红蛋白干扰小，操作简便，适用于全自动及半自动生化分析仪，可推广运用。     

钒酸氧化法测定血清胆红素的实验评价

目的对钒酸氧化法测定血清胆红素进行方法学评价。方法收集40例高、中、低浓度的血清样本进行钒酸氧化法与重氮法的比对，分析钒酸氧化法的精密度、灵敏度、稳定性并做干扰实验。结果钒酸氧化法测定血清总胆红素（TBil）批内变异系数（CV）为1．58％，批间CV为2．94％；血清直接胆红素（DBil）批内CV为1．23％，批间CV为2．7％；平均回收率TBil为101．1％，DBil为100．1％。维生素C（Vit C）≤0．5g/L时对钒酸氧化法和重氮法均无干扰，三酰甘油≤6mmol／L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有明显干扰。血红蛋白浓度≤8g/L时对钒酸氧化法无干扰，对重氮法有较大干扰。结论钒酸氧化法测定TBil和DBil是较理想的方法。     

血清葡萄糖及1，5-脱水葡萄糖醇双项同测的建立

目的建立新全酶终点法同时测定血清中1，5-脱水葡萄糖醇（1，5-AG）和葡萄糖（Glu）。方法用葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）偶联系统使血清中Glu彻底转化为不与呋喃糖氧化酶（PROD）反应的6-磷酸葡萄糖酸内酯（6-PGA），以其吸光度变化计算出Glu浓度；以PROD氧化1，5-AG，生成1，5-脱水果糖和H2O2，用Trinders反应比色测定出1，5-AG的浓度。结果1，5-AG在550μmol／L（Y=0．001X＋0．0658，r=0．999）以内，Glu浓度在40mmol／L（Y=0．051X＋0．128，r=0．9989）以内线性良好。Glu和1，5-AG的平均批内变异系数（CV）分别为0．88％和1．05％，批间CV分别为1．40％和1．94％。Glu和1，5-AG的平均回收率分别为100．2％和101．6％。三酰甘油（TG）≤8．9mmol／L、血红蛋白（Hb）≤4g／L、总胆红素≤350μmol／L时不影响Glu和1，5-AG的测定。本法测定l，5-AG与Lana微柱法及GK法与HK法测定Glu相关性均良好（r^2=0．999）。Glu与1，5-AG的95％参考值范围分别为3．7—5．7mmol／L和83．1～240．7μmol／L。结论本法简便快速、灵敏、准确和稳定，可自动化双项同测Glu和1，5-AG，为糖尿病的检测与治疗监控提供了新的方法。     

重氮法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素的初步比较分析

目的：探讨重氮法与钒酸盐氧化法测定血清胆红素的差别。方法：从精密度、线性范围及回收率三个方面对两种方法测定血清胆红素的结果进行比较。结果：重氮法测定的总胆红素和直接胆红素的批间和批内CV％为1．33与1．36和3．1与3．4，线性范围为260μmol／L与μmol／L，回收率为99．3％和99．9％；钒酸盐法分别为1．30与1．24和2．95与3．31，520μmol／L与260μmol／L，99．8％和99．8％。结论：重氮法在精密度和线性范围两项指标上不如钒酸盐法，在回收率上两者均较好。     

酶偶联法测定肌酐与苦味酸法的比较

目的：评价肌酐酶－氧化酶偶联法测定肌酐（以下简称酶法）。方法：同时用ROCHE公司和LABO公司的两种酶法试剂盒测定肌酐并与苦味酸法进行比较。结果：LABO酶法测定肌酐的线性范围为25μmol/L-2210μmol/L，ROCHE为49μmol/L－4420μmol/L，苦味酸法为92μmol/L－520μmol/L。LABO试剂的批内CV＜0．54％，批间CV＜2．06％，回收率为95％；ROCHE试剂的批内CV＜0．88％，批间CV＜2．30％，回收率为99％；苦味酸法批内CV＜1．13％，批间CV＜3．23％，回收率为93％。溶血、黄疸对两种酶法测定肌酐的干扰率＜4％；抗坏血酸对苦味酸法产生正干扰，当其＞0．625g/L时，干扰率≥11．2％，抗坏血酸≥1．25g/L时，对ROCHE试剂测定结果的干扰率≥5．58％；药物头孢曲松钠≥1．00g/L时，对苦味酸法产生正干扰，干扰率≥7．11％，对其它两种试剂无干扰。结论：酶法测定肌酐优于苦味酸法，可作为临床常规测定方法。同时，临床实验室需根据自己的实际情况选择合适的酶法试剂盒。     

速率法测定血清二氧化碳

用英国朗道公司的二氧化碳终点法试剂，在日本岛津CL－7200全自动生化分析仪上自行建立连续监测法．该法与美国NOVA16型急诊生化仪的二氧化碳电极法比较，30份患者血清的测定值经配对t检验，P＞0．05，差异无显著性意义；同一份质控血清用该法测定，批内CV：2．1％，批间CV：3．7％；胆红素100μmol／L，血红蛋白10g／L，对测定值无干扰．     

免疫比浊法测定尿微量白蛋白的探讨

目的 对免疫比浊法测定尿微量白蛋白(UmALB)进行方法学评价。方法 采用免疫比浊法在HITACH17170A全自动生化分析仪上测定UmALB。结果 UmALB的检出限为0～200mg／L，批内变异系数为0．55％，平均批间变异系数为1．80％，平均回收率为102％。0．62g／L以上的血红蛋白和1．73μmol／L以上的胆红素对测定有较大负干扰，干扰率分别为-2．60％和-3．0％。结论 该法测定尿微量白蛋白精密度好，准确性高，适于常规实验室使用。     

血清鸟嘌呤脱氨酶的连续监测法

利用葡萄糖氧化酶法测葡萄糖，间接测得2．4－二氧酚摩尔吸光因数ε＝3．31×104cm2／mol，再利用trinder反应建立连续监测法测定血清鸟嘌呤脱氨酶的活力，此法不但灵敏度高，同时有很高的精度，批内、批间的CV≤5．98％，最适pH为7．0，在600秒观察期内吸光度变化与时间成正比。Km＝1．09×10－2mmol／L，最佳黄嘌呤氧化酶用量为10U／L，最佳过氧化物酶用量为≥190U／L。120例健康体检者参考范围为0．06～1．02U／L，并对实验条件及鸟嘌呤脱氨酶的临床意义作了探讨。     

载脂蛋白A1与载脂蛋白B液体双试剂性能评价

目的对伊利康生物技术有限公司载脂蛋白A1（ApoA1）、ApoB检测试剂盒进行性能评价。方法通过试剂的批内精密度、批间精密度、线性范围、稳定性、回收率、干扰试验等进行系统评估。结果伊利康ApoA1、ApoB试剂盒测定ApoA1批内变异系数（CV）值分别为0．98％、1．23％、2．56％,批间Cy值分别为0．99％、1．18％、2．33％;ApoB批内CV值分别为1．23％、1．57％、2．46％,批间CV值分别为1．17％、1．43％、2．29％。与进口试剂相比,ApoAl的相关系数（r）=0．9989,相关方程为Y=0．9998X＋0．0168;ApoB的r=0．9994,相关方程为Y=0．9909X＋0．0108,测定结果呈显著相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。当三酰甘油的浓度小于15mmol／L、抗坏血酸小于4．5mmol／L、血红蛋白小于4．5g／L、胆红素小于540μmol／L时,其对本法无显著性干扰。结论该试剂完全符合临床诊断试剂要求,能适用于各种全自动生化分析仪。     

KHC3法测定血清总胆红素的方法评价

[目的] 应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的标准化评价方案对KHC3法测定血清总胆红素（TBIL）进行初步评价。[方法] 系统研究KHC3法测定血清总胆红素的精密度、准确度、线性范围及干扰因素，并比较其与重氮法结果的相关性。[结果] KHC，法测定血清总胆红素具有良好的精度（批内，批间，日间及总变异系数均小于5％）和准确度（回收率95．7％～102．2％，平均回收率98．7％）。线性范围：0～513μmol／L．维生素C（VitC）≤0.5g／L、甘油三酯（TG）≤5．0mmoL／L和血红蛋白（Hb）≤1．5g/L时对KHC，法无干扰与重氮法相关性好。[结论]KHC3法测定总胆红素具有准确度高、重复性好，线性范围宽，有较强的抗干扰能力，适用于实验室常规自动化分析。     

茜素红S直接光度法测定血清白蛋白的方法学评价

目的：建立准确、灵敏、特异、微量的茜素红S(ARS)光度法测定血清白蛋白。方法：建立检测血清白蛋白含量的茜素红S法最适条件并进行方法学系列评价实验。结果：该法线性范围为0～75g／L，手工法批内和批间变异系数分别为2．1％，3．4％；回收率97．2％～102．0％。自动分析法批内和批间变异系数分别为1．9％，2．5％；回收率97．7％～103．2％。与BCG法比较有良好的相关性，相关系数r=0．9913，相关方程y=0．9783x 2．043。γ-球蛋白、胃蛋白酶、溶茵酶、胰蛋白酶对测定基本无干扰。血清甘油三酯浓度3．0mmol／L以下，血红蛋白浓度2．5g／L以下，胆红素浓度342μmol／L以下对测定无影响。结论：茜素红S测定白蛋白方法血清微量，操作简单，线性范围宽，重复性好，准确度高，适用于手工和自动生化分析仪检测。     

邻苯二甲醛法血清尿素氮的测定

报道一种不用加热煮沸，室温条件下测定血清尿素氮的方法，并对该法进行了评价。该法尿素氮浓度在0～80mmol／L范围内呈线性；回收率为90％～98％；批内CV4．9％～6．4％，批间CV6．8％；与二乙酰一肟法相关性较好r＝0．9545，回归方程为y（本法）＝0．0719＋0．9937x；测定正常成人男40例、女30例，血清尿素氮参考值范围（x±1．96s）为4.39～14.21mmol／L。     

除蛋白速率法测定高胆红素血浆中肌酐

苦味酸速率法测定肌酐时，高胆红素血浆使结果明显偏低，现用的消除干扰的方法只能减弱干抗。为此，我们建立了一种既能有效地消除干扰又经济方便的方法。即取100g／L磺基水杨酸0．1ml，加高胆红素血浆0．5ml，混匀，离心沉淀，取上清液用速率法测定肌酐，有效地去除负干扰．批内CV=3．6％、n=20，批间CV=5．9％，n=15；平均回收率为98．2％。本法（105±61．1μmol／L），与除蛋白手工法（106．6±62．1μmol／L）呈高度相关（r=0．970），且两法差异无显著意义（P＞0．05）．而速率法仅77．6±47．6μmol／L。本法尤其可保证黄疸病人内生肌酐清除率的准确性。     

血清肌红蛋白比浊法测定试剂的评价及其初步临床应用

目的 通过评价肌红蛋白测定试剂的性能,建立一种用全自动生化分析仪检测肌红蛋白的免疫比浊法。 方法 利用标记抗体检测抗原的比浊法原理,进行精密度、线性、回收率、干扰试验。 结果 本法标准曲线y＝7．3635＋0．9739x,r＝0．9997。正常人血清肌红蛋白浓度的批内CV％为0．25％,批CV％为1．49％。心肌梗塞病者的则分别人1．3％与2．23％,回收率为97．1％～104．7％。血清TG＞5．0mmol／L或Hb＞500mg／L对肌红蛋白的检测才有干扰。测定100例健康体检者血清肌红蛋白（SMb）含量为20．7～58．9μg／L。33例急性心肌梗塞（AMI）患者的SMb的含量为542±178μg／L。 结论 该法具有快速、灵敏、简便、准确的优点,对AMI的诊断有较高的应用价值。     

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

目的：对胶乳增强免疫比浊法（LEIA）定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。方法应用美国临床实验室标准化协会（ CLSI）的标准化评价方案评价LEIA测定血浆NGAL的不精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。同时测定86例2型糖尿病（T2DM）患者（其中包括41例糖尿病肾病（DN）患者）、40名体检健康者（正常对照组）的血浆NGAL水平。结果LEIA测定血浆NGAL 低、高水平的批内变异系数（ CV）分别为3．76％、1．79％;日间 CV 分别为6．62％、3．45％。平均回收率为97．3％～104．6％;在0～5000μg／L内线性良好,线性范围内偏差＜8％。与进口同类试剂盒（粒子增强免疫比浊法）具有高度相关性（R2＝0．9966）,两种检测方法在200和700μg／L处的偏倚分别为3．66和11．79μg／L,均满足厂家规定的要求。总胆红素≤600μg／L、血红蛋白≤10 g／L、维生素C≤0．6 g／L、甘油三酯≤15 mmol／L时对LEIA测定血浆NGAL均无明显干扰;试剂在仪器2～8℃的条件下放置,至少可保存稳定35 d;20名健康体检者血浆NGAL水平均处于厂家声明的参考区间内。正常对照组、T2DM组和DN组血浆NGAL水平呈逐步增高趋势,各组间差异均有统计学意义（P均＜0．01）。血浆NGAL与血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）、肌酐（Cr）呈正相关（相关系数分别为0．58、0．43,P均＜0．01）。结论 LEIA测定血浆NGAL具有较高的灵敏度和精密度,所测结果准确可靠,能直接在自动生化分析仪上使用,操作简便、快速,适用于大批量测定。     

用HBHBA作色原测定血浆游离血红蛋白

目的 测定血浆中游离血红蛋白。方法 用2，4，6－三溴－三羟基苯甲酸(HBHBA)做色原剂和4－AAP（4－氨基氨替吡啉）形成红色醌类物质，用比色法测定其浓度。结果 该法线性范围0－0.8g/L。重复性试验，低值血清批内CV＝2．8％，批间CV＝5％；高值批内CV＝1．7％，批间CV＝3．7％。平均回收率98．6％（96％－102％）。对照实验r=0.9860(Y=0.99x 0.2)。正常参考值0.013-0.073g/L。结论 所用试剂无毒性，不致癌，显色稳定，灵敏度高，重复性好，结果准确可靠，是一种理想的测定方法。     

乙醇氧化酶法测定血清中乙醇含量

目的：建立血清中测定乙醇浓度的的乙醇氧化酶法。方法：基于乙醇氧化酶氧化乙醇产生乙醛和H2O2，偶联Trinder反应生成醌亚胺，可在500nm波长比色测定，通过优化反应体系中各主要成分和测定条件，建立了本法。结果：本法的灵敏度0．5g/L时，A500nm,1cm＞0．08／线性范围0．125－5．0g/L；批内CV为1．02％，批间CV为2．76％；本法（Y）与气相色谱法（X）比较；Y＝1．06X＋0．12，γ＝0．989。结论：本法的灵敏度较高、线性范围宽、精密度和准确性均较好，适合临床实验室急诊测定用。     

红细胞肌酸测定在溶血性贫血实验诊断的应用

在Barritt反应基础上建立了一种红细胞肌酸的测定方法，测定了24～51岁正常人红细胞肌酸的正常参考值，男：401．4±186．5μmol／LRBC，女：453．7±195．3μmol／LRBC，批内CV＝2．14％，批间CV＝4．20％。回收率为97．5％，并且对比了溶血性贫血红细胞肌酸水平与其网织红细胞计数的关系。